GITR抗体对L615白血病抑制作用的实验研究

目的 探讨糖皮质激素诱发型TNF受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor,GITR)的抗体对抗小鼠L615白血病(T淋巴细胞来源白血病)的效果和作用机制.方法 以L615小鼠建立白血病模型,分3组实验组以及阴性对照组,观察实验小鼠生存状态及时间、外周血白细胞计数及分类、外周血和骨髓中白血病细胞形态变化、肝脾指数、肝脾组织病理改变.结果 GITR抗体可以延长L615白血病小鼠的生存时间,可引起骨髓中白血病细胞发生凋亡、坏死、肝脾指数降低、肝脾组织被白血病细胞浸润,提示GITR抗体能够降低和缓解白血病细胞所致的小鼠外周血白细胞的升高和浸润,以及肝脾的肿大.结论 通过免疫调节机制GITR抗体能够有效地抑制L615白血病细胞的增殖,进而抑制白血病的发展.     

GITR抗体介导增强NK细胞杀伤活性的实验研究

目的探讨糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关受体（glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor family related receptor．GITR）抗体通过调节Treg细胞和NK细胞的功能对L615白血病细胞增殖的影响．了解NK细胞对白血病细胞的杀伤活性。方法通过不同的给药方式将L615白血病小鼠设立为4个实验组．提取实验分组后的小鼠脾脏中NK细胞作为效应细胞．以L615白血病细胞作为靶细胞．在体外观察了NK细胞的杀伤活性变化情况．并运用RT-PCR进一步观察了体现NK细胞杀伤活性的几个相关指标的变化。结果GITR抗体可以明显增强小鼠脾脏中NK细胞的杀伤活性．表现为同NK细胞活性密切相关的3个指标穿孔素（Perforin）、γ干扰素（IFN-γ）、Fas的表达量明显增加。结论GITR抗体能够通过Treg细胞的调节增强NK细胞的杀伤活性,进而有效的抑制L615自血病细胞。     

瘀毒清对微小残留白血病作用的实验研究

目的：以615小鼠L7212微小残留白血病模型为工具,观察瘀毒清对模型小鼠骨髓有核细胞分类和白血病细胞百分率及小鼠存活时间的影响。方法：用FCM检测骨髓有核细胞DNA含量及细胞周期,并通过肝脾病理检查观察白血病细胞的肝脾浸润情况。结果：低剂量组和高剂量组白血病细胞百分率均较对照组低（P＜0．01）,而正常成熟细胞较对照组高（P＜0．05）,肝脾白血病细胞浸润程度则均较对照组轻,两个剂量组小鼠生存期均较对照组明显延长（P＜0．05）,尤以低剂量组更明显,生命延长率达194．22％;低剂量组G2和S期细胞百分率似较对照组有减低趋势。结论：瘀毒清有一定的抑制白血病细胞增殖作用。     

GITR抗体介导增强NK细胞杀伤活性的实验研究

目的 探讨糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptorfamily related receptor,GITR)的抗体通过抑制Treg细胞的功能,进而增强NK细胞杀伤活性来对L615白血病细胞产生杀伤作用.方法 通过不同的给药方式将L615白血病小鼠设立为4个实验组,提取实验分组后的小鼠脾脏中NK细胞作为效应细胞,以L615白血病细胞作为靶细胞,在体外观察了NK细胞的杀伤活性变化情况,并运用RT-PCR,进一步观察了体现NK细胞杀伤活性的几个相关指标的变化.结果 GITR抗体可以明显增强小鼠脾脏中NK细胞的杀伤活性,具体表现为同NK细胞活性密切相关的3个指标穿孔素(Perforin),γ干扰素(IFN-γ),Fas的表达量明显增加.结论 GITR抗体能够通过Treg细胞的调节增强NK细胞的杀伤活性,进而有效的抑制L615白血病细胞.     

低剂量辐射对小鼠白血病的治疗作用

目的 观察低剂量辐射对小鼠白血病的治疗作用。方法 使用615小鼠和L615K淋巴细胞白血病细胞株建立T淋巴细胞白血病小鼠模型，给予75mGy的低剂量辐射，检测外周血白细胞变化、小鼠的生存时间及脾脏白血病细胞浸润情况。结果 接受75mGy的低剂量辐射后，荷瘤小鼠白血病细胞生长受抑制，生存期延长。结论 低剂量辐射具有抗淋巴细胞白血病的作用。     

低剂量辐射对白血病模型小鼠治疗作用研究

目的:探讨低剂量辐射对白血病模型小鼠的治疗作用.方法:使用615小鼠和L615K淋巴细胞白血病细胞株建立T淋巴细胞白血病小鼠模型,给予75 mGy的低剂量辐射后,检测外周血白细胞数、小鼠的生存时间及脾脏指数.结果:接受75 mGy的低剂量辐射后,荷瘤小鼠白血病细胞生长受抑,生存期延长.结论:低剂量辐射具有抗淋巴细胞白血病的作用.     

Cx43修饰人脐血源基质细胞输注阻抑白血病MRD小鼠造血干细胞移植后复发

目的 观察间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)修饰人脐血源基质细胞(human umbilical cord blood-derived stromal cells,hUCBDSCs)体外对L615小鼠白血病细胞株凋亡以及在体对白血病微小残留病(minimal residual disease,MRD)小鼠疾病进展的影响.方法 通过Cx43过表达腺病毒(Ad-Cx43-GFP)上调hUCBDSCs中Cx43表达,体外构建L615+Cx43+hUCBDSCs共培养模型,检测其对L615细胞凋亡的影响.建立L615细胞低瘤负荷的MRD小鼠模型,分为骨髓(bone marrow,BM)移植组和Cx43+hUCBDSCs+ BM移植组进行移植,以正常L615小鼠作为对照,检测移植后外周血象、骨髓涂片、组织病理及骨髓Cx43表达变化等.结果 Ad-Cx43-GFP能够在mRNA和蛋白水平显著上调hUCBDSCs中Cx43表达.L615+Cx43+hUCBDSCs移植组L615细胞凋亡比例较对照组显著升高[(8.93±1.24)％ vs(3.53±0.13)％,P＜0.01].对MRD小鼠移植后,Cx43+hUCBDSCs+BM移植组外周血WBC和PLT恢复更快,17d时接近正常水平,而BM移植组外周血WBC和PLT恢复延迟,17 d时低于正常水平;17 d时,Cx43+hUCBDSCs+BM移植组骨髓涂片原始细胞比例较BM移植组显著降低[(7.67±1.25)％ vs (56.33±1.25)％,P＜0.01];与BM移植组比较,Cx43+hUCBDSCs+BM移植组肝、脾、骨髓的白血病浸润程度较低,同时骨髓中Cx43蛋白表达增加.结论 上调hUCBDSCs中Cx43表达能在体外促进L615细胞凋亡,Cx43+hUCBDSCs+BM联合移植能够促进MRD小鼠外周血WBC和PLT恢复,阻抑MRD小鼠移植后复发.     

电泳分析白血病小鼠血清及脾细胞匀浆蛋白质

本文应用不连续性聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定L615和我实验室制备的抗白血病生物活性物质治疗后的L615小鼠血清及脾细胞匀浆蛋白质组份。结果是L615纯系小鼠血清蛋白质谱中,含有13—16条分带,脾细胞匀浆蛋白质中α球蛋白含量最多。L615白血病小鼠血清,脾细胞匀浆蛋白质的α_1球蛋白呈现1条异常分带,而615小鼠和80—11小鼠则缺如。     

转输小鼠脾细胞对小鼠白血病(L615)的防治作用

本文报告了转输正常小鼠脾细胞对615系小鼠白血病(L615)攻击的保护效应。如果在攻击前7天转输,五种具有不同遗传学背景的正常小鼠脾细胞都有明显的保护效应;但若在攻击前28天转输,其保护效应则因供者品系而异;随着E/T(效应细胞数/肿瘤细胞数)比值降低其保护效应也有降低的趋势。如果将相同数量的正常小鼠脾细胞装入扩散盒,然后将其植入小鼠腹腔,则不能诱导保护效应。转输正常肾细胞或注射正常脾细胞匀浆对L615白血病细胞攻击也无任何保护效应。实验组大多数存活小鼠都能耐受剂量递增(10~4—10~6)的L615白血病细胞的反复攻击。在继承性化学免疫治疗实验中这些存活小鼠的免疫脾细胞能延长晚期L615病鼠的中位存活时间,甚至能使50%(5/10)的小鼠获得治愈。     

紫金锭及其加味抗急性白血病的实验研究

本研究从血象、骨髓、病理、骨髓细胞增殖动力学的角度证明:紫金锭具有明显的抑制和杀伤实验白血病小鼠(L7212)白血病细胞的作用(主要影响细胞周期的S期),具有缓解、减轻白血病细胞对肝脾浸润,明显延长白血病小鼠生存期的作用,紫金锭和诸复方配伍,具有明显的协同作用。     

L_(615)白血病的病理组织学及电镜观察

<正> L615白血病模型自建立以来,在国内已广泛应用于抗癌药物的筛选、实验治疗及肿瘤发病机理等方面的研究,但病理学方面的报道较少。我们为了观察此白血病的发病和病变发展规律以及白血病细胞的分化程度,进行了此实验,作为将来研究L615白血病细胞恶性度转变的基础。     

Bcl-2参与SCID小鼠体内齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡的调控作用

目的:观察齐墩果酸(OA)对白细胞移植模型小鼠脾脏浸润白血病细胞凋亡数量和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨OA对白血病模型鼠的治疗作用机制.方法:取浓度为2×107mL-1体外培养的人早幼粒系白血病HL-60细胞0.5 mL,腹腔注射重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠,构建SCID小鼠的HL-60细胞移植瘤模型;模型成功后...     

槲皮素抗小鼠P388白血病的作用

目的：研究槲皮素抗小鼠P388白血病的作用。方法：采用DBA／2小鼠腹腔注射P388细胞的方法建立白血病小鼠模型，80只小鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、高剂量槲皮素组、低剂量槲皮素组，每组20只。于第7天末次给药后每组小鼠随机抽取10只处死，收集腹水分别计数，观察腹水细胞荧光形态变化，分析细胞周期及细胞凋亡率，观察骨髓涂片及心、肝、脾、肾的组织病理学改变。观察记录其它小鼠一般情况及生存期。结果：给予槲皮素的两组小鼠平均生存期较两对照组显著延长（P〈0．05），且高剂量组小鼠平均生存期较低剂量组显著延长（P〈0．05）。在第7天处死小鼠后，高剂量组小鼠无肉眼可见腹水。低剂量组小鼠腹水细胞的密度显著减小，G0-G1期细胞比例减少，S期细胞比例增加，细胞凋亡率显著升高（P〈0．05）。各组小鼠骨髓涂片及心、肝、脾、肾组织病理切片未见明显异常。结论：槲皮素对P388白血病小鼠有延长生存期及抑制腹水细胞增殖和诱导腹水细胞凋亡的作用。     

狼毒浸出液抗白血病作用的实验研究

用小鼠T淋巴细胞白血病(L_(615))为实验动物模型,对狼毒浸出液(YF-1)的抗白血病作用进行了初步研究.结果表明,实验组和对照组的平均存活时间分别为16.3d和9.5d,实验组明显长于对照组(P<0.01);中和试验实验组和对照组的平均存活时间分别为19.3d和9.9d,对照组中没有长期存活的小鼠,实验组则有40%的小鼠长期存活,两组比较有显著性差异(P<0.01).提示YF-1对L(615)细胞有较强的抑制或(和)杀伤作用,能够对抗和抑制白血病的发生与发展.     

L615白血病鼠胸腺和脾脏淋巴细胞脱氢酶同工酶的研究

本文对比观察L615鼠和615鼠胸腺及脾脏淋巴细胞的乳酸脱氢酶同工酶(LDH Isoenzyme)、6-磷酸葡萄糖脱氢酶同工酶(G6PD Isoenzyme).结果表明L615鼠与615鼠相比,胸腺淋巴细胞G6PD-3活性明显下降.脾脏淋巴细胞LDH-1、2活性显著减弱,LDH-5活性相应明显增强,同时G6PD-1活性上升,G6PD-2活性下降.LDH、G6PD全酶活性应用全自动扫描显微分光光度计进行单一细胞酶活性全面积扫描,结果为L615白血病鼠胸腺淋巴细胞G6PD及脾脏淋巴细胞LDH、G6PD酶活性明显增强.     

Induction of T-cell immunity against leukemia by dendritic cells pulsed with total RNA isolated from leukemia cells

Objectives To assess the feasibility and efficacy of eliciting leukemia-specific T-cell responses in syngeneic mice in vitro and in vivo using dendritic cells (DCs) pulsed with total RNA from leukemia cells.Methods DCs generated from bone marrow culture in vitro in the presence of combined cytokines were pulsed with cellular total RNA isolated from cultured L615 cells by cationic lipid 1,2-dioleoyloxy-3-(trimethylammonium) propane (DOTAP). T-cell responses were evaluated by in vitro proliferation, and cytotoxicity assay. And in vivo immune protection and proghosis of mice with leukemia were studied.Results DCs pulsed with total RNA isolated from cultured L615 cells (DCs/RNA) were remarkably effective in stimulating L615-specific T-cell response in vitro, but did not cross-react with other leukemia cells from syngeneic mice. Vaccination of naive mice with viable DCs/RNA vaccine was able to partly protect from challenge with a lethal dose of live L615 cells, leading to low leukemia incidence and overall survival prolongation. Statistically significant survival was also observed in a low lethal dose of L615-bearing mice that received treatment using viable DCs∕RNA vaccine alone, suggesting that systemic administration of IL-2 could enhance the anti-tumor efficacy of leukemia RNA/DCs vaccine.Conclusions These data support the use of DCs/RNA vaccine as a feasible and effective route to elicit leukemia immunity against unidentified leukemia-associated antigens for treatment of leukemia-bearing animals.     

补血养肝法对血虚证小鼠肝细胞凋亡的影响

目的:观察补血养肝法对血虚证小鼠肝细胞凋亡的影响。方法:30只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、实验组。以腹腔注射环磷酰胺建立血虚证模型,检测各组小鼠外周血红细胞数、白细胞数及血红蛋白含量,采用Tunnel法检测肝细胞凋亡。结果:与模型组相比,实验组小鼠外周血红细胞数、白细胞数以及血红蛋白含量升高(P0.05),肝细胞凋亡百分率下降(P0.05)。结论:补血养肝法对血虚证的治疗作用可能与其减少肝细胞凋亡有关。     

TGF-β1基因修饰树突状细胞对免疫排斥反应影响的研究

目的 探讨术前输注TGF-β1基因修饰的供者树突状细胞（dendritic cell,DC）对大鼠肝移植免疫排斥的抑制作用及相关机制。方法 TGF-β1重组腺病毒转染供者DC,静脉输注受体大鼠,1周后建立大鼠肝移植免疫排斥模型并鉴定表达,记录存活时间,凝胶电泳迁移率试验法检测脾T细胞、Kupffer细胞NF—κB活性及相关细胞因子TNF的表达,观察移植肝排斥病理改变。结果 Ad—TGF—β1-DC输注组移植大鼠的T细胞、Kupffer细胞活性及TNF表达明显低于对照组,排斥病理改变明显减轻,存活时间延长,差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论 TGF-β1-DC能有效降低T细胞和Kupffer细胞活性,提高移植肝免疫耐受,延长存活时间。