空心莲子草与氯硝柳胺复配灭螺作用的研究

目的探讨空心莲子草与氯硝柳胺复配用药的灭螺效果。方法采用室内浸杀法，将不同浓度的空心莲子草水浸液以及0．0625mg／L氯硝柳胺与不同浓度空心莲子草水浸液的复配溶液，在（22±2）℃室温条件下浸泡钉螺24h和48h，观察钉螺上爬、闭厣及死亡情况。结果不同浓度的空心莲子草水浸液单用浸杀灭螺24h半数致死量（LC50）为388mg／L，将0．0625mg／L的氯硝柳胺分别与不同浓度的空心莲子草水浸液复配后，灭螺24h比。降为116mg／L，增效比（SR）〉3。当空心莲子草水浸液浓度为800mg/L及以上时，能使钉螺闭厣率在30min内达76．7％以上，有效抑制了钉螺上爬。结论空心莲子草具有显著灭螺及抑制钉螺离水上爬的作用，且与0．0625mg／L氯硝柳胺复配后能明显增强杀螺效果。     

血水草生物碱对钉螺肝脏超微结构的影响

目的钉螺经血水草生物碱水溶液浸泡后,观察肝脏超微结构的变化,探讨血水草生物碱杀灭钉螺的作用机理。方法用血水草生物碱浸泡钉螺48h,解剖钉螺,取肝脏用常规方法制作电镜切片,用日立H-600型透射电镜观察组织结构变化。结果血水草生物碱浸泡后,钉螺肝细胞肿胀、变性,内质网扩张呈空泡状。线粒体嵴肿胀、模糊不清,部分嵴断裂或丢失,呈空泡变;毛细胆管扩张;部分细胞核坏死出现溶解或萎缩;绒毛减少、不规则或消失。结论肝细胞严重损伤是血水草生物碱致钉螺死亡的重要原因之一。     

氯硝柳胺杀灭钉螺效果影响因素分析

目的 研究氯硝柳胺杀灭钉螺的效果并了解影响其杀灭效果的主要因素。方法 采用实验流行病学方法，对中国血吸虫病流行区的钉螺通过随机分层抽样，抽取了10个省（市）33个县共37个点，采集钉螺，随机分组，用不同浓度的氯硝柳胺分别浸泡24h、48h，观察其杀灭效果，计算不同药物浓度、不同作用时间和不同生境的LC50。统计分析采用SPSS 13．0软件进行。结果 氯硝柳胺溶液1．0mg／L浸泡24h和0．5mg／L浸泡48h，杀螺率均达100％。同一作用时间，对钉螺的杀灭效果随着药物浓度降低显著下降。浸泡钉螺24h，LC50均值为0．0939mg／L，而浸泡钉螺48h，LC50均值为0．0625mg／L，浸泡24h和48h间的杀灭钉螺LC50差异有统计学意义（t=5．001，P〈0．01）。在一定的浓度范围内，氯硝柳胺对钉螺的杀灭效果在48h、不同生境（山丘型、湖沼型和水网型）SlgLG50之间的差异具有统计学意义（F=4．264，P〈0．05）。非条件logistic回归分析，浓度、时间、生境的标准化回归系数估计值分别为2．047（OR=5．573）、0．263（OR=2．924）、0．187～0．210（1．969～2．560）。结论 氯硝柳胺能有效杀灭钉螺，药物浓度、作用时间以及钉螺孳生地类型为其主要影响因素。     

青弋江江滩植被与钉螺分布关系的初步研究

目的 研究江滩植被各属性与钉螺分布的关系.方法 采用随机取样与系统抽样相结合方法,调查样方内植被的种类、株丛数、物候期、生活力、高度、盖度、多度和频度,钉螺的总螺数、活螺数、死螺数.结果 江滩植被种类主要有12种,分别是空心莲子草、狗牙根、莎草、窃衣、野艾蒿、野菊花、苍耳、香附子、葎草、灯芯草、野大豆和辣蓼,其中空心莲子草和香附子为优势种群.空心莲子草群丛活螺最多(活螺密度为2.67个/0.1 m2),狗牙根+辣蓼群丛死螺最高(死螺密度为2.33个/0.1 m2).将植被盖度和钉螺密度回归分析得二次函数y=11.435+ 2.104x-0.162x2 (R2=0.394,F=42.319,P＜0.01)(夏季)、y=14.154+ 1.034x-0.043x2(R2=0.794,F=57.432,P＜0.01)(秋季).结论 钉螺对空心莲子草群丛有趋向性,狗牙根+辣蓼群丛可能有杀灭钉螺的作用,植被盖度和钉螺密度是平滑的二次函数关系.     

MNNG和大戟对血吸虫细胞鸟氨酸脱羧酶活性作用的研究

目的：研究N－甲基－N硝基－N－亚硝基胍（MNNG）和大戟水提取液合用对日本血吸虫成虫细胞的促增殖作用。方法：观察MNNG和大戟水提取液合用对日本血吸虫成虫细胞鸟氨酸脱羧酶活性的影响。用RPMI－1640加10％小牛血清的培养基培养日本血吸虫成虫细胞，在细胞接种1周后分别用MNNG和大戟水提取液处理24h，然后继续培养。用分光光度法测定细胞鸟氨酸脱羧酶活性。结果：MNNG和大戟水提取液联合处理后培养第4、5、6周时细胞鸟氨酸脱羧酶活性显著增高。结论：MNNG和大戟水提取液合用有促进日本血吸虫成虫细胞增殖的作用。     

胞外Ca2+浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨胞外不同Ca^2＋浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的促进作用.方法对体外培养的HL-60细胞经一定剂量的32P辐射后发现加入不同浓度的Ca^2＋继续培养24、48h,流式细胞仪检测凋亡率.结果胞外Ca^2＋作用于HL-60细胞24、48h后发现对辐射诱导细胞凋亡随Ca^2＋浓度的增加细胞凋亡率增大,Ca^2＋有明显的促凋亡作用,相关性很好r24=0.9001（P=0.0145）,r48=0.9343（P=0.0063）.结论胞外不同浓度的Ca^2＋对辐射诱导HL-60细胞有明显的促进凋亡的作用.     

人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞对其细胞周期的影响

目的研究人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）感染人胚肺成纤维细胞（human embryoniclung fibroblast,HELF）后对其细胞周期的影响,探讨HCMV感染的发病机制。方法用HCMV感染同步化的HELF作为感染组,同时设模拟感染组为对照组。用倒置相差显微镜观察两组细胞形态学变化至感染后7d。于感染后12h、24h、48h、72h和96h收获细胞,用免疫细胞化学法检测两组细胞核内HCMVIE172蛋白,流式细胞术检测细胞周期。结果模拟感染组未见细胞形态学改变,亦未出现HCMVIE172蛋白阳性产物。感染组感染后72h时即可见局部细胞变圆,膨胀,胞体及胞核巨大化,7d时可见所有细胞均发生病变;免疫细胞化学检测显示,其各时间点的细胞均在核内出现呈棕黄色颗粒的HCMVIE172蛋白。模拟感染组在感染后12h时有65.7%的细胞处于G1期,24h时有43.8%的细胞处于G1期;感染组在感染后12h时有70.4%的细胞处于G1期,24h时有69.9%的细胞处于G1期;两两比较,差异均有显著性（均P〈0.01）。结论HCMV感染HELF后在细胞核内进行复制、增殖,其影响了HELF周期,使大部分细胞停滞在G期。     

血水草血根碱杀灭钉螺作用的研究

目的 探讨血水草生物碱的主要单体成份血根碱的杀灭钉螺作用和量效关系.方法 按WHO"杀螺剂实验室终筛方法"中的浸泡法进行实验室杀灭钉螺试验.配置成不同浓度血根碱溶液,在25℃进行24、48、72、96 h实验室浸泡杀螺,设去氯水对照,观察钉螺死亡率,计算量效关系.结果 血根碱有很好杀灭钉螺的效果:在25 mg/L、钉螺浸泡48 h,6.25 mg/L、钉螺浸泡72 h,0.78125 mg/L、钉螺浸泡96 h,死亡率均达90%;25 mg/L、钉螺浸泡72 h,12.5 mg/L、钉螺浸泡96 h,死亡率均达100%. 结论 血根碱是植物杀螺剂血水草杀螺的有效化学成分.     

酸氧化电位水对微生物杀灭效果的观察

目的测定酸氧化电位水消毒液对细菌芽胞的杀灭效果和对HBsAg抗原性的破坏作用,了解该消毒液用于医疗器械消毒时的使用剂量.方法采用载体流动浸泡定量杀菌试验、载体浸泡定性HBsAg抗原性的破坏试验和医疗器械模拟现场消毒试验,分别测定酸氧化电位水消毒液对细菌芽胞的杀灭效果、HBsAg抗原性的破坏作用和使用消毒效果.结果酸氧化电位水消毒液在氧化还原电位值(1150±50)mV、pH值2.2±0.2和有效氯含量(55±10)mg/L时,流动浸泡作用15min可杀灭枯草杆菌黑色变种芽胞达消毒要求,载体浸泡作用10min可破坏HBsAg的抗原性,连续流动浸泡消毒45min,对干燥于医疗器械表面的枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭率可达99.90%以上.     

白僵蚕水提物对镉致胰岛β细胞毒性的影响研究

目的 探讨白僵蚕水提物对硫酸镉（CdSO4）致胰岛β细胞NIT-1细胞毒性的影响。方法 采用冷水浸泡法提取白僵蚕的水溶性成分。分别用（0、0.4、0.8、1.6、3.2和6.4mg/mL）白僵蚕水提物染毒细胞24h;用4μmol/L CdSO4分别与（0.4和0.8mg/mL）白僵蚕水提物混合后共处理24h;以及用（0.4和0.8mg/mL） 白僵蚕水提物预处理2h,再以4μmol/L CdSO4分别染毒24h。采用CCK8、Hoechst33258染色以及荧光探针等方法分别检测NIT-1细胞存活率、细胞凋亡及活性氧ROS的水平。结果 （1）与对照组比较,细胞存活率随白僵蚕水提物染毒浓度的增加呈现出先升高后下降的趋势（P<0.05）;（2）与单独处理组相比,4μmol/L CdSO4与（0.4和0.8mg/mL）白僵蚕水提物共处理组细胞存活率均降低（P<0.05）,且预处理组细胞存活率相比白僵蚕单独处理组也降低（P<0.05）;（3）联合处理组细胞变圆、细胞核呈致密浓染,细胞凋亡率均高于白僵蚕和CdSO4单染组（P<0.05）;同时,联合处理组ROS荧光强度也升高,分别为白僵蚕和CdSO4单染组的1.18和1.05倍（P<0.05）。结论 白僵蚕水提物在低浓度下可促进NIT-1细胞的增殖,高浓度则降低细胞的存活率;低浓度的白僵蚕水提物无法拮抗CdSO4诱导的细胞死亡,反而增强了细胞毒性,其机制可能与凋亡和ROS水平增加有关。     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜上皮细胞及线粒体结构和功能的影响

目的探讨大黄附子汤对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜上皮细胞(IEC)结构的保护作用及IEC线粒体功能的影响。 方法本研究为随机对照试验,将60只健康雄性SD大鼠(体重250～300 g),采用随机数字表法将大鼠分为对照组、重症急性胰腺炎组(SAP组)和大黄附子汤治疗组(大黄附子汤组),每组20只。每组再按建模后时间(6、12、24、48 h)分为4个亚组,每个亚组5只。SAP组和大黄附子汤组采用5%牛磺胆酸钠(0.1 mL/100g)胰胆管注射法诱导SAP模型,对照组开腹翻动胰腺数次后关腹。大黄附子汤组大鼠分别于术后0、15、30、45 h以大黄附子汤灌肠(10 mL/kg),对照组和SAP组在同时间点给予同体积0.9%氯化钠溶液灌肠。各组按各时间点处死动物,左侧股静脉取血测定血清淀粉酶和内毒素变化。采用分光光度计、荧光定量法检测IEC线粒体ATP合成酶、细胞色素C氧化酶(CcO)含量变化,光镜观察小肠上皮组织的形态学变化。 结果与SAP组相比,大黄附子汤可降低SAP后24 h、48 h的血清淀粉酶水平[24 h：(769.14±456.99) vs (1 399.85±623.40)U/L,P<0.01;48 h：(889.59±209.82) vs(1 562.00±316.19)U/L,P<0.001)。与SAP组相比,大黄附子汤组大鼠血清内毒素在建模后24 h、48 h均有不同程度下降[24 h：(108.78±22.16) vs(168.77±29.25)pg/mL,P<0.01;48 h：(242.90±45.12) vs(124.01±321.45)pg/mL,P<0.001]。与对照组相比,SAP后IEC线粒体ATP合成酶和CcO活性均降低且随病程推移呈递减趋势;经大黄附子汤治疗后IEC线粒体ATP合成酶活性高于同时相点的SAP组[12 h：(19.60±1.67)vs(13.60±2.88)nmol·min^－1·mg^－1 pro,P<0.05;24 h：(17.40±2.79) vs(11.2±2.78) nmol·min^－1·mg^－1 pro,P<0.05;48 h：(18.60±2.07) vs (11.2±1.92)nmol·min^－1·mg^－1 pro,P<0.01],且24 h、48 h线粒体CcO活性高于同时相点SAP组[24 h：(1.56±0.11)vs(1.06 ±0.18)μmol·min^－1·mg^－1;48 h：(1.04±0.31) vs(0.50±0.16)μmol·min^－1·mg^－1,P均<0.01]。SAP后12 h小肠上皮损伤指数开始升高(2.2±0.84 vs 0.60±0.55,P<0.01),且24、48 h持续性升高;大黄附子汤组可显著降低SAP后48 h小肠上皮损伤指数(1.2±0.45 vs 4.0±1.0,P<0.001)。 结论大黄附子汤能通过增强大鼠IEC线粒体ATP合成酶和CcO活性,改善IEC线粒体能量代谢和呼吸功能,保护SAP后肠屏障的完整性和功能,降低血清淀粉酶和内毒素含量,缓解SAP病情。     

Protective Effect of Wheat Peptides against Indomethacin-Induced Oxidative Stress in IEC-6 Cells

Recent studies have demonstrated that wheat peptides protected rats against non-steroidal anti-inflammatory drugs-induced small intestinal epithelial cells damage, but the mechanism of action is unclear. In the present study, an indomethacin-induced oxidative stress model was used to investigate the effect of wheat peptides on the nuclear factor-κB(NF-κB)-inducible nitric oxide synthase-nitric oxide signal pathway in intestinal epithelial cells-6 cells. IEC-6 cells were treated with wheat peptides (0, 125, 500 and 2000 mg/L) for 24 h, followed by 90 mg/L indomethacin for 12 h. Wheat peptides significantly attenuated the indomethacin-induced decrease in superoxide dismutase and glutathione peroxidase activity. Wheat peptides at 2000 mg/L markedly decreased the expression of the NF-κB in response to indomethacin-induced oxidative stress. This study demonstrated that the addition of wheat peptides to a culture medium significantly inhibited the indomethacin-induced release of malondialdehyde and nitrogen monoxide, and increased antioxidant enzyme activity in IEC-6 cells, thereby providing a possible explanation for the protective effect proposed for wheat peptides in the prevention of indomethacin-induced oxidative stress in small intestinal epithelial cells.     

细胞凋亡在体外循环大鼠肠黏膜屏障功能障碍中的作用

目的　探讨细胞凋亡在大鼠体外循环 (CPB)早期肠道黏膜屏障功能障碍中的作用。方法　建立大鼠CPB模型。分别对CPB组、假手术组 (SO)和正常组 (N)大鼠于术后 3、6、12、2 4h取回肠末端黏膜进行光镜、电镜观察 ,并用TUNEL方法研究肠上皮细胞凋亡。结果　CPB组大鼠除了 2 4h时相点光镜下观察发现肠黏膜上皮细胞脱落外 ,其它时相点肠粘模均保持完整 ,电镜观察可见CPB各时点均可见典型凋亡细胞 ;TUNEL法显示CPB组各时相点肠黏膜上皮细胞凋亡指数较SO组显著增加 (P值 <0 0 1) ,并于CPB结束后 6h达到峰值 ,凋亡细胞主要分布在肠黏膜隐窝部。结论　大鼠CPB后早期肠黏膜上皮细胞凋亡明显增加 ,上皮细胞凋亡增加可能是CPB后肠黏膜屏障功能障碍的病理生理基础。     

血水草血根碱致钉螺肝脏差异表达蛋白质的鉴定

目的 分析血水草血根碱致钉螺肝脏蛋白质表达的变化.方法 从血水草粉末中分离血根碱,配成5 mg/L水溶液,每500 ml药液投放50只钉螺,25℃浸泡36 h,解剖活螺并收集肝脏,双向电泳分离血根碱处理组和清水对照组钉螺肝脏蛋白质,ImageMaster 2D 5.0软件分析图谱,筛选差异蛋白质,并用质谱鉴定.结果 血根碱组和清水对照组分别检出(433±14)、(385±12)个蛋白质点;质谱鉴定获得11个差异表达蛋白,分别是原肌球蛋白、假定蛋白XP_533132、肌动蛋白87E、角蛋白6A、β-微管蛋白、线粒体内膜蛋白4样蛋白、角蛋白2、咽侧体抑制激素A前体、ENSANGP00000020184、肌动蛋白-3、ENSANGP00000013943.其中假定蛋白XP_533132、ENSANGP00000013943在血根碱处理组表达下调,其余9个蛋白质在血根碱处理组表达上调.结论 血根碱引起钉螺肝脏蛋白质表达发生改变.     

Dietary-induced increases of disaccharidase activities in rat jejunum.

A study was carried out to examine whether the responsiveness of small intestinal epithelial cells to dietary carbohydrate varied during the daily 24 h cycle. The effect of sucrose on disaccharidase activities was compared during a period of decreasing disaccharidase activities, i.e. between 22.00 and 10.00 hours, and increasing disaccharidase activities, i.e. between 10.00 and 22.00 hours, in the jejunum of 7-week-old-rats. Rats were fed on a low-starch, high-fat diet (Lst; starch 5 and fat 73% of gross energy), or a high-starch, low-fat diet (Hst; starch 70 and fat 7% of gross energy). Both dietary groups exhibited typical diurnal variations in jejunal sucrase (EC 3.2.1.48), maltase (EC 3.2.1.20) and lactase (EC 3.2.1.23) activities, exhibiting a peak around 22.00 hours and a trough at approximately 10.00 hours. When rats were fed on diet Lst for 7 d and then force-fed on an isoenergetic sucrose diet (S; sucrose 40 and fat 37% of gross energy) for 6 or 12 h they exhibited increased sucrase, maltase and lactase activities compared with rats fed on diet Lst. The absolute increase in disaccharidase activities was similar regardless of the time diet S was given or whether rats were killed at 10.00 hours or at 22.00 hours. Analyses of sucrase and lactase activities along the villus-crypt columns showed that the distribution of cell cohorts that responded to diet S was not influenced by the time of introduction of diet S. These findings suggest that small intestinal epithelial cells possess the ability to respond to dietary carbohydrate throughout the daily 24 h cycle.     

Haemolymph Components of Infected & None Infected Lymnaea snails with Xiphidiocercariae

Background

In this study the haemolymph components of infected and none infected Lymnaea gedrosiana with xiphidiocercaria larvae was compared.

Methods

Five hundred Fifty Lymnaea snails were collected from Ilam and Mazandaran provinces, Iran, during 2008–2009. The snails were transported to the lab at Tehran University of Medical Sciences and their cercarial sheddings were studied. Haemolmyphs of snails were extracted and cells were counted using haemocytometer and cell-surface carbohydrate were recognized by conjugated lectin (Lentil). Haemolymph protein concentrations were measured by Bradford protein assay method and soluble protein compositions were determined on sodium dodecyl sulphate polyacrilamide gel electrophoresis (SDS-PAGE).

Results

From the 550 examined Lymnaea snails for cercariae, 27 snails were infected with xiphidiocercariae. Mean of haemolymph cells (haemocyte) number were obtained 93480±2.43 (cells/ml) for none infected snails (25 snail) and 124560±2800 (cells/ml) for infected snails (25 snail). Mannose carbohydrate was recognized on haemocyte of none infected and infected snails. Mean of protein concentration of haemolymph plasma was obtained as 1354±160 µg/ml (1.4 mg/ml) for none infected snails (25 snails) and 1802±138 µg/ml (1.8 mg/ml) for infected snail (25 snails). Comparing to none infected snails, the SDS-PAGE results of haemolymph plasma of infected snails, showed an extra protein band (70 kDa). The results showed a significant difference between the amounts and the kinds of proteins in haemolymph of infected and none infected snails.

Conclusion

This information might be useful to understand of parasite detection, adhesion, engulfment and antigen agglutination by snail.     

肠营养素对小肠粘膜上皮细胞分化的影响

目的：探讨表皮生长因子（ＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）、胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）、Ｌ－谷氨酰胺（Ｇｌｎ）、精氨酸、重组人生长激素（ｒｈＧＨ）和胰岛素对原代培养的小肠粘膜上皮细胞分化的影响。 方法：孕龄１７￣１９天Ｗｉｓｔａｒ系孕鼠胎仔小肠制备成小肠绒毛细胞团悬液，培养４８ｈ后加入上述肠营养素，通过测定ＡＬＰ活性观察不同剂量肠营养素对贴壁生长的肠上皮细胞分化的作用。 结果：当     

影响血水草血根碱杀螺效果相关因素分析

目的通过对血水草生物碱主要单体成分-血根碱杀螺试验研究,了解血根碱杀螺效果及影响因素。方法设置20℃、25℃、30℃三个温度组,配制25、12.5、6.25、3.125、1.5625、0.7813、0.3906、0.1953 mg/L 8个不同浓度组的血根碱溶液及去氯水对照组,分别观察钉螺浸泡24、48、72 h死亡率,用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果药物组钉螺死亡率与对照组差异有统计学意义,钉螺死亡率与温度、浸泡时间、药物浓度关系的回归方程为y=5.089X1+0.929X2+1.887X3-138.925。结论血根碱具有较好的杀灭钉螺作用;药物浓度、温度、浸泡时间均能影响San杀螺效果,实验室San杀螺的最佳条件是浓度:1.5625 mg/L;温度:25℃;时间:48~72 h。