罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达和排泄的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达和排泄的影响。方法Wistar大鼠分为正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病罗格列酮(4mg.kg-1.d-1)治疗组,每组8只,检测各组第1、4、6、8周尿CTGF排泄率(ELISA法),进行组间差异比较;于第8周处死大鼠,每组各5只,应用免疫组化检测肾皮质CTGF蛋白表达。结果第4、6、8周糖尿病大鼠治疗组及糖尿病模型组尿CTGF排泄率及第8周肾皮质CTGF蛋白表达水平较正常组明显升高,治疗组上述指标均较模型组低(P<0.01)。结论罗格列酮可抑制肾脏CTGF表达和排泄,这可能与其保护肾脏有关。     

罗格列酮对糖尿病大鼠大血管中磷酸化IKK和IκBα表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠大血管组织中磷酸化核因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IKK)及其下游作用物NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达的影响。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病组(B)和罗格列酮治疗组(C),C组给予5mg·kg-1·d-1罗格列酮生理盐水混悬液灌胃,A组和B组给予等体积生理盐水灌胃,用免疫组织化学检测8周和12周后颈动脉中磷酸化IKK和磷酸化IκBα表达的改变,光镜、电镜观察各组颈动脉形态的改变。使用图像分析系统分析颈动脉内中膜厚度(IMT),分离血清测血糖、血脂以及C肽。结果与正常对照组相比,糖尿病组及罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达增加,IMT增加(P<0.05);而罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达低于糖尿病组,IMT下降(P<0.05)。结论罗格列酮可通过抑制IKK活化,进而抑制IκBα降解,降低NF-κB活化水平,从而减轻大血管病变。     

肝细胞生长因子对心肌成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的通过体外培养的新生大鼠心肌成纤维细胞研究肝细胞生长因子(HGF)对结缔组织生长因子表达(CTGF)的影响。方法差速贴壁法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞(CFs)及免疫组化法对其进行鉴定,选AngⅡ(10~(-6)mol/L)作诱导浓度,与HGF100ng/ml孵育48h,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定CFsCTGFmRNA的表达,WesternBlot法测定CTGF蛋白的表达。结果肝细胞生长因子能够在mRNA及蛋白水平上大部分抑制AngⅡ对CTGF表达的诱导。结论初步证实在心肌纤维化的过程中,HGF与CTGF是一对拮抗生长因子,HGF可能通过抑制CTGF表达的途径逆转心肌纤维化。     

辛伐他汀对肾性高血压心肌纤维化及结缔组织生长因子的影响

目的探究辛伐他汀(simvastatin)对肾血管性高血压心肌纤维化及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法建立二肾一夹肾血管性高血压(2K1CRH)大鼠模型,将实验大鼠随机分为3组假手术组、高血压组、辛伐他汀治疗组。术后4周末,开始以辛伐他汀(5mg·kg-1·d-1)灌胃,共8周。测量大鼠收缩压(SBP)、心肌总胶原容积分数、心肌胶原浓度以及CTGF的表达。结果与假手术组相比,高血压组的收缩压、心肌总胶原容积分数、心肌胶原浓度显著增加(P<0.01),CTGF表达上调(P<0.01),辛伐他汀抑制2K1CRH大鼠心肌纤维化的发展和心肌组织中CTGF的表达(P<0.05)。结论辛伐他汀能抑制高血压心肌纤维化,可能与下调CTGF的表达有关。     

核因子-κB和生长因子在糖尿病大鼠早期大血管病变中的表达

目的：探讨糖尿病大鼠早期大血管病变中核因子-κB（NF-κB）及生长因子表达的变化及意义。方法：选用Wistar大鼠24只．随机分为正常对照组和糖尿病组，每组12只。以四氧嘧啶50mg／kg尾静脉注射制造糖尿病模型。10周后．免疫组化染色观察夫鼠主动脉中NF-κB及血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）蛋白表达隋况。结果：糖尿病大鼠主动脉表现为局限性内膜增厚，中膜浅层平滑肌细胞轻度增生、排列紊乱，病灶处内弹力板呈波浪状或交织状排列．有断裂分离现象。糖尿病组与对照组相比，主动脉NF-κB、VEGF及bFGF蛋白表达均增加．差异有统计学意义（均P〈0．01）。结论：高血糖引起的NF-κB、VEGF及bFGF表达增加在糖尿病早期大血管病变的发生发展中可能有重要意义。     

罗格列酮对糖尿病心肌病小鼠心肌纤维化进程的影响北大核心CSCD

目的探讨罗格列酮对糖尿病心肌病(DCM)小鼠心肌纤维化的影响。方法按照体重将小鼠随机分为5组:正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组,每组10只。除正常组外,小鼠给予高脂饲料喂养,同时腹腔内注射链脲佐菌素溶液100 mg·kg^(-1)建立DCM小鼠模型。16周后,3个剂量实验组予罗格列酮1,2和4 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,余2组予等体积生理盐水灌胃治疗,干预12周。计算小鼠心脏指数,以脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附法检测乳酸脱氢酶(LDH)水平,蛋白质印迹法检测金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP2)蛋白表达水平(灰度值)。结果正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的心脏指数分别为(3.69±1.01),(7.55±1.49),(6.33±1.26),(5.21±1.32)和(4.13±0.94)mg·kg^(-1);这5组的心肌细胞凋亡率分别为(3.72±0.94)%,(24.85±4.63)%,(18.48±3.17)%,(16.52±3.25)%和(10.54±2.66)%;这5组的LDH分别为(1.23±0.31),(2.48±0.56),(2.02±0.44),(1.85±0.37)和(1.52±0.38)U·L^(-1);这5组的TIMP2蛋白表达水平分别为0.09±0.02,0.67±0.31,0.49±0.22,0.33±0.15和0.14±0.05;与正常组相比,模型组上述指标差异均有统计学意义(均P<0.05);低、中、高3个剂量实验组的上述指标与模型组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论罗格列酮抑制DCM小鼠心肌纤维化进程,效果与剂量呈正相关。     

灯盏花素对糖尿病大鼠心肌生长因子β_1、转录因子-κB表达的影响

目的:观察灯盏花素(Bre)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌生长因子(TGFβ1)、转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:采用SD大鼠尾静脉注射45mg.kg-1STZ建立实验性糖尿病模型。30只成模大鼠随机分为糖尿病模型组(DM组)、灯盏花素治疗组(Bre-L组,10mg.kg-1.d-1;Bre-H组,20mg.kg-1.d-1),同时设正常对照组(NC组)10只。用药处理8周后检测各组大鼠体质量、血糖、心脏重量指数、心功能,血清LDH、CK含量及心肌组织SOD活性及MDA含量,采用免疫组化方法检测心肌组织中TGFβ1、NF-κB的表达情况。结果:与DM组比较,Bre治疗组大鼠血糖水平无明显变化,但心脏重量指数明显降低,左室内压上升、下降最大速率下降,血清LDH、CK水平及心肌组织MDA含量明显降低,而SOD活性增强,心肌组织TGFβ1、NF-κB的表达显著减少。结论:Bre可明显改善糖尿病大鼠心功能、减轻脂质过氧化损伤和减少心肌TGFβ1、NF-κB表达,对糖尿病大鼠心肌有一定的保护作用。     

非诺贝特及罗格列酮对高糖培养肾小球系膜细胞核因子κB信号通路调控的影响

目的探讨过氧化物酶增殖体激活受体(PPAR)激动剂对糖尿病肾病(DN)作用的机制。方法将大鼠肾小球系膜细胞(MC)分4组:正常对照组(葡萄糖5.5mmol·L-1)、高糖组(HG,葡萄糖25mmol·L-1)、非诺贝特(FB)100μmol·L-1组和罗格列酮(RG)20μmol·L-1组。ELISA法检测培养细胞上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)和纤连蛋白(FN)含量;RT-PCR法检测核因子κB(NF-κB)mRNA的表达;ELISA法检测胞浆及胞核内总NF-κBp65、活性NF-κBp65和磷酸化NF-κBp65表达。结果与正常对照组比较,HG组MC合成基质蛋白Col-Ⅳ和FN增多;HG组MC胞核内核定位序列(NLS)-NF-κBp65和Ser276-NF-κB的表达显著增加;FB或RG干预后能部分或完全逆转上述变化。与HG组比较,FB或RG组上清液中Col-Ⅳ含量下降48h:(21.2±3.2)vs(17.7±2.2),(17.0±3.2)μg.L-1、FN减少48h:(13.5±1.3)vs(12.1±1.0),(11.8±1.1)μg.L-1。各组MC胞浆内NLS-NF-κBp65和Ser276-NF-κB表达则无显著变化;各组NF-κBmRNA表达及总NF-κBp65蛋白水平亦无明显改变。结论PPAR激动剂通过下调MC胞核内NF-κB信号传导通路的活化,进而减少胞外基质合成,达到对DN的治疗作用。     

糖尿病肾病大鼠核转录因子-κB的表达及来氟米特的干预作用

目的研究糖尿病肾病(DN)大鼠模型核转录因子-κB(NF-κB)的表达及来氟米特的干预作用,进一步探讨来氟米特对DN大鼠的治疗作用及可能机制。方法健康雄性Wistar大鼠40只随机分为对照组、DN组、来氟米特组、贝那普利组4组。摘除左肾后,DN模型组与来氟米特组、贝那普利组分别以链脲佐菌素(STZ)35mg/kg腹腔注射,对照组腹腔注射等体积的柠檬酸缓冲液。来氟米特组在成模后每日灌胃:来氟米特5mg/kg,贝那普利组在成模后每日灌胃:贝那普利10mg/kg。8、12周末处死前各组分别测24h尿量及24h尿蛋白定量;心内采血测肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);电镜及苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理改变,免疫组织化学法检测肾组织NF-κB蛋白的表达。结果免疫组织化学结果显示:DN组大鼠NF-κB的表达8、12周逐渐增加,与同期健康对照组及来氟米特组相比,差异有统计学意义(P<0.05),同期来氟米特组与贝那普利组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论NF-κB伴随着肾脏病理学改变而持续激活,可能在DN大鼠肾脏病变中有着重要的作用,来氟米特可通过抑制NF-κB的表达,发挥出肾脏保护作用。     

罗格列酮对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β、Ⅳ型胶原的影响

目的 探讨罗格列酮对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠肾组织转化生长因子[3(TGF-β)及Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)表达的影响.方法 40只大鼠分为正常对照组(C组)、DM组和糖尿病罗格列酮治疗组(DR组).10周后观察血糖(BG)、肾脏指数(KI)、尿微量白蛋白(MAU)及肾组织形态学改变.免疫组化法观察肾皮质TGF-β及C-Ⅳ表达.结果 DM组尿素氮(BUN)、KI、MAU及肾皮质TGF-β、C-Ⅳ表达显著高于C组(P＜0.01),并出现糖尿病肾病(DN)典型的病理改变;而DR组KI、MAU及TGF-β、C-Ⅳ表达较DM组明显减低(P＜0.01).结论 罗格列酮可通过下调肾皮质中TGF-β、C-Ⅳ表达,对DN起保护作用.     

灯盏花素对大鼠糖尿病模型肾组织TGF-β1与CTGF表达影响的实验研究

目的　探讨灯盏花素对大鼠糖尿病模型肾组织转化生长因子 β1(TGF β1)与结缔组织生长因子 (CTGF)表达的影响。方法　建立STZ诱导的单侧肾切除糖尿病模型 ,随机分 :对照组、模型组、灯盏花素给药组 (2 0mg·kg-1·d-1,灌胃 )。观察 8wk后大鼠体重、肾重、肾重 /体重、2 4h尿白蛋白排泄率 (AER)、肾小球面积 (AG)和容量 (VG)及系膜区面积 (AM)的变化 ,并检测肾组织与尿MDA含量及肾组织SOD、CAT、GSH PX活性 ,通过免疫组化检测肾小球TGF β1与CTGF蛋白表达。结果　灯盏花素给药对大鼠糖尿病模型血糖、体重无明显影响 ,可明显抑制肾重、肾重 /体重、AER、AG、VG 及AM 的增加 (P <0 0 5 ) ;对肾组织及尿MDA含量的增加有明显抑制作用 (P <0 0 5 ) ,并明显提高肾组织SOD、CAT及GSH PX活性 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。免疫组化半定量分析显示 ,与对照组相比糖尿病大鼠肾小球TGF β1及CTGF表达明显增加 (P <0 0 1) ,灯盏花素给药对其有明显抑制作用 (P <0 0 5 )。结论　灯盏花素对大鼠糖尿病模型肾脏有明显保护作用 ,其机制部分与抑制肾组织TGF β1与CTGF过高表达有关     

姜黄素对肺纤维化大鼠结缔组织生长因子表达的影响

目的研究姜黄素对博来霉素诱导肺纤维化大鼠结缔组织生长因子表达的影响。方法SD雄性大鼠72只,分为对照组、模型组、姜黄素治疗组,每组24只。对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水,其余各组大鼠气管内一次性滴注盐酸博来霉素。造模后第1天姜黄素治疗组开始给药为200mg.kg-1.d-1,持续到处死动物的前1d。对照组、模型组分别灌服等体积的生理盐水。各组动物于7、14、28d随机处死8只,取肺组织进行HE、Mallory染色,同时进行免疫组织化学染色,结合图像分析来检测各组肺组织中结缔组织生长因子蛋白的表达水平。结果模型组大鼠结缔组织生长因子表达水平与对照组比较显著增高(P<0.01);姜黄素治疗组大鼠结缔组织生长因子表达水平与对照组和模型组比较差异有统计学意义(均为P<0.05)。结论姜黄素具有抗肺纤维化形成的作用,可能与其抑制结缔组织生长因子在肺组织中的表达有关。     

肾络通对大鼠系膜细胞CTGF mRNA表达的影响

结缔组织生长因子(CTGF)是近年来研究发现的一种新的生长因子.它对肾细胞的分泌、增生及细胞外基质(ECM)的合成和降解具有很强的调控作用,其异常表达,在各类肾脏疾病纤维化(肾脏硬化)进程中起着关键作用.中药复方对MCs表达CTGF mRNA有何影响,迄今国内尚未见研究报道.由此设计该课题,通过AngⅡ刺激体外培养的MCs,观察肾络通对CTGF mRNA表达水平的影响,旨在进一步研究其对肾保护作用的可能机制,从分子水平探索活血通络中药的意义,为中药抗肾纤维化治疗策略提供新的思路.     

葛根素对慢性心肌纤维化大鼠心脏功能和结缔组织生长因子的影响

目的研究葛根素对慢性心肌纤维化大鼠的心脏功能和心肌结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的影响。方法采用异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)5mg/kg·d×10d皮下注射制作大鼠慢性心肌纤维化模型,分早期和后期给予葛根素(100mg/kg·d)腹腔注射分别56d和46d。对48只雄性SD大鼠进行随机分组:造模组(M组)16只;对照组(C组)8只;早期干预组(Pa组)12只;后期治疗组(Pp组)12只。实验8周末对大鼠进行超声心动图检测左室射血分数(left ventricle ejection frac-tion,LVEF)及缩短分数(fractional shortening,FS),计算左心指数,进行VG(VanGieson)染色测算胶原容积积分(collagen volume fraction,CVF),RT-PCR检测CTGF mRNA水平。结果Pa组和Pp组的左心指数、CVF和CTGF均较M组明显减少(P<0.01),LVEF和FS则较M组明显增加(P<0.01);Pa组的左心指数和CTGF较Pp组明显减少(P<0.05),而CVF减少更为显著(P<0.01);Pa组的LVEF、FS则明显增加(P<0.01),其中Pa组的LVEF与C组无显著差异(P=0.075)。结论葛根素可抑制ISO诱导的心肌CTGF过表达,减少胶原沉积,从而改善心脏功能。     

罗格列酮对高血压大鼠肾保护作用的研究

目的：观察结缔组织生长因子（CTGF）在两肾-夹高血压大鼠肾间质中的表达及其与肾损害的关系,探讨罗格列酮对CTGF在肾间质表达的影响及高血压肾保护作用的机制。方法：两肾-夹高血压大鼠随机分为阳性对照组（B组）、罗格列酮治疗组（C组）,假手术组作为阴性对照组（A组）。监测各组大鼠各阶段血压的变化,检测尿＆微球蛋白（-MG）、尿素氮（Bun）、血肌酐（Cr）。免疫组化法检测CTGF在肾组织中的表达,并判断肾组织的病理学变化及肾间质纤维化程度。结果：治疗前B组与C组的尿B．MG均较A组明显升高（P〈0．01）,B组与C组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）,而治疗后C组的尿＆-MG较B组明显降低（P〈0．05）;CTGF在B组和c组的表达较A组均明显增加（P〈0．01）,而C组CTGF的表达较B组降低（P〈0．05）。CTGF的表达与β2-MG及肾间质纤维化呈正相关（r=0．734,P〈0．01;r=0．777,P〈0．01）。结论：罗格列酮可以降低血压,减少蛋白尿,下调CTGF在肾间质的表达,从而延缓肾间质纤维化（RIF）的发展,发挥肾保护作用。     

血清结缔组织生长因子在肝纤维化评估中的临床价值

目的探讨血清结缔组织生长因子(CTGF)和肝纤维化的关系,评估结缔组织生长因子在肝纤维化诊断中的临床价值。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清CTGF水平,探讨血清CTGF浓度和肝纤维化程度的关系;通过CTGF和一些已经证实的肝纤维化标记物的ROC曲线分析,评估CTGF诊断肝纤维化的价值。结果血清CTGF水平和肝纤维化分期明显相关,r为0.689(P<0.001),CTGF用于鉴别轻微纤维化和明显纤维化的ROC曲线下面积为0.841,95%可信区间0.762~0.920。结论血清CTGF和肝纤维化分期明显相关,提示血清CTGF水平可能是预测肝纤维化分期比较好的标记物,血清CTGF在肝纤维化的评估中是一个非常有价值的指标。     

罗格列酮对2型糖尿病病人肿瘤坏死因子和瘦素的影响

目的 :探讨罗格列酮治疗 2型糖尿病对肿瘤坏死因子 (TNF)和瘦素的影响及其治疗糖尿病的可能机制。方法 :4 8例 2型糖尿病病人 ,男性 2 4例 ,女性 2 4例 ,年龄 (5 8±s 8)a ,随机分为 2组 ,每组 2 4例 ,对照组维持原磺酰脲类和双胍类药物降糖治疗 ,治疗组在原治疗基础上加用罗格列酮 4mg·d- 1,疗程 3mo。测定治疗前后 2组血糖、胰岛素、糖化血红蛋白及TNF和瘦素水平。结果 :治疗后 ,治疗组空腹和餐后 2h血糖下降 (1.0± 1.0 )和 (4±3)mmol·L- 1,TNF和瘦素下降 (0 .8± 0 .4 )和 (10±7) μg·L- 1,空腹和餐后 2h胰岛素下降 (3± 4 )和(8± 7)mU·L- 1,与治疗前及对照组相比 ,差异有显著或非常显著意义 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :罗格列酮可明显改善 2型糖尿病病人的血糖和胰岛素抵抗 ,可能与降低TNF和瘦素有关