无载体酶稳定化——交联酶晶体

本文涉及到无载体稳定化问题,介绍无载体稳定化新方法－交联酶晶体（Ｃｒｏｓｓ－ＬｉｎｋｅｄＥｎｚｙｍｅＣｒｙｓｔａｌｓ,ＣＬＥＣｓ）它是近年发展起来的新型酶晶体催化剂,具有酶的一般特性,催化活性和选择性高,在温和条件下反应等,又具有非均相化学催化剂的操作稳定性高,易回收利用的特点,ＣＬＥＣｓ技术是将酶结晶技术和化学交联技术结合,提高酶抵抗极端条件以及有机溶剂中的稳定性,并广泛适应于各种各样的蛋白质及     

课堂教学随笔:异构酶、变位酶、消旋酶、差向异构酶与互变异构酶

物质代谢过程涉及多种酶的参与,了解这些酶的作用及机制对理解代谢过程非常重要。课堂教学中,我们经常会碰到各种名称的异构酶,包括变位酶、消旋酶、差向异构酶与互变异构酶等,学生难免会混淆彼此的含义。本文拟就生化代谢中的一些反应实例,探讨这几类酶的作用特点。     

热稳定性酶

酶的热稳定性是酶的重要属性之一。任何导致酶的空间结构变化的因素都影响酶的热稳定性,包括酶液的ｐＨ、缓冲液、离子强度、底物浓度、溶剂等等。热稳定性酶具有提高化学反应速率,简化工艺,降低成本,提高产品质量,活性稳定,耐贮藏等优点。所以寻找热稳定性酶,提高...     

辣根过氧化物酶模拟酶研究进展

辣根过氧化物酶 (HRP)是一种常用的工具酶 ,对其模拟酶的研究是近年来生物化学和有机化学的重要课题 ,具有重要的理论意义和应用价值。本文评述了近十年来HRP模拟酶的研究进展。     

天然巴曲酶的酶学性质研究

目的 研究巴西矛头蝮蛇蛇毒中纯化的天然巴曲酶的酶学性质.方法 测定不同的温度、pH值和金属离子等条件对重组定点突变巴曲酶活性的影响.结果 实验表明,该酶在温度30～40℃,pH 6.5～9.0活性较为稳定;其最适反应温度为37℃,pH为7.5;Mg2+、K+和Ca2+离子对酶活有激活作用,而Cu2+、Fe2+和Zn2+离子对该酶有抑制作用.结论 从蛇毒提取的天然巴曲酶酶学性质比较稳定.     

作为人造极端酶的交联酶晶体

作为人造极端酶的交联酶晶体林影卢荣德郭勇（华南理工大学生物工程系,广州５１０６４０关键词交联酶晶体极端酶酶作为生物催化剂,催化效率高,立体选择性和底物专一性强,是普通化学催化剂所不可比拟的。然而,在酶的应用过程中还有很多令人不满意之处,如在环境中常常...     

也谈多功能酶与多酶复合体

“关于多功能酶与多酶复合体的教学”《生物学杂志》 ,1 7( 5 ) :4 4一文提出了生化教学中两个易混淆的概念。笔者认为 ,提出教学难点 ,进行充分的讨论 ,有助于明辨是非 ,澄清认识 ,提高教学质量。上文在阐述这两个概念时 ,强调了多酶复合体中每种酶催化的反应彼此之间有反应链的特征 ,而多功能酶中每种酶催化的反应之间并无反应链的关系。这种立论是片面的 ,是不符合迄今所知的许多实验事实的。例如 ,催化脂肪酸生物合成的脂肪酸合成酶 ,在大肠杆菌中以多酶复合体的形式存在 ,它是以酰基载体蛋白 (ＡＣＰ)为核心 ,6种酶排列在四周而构成的…     

极端酶的研究进展

生命科学的迅猛发展大大拓宽了人们对酶的认识。以前,酶被定义为作用于常温、常压、温和PH和离子强度的水溶液中,具有区域专一性、立体专一性和高效催化活性,存在于天然生命体中的蛋白质。而今,酶在分子水平上被视为四类[1]：蛋白质酶（Pepzyme）、核酸酶（ribozyme）、化学酶（chemozyme）和抗体酶（abzyme）,作用范围也大大拓宽。科学家将那些可在非常规条件下作用的酶称之为极端酶（extremozmpe）[2]。依据其来源,极端酶大致可分为三种：（1）从生活在非常规条件下的微生物（细胞）如某些古细菌（archaea）中分离得到的酶：（2）…     

交联酶聚集体--一种无载体酶固定化方法

对一种崭新的无载体酶固定化技术——交联酶聚集体(Cross-linked Enzyme Aggregates,CLEAs)技术进行了文献综述。CLEAs技术是一种将蛋白质先沉淀后交联形成不溶性的、稳定的固定化酶。研究结果显示其活性和稳定性可与交联酶晶体(Cross-linked Enzyme Crystals,CLECs)技术相媲美。由于其制备不需要复杂耗时的结晶、纯化步骤,一般实验室都能实行,因而更有利于研究和应用的普及。该文就CLEAs的制备、在水溶液中的活性和稳定性在有机溶剂中的活性和作用机理及研究进行了介绍讨论。     

淀粉合酶的酶学与分子生物学研究进展

淀粉合酶作为淀粉合成的关键酶之一,一直是淀粉研究的重要内容,这些研究多集中在对其同工型的研究,淀粉合酶的两类主要同工型分别为淀粉粒结合的淀粉合酶和可溶性淀粉合酶,这两类同工型的作用极为复杂,本文介绍了淀粉合酶同工型的酶学和分子生物学近年来的研究进展,同时也讨论了这些同工型的分类,相互关系及其在淀粉合成过程中的生理功能等内容。     

漫谈酶营养和酶的养生保健功能

酶营养学是近年来所形成的抗病抗衰老学说之一,酶营养学家做了大量研究终于明白机体衰老和慢性病根源是由于体酶不足所引起的。不良的生活习惯和饮食可引起消化不良,从而导致体酶的大量损耗,因此提倡改善饮食和生活习惯来节约体酶的消耗以防止体酶之无谓浪费,并多食生鲜果蔬及酶补充剂是延缓衰老、减少慢性病发生的有效措施。     

酶稳定化研究进展

酶稳定性研究无论对阐明酶结构与功能关系,还是对酶在生物工程中的应用都 有重要意义。文章概述了迄今开发的酶稳定化方法,并比较了各种方法的优缺点,提出酶稳定化的标准,强调了最近在酶稳定化研究中所取得的进展。     

糜酶的研究进展

糜酶是一类丝氨酸蛋白酶,主要存在于肥大细胞的分泌颗粒和细胞间质。成熟的酶为一糖蛋白,由２２６个氨基酸组成,分子量为３０ｋＤ,其酶活力能被丝氨酸蛋白酶抑制剂所抑制,而不受血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂的影响。糜酶的ｃＤＮＡ和基因组ＤＮＡ均已被克隆和测序。该酶和神经炎症反应、血管活性肽代谢和细胞外基质代谢等有密切联系,在心脏血管紧张素Ⅱ形成中起重要作用。     

含硒酶与非酶作用机制

在微生物、植物和动物体内,硒的功能形式多种多样,但其作用机制可归纳为酶与非酶两个方面,含硒酶的作用主要有：谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）家族催化超氧化物还原,防止细胞膜的氧化损伤;脱磺酶（ID）家族调节甲状腺激素代谢,硫氧还蛋白还原酶（TDR）家族催化硫氧还蛋白（Trx）还原,TDR／Trx系统为细胞的生长和分化所必需,硒的非酶化学保护作用体现在：可诱导一些蛋白激酶的富半胱氨酸结构域发生氧化还原修饰,增强免疫功能等作用,硒在植物中的作用机制具有许多特殊性。     

真菌漆酶的酶活测定方法评价

目前真菌漆酶酶活的测定方法多样,没有统一的标准,致使不同研究之间的漆酶酶活无法进行比较分析,也造成漆酶产品在酶活质量意义上的混乱。因此,对测定真菌漆酶酶活的各种不同的分光光度法进行了综述和比较分析,认为采用ABTS法作为测定漆酶酶活的方法较具合理性和科学性,建议作为漆酶酶活测定的统一方法。     

简述几个酶学概念

单体酶（monomericenzyme）、寡聚酶（oligomeri－cenzyme）、多酶复合体（muhltienzymecomplex）、多酶融合体（multienzymeconjugate）等概念之间存在着交叉和重叠现象,本文对其进行了简述。1单体酶由一条肽链组成或由多条肽链组成,但肽链间以共价键结合的酶。例如牛胰核糖核酸酶是由含124个氨基酸残基的一条肽链组成。又例如胰凝乳蛋白酶是由3条肽链组成,队链间由二硫键相连构成一个共价整体。这类合几条肽链的单体酶往往是由一条前体肽链经活化断裂而生成。2寡聚酶由2个或2个以上亚基组成的酶,亚基间以非共价键结合。从结构上看,酶…     

豇豆几丁质酶部分酶学特性的研究

该文测定了纯化的豇豆几丁质酶部分酶学特性。结果表明,该酶在pH5-8,温度低于60℃的范围内稳定性较好,酶活力最适pH为65,最适温度为50℃。10mmol/L浓度的Hg2 、Mn2 、Mg2 、Co2 等金属离子对酶活力有一定抑制作用,其中Hg2 离子抑制率最高(6883%)。Km(胶状几丁质)值为1662mg/ml;以SDS-PAGE电泳和SephadexG-100柱层析两种方法分别测得分子量为34kD、325kD;IEF电泳测得等电点为83。     

酶的辅因子

(一)辅因子概念酶的化学本质是蛋白质,它和其它蛋白质一样,主要由氨基酸组成。因此也具有两性电解质的性质,并且具有一、二、三、四级结构。酶和其它蛋白质一样,其中有些是单纯蛋白质,有些是结合蛋白质。脲酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和核糖酸酶等一般水解酶都属于简单蛋白质。这些酶只由氨基酸组成,此外不含其它成份。转氨酶、碳酸酐酶、乳酸脱氢酶及其它氧化还原酶类等均属于结合蛋白质。这些酶除了蛋白质组份外,还含有对热稳定的非蛋白的小分子物质。前者称为酶     

褐藻胶裂解酶基因的克隆表达及重组酶酶学性质

【目的】克隆交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)BYS-2的褐藻胶裂解酶基因,实现其在大肠杆菌细胞中异源表达,对分离纯化的重组酶进行酶学性质研究。【方法】以交替假单胞菌BYS-2菌株基因组DNA为模板,克隆得到褐藻胶裂解酶基因alg738,构建重组基因工程菌BL21(DE3)/p ET22b-alg738,诱导表达,表达产物通过Ni-NTA树脂纯化后进行酶学性质研究。【结果】重组酶的最适反应p H为8.0,在p H 6.0-9.0范围内37°C保温1 h仍能保持84%以上的相对酶活力,具有较好的p H稳定性;最适反应温度为45°C,热稳定性实验显示在37°C下保温60 min其残余酶活力仍达66.6%;在5 mmol/L浓度下,Na~+、Mg~(2+)、Mn~(2+)对该酶具有明显的促进作用,Ni~(2+)、Co~(2+)、Cu~(2+)、Hg~(2+)、Zn~(2+)、EDTA、β-巯基乙醇、SDS具有明显的抑制作用。动力学参数Km、Vmax分别为1.11 g/L和0.011 g/(L·min),底物特异性分析表明该重组酶为偏好聚甘露糖醛酸钠(Poly M)裂解作用的双功能酶。【结论】重组褐藻胶裂解酶具有良好的酶学特性,为褐藻胶裂解酶的开发应用打下基础。