腺嘌呤核苷脱氨酶及核苷运转系统对精子运动的调节作用

 腺嘌呤核苷(ADO)和它的类似物2-Cl-ADO对牛附睾尾部精子的运动有刺激作用,为了探讨ADO及其类似物对精子运动调节作用的机理,我们从ADO受体,核苷运转系统(NTS)及腺苷脱氨酶(ADA)三个方面对牛附睾尾部的精子进行了研究。我们发现腺苷受体不存在于牛精子膜上,但ADA和NTS以膜蛋白的形式结合在精子膜上,并对精子体内的ADO浓度起调节作用。我们的结论是ADO及其类似物对牛精子运动的调节作用是首先通过精子膜上的ADA和NTS影响精子体内的ADO浓度,进而ADO又通过调节钙离子浓度刺激牛精子运动。     

古尼虫草核苷类成分的高效液相色谱分析

以已知核苷为标样,并以冬虫夏草做对比,利用反相高效液相色谱法对古尼虫草及其发酵菌丝体的核苷类化学成分进行了分析,结果表明古尼虫草和冬虫夏草主要含有7种标样核苷中的腺苷、胞苷、尿苷,其含量相当,而古尼虫草发酵菌丝体中腺苷和尿苷的含量是古尼虫草子座或僵虫体的2～3倍。     

古尼虫草核苷类成分的高效液相色谱分析*

以已知核苷为标样,并以冬虫夏草做对比,利用反相高效液相色谱法对古尼虫草及其发酵菌丝体的核苷类化学成分进行了分析,结果表明古尼虫草和冬虫夏草主要含有7种标样核苷中的腺苷、胞苷、尿苷,其含量相当,而古尼虫草发酵菌丝体中腺苷和尿苷的含量是古尼虫草子座或僵虫体的2~3倍。     

大鼠胃纵行和环行平滑肌对细胞外核苷引起的差异收缩反应

目的：观察几种细胞外核苷如ATP、urIP和四磷酸脲腺苷（Up4A）在胃纵行平滑肌（Ⅲ）和胃环行平滑肌（CM）中引起不同的反应,P2X和P2Y受体拮抗剂以及环氧合酶抑制剂五磷酸二肌苷（11＇5I）、苏拉明（suramin）和吲哚美辛对№A在删和CM中引起的收缩的影响。方法：取大鼠全胃,分离LM和CM,使用organbath系统测量平滑肌收缩。结果：Up4A可以在I_aM和CM中引起与ATP和U1P类似的收缩;IP5I对LM和CM中由Up4A引起的收缩并无影响;但suramin和吲哚美辛则能在CaM中显著抑制由Up4A引起的收缩,而LM中无此现象。结论：两种胃平滑肌对核苷类药物及其抑制剂的反应有差异。     

细胞外腺苷介导核苷转运体ENT1阻断cA MP/p-PKA信号通路抑制肝脏糖异生

糖尿病的关键特征是葡萄糖和脂质代谢紊乱。目前,糖尿病已成为沉重的全球疾病负担。越来越多的证据表明,腺苷系统在调节胰岛素和葡萄糖平衡中发挥关键作用。腺苷是一种重要的细胞代谢调节剂,通过激活G蛋白偶联受体和核苷转运体参与能量代谢、免疫调节、氧化应激等多个生理病理过程。然而,腺苷在肝脏糖异生调控中的角色尚未被阐明。该文从多层面验证了腺苷通过核苷转运体(equilibrative nucleoside transporter, ENT)转运入胞内后对胰高血糖素刺激引起的肝脏糖异生通路的影响。结果显示,在体内模型中,外源性腺苷显著抑制小鼠血糖升高。在细胞模型中,腺苷以剂量依赖的方式抑制肝脏糖异生进而降低葡萄糖输出水平,且无细胞毒性。肝脏组织及细胞中ENT广泛表达,其中1型核苷转运体(equilibrative nucleoside transporter 1, ENT1)介导了腺苷抑制的肝糖输出。此外,腺苷介导的糖异生抑制并非依赖于AMP依赖的蛋白激酶[adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase, AMPK]通路的激活。最后...     

嘌呤核苷磷酸化酶与嘧啶核苷磷酸化酶的融合表达及酶法合成嘌呤核苷类产物

将嘌呤核苷磷酸化酶与嘧啶核苷磷酸化酶进行融合,提高生物酶法催化合成克拉屈滨等嘌呤核苷类产物的产率.设计不同的刚性、柔性连接短肽(Linker),将嘧啶核苷磷酸化酶EcUP与嘌呤核苷磷酸化酶AmPNP连接融合,考察酶融合蛋白的可溶性表达与活性情况.使用EEEEEEKKK短肽连接的融合蛋白EcUP-L4-AmPNP可溶性表...     

腺苷在脑缺血过程中的双重作用

随着内源性腺苷系统具有神经保护作用的提出,派生出新的课题——腺苷及其类似物能否治疗脑卒中等一系列神经系统疾病?随着研究的深入,这一问题已逐渐成为神经药理学研究的热点。大量的工作集中在腺苷及其类似物对脑卒中的治疗作用,但实验结果具有很大的不确定性。传统上认为系统性给予腺苷引起心率减慢、血压降低、脑供血减少,从而限制了腺苷的应用。因此,提出了合用外周腺苷受体拮抗剂、腺苷转运蛋白抑制剂及代谢阻断剂,这既能对抗其心血管副作用,又使得脑缺血区的内源性腺苷维持在较高水平,发挥神经保护作用。然而,在脑缺血的病理条件下,腺苷浓度已显著提升,逾越了其自调节的范围。在此情况下,继续强化腺苷的作用,是否有悖于机体自稳态的恢复?诚然,腺苷具有明显的神经保护作用,但近年的研究又显示腺苷及其某些代谢产物具有神经损伤作用,如何解释这些相互矛盾的现象?又如何评价腺苷在脑缺血过程中的作用?本文主要从作用机制上,综合评述腺苷在脑缺血过程中可能发挥的神经保护及损伤作用,以期为脑卒中的临床治疗和新药开发提供一定的参考。     

培养牛心内膜内皮细胞的腺苷三磷酸双磷酸酶的特性研究

包括血管内皮细胞在内的多种细胞和组织存在腺苷三磷酸双磷酸酶,但心内膜内皮细胞是否含有ａｐｙｒａｓｅ尚无报道。本文旨在研究牛心内膜内皮细胞ａｐｙｒａｓｅ的特性。以无机磷释放法检测培养牛心内膜内皮细胞（ＢＥＥＣ）ａｐｙｒａｓｅ的活性,公认的ａｐｙｒａｓｅ抑制剂叠氮钠呈浓度依赖性地抑制ａｐｙｒａｓｅ活性;另一种ａｐｙｒａｓｅ抑制剂氟化钠也明显抑制ａｐｙｒａｓｅ活性地抑制活性而Ｎａ＾＋／Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓ     

微生物产生核苷和核酸

微生物经诱发育种后能够产生核酸类物质。肌苷、腺三磷等是具有特定功能的生化药物,鸟苷、胞苷、尿苷等核苷是一类抗病毒、抗肿瘤药物的中间体。肌苷酸钠和鸟苷酸钠是呈味性核苷酸,用于和谷氨酸钠复配成为第二代、第三代味精。核糖核酸（ＲＮＡ）、脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）是酶法和化学法分解产生核苷和核苷酸的原料。据国内外的研究、生产报导,枯草芽孢杆菌是产生核苷的最佳出发菌核,经诱变育种,选育硷基缺陷型和药物抗性菌株,     

植物核苷二磷酸激酶研究进展

核苷二磷酸激酶(Nucleoside diphosphate kinases,NDPKs)是一类高度保守的蛋白,大小一般在70-100 k D,在生物体内大多数以六聚体形式存在,仅在少数原核生物中以四聚体形式存在。NDPK主要参与维持核苷二磷酸和核苷三磷酸的平衡。目前在植物中已发现4种NDPK:NDPKⅠ、NDPKⅡ、NDPKⅢ和NDPKⅣ,相关研究主要集中在前3种。NDPKⅠ与植物生长发育、非生物胁迫、感病应激和激素响应有关;NDPKⅡ参与光合作用和活性氧清除;NDPKⅢ参与能量代谢和细胞程序性死亡;NDPKⅣ仅在拟南芥和水稻基因组中发现,预测定位于内质网,功能未知。除了上述的主要作用外,NDPK在某些植物中还有特殊功能,如参与DNA复制、参与淀粉和纤维素的合成、参与生长素调节和发挥核酶活性等。这些作用机制是否存在物种特异性还有待进一步的研究。对NDPK的系统进化、生物功能的最新进展进行了综述。最后对NDPK的发展趋势进行了展望,有助于将来对NDPK进行更深入和全面的研究。     

嘧啶核苷的研究进展

嘧啶核苷包括尿嘧啶核苷和胞嘧啶核苷,其在食品工业和医药行业上应用广泛。介绍了嘧啶核苷的用途、测定方法、生产方法等;根据代谢控制发酵原理,以尿苷生产菌的选育为例,详细介绍了嘧啶核苷生产菌的育种策略,并对嘧啶核苷生产菌的育种实例、育种展望进行了综述。     

核苷类药物酶法合成研究进展

由于核苷类似物具有很高的抗病毒活性,因为而已成为医药工作者研究的重点。运用酶法合成核苷类似物．已经显示了巨大的优势。本文综述了酶法合成核苷类似物的产生菌种和酶系,以及它们的催化机理,并罗列了已经用于生产或较有使用价值的菌种。     

急性重复缺氧对小鼠脑组织腺苷及其A1受体的影响

分别应用酶鉴别分光光度法和放射性配体结合法测定小鼠脑组织腺苷（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ,ＡＤＯ）含量及Ａ１受体在急性重复缺氧过程中的变化。发现经急性重复缺氧处理的动物全脑内ＡＤＯ含量有一定程度的累积增加,尤其在海马、脑桥和延髓处的增加较为显著;各脑区Ａ１受体的数目显著低于正常对照组,但海马、脑桥和延髓处Ａ１受体的亲和力显著高于正常对照组。结果提示,重复缺氧后虽然脑内Ａ１受体数目减少,但由于海马、脑桥和延髓处Ａ１受体的亲和力升高,累积增加的ＡＤＯ和Ａ１受体结合后,抑制神经细胞兴奋性的作用仍可能得到加强,从而使ＡＤＯ仍能更好地发挥抑制性神经调制作用。     

脑预缺血引起大鼠海马细胞膜腺苷受体数量和亲和力升高及其对神经元的保护作用

采用放射性配基结合法,测定大鼠全脑缺血后海马细胞膜腺苷(adenosine,ADO)受体数量及亲和力的变化,以探讨其与脑缺血耐受形成之间的关系。发现缺血6min即可导致海马组织明显的神经元延迟性死亡(delayed neuron     

腺苷甲硫氨酸合成酶的提取纯化研究

腺苷蛋氨酸具有转甲基、转硫和转氨丙基等重要生理作用,已成为治疗疾病的重要药物。目的：为腺苷蛋氨酸合酶的基因克隆做准备。方法：研究了腺苷甲硫氨酸合成酶的提取和纯化。腺苷蛋氨酸合酶为胞内酶,其提取需先进行细胞破碎,然后进行盐析和离子交换层析等方法来纯化。酵母的破壁试验考察了研磨、加入有机溶剂和超声波等不同的破碎方法。结果：超声波破碎法最好,得到粗酶液的酶活力为0．934U／ml;经过硫酸铵盐析后,利用离子交换层析法纯化腺苷甲硫氨酸合成酶,作出了腺苷甲硫氨酸合成酶的穿透曲线和洗脱曲线。     

腺苷的中枢作用

腺苷是包括中枢神经系统（ＣＮＳ）细胞外液在内的体液的正常组成成分,其正常水平为０．０３～０．３μｍｏｌ／Ｌ。ＡＴＰ合成与分解失衡的条件下明显升高,如缺血时可升高１０００倍之多。腺苷通过腺苷受体（ａｄｅｎｏｄｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＡＲ）对ＣＮＳ具有多方面的生理与病理作用,被认为是ＣＮＳ的抑制性神经调质,具有神经保护作用。     

F—1ATP酶的三维结构

ATP（三磷酸腺苷）是细胞的化学合成、交换和运动必不可少的动力。这一重要事实人们已经知道了将近50个年头。近20年来,对产生ATP的ATP合成酶在线粒体、叶绿体和细菌的“能量转换”中的重要地位,又得到进一步确认。80年代,Boyer等人首次提出了ATP合成酶催化部分的模型。指出ATP合成酶的催化部分是一个球状体,其中包括a一和卜两类亚基蛋白质,各有3个,相间排列,象陀螺一样旋转。其中卜亚基能催化产生ATP,每旋转一周,3个卜亚基就改变了形状,各自处于不同的状态,分别进行捕捉ATP一前体,催化反应和释放新形成的分子。令人遗…     

地黄中腺苷含量的影响因素

地黄中腺苷含量的影响因素朱青罗燕燕王瑛龚韬郄春鹏（北京市临床药学研究所,北京１０００３５）ＴｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｆａｃｔｏｒｓｏｎａｄｅｎｏｓｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅｒｏｏｔｔｕｂｅｒｏｆＲｅｈｍａｎｎｉａｇｌｕｔｉｎｏｓａＬｉｂｏｓｃｈ．Ｚ...     

腺苷及其受体阻断剂对蟾蜍离体心脏功能的影响

实验采用离体心脏灌流方法,观察了腺苷,腺苷受体特异性阻断ＤＰＣＰＸ以及非特异性腺苷受体阻断剂茶碱对两栖类动物蟾蜍的离体心脏力和心率的影响。结果显示,腺苷对心脏收缩力和心率有明显的剂量依赖性抑制作用。单纯的ＤＰＣＰＸ或茶碱对心肌收缩力和心率无显著影响,但在含腺苷的灌流液中加入ＤＰＣＰＸ或茶碱后,对腺苷有明显的拮抗效应。