氯化锂联合匹罗卡品小剂量多次注射诱发癫痫持续状态模型的研究

目的 研究减少匹罗卡品癫痫持续状态模型病死率的方法 .方法 建立3种匹罗卡品癫痫持续状态模型：大剂量匹罗卡品注射、氯化锂联合匹罗卡品单次注射、氯化锂联合匹罗卡品小剂量多次注射,比较3种方法 癫痫状态发生率、病死率及自发发作率的差异.结果 3种方法 癫痫状态发生率分别为70.0%、76.7%、80.0%,差异无统计学意义;癫痫自发发作率分别为77.8%、83.3%、85.7%,差异无统计学意义;病死率分别为57.1%、47.8%、12.5%,氯化锂-小剂量多次匹罗卡品组明显降低.结论 氯化锂联合匹罗卡品小剂量多次反复注射,癫痫病死率明显降低,慢性期癫痫自发发作率高,是一种理想的癫痫持续状态模型.     

匹罗卡品致大鼠癫痫持续状态后海马神经元凋亡的动态观察

目的 探讨癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后海马细胞凋亡的发生及其与caspase-3表达的关系.方法 采用匹罗卡品诱发大鼠SE模型,用TUNEL染色和免疫组化技术检测海马神经元凋亡和caspase-3表达的动态变化.结果正常对照组大鼠海马未见TUNEL阳性细胞;SE后6 h,开始出现少量TUNEL阳性细胞;SE后72 h,达到高峰;SE后7 d,TUNEL阳性细胞开始减少.正常对照组大鼠海马可见少量caspase-3阳性表达;SE后6 h,大鼠海马caspase-3阳性表达增多,主要集中于CA1和CA3区;SE后48 h,caspase-3表达达到高峰;SE后72 h～7 d,caspase-3阳性染色细胞数开始减少;但仍显著多于对照组,差异有极显著意义(P＜0.01).结果 显示caspase-3表达分布与TUNEL染色基本一致,caspase-3表达高峰早于TUNEL所示凋亡细胞出现的高峰.结论 神经元凋亡参与了SE后海马神经元迟发性死亡过程并与caspase-3的激活有密切的关系.     

地西泮微量输液泵治疗癫痫持续状态的护理

癫痫持续状态(status epilepticus,SE)是小儿常见危重症之一,尽量控制惊厥是抢救成功的关键.静脉推注地西泮(diazepam,商品名安定)是常规首选药物,但存在着药物浓度不稳定、污染机会多、护理人员劳动强度大等缺点.笔者应用地西泮输液泵静脉维持抢救SE患儿28例,疗效较好,现就其护理作一报道.     

口服补液盐降低氯化锂-匹罗卡品惊厥持续状态大鼠死亡率的研究

目的 探讨通过胃管灌胃改良口服补液盐（Oral Rehydration Salts,ORS）降低氯化锂-匹罗卡品诱发惊厥持续状态（statue convulsion, SC）模型的死亡率的方法。方法 选用成年组(60d)SD大鼠30只和幼年组（20d）SD大鼠45只,随机分为成年SC+ORS组、成年SC组、幼年SC+ORS组、幼年SC组、幼年血糖组各15只。经腹腔注射氯化锂和匹罗卡品,诱发大鼠惊厥发作,惊厥60min后,给予安定止惊。各ORS组于SC后1h、12h、24h根据不同年龄予以不同剂量改良ORS灌胃。其余各组不给予处理。记录实验大鼠惊厥发作情况,惊厥前后体重变化及死亡情况;血糖测定组于SC后8h取血检测血糖,探索降低该模型死亡率的方法。结果 （1）各组惊厥后体重均降低,约占体重的5%-8%。（2）氯化锂-匹罗卡品惊厥持续状态模型死亡率较高,幼年组40.00%,成年组57.14%;死亡发生时间集中在惊厥后24h内,72h后死亡数趋于平稳。（3）SC后实验大鼠血糖明显降低,给予ORS液灌胃后,血糖趋于正常水平。（4）以改良ORS灌胃后,幼年组和成年组72h内死亡率明显降低。结论 SC后改良ORS液灌胃有效改善实验动物死亡率,是有效提高其生存率的方法。     

地西泮联合苯巴比妥治疗癫痫持续状态28例临床观察

目的探讨地西泮联合苯巴比妥治疗癫痫持续状态的疗效、安全性、不良反应。方法回顾性分析28例应用地西泮联合苯巴比妥治疗癫痫持续状态的疗效。结果25例治愈,3例无效,治愈率达89%。无1例出现呼吸抑制等不良反应。结论地西泮联合苯巴比妥治疗癫痫持续状态,简便实用,安全有效。     

大鼠癫痫持续状态后前凋亡分子GADD153在海马中的表达

癫痫持续状态（status epilepticus，SE）可造成海马等结构的神经元选择性凋亡。生长停滞、DNA损害可诱导蛋白153（growth arrest and DNA damageinducible protein 153，GADD153），是介导内质网应激相关性凋亡的重要分子之一，它是否参与了SE致细胞凋亡过程，笔者未见相关报道。本研究应用氯化锂-匹罗卡品大鼠SE模型动态观察了海马GADD153 mRNA的表达变化。     

锂-匹鲁卡品大鼠急性癫痫模型的建立及评价

目的用氯化锂-匹鲁卡品制备Wistar大鼠急性癫痫模型,探讨匹鲁卡品合适的剂量及用法。方法54只wistar大鼠腹腔注射氯化锂3 mmol/kg,在三天内分六个时间段给予不同剂量的匹鲁卡品腹腔注射。结果30只大鼠癫痫持续状态(SE)发作,5只死亡,以氯化锂预处理16小时-24小时后注射30 mg/kg匹鲁卡品量组的SE发作率高,死亡率低。结论用氯化锂-匹鲁卡品制备Wistar大鼠SE模型,氯化锂预处理16小时-24小时后注射30 mg/kg匹鲁卡品量较好。     

地西泮联合丙戊酸治疗癫痫持续状态的临床疗效分析

目的：观察地西泮联合丙戊酸治疗癫痫持续状态的临床疗效。方法以2009年6月-2013年4月平舆县人民医院神经内科收治的104例癫痫持续状态患者为研究对象并随机分为对照组与治疗组。其中对照组单用地西泮治疗,治疗组在对照组基础上加用丙戊酸,观察两组临床疗效。结果治疗组的癫痫发作控制时间、有效率、复发率均优于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;不良反应方面二者无显著性差异（P＞0.05）。结论地西泮联合丙戊酸治疗癫痫持续状态安全、有效,值得推广。     

地西泮配合苯巴比妥钠治疗癫痫持续状态62例临床体会

目的:探讨地西泮配合苯巴比妥钠治疗癫痫持续状态的方法和效果。方法:分析总结我院从2008年6月～2011年6月收治的62例癫痫持续状态患者的临床资料。结果:有效控制57例,治愈出院55例,治愈率达88%。家属放弃治疗5例,死亡2例,1例死于原发病,1例死于并发症。结论:地西泮配合苯巴比妥治疗癫痫持续状态安全有效,简便实用,减少脑损害程度,降低并发症和死亡率。     

氯化锂-重复低剂量匹罗卡品致大鼠癫痫模型制作

目的:建市氯化锂一重复低剂量匹罗卡品致痫大鼠模型.方法:雄性成年sD大鼠173只.随机分为对照组、非药物干预组和药物干预组.氯化锂3mEq/kg腹腔注射(IP),19h后给予低剂量匹罗卡品10mg/kg,每隔30min 1次,重复2-4次.观察大鼠行为、脑电、模型成功率、死亡率、自发性癫痫发作及其潜伏期和发作的严重程度.结果:氯化锂-重复低剂量匹罗卡品大鼠癫痫模型在匹罗卡品1～4剂后发生癫痫持续状态,痫性发作距离注射时间平均为16min,成功率73%,匹罗卡品用量平均25.9mg/kg,持续90min被终止者死亡率低于10%.自发性癫痫发作平均每天2.4～5.7次,潜伏期平均40天.发作程度均达到Ⅲ级以上的痫性发作,绝大多数为Ⅳ/Ⅴ级,脑电类似人类颞叶癫痫.对照组大鼠均为0级发作.结论:氯化锂-重复低剂量匹罗卡品诱导的大鼠癫痫模型具有制作方便、致痫成功率高和动物死亡率低特点,同人类癫痫持续状态和颞叶癫痫有相似的行为和脑电图改变.     

咪唑安定治疗儿童癫痫持续状态的疗效观察

目的：研究咪唑安定持续静脉滴注对癫痫持续状态的疗效。方法：选择40例SE患儿随机分为两组：咪唑安定组21例,持续静脉滴注;对照组19例,应用一线抗癫痫药安定静注;观察两组的起效时间、疗效,以及用药前后心率和血压。结果：两组心率、血压差异无显著性,治疗组疗效明显高于对照组（P〈0.05）。结论：持续静脉滴注咪唑安定是治疗SE安全有效的方法。     

马桑内酯局部癫痫持续状态大鼠大脑皮质的形态计量研究

用马桑内酯明胶淀粉微粒包埋于１０只大鼠左侧大脑半球的前肢运动区，诱发局部癫痫持续状态。发作高峰（６小时）时取材，用光镜、电镜和体现学方法研究大脑皮质运动区第Ⅴ层的形态、结构、细胞数量及神经毡成分的变化。与对照鼠比较，癫痫鼠大脑皮质第Ⅴ层神经元的数目减少，以灶区下降最多，灶旁区次之；胶质细胞数也明显减少，各区间下降程度相近。癫痫鼠皮质神经毡的突触性终末数及其面积分数明显下降，以灶区为甚，灶旁区次之；而胶质突起的面积分数却明显增加，以灶区为甚，镜灶区次之。     

氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠成年后少突胶质细胞转录因子Olig2在脑白质区的表达

目的探讨氯化锂-匹罗卡品（lithium-pilocarpine,LI-PILO）点燃幼鼠癫痫持续状态（status epilepticus,SE）,成年后发展为自发反复性癫痫发作（spontaneous recurrent epileptic seizure,SRS）的大鼠脑内转录因子Olig2的表达。方法采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射诱导幼鼠SE模型,应用多道生理信号采集处理系统检测大鼠脑电图（electroencephalogram,EEG）痫样活动波和Nissl染色方法观察神经元鉴定,证实SRS模型大鼠诱导成功;应用免疫组织化学染色技术观察少突胶质细胞（oligodendrocyte,OL）转录因子Olig2变化。结果 SRS模型组脑电图与正常对照组相比,可见频发尖波、棘-慢、尖-慢综合波;海马CA1、CA3和齿状回区Nissl染色显示神经元数目减少,部分细胞变性和坏死。SRS模型组在胼胝体与扣带回区域内Olig2的免疫组织化学染色细胞数量明显减少,与正常对照组相比有显著差异。结论氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠,成年后仍伴有慢性自发反复性癫痫发作的脑内少突胶质细胞转录因子Olig2的表达明显降低。     

亚低温治疗对儿童癫痫持续状态的安全性及脑保护作用的临床研究

目的 分析亚低温治疗对儿童癫痫持续状态的安全性及脑保护作用。方法 选择2010年7月～2014年7月间接受住院治疗的癫痫持续状态患儿82例为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各41例,对照组患儿采用癫痫持续状态常规治疗,观察组患儿在常规治疗基础上加入亚低温治疗。比较两组格拉斯转归量表评分（GOS）、氧化应激水平、并发症、治疗效果。结果 治疗效果：观察组有效率95.12%明显高于对照组80.49%（χ²=6.500,P<0.05）;GOS评分：观察组GOS评分（4.68±0.24）明显高于对照组（4.32±0.15）（t=8.145,P<0.05）;氧化应激反应：观察组超氧化物歧化酶（SOD）明显高于对照组,丙二醛（MDA）、晚期氧化蛋白产物（AOPP）、一氧化氮（NO）明显低于对照组（t=4.402～21.508,P<0.05）;不良反应：两组肺部感染、心律失常、凝血功能障碍等并发症比较,差异无统计学意义（χ²=0.346～1.051,P >0.05）。结论 亚低温治疗有助于保护癫痫持续状态儿童脑功能,缓解全身氧化应激状态,提高治疗效果。     

海马局部注射人骨髓间充质干细胞对癫痫持续状态后大鼠视空间记忆的影响

目的探讨海马局部移植人骨髓间充质干细胞(hMSC)对癫痫持续状态(SE)后大鼠视空间记忆功能的影响。方法雄性SD大鼠随机分为hMSC移植组、人成纤维细胞组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、假手术组和正常对照组,采用氯化锂-匹罗卡品诱导SE模型。SE 3 d后通过立体定位方法分别向海马CA1区注射hMSC(1.5×107个/ml)、人成纤维细胞(1.5×107个/ml)和PBS各3μl,假手术组不进行立体定向注射。2周后部分大鼠行灌流取脑组织,MAB1281免疫组化染色观察示踪细胞。剩余大鼠在4周后进行水迷宫实验。结果免疫组化染色显示仅在hMSC移植组见到CA1区有染棕黄色的细胞,而人成纤维细胞组、PBS组和假手术组均未见到染色阳性细胞。水迷宫试验显示hMSC移植组的逃逸潜伏期短于人成纤维细胞组和PBS组,仅略长于假手术组,虽与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),但除正常对照组以外,其余4组组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论hMSC可在SE大鼠海马CA1区局部存活,移植后4周未发现hMSC能明显改善SE大鼠的视空间记忆功能。     

氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠苔藓纤维发芽的不同时点研究

目的探讨匹罗卡品致痫大鼠海马结构齿状回苔藓纤维发芽(MFS)各时间点的变化。方法采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射制成大鼠癫痫持续状态(SE)及颞叶癫痫模型,利用Timm组化染色法进行MFS观察研究。结果Timm染色可见到实验组大鼠SE24h时齿状回内分子层及CA3区下锥体层即有MFS现象;实验组不同时点与对照组大鼠CA3区和齿状回内分子层MSF评分间差异均有统计学意义(P<0·05)。结论匹罗卡品模型基本复制了人类颞叶癫痫的临床病理特征;诱导的SE可造成大鼠海马结构易损区的MFS增加,从SE后24h即开始出现MFS现象,且随时间的延长其程度加重。     

氯化锂阻断大鼠海马注射溶血磷脂酸诱导的神经元Tau蛋白磷酸化

目的:探讨氯化锂(LiCl)对溶血磷脂酸(LPA)在大鼠体内引起海马神经细胞tau蛋白磷酸化水平的影响。方法:将54只SD大鼠分为LPA实验组9只,LiCl+LPA实验组27只(低、中、高量LiCl组各9只),实验对照组9只,对照组9只,采用腹腔注射LiCl,脑立体定位仪技术将LPA、PBS缓冲液注射入大鼠海马,各实验组大鼠分别于注射LPA后12,24,48 h后处死,对照组大鼠未做任何处理直接处死,采用免疫组化方法测定海马锥体细胞中ser202位点磷酸化tau蛋白(PS202-tau)的表达。结果:LiCl+LPA实验组Tau蛋白磷酸化的水平均低于相同时间点处死的LPA实验组(P<0.05),且LiCl浓度越高,Tau蛋白磷酸化的水平越低。结论:LiCl能抑制LPA引起的大鼠海马神经细胞的Tau蛋白磷酸化。     

气相色谱法测定人血浆中安定及去甲安定的含量

本文通过气相色谱氮磷检测法测定人血浆中安定（ＤｉａｚｅｐａｍＤＺ）及其代谢产物去甲安定（ＤｅｓｍｅｔｈｙｌｄｉａｚｅｐａｍＤＭＤＺ）的含量。标本的提取采用在弱碱性条件下，以无水乙醚萃取，离心后于４５℃水浴挥干后以２０μＬ甲醇溶解后进样，结果显示色谱图形中无明显干扰峰，待测物线性范围：５μｇ／ＬＶ１０００μｇ／Ｌ，检测灵敏度：５μｇ／Ｌ（ＤＺ），８μｇ／Ｌ（ＤＭＤＺ），回收率９９．５±３．９％（ＤＺ），１００．５±７．３％（ＤＭＤＺ）该方法处理简单，方法灵敏可靠，是一种较好的检测血中安定及其代谢去甲安定浓度的方法，可用于安定临床药代动力学的研究