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1.
原位分子杂交证明,各种哺乳动物的119 s-
28 S核搪体RNA基因(rDNA)位于特定的染色体的核仁形成区(NOR),最近,Gootlpasture
等应用银胺法特异地染色核仁形成区,证实银染的位置是染色体_L核塘体RNA基因的位置。
此后,进一步证明银染物质不是rDNA,亦不是
rRNA,可能是核仁形成区特异的蛋白质,即和
r1:NA转录相联系的酸性蛋白。人类核糖体
RNA基因位于5对近端着丝点染色体短臂的
次猛痕处,即人类的核仁形成区。在正常人中,
常不是所有核仁形成区皆彼银染,其范围大约
4-10。应用银染法可以觉察正常人体核塘体
RNA基因的活动。 相似文献
2.
3.
自Goodpastur。等[3]建立染色体的银染色方
法以来,该技术已在细胞遗传学的各个领域得
到广泛的应用,被认为是研究18S-28S rDNA
的分布与转录的一种简易而有效的方法[4]。银
染技术可以特异性地使核仁组织者区(NOR)
着色(称之Ag-NOR),其银染位置与染色体上
核糖体基因(rDNA)的分布相一致[10] 相似文献
4.
已知哺乳动物中18S+28S核糖体基因(rDNA)位于特定染色体的核仁组成区(NOR_s),银染技术能使哺乳动物染色体上的核仁组成区着色。银染核仁组成区是一种很好的遗传学标记。近年来,银染技术已开始用于追溯家畜的品种起源(王子淑等,1982)。还发现患白血病的黑白花奶牛的Ag-NOR_s出现率比正常牛显著下降(郭爱朴等,1983)。一些哺乳动物的Ag-NOR_s,如狗(张锡然等,1982)、灵长类(曹彼梅等,1981)、毛冠鹿(张锡然,1983)等已有过报道。本文应用银染技术,对东北梅花鹿(Cervus nippon hortulorum)的体细胞染色体的核 相似文献
5.
玉米(Zea mays)只有1对45S rDNA位点并在分裂期染色体形成次缢痕,是研究植物细胞rRNA基因组织和表达模式的简单模型。采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)、CPD(PI与DAPI组合)染色和银染技术,分析了玉米根尖分生细胞rRNA基因的组织和表达模式。45S rDNA探针在所有间期细胞核中显示2种杂交信号:荧光强烈地位于核仁周边的纽,而相对较弱地分布于核仁内的点。在部分细胞中可观察到点与纽相连或从纽发出;点的数目越多,纽变得越小;点的数目多少与细胞的活性呈正相关。研究结果表明,纽代表了处于凝缩状态的非活性的rDNA染色质,纽解凝缩形成的点是rRNA基因活跃转录的细胞学表现;不同阶段间期核的点的数目变化反映了被活化的rRNA基因数目不同。间期和前期细胞的CPD染色和相继的银染结果显示,大部分rDNA染色质没有参与核仁的形成。rDNA FISH显示,同一间期细胞的2个同源rDNA位点的表达水平存在差异,同源染色体次缢痕的长度差异以及Ag-NOR和银染核仁的异态性进一步证实了这种差异的存在。FISH结果显示,早中期细胞的rDNA染色质相对解凝缩,银染在所有早中期细胞和部分中期细胞显示了明显的核仁,表明玉米的rRNA基因在有丝分裂早中期有较活跃的转录,其转录在晚中期才停止。 相似文献
6.
人类D组和G组染色体的随体茎部为18S
和28S rRNA基因(即rDNA)的座位,该区
亦称为核仁形成区。应用细胞化学上的银染法
可以判断rDNA的活性。至今已经证明,银
染物质是同rRNA 转录有密切联系的蛋白质,
因而这是一个判别该区有何功能而不是有没有
形态结构的简便有效方法。周宪庭等田报道,
在中国人中,随着年龄增长,该基因活性有丢失
的趋势。银染法也很快用在肿瘤遗传学的研究
中。H. Hubbell和徐道觉[[41发现,一些肿瘤的
细胞株,其每细胞的纯-NORs(表示银染后出
现阳性的rRNA基因数目)与正常对照组相
接近,然而由于肿瘤细胞株的大多数细胞的染
色体数目大于46,故其D和G组的染色体数目
也超过正常者的10条,因此实际上有更多的
rDNA处于失活状态。D. A. Miller等【31运用
分子杂交、细胞杂交等方法得出,肿瘤细胞株
中不但含有更多的D和G组染色体,而且由于
纯-NOR基因并不比对照组有更多的失活,所以
肿瘤细胞中活性rDNA总数比正常细胞要多。
鉴于不同工作者对同一问题得出相互矛盾的结
果,因此有必要在病人的细胞中观察有活性的
rDNA数目究竟有没有变化,若有变化,则其可
能的意义又是什么?这便是本文探讨的目的。 相似文献
7.
玉米(Zea mays)只有1对45S rDNA位点并在分裂期染色体形成次缢痕, 是研究植物细胞rRNA基因组织和表达模式的简单模型。采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)、CPD(PI与DAPI组合)染色和银染技术, 分析了玉米根尖分生细胞rRNA基因的组织和表达模式。45S rDNA探针在所有间期细胞核中显示2种杂交信号: 荧光强烈地位于核仁周边的纽, 而相对较弱地分布于核仁内的点。在部分细胞中可观察到点与纽相连或从纽发出; 点的数目越多, 纽变得越小; 点的数目多少与细胞的活性呈正相关。研究结果表明, 纽代表了处于凝缩状态的非活性的rDNA染色质, 纽解凝缩形成的点是rRNA基因活跃转录的细胞学表现; 不同阶段间期核的点的数目变化反映了被活化的rRNA基因数目不同。间期和前期细胞的CPD染色和相继的银染结果显示, 大部分rDNA染色质没有参与核仁的形成。rDNA FISH显示, 同一间期细胞的2个同源rDNA位点的表达水平存在差异, 同源染色体次缢痕的长度差异以及Ag-NOR和银染核仁的异态性进一步证实了这种差异的存在。FISH结果显示, 早中期细胞的rDNA染色质相对解凝缩, 银染在所有早中期细胞和部分中期细胞显示了明显的核仁, 表明玉米的rRNA基因在有丝分裂早中期有较活跃的转录, 其转录在晚中期才停止。 相似文献
8.
一种改进的植物染色体Ag—NOR染色方法及其应用 总被引:6,自引:1,他引:5
自1975年,Howell等和Goodpasture等报道人类染色体的Ag-NOR(银染核仁组成区)染色技术以来,银染色技术已广泛用于人类和哺乳动物染色体的核仁、核仁组成区、中心粒、着丝点、染色体轴心以及联会复合体等结构和行为的研究。但银染技术在植物 相似文献
9.
10.
核仁组织者区域(NORs)存在185+285核糖体核糖核酸(rRNA)的密码基因(rDNA),可用银染色技术特异性地显示出来。Schwarzacher等(1978),用光学显微镜和电子显微镜研究了银染色体的原理,证明银可染物质是活性NORs周围或外面的酸性蛋白,而不是基因本身。 许多学者先后以银染色技术,测定了狨猴(Saguinusoedipus,Saguinus fuscicollis,Callithrix jacchus)、恒河猴(Macaca mulatta)、食蟹猴(M.fasciculars)、狒狒(Papio papio)等猴子的核仁组织者区域(Bedard等,1978;Goodpasture等,1975;Dutrillaux等1979)。Tantravahi等(1976)对人、黑猩猩猿(Pan troglodytes)、大猩猩(Gorlla gorilla)、猩猩(Pongo Pygmaeus)、银色长臂(Hylobates moloch)进行了NORs的比较研究。 本文报告了我国灵长类动物5个属11个种染色体的银染色的NORs(Ag—NORs)分布,并作了初步比较。 相似文献
11.
银染色方法及其在细胞遗传学中的应用 总被引:4,自引:0,他引:4
硝酸银染色在细胞化学中的应用已有很久
的历史,但用以研究染色体却是近几年的事。
Goo即asture等[21应用称为Ag-AS的银染色技
术,使9种哺乳动物的核仁组织者(NOR)特
异性染为黑色。这种银染色阳性的NOR称为
Ag-NOR。经与Hsu等[31用原位分子杂交得到
的结果相比较,证明Ag-NOR也就是18S+28S
核糖体基因(rDNA)的分布区。嗣后,在肿瘤
细胞遗传学、进化遗传学、临床遗传学、体细胞
遗传学等方面,银染色的应用日趋广泛。技术本
身也不断有所改进和发展,现被认为是研究
18S十28S r DNA的分布和转录活性的一种简
易有效的方法。最近,银染色还开始用于着丝
点、中心粒、减数分裂联会复合体(Synapsis
complex)的研究,取得了许多有意义的新结
果。 相似文献
12.
核仁组成区(Nucleolar OrganizerRegions,NORs)是位于细胞核仁内的DNA 环,具有 rRNA 基因,与 rRNA 的转录活性有关、在蛋白质合成中起重要的作用。遗传学家曾利用银染技术显示染色体核仁组成区来研究各种遗传缺陷性疾病。1986年 Ploton 建立丁一科改良的一步法胶银染色技术显示核仁组成区相关蛋白(Nucleoar Organizer Region Associa-ted Protein,AgNORs),虽然现在对这些蛋白染色的性质还不清楚,但该技术提供了一种快速检测核仁结构和活性改变的有效手段,已受到病理学界的高度重视, 相似文献
13.
快速简便的NOR染色法 总被引:2,自引:2,他引:0
自Good pasture等(1975)",首先用Ag-As银染
技术对9种动物中期染色体的核仁组织者(NOR)进
行了特异性染色以来,Ag染色已日趋广泛。M川er
等‘,,“。’认为,A g- As选择地染中期及前间期染色体
上转录活化的RNA 基因(18S和28S rRNA基因)
rDNA的位点。这些结果与Hsu等t37用DNA/RNA
原位杂交定位核糖体的作用子所得的结果是一致的。
但Henderson等‘3,+,及Howell等【‘,则认为A g- As
是染核仁组织者上和rRNA转录相联系的特异酸性蛋
白质,而不是染rDNA, NOR研究正在不断地深人,方
祛也在不断地改进。同时,由于它可得到燕似于原位
杂交的结果,所以Ag染色法现已成为表征一个基因
功能的一种准确方法。在动、植物细胞遗传学、临床及
肿瘤细胞遗传学、体细胞遗传学以及在进化与发育等
研究中。都有着十分重要的意义。但目前所用的染色
方法耗时较长,一般需3-24小时。同时,由于氨银及
甲醛显影液不稳定,使显影时间不易标准化,故需对
Ag-NOR的显影进行显微镜检。因此操作较繁杂。找
们在Goodpasture"’和Howell等‘,’的实验基础上,
摸索了NOR快速、简便(只用1.5-2分钟,一步操作)
的染色法,得到较理想的结果。这在国内尚未见报道,
现简介如下。 相似文献
14.
15.
肝癌患者外周血淋巴细胞的rDNA活性及其四维时空遗传意义初探 总被引:1,自引:0,他引:1
人类D组和G组染色体的随体茎部为18S和28S rRNA基因(即rDNA)的座位,该区亦称为核仁形成区。应用细胞化学上的银染法可以判断rDNA的活性。至今已经证明,银染物质是同rRNA转录有密切联系的蛋白质,因而这是一个判别该区有何功能而不是有没有形态结构的简便有效方法。周宪庭等报道,在中国人中,随着年龄增长,该基因活性有丢失的趋势。银染法也很快用在肿瘤遗传学的研究中。H.Hubbell和徐道觉发现,一些肿瘤的细胞株,其每细胞的Ag-NORs(表示银染后出现阳性的rRNA基因数目)与正常对照组相 相似文献
16.
银染色方法及其在细胞遗传学中的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
硝酸银染色在细胞化学中的应用已有很久的历史,但用以研究染色体却是近几年的事。Goodpasture等应用称为Ag-AS的银染色技术,使9种哺乳动物的核仁组织者(NOR)特异性染为黑色。这种银染色阳性的NOR称为 相似文献
17.
人14p+标记染色体的分子细胞遗传学研究 总被引:2,自引:1,他引:1
一例23岁女性患者因近五、六年来出现胡须、四肢多毛及偶有月经不规则而就诊。细胞遗传学检查发现一个短臂明显增大的亚中着丝粒的14号标记染色体14p ·p 区域GTG显带呈浅染,C-带暗染,都呈均匀的染色区。硝酸银染色在p 远侧端显现一个Ag-NOR,其大小与正常近端着丝粒染色体的无明显差异。应用~3H标记的7.3 kb长的rRNA基因探针进行染色体原位杂交,自显影银颗粒沿整个p 区域分布,p 上的银颗粒数是正常近端着丝粒染色体短臂上银颗粒平均数的5倍。这些结果排除了Y或其他染色体参加的重排形成p 的可能性,并表明Ag-NOR的大小或NOR的数目并不一定与rRNA基因的数量成正比。研究Dp 或Gp 类型的染色体变异,对了解人二倍体细胞内rRNA基因表达的调控有重要意义。 相似文献
18.
19.
黑麦(Secale cereale)染色体除核仁组成区,着丝粒、端粒能被AgNt)3染色体,还可用BrdU和Hoechst 33258诱导出银染区,本文还对染色体差别银染的机制作了探讨。 相似文献
20.
黑麦(Secale cereale)染色体除核仁组成区,着丝粒、端粒能被AgNt)3染色体,还可用BrdU和Hoechst 33258诱导出银染区,本文还对染色体差别银染的机制作了探讨。 相似文献