附睾和睾丸精子活力对卵胞浆内单精子注射结局的影响

目的比较附睾或睾丸来源及其不同活力精子行卵胞浆内单精子注射（ICSI）的结局。方法回顾性分析2005年1月至2008年5月在本生殖中心经皮附睾精子抽吸术（PESA）、睾丸精子抽吸术（TESA）助孕的218例无精子症患者的资料,比较附睾和睾丸及其不同活力精子的正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、种植率和早期流产率。结果附睾精子组与睾丸精子组比较,正常受精率、卵裂率、临床妊娠率、种植率和早期流产率无显著性差异（P〉0．05）;优质胚胎率附睾精子组显著高于睾丸精子组（P〈0．05）。附睾活动精子、睾丸活动精子和睾丸不活动精子的正常受精率显著高于附睾不活动精子（P〈0．01）;睾丸活动精子的正常受精率显著高于睾丸不活动精子组（P〈0．05）;以上各组间的优质胚胎率、临床妊娠率、种植率、流产率均无显著性差异（P〉0．05）。结论PESA操作简单且不影响妊娠率,无精子症患者行ICSI治疗时可首选附睾精子;附睾或睾丸不活动精子影响ICSI的受精率,应优先选择活力较好的精子,若无活动精子则选择睾丸不活动精子。     

采用抽吸取精法结合单精子注射治疗无精子症110例临床报告

目的分析采用抽吸取精法（PESA或TESA）获得精子进行单精予注射（ICSI）治疗无精子症的妊娠结局。方法经皮附睾精子抽吸术（PESA）获得附睾精子，经皮睾丸精子抽吸术（TESA）获得睾丸精子，女方进行常规超排卯。两种取精方法获得的精子进行ICSI，比较其受精率、种植率和临床妊娠率。结果110例无精子症患者中有83例（75．5％）经PESA获得精子，26例（23．6％）通过TESA获得精子。PESA和TESA组的受精率、种植率和临床妊娠率分别为72．60％和74．81％，23．89％和21．54％，41．22％和40．35％。两组的受精率、种植率和临床妊娠率比较，差异无显著性（P〉0．05）。在TESA组有1例取精失败而放弃治疗。结论采用抽吸取精方法（PESA或TESA）获得精子进行ICSI是治疗男性无精子症的有效方法。     

梗阻性无精子症患者睾丸抽吸精子行ICSI后的胚胎结局

目的总结非手术精子抽吸(NSA)联合ICSI对梗阻性无精子症患者的治疗意义,并探讨精子来源等对ICSI后胚胎结局的影响。方法回顾性分析642个ICSI周期,比较了睾丸抽吸精子和精液精子行ICSI后的受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、种植率及胚胎停育率等。结果NSA睾丸精子组和精液精子组相比较,其2PN受精率、优质胚胎率、临床妊娠率、种植率及胚胎停育率之间均没有显著性差异(71．4％vs 73．2％, 73．1％vs 70．1％,34．2％vs 32．6％,22．3％vs 19．8％,21．3％vs 25．0％,P>0．05)。结论非手术抽吸睾丸精子联合ICSI是治疗梗阻性无精子症的一种有效方法。     

冷冻睾丸精子行卵泡浆内单精子注射术的结局评估

目的 梗阻性无精子症患者采用诊断性睾丸精子抽吸术(TESA),对获得的睾丸精子进行冷冻,评估新鲜精子和冷冻精子分别行卵泡浆内单精子注射术(ICSI)的受精率和妊娠率. 方法 回顾分析本院2007～2010年就诊的237对梗阻性无精子症(OA)夫妇用新鲜睾丸精子行ICSI和2010～2011年就诊的31例OA患者的冷冻睾丸精子行ICSI后胚胎移植的资料. 结果 新鲜精子组和冷冻精子组的平均成熟卵泡数分别为(14.13±7.41)和(14.31±8.14),平均正常受精率分别为82.99％和84.17％,种植率分别为24.08％和25.64％,以上指标两组相比较均无显著性差异(P＞0.05).两组的临床妊娠率也没有显著差异(新鲜精子组43.88％和冷冻精子组48.39％,P＞0.05). 结论 冷冻睾丸精子不影响ICSI的受精率和临床妊娠率,采用TESA获取的冷冻睾丸精子行ICSI是一种能减少患者痛苦又安全、有效的方法.     

睾丸精子冷冻复苏对ICSI助孕结局的影响

目的探讨睾丸精子冷冻复苏对ICSI助孕结局的影响。方法回顾性分析2010年1月至2014年9月因梗阻性无精子症在本院采用睾丸精子行ICSI助孕的214个周期的临床资料,其中107个周期采用冷冻复苏的睾丸精子(冻精复苏组),另外107个周期采用新鲜睾丸精子(新鲜精子组)。比较两组中女方的一般资料、受精率、卵裂率、可利用胚胎数、优质胚胎率,以及临床妊娠率。结果本研究中,107个周期冻存睾丸精子复苏均获成功;冻精复苏组与新鲜精子组行ICSI助孕后的受精率[(76.91±18.24)%vs.(75.35±20.62)%]、卵裂率[(94.69±5.29)%vs.(95.37±4.48)%]、可利用胚胎数[(4.67±2.52)vs.(4.20±2.75)个]、优质胚胎率[(64.47±26.08)%vs.(60.34±27.39)%]及临床妊娠率(52.24%vs.50.63%)比较均无显著性差异(P0.05)。结论睾丸精子冷冻复苏对ICSI助孕结局并无显著影响。     

不同来源精子对卵胞浆内单精子注射治疗结局的影响

目的:分析不同来源精子对卵胞浆内单精子注射(ICSI)临床结局的影响.方法:接受ICSI治疗的不育夫妇共进行了286个周期,分为3组,A组(射出精子组):射出精液少弱畸(包括严重少弱畸)精子症186个周期;B组(PESA组):经皮附睾抽吸术(PESA)80个周期;C组(TESE组):睾丸精子获取术(TESE)20个周期,比较其妊娠结局.结果:PESA组受精率明显高于射出精子组和TESE组(88%VS 84%,77%,P<0.01),PESA组的临床妊娠率显著高于射出精子组(47%,33%,P<0.05),射出精子组临床妊娠率高于TESE组,但差异无统计学意义;3组的种植率差异极显著(20.7%,31.4%,13.2%,P<0.01);卵裂率(99%,98%,98%)、流产率(7%,15%,0%)均没有显著差异.结论:PESA来源精子比射出精子组及TESE组的受精率及临床妊娠率有所增高,但TESE和PESA来源精子对临床妊娠率没有影响,射出精子组和TESE组来源精子对临床妊娠率没有影响.对于重度少弱精子症患者和梗阻性无精子症患者,进行ICSI治疗,均有机会获得妊娠.     

经皮睾丸微穿刺活检后冷冻精子的卵胞质内单精子注射

目的:对经皮睾丸微穿刺活检后冷冻保存精子卵胞质内单精子注射(ICSI)治疗非梗阻性无精子症所致不育进行临床总结,并对其影响治疗结果的因素进行探讨。方法:对62例非梗阻性无精子症患者进行经皮睾丸微穿刺活检,发现活动精子者(35例)对睾丸活检组织进行冷冻保存;女方促排卵常规使用促性腺激素释放激动剂(GnRHa)/卵泡刺激素(FSH)/人绒毛膜促性腺激素(hCG)方案,B超监测卵泡发育情况并引导经阴道取卵,冷冻的睾丸组织解冻后行ICSI,良好胚胎进行移植。结果:取卵周期为35个,冷冻的睾丸精子解冻后行ICSI,35个周期进行常规胚胎移植。13例临床妊娠。启动周期、取卵周期与移植周期临床妊娠率均为37.14%(13/35)。结论:经皮睾丸微穿刺活检后ICSI是治疗非梗阻性无精子症所致不育的最主要和有效的方法;活检后对有活动精子的睾丸组织进行冷冻保存不影响治疗结果,可以减少患者睾丸活检的次数,减轻患者痛苦。     

采用冷冻精子与新鲜精子进行卵胞浆内单精子注射的结果比较

目的　比较冷冻精子与新鲜精子进行卵胞浆内单精子注射 ( ICSI)助孕技术的治疗效果。　方法　对 1 6 1对不育夫妇进行 1 6 3个辅助生殖技术治疗周期 ,其中采用冷冻精子 47个周期 ,比较了冷冻精子组与新鲜精子组 1 1 6个周期的受精率、卵裂率、A级胚胎率与临床妊娠率。　结果　冷冻精子组 (组 I)的受精率为 77.6 %、卵裂率为 92 .9%、A级胚胎率为 6 5.4%、临床妊娠率为 45.5% ;新鲜精液严重异常组 (组 II)分别为 54 .4%、94.0 %、45.7%及 2 5.0 % ;新鲜精液轻、中度异常组 (组 III)分别为 73 .5%、92 .5%、46 .8%及 2 9.3 %。组 I的受精率、A级胚胎率和临床妊娠率明显高于组 II( P<0 .0 5) ;与组 III比较无显著性差异 ( P>0 .0 5)。　结论　患者本身的精子质量直接影响 ICSI的受精率 ,精子冷冻复苏处理不影响 ICSI的受精率、卵裂率和优质胚胎率     

中、重度少弱精子症患者冻融精子与新鲜射出精子的ICSI临床结局比较

目的研究中、重度少弱精子症患者冻融精子与新鲜射出精子对ICSI结局的影响。方法回顾性分析227对不育夫妇240个ICSI治疗周期,分为3组:新鲜重度少弱精子组(A组,107例,111个周期);新鲜中度少弱精子组(B组,71例,76个周期);冻融中、重度少弱精子组(C组,49例,53个周期)。比较各组的临床结果。结果新鲜重度、中度少弱精子组的可用胚胎率(分别为78.1%、75.0%)、优质胚胎率(分别为46.1%、46.2%)显著高于冻融组(分别为66.7%和37.4%)(P0.05),但3组间受精率、正常受精率、卵裂率、临床妊娠率、种植率均无显著性差异(P0.05)。新鲜中度少弱精子组与新鲜重度少弱精子组在可用胚胎率、优质胚胎率、受精率、正常受精率、卵裂率、临床妊娠率及种植率方面均无统计学差异(P0.05)。结论中、重度少弱精子症患者冻融精子行ICSI影响可用胚胎率和优质胚胎率,但不影响临床妊娠率和胚胎种植率。     

不同来源的精子ICSI治疗周期妊娠结局分析

目的:比较不同来源的精子进行ICSI治疗后受精率、胚胎种植率、临床妊娠率等临床指标有无差异。方法:回顾性分析2006年1月~2008年12月本院生殖中心进行的431个ICSI治疗周期,按精子来源分为A组(重度少弱精子症组)287个周期、B组(梗阻性无精子症附睾穿刺组)109个周期、C组(梗阻性无精子症睾丸穿刺组)35个周期,比较各组女方平均年龄、男方平均年龄、不孕病史、平均MII卵数、受精率、卵裂率、胚胎利用率、平均移植胚胎数量、种植率、妊娠率、流产率等指标的差异。结果:A组与B、C两组在种植率、妊娠率方面差异有统计学意义(18.46%vs25.23%、28.76%;31.23%vs42.16%、39.39%,P<0.05);B、C两组之间各数据差异无统计学意义(P>0.05),受精率、卵裂率、流产率3组之间差异无统计学意义。结论:重度少弱精子症患者射出精子进行ICSI治疗后胚胎种植率、临床妊娠率低于梗阻性无精子症患者。     

使用放大系统对睾丸精子行形态选择性卵细胞胞质内单精子注射的临床结局分析

目的:探讨使用放大系统对睾丸精子行形态选择性卵细胞胞质内单精子注射术(ICSI)的临床结局。方法:回顾分析本中心2008年1月至2008年10月共66例无精子症患者行常规ICSI,2008年11月至2009年7月共39例无精子症患者用放大系统将睾丸精子放大6 000倍后,行卵细胞胞质内形态选择性单精子注射(IMSI)。结果:行ICSI的患者临床妊娠率为51.52%,种植率为30.67%,早期流产率为11.76%;行IMSI的患者临床妊娠率为56.41%,种植率为35.29%,早期流产率为4.50%。结论:无精子症患者的睾丸精子通过放大系统选择后行ICSI,早期流产率较常规ICSI有下降的趋势。     

比较金黄地鼠和人卵浆内单精子注射技术受精率

卵浆内单精子注射技术（ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＩＣＳＩ）１９９２年后已广泛应用于治疗严重的男性不孕患者，平均受精率可达６５％～７０％。但仍有大约１／３的卵在ＩＣＳＩ后未能受精。金黄地鼠ＩＣＳＩ试验（ｈａｍｓｔｅｒ ＩＣＳＩａｓａｙ）可能有助于在临床ＩＣＳＩ治疗前了解精子受精的潜力。为了证明金黄地鼠ＩＣＳＩ和人类ＩＣＳＩ受精率之间的相关性，探索金黄地鼠ＩＣＳＩ能否用为临床ＩＣＳＩ的预试验，本研究采用同一男性不孕患者的精子经显微注射技术在同一天分别注入人和金黄地鼠卵。１６～１８小时后在光镜下观察有无双原核形成（２ ｐｒｏｎｕｃｌｅｕｓ，２ＰＮ）。人卵１１０个其受精率为５８２％（６４／１１０）。金黄地鼠卵１１４个其受精率为１６５％（１４／８０）。经统计学处理，二者无相关性。金黄地鼠ＩＣＳＩ分为两组，Ａ组：无选择地注射了已激活与未激活的卵６３个；Ｂ组：注意选择未激活的卵共５１个。虽经统计学处理无明显差异，但仍可看出Ｂ组的损伤率（１９７±１６６％）低于Ａ组（３５９±５．７％）（Ｐ＝００８）；而Ｂ组的受精率（１８３±１０．９％）略高于Ａ组（１４２±８．７％）（Ｐ＝０?     

Parameters predicting sperm retrieval rates during microscopic testicular sperm extraction in nonobstructive azoospermia

The aim of this study was to investigate the predictive value of the parameters that might have an effect on the success of microscopic testicular sperm extraction (micro‐TESE) in infertile patients with nonobstructive azoospermia (NOA). Between 2003 and 2014, 860 patients with NOA were retrospectively analysed. The effect of age, infertility duration, history of varicocelectomy, herniorrhaphy or orchiopexy, presence of solitary testis, tobacco use, previous testicular biopsy results, history of orchitis, usage of human chorionic gonadotropin in the past three months, presence of undescended or retractile testis, presence of varicocele, testicular volume, levels of serum follicle‐stimulating hormone, luteinising hormone, and testosterone, presence of Klinefelter syndrome and micro‐deletion of Y chromosome on sperm retrieval rates were evaluated. In 45.8% (n = 394) of the patients who underwent micro‐TESE, spermatozoon was adequately obtained. Multiple logistic regression analysis demonstrated that previous successful testicular biopsy (OR = 15.346; GA = 5.45–43.16; p < .001) and higher testicular volumes significantly increase sperm retrieval rate in micro‐TESE. The testicular volume cut‐off as 11 ml was found to be the most significant factor. Although currently testicular biopsy result is not being used as a diagnostic method, it is significantly associated with micro‐TESE result.     

Controlled freezing studies on boar sperm cryopreservation

Boar spermatozoa from different males were frozen at a number of cooling rates using a controlled-rate freezing machine designed to minimise thermal variables involved in the cooling process, to see whether inter-boar sperm cryosurvival may be improved by changing cooling rate. Four cooling rates in the range 3 °C min⁻¹ to 24 °C min⁻¹ from +5 °C to −5 °C and five cooling rates in the range 5 °C min⁻¹ to 80 °C min⁻¹ from −5 °C to −80 °C were tested. Motile spermatozoa were assessed by CASA, plasma membrane integrity by fluorescent probes (SYBR14/propidium iodide) and flow cytometry, and acrosome membrane integrity by lectins (PSA-rhodamine) and fluorescent microscopy. Cooling rate affected sperm cryosurvival from different boars in different ways; that is, spermatozoa from some individuals were less susceptible than those from others. For some individuals, sperm cryosurvival was poor regardless of cooling rate, but for others it was better with faster rates. This confirms cooling rate effects on sperm cryosurvival depend on inter-individual boar differences more than on the cooling process itself.     

精子DNA碎片指数和精子畸形率对ICSI临床结局的影响

目的:通过评估ICSI治疗前的精子畸形率(SMR)和精子DNA碎片指数(DFI),探讨精子DFI和SMR对卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕结局的影响。方法:共入组79对因少弱精子症实施第一周期ICSI治疗的不孕夫妇,在进入治疗周期前3⁶个月,评价精子浓度、前向运动精子百分率、SMR及DFI。主要观察SMR和DFI与ICSI结局参数的关系。结果:79例少弱精子症患者DFI正常51例,异常28例,异常组的DFI值明显升高(14.18%vs 41.47%);巧合的是,SMR正常组同样为51例,异常组28例,异常组的SMR值亦明显升高(87.88%vs98.46%)。按DFI正常(DFI≤25%)与异常(DFI>25%)分组,或按SMR正常(≤96%)与异常(>96%)分组,组间的双方年龄、女方BMI、获卵数、移植胚胎数等基本情况差异无统计学意义。DFI正常和异常组间,SMR正常和异常组间的受精卵子数、可移植胚胎数、早期流产率无显著差异;异常组生化妊娠率(43.5%vs 61.5%)和临床妊娠率(39.1%vs 56.4%)降低,但差异无统计学意义(P=0.19及0.10)。精子DFI与SMR呈显著正相关(r=0.231,P<0.05)。结论:精子DFI增高(>25%),与按严格标准检测的SMR增高(>96%)男性行ICSI治疗,生化妊娠率和临床妊娠率降低,但与正常者比较未发现有统计学差异,可能与样本量小有关,有必要深入研究。     

精子CMA3阳性率与IVF受精率的相关性研究

目的探讨精子色素酶A3(CMA3)阳性率与IVF受精率之间的相关性。方法收集2015年4月至2016年7月因单纯输卵管性不孕在我院生殖医学科行常规IVF助孕的156个周期,以受精率<25%为低受精,根据受精率不同分为正常受精组(134个周期)和低受精组(22个周期)。取卵日,将授精后剩余的洗涤精液行精子浓度和活动率分析,并将精子进行CMA3染色。比较两组优选后的精子参数,分析IVF受精率与精子参数及CMA3阳性率的关系。结果与正常受精组比较,低受精组精子CMA3阳性率显著升高[(20.0±4.2)%vs.(30.7±2.3)%],优选后前向运动精子的百分率显著降低[(90.4±4.8)%vs.(74.3±3.4)%](P<0.05);两组精子浓度比较无显著性差异(P>0.05)。IVF受精率与优选后的前向运动精子百分率呈正相关(r=0.76,P<0.01)。精子CMA3阳性率与优选后前向运动精子百分率(r=-0.82,P<0.01)及IVF受精率(r=-0.83,P<0.01)呈显著负相关,与精子浓度则无显著相关性(P>0.05)。结论精子CMA3阳性率与IVF受精率负相关,但其具体机制尚需进一步研究探讨。     

异常形态精子对植入前胚胎发育和妊娠结局的影响

目的探讨异常形态精子(畸形率≥98%)对植入前胚胎发育及妊娠结局的影响。方法采用回顾性队列研究,分析2017年1~12月在唐都医院妇产科生殖医学中心行ART助孕的2419例患者临床资料,根据异常形态精子分为3组,即IVF对照组(畸形率≤96%,n=2129)、IVF实验组(畸形率≥98%,n=90)和ICSI实验组(畸形率≥98%,n=200)。比较3组间植入前受精失败率(受精率<30%)、正常受精率、可用胚胎率等胚胎发育参数和着床率、临床妊娠率、流产率及活产率等妊娠结局的差异。结果(1)胚胎发育结果:组间比较,IVF实验组受精失败率显著高于IVF对照组(P<0.05),ICSI实验组的受精失败率为0;ICSI实验组正常受精率显著高于IVF对照组和IVF实验组(P<0.05);IVF实验组可用胚胎率显著低于IVF对照组和ICSI实验组(P<0.05)。(2)妊娠结局:单因素分析结果显示,与IVF对照组、ICSI实验组相比,IVF实验组的着床率、临床妊娠率、流产发生率和活产率差异均有统计学意义(P<0.05);IVF对照组和ICSI实验组组间妊娠结局指标比较均无显著性差异(P>0.05)。(3)Logistic多因素分析显示:IVF实验组的受精失败风险显著高于IVF对照组(P=0.002),可用胚胎率、活产率显著低于IVF对照组(P=0.002);ICSI实验组的正常受精率显著高于IVF对照组(P=0.05)。结论对于活力正常、但异常形态精子率≥98%的患者,采用ICSI授精方式,能降低受精失败风险,提高正常受精率和可用胚胎率,同时提高妊娠率和活产率并降低流产发生率。     

MII期卵母细胞质量对卵胞浆内单精子注射结局的影响

目的　探讨MII期卵母细胞质量对卵胞浆内单精子注射 (ICSI)结局的影响。　方法　对ICSI中去除颗粒细胞后的MII期卵母细胞从第一极体、卵周隙和胞浆形态三者综合评价。按形态表现分为 5级 ,比较各级卵母细胞的受精率、优质胚胎率及种植率、临床妊娠率。　结果　I级卵母细胞受精率、优质胚胎率 ,明显高于其他各级含异常形态的卵母细胞 (P <0 .0 1) ;种植率和临床妊娠率也明显高于其他组 (P <0 .0 5 )。　结论　根据MII期卵母细胞的第一极体、卵周隙及胞浆形态进行的卵母细胞分级可作为胚胎移植时选择胚胎的依据。     

人类精液一步熏蒸法冻融的实验研究

目的:研究一步熏蒸法对冷冻精子复苏率的影响,以探索人类精子的最优冷冻方法。方法:选择100例符合WHO第5版正常参考值的精液标本,按照程序降温法和一步熏蒸法分2组进行冷冻。利用计算机辅助精液分析系统(CASA)检测冷冻前后精子前向活动力,同时比较2种方法对精子膜功能完整性、畸形率的影响。结果:冷冻后程序降温法和一步熏蒸法前向运动精子百分率差异有显著性[(34.0±18.4)%vs(43.0±19.5)%,P<0.05],均较冷冻前的(57.0±16.7)%显著下降(P<0.05);2种冷冻方法前向运动精子复苏率差异显著[(52.2±20.6)%vs(67.1±20.0)%,P<0.05];与冷冻前[(84.5±7.5)%]相比,2种方法冷冻后低渗肿胀精子百分率明显下降[分别为(67.1±11.1)%和(70.6±10.0)%,P<0.05],2种冷冻方法间差异也显著(P<0.05);而畸形率冷冻后显著增加[(85.0±8.7)%和(85.7±9.1)%vs(77.8±9.6)%,P<0.05],但2种冷冻方法之间差异无显著性(P>0.05)。结论:与程序降温法相比,一步熏蒸法操作简单方便,适用于不同时间段的精液标本冷冻,具有较高的冷冻复苏率,是一种值得推荐的快速冷冻方法。     

Influence of extended incubation time on Human sperm chromatin condensation,sperm DNA strand breaks and their effect on fertilisation rate

The purpose of this study was to determine influence of extended incubation time on sperm chromatin condensation and DNA strand breaks and their effect on fertilisation rate. Forty couples undergoing ICSI therapy were included. Semen was prepared by PureSperm gradient centrifugation and divided into two parts. The first part (G1) was used immediately for ICSI, whereas the second part (G2) was kept in the incubator at 37°C, 5% and 90% Humidity for 5 hr, and thereafter, the capacitated spermatozoa were used for ICSI. The TUNEL test and chromomycin CMA3 were used to evaluate the DNA strand breaks and chromatin condensation respectively. The percentage of condensed chromatin was 73.92 ± 12.70 in the group 1 and 81.13 ± 10.31% in group 2 (p = .001). However, the double‐strand breaks were 11.15 ± 8.67% in G.1 and 16.30 ± 11.12% in G.2. (p = .001). Fertilisation rate in the (Group 1) was 62.45% and 69.17% in (Group 2). There was a positive correlation between condensed chromatin and fertilisation rate (r = 0.846, p = .001) and a negative correlation with DNA double‐strand breaks (r = ?0.802; p = .001). In conclusion, the prolonged sperm incubation (5 hr) leads to a higher chromatin condensation and to a significantly increased number of DNA strands double breaks with no influence on fertilisation rates.