光动力疗法及其在消化系肿瘤治疗中的应用

光动力疗法(photodynamic therapy，PDT)是一微侵袭性、引起局部组织破坏的非产热性治疗手段。1895年Finsen和Raab等分别撰文论及光动力学。1903年Jesionek和Tappeiner应用伊红致敏肿瘤，引起肿瘤细胞破坏。1976年Kelly和Snell应用一种血卟啉衍生物(hematoporphyrin derivative，HpD)治疗膀胱肿瘤获得成功，由此开创了PDT。近年来，由于光敏物质、光激活装置和导光系统的发展和进步，PDT已逐步成为肿瘤的基本治疗手段之一。     

血卟啉单甲醚介导的光动力治疗对巨噬细胞的作用

目的研究血卟啉单甲醚介导的光动力治疗对巨噬细胞的作用。方法检测血卟啉单甲醚随时间增加在巨噬细胞内的聚集量,共聚焦显微镜观察血卟啉单甲醚在细胞的聚集情况;用不同能量对巨噬细胞进行光动力作用,MTT法观察巨噬细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果血卟啉单甲醚随着孵育时间的增加,细胞内荧光强度增加;随着光动力作用时间的增加细胞活性降低,光动力作用后12 h巨噬细胞的凋亡数量增加,光动力治疗1.5 min组晚期凋亡率(5.82%±3.27%)较对照组(1.20%±3.54%)稍有增加(P<0.05);光动力治疗3min组晚期凋亡率(65.45%±5.17%)较对照组显著增加(P<0.001)。结论血卟啉单甲醚可以在巨噬细胞内聚集,其介导的光动力治疗可以诱导巨噬细胞凋亡。     

光动力治疗消化系肿瘤的进展与展望

本文结合作者自己的研究成果,对国内外近年来在应用光动力技术治疗消化系肿瘤方面的文献报道进行较全面的复习和综述,介绍光动力治疗消化系肿瘤的技术方法及其机制.应用光动力治疗消化系实体肿瘤具有较好的效果,其与传统的手术、化疗、放疗、免疫治疗等方法并不矛盾,他的主要机制是破坏肿瘤微血管、诱导肿瘤细胞凋亡、膜的损伤和引起免疫反应等.     

光动力学疗法治疗早期胃癌

光动力学疗法治疗早期胃癌唐开业陈祖林唐建民Ｓｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｓｔｏｍａｃｈｎｅｏｐｌａｓｍｓ／ｔｈｅｒａｐｙ；ｌａｓｅｒｓ／ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｕｓｅ；ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ；ｐｈｏｔｏｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇａｇｅｎｔｓ；...     

康莱特注射液与光动力疗法联合治疗大鼠胰腺移植瘤

目的 探讨康莱特注射液与光动力疗法(PDT)联合应用对裸鼠胰腺癌移植瘤生长的抑制作用.方法 将人胰腺癌细胞株SW1990移植至裸鼠皮下制备皮下移植瘤模型.60只荷瘤鼠按随机数字法分为6组:对照组,不予任何治疗;康莱特1组,激光照射前一天开始从尾静脉注射康莱特注射液1.25 g/kg体重,连续10 d;康莱特2组,同上法注射康莱特注射液2.5 g/kg体重;光动力(PDT)组,腹腔内注射Photosan 2 mg/kg体重,48 h后予激光照射;联合1组,治疗方法采用康莱特1组+PDT组;联合2组,治疗方法为康莱特2组+PDT组.每组10只.每周2次测量肿瘤大小.PDT后14 d处死动物,取瘤块称重,计箅抑瘤率.结果 对照组、康莱特1组、康莱特2组、PDT组、联合1组和联合2组治疗后14 d的瘤体积分别为(550.08±52.46)mm3、(519.71±46.44)mm3、(405.29±38.67)mm3、(199.27±37.37)mm3、(107.47±14.13)mm3和(75.58±12.53)mm3;瘤重分别为(0.82±0.08)g、(0.77±0.06)g、(0.61±0.06)g、(0.41±0.05)g、(0.28±0.04)g和(0.16±0.04)g.2个联合组的肿瘤体积和瘤重明显小于其他各组(P＜0.05);联合1组抑瘤率从PDT组的50%上升到65.9%,联合2组上升到80.5%.结论 康莱特与PDT联合应用可明显抑制移植瘤体积,有协同增效作用.     

光动力疗法对胰腺癌移植瘤的疗效及其时-效关系

目的 探讨光动力疗法(PDT)对人胰腺癌裸鼠移植瘤的疗效及其时-效关系.方法 将人胰腺癌细胞SW1990皮下种植后形成的瘤块剪成1 mm3组织块再移植至36只裸鼠皮下,待皮下移植瘤直径达0.8～1 cm时按随机分组法分为3组:荷瘤对照组、光敏剂组(腹腔内注射Photosan 2 mg/kg体重)、光动力组(腹腔内注射Photosan 2 mg/kg体重,48 h后予激光照射),每组12只.每周2次测量肿瘤大小,3周后取瘤称瘤重,计算瘤体积及抑瘤率.结果 PDT组治疗后第6天瘤体积为(0.24±0.15)cm3,显著小于荷瘤对照组的(0.43±0.18)cm3和光敏剂组的(0.39±0.15)cm3(P＜0.05),并随着时间延长,差异更加显著.但治疗后15 d起,PDT组移植瘤体积又开始增大.治疗21 d后,PDT组瘤重为(0.69±0.23)g,显著小于荷瘤对照组的(1.65 ±0.21)g和光敏剂组的(1.62±0.12)g(P＜0.05).PDT组抑瘤率为58.18%,显著高于光敏剂组的1.80%(P＜0.05).结论 PDT对胰腺癌具有显著的抑制作用,起效快,但单用疗效维持时间不长.     

光动力疗法对消化道肿瘤的治疗与护理

光动力疗法是近10年迅速发展起来的一种肿瘤治疗新技术，具有并发症少、实施简便、可反复进行等优点，至今已进入临床扩展阶段。现就其应用于消化道肿瘤的治疗及护理体会简介如下。     

光动力疗法治疗肝癌的研究现状

光动力疗法是一种治疗癌症的新方法,具有其优势和不足。本文简要概述其治疗基本原理、优缺点,并简要介绍其用于肝癌治疗的最新基础实验研究现状和目前的一些临床观察。     

光动力疗法治疗脑胶质瘤的研究进展

脑胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康。由于肿瘤呈侵袭性生长，加之好发于人脑重要功能区或附近区域。因此术中无法将肿瘤完全切除，术后易复发。1980年美国全国诊断为胶质母细胞瘤的患者中，只有5．5％生存期超过5年。放、化疗虽可杀伤肿瘤细胞，但同时亦损伤部分正常脑组织。并出现严重的全身不良反应，治疗效果不甚满意。光动力疗法（phmodynamic therapy，PDT）是一种治疗恶性肿瘤有效的辅助方法，具有相对特异性杀伤肿瘤细胞，对周围正常组织损伤小、不良反应少等特点。因此国内外许多学者都对PDT治疗恶性肿瘤进行了大量的基础与临床研究，取得了令人瞩目的进展。     

硼替佐米对胰腺癌细胞BxPC3、SW1990生长抑制作用的体外研究

目的 观察硼替佐米对胰腺癌细胞BxPC3、SW1990增殖、凋亡的影响,探讨硼替佐米杀伤癌细胞的可能机制.方法 应用1、10、50、100、500 nmol/L及1、10 μmol/L的硼替佐米干预BxPC3、SW1990细胞,以硼替佐米未干预的细胞作为对照组.采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR法检测Bak、Bax、Bcl-2、Bcl-xl、survivin mRNA表达;蛋白质印迹法检测pro-caspase-3、cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2、surviving蛋白表达.结果 大于50 nmol/L的硼替佐米干预胰腺癌BxPC3、SW1990细胞时,呈浓度及时间依赖性抑制细胞的增殖,其中硼替佐米对BxPC3细胞的生长抑制作用显著大于对SW1990细胞的作用,两者差异有统计学意义（P值均＜0.05）.100 nmol/L硼替佐米干预组BxPC3和SW1990细胞凋亡率分别为（22.56±4.23）％和（（12.71±2.23）％,显著高于对照组的（2.15±0.47）％和（2.32±0.54）％（P值均＜0.05）,且BxPC3细胞的凋亡率显著高于SW1990细胞（P＜0.05）.100 nmol/L硼替佐米干预48 h后BxPC3和SW1990细胞的Bak mRNA表达无显著变化,Bax mRNA及蛋白表达显著增加（P值均＜0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达及Bcl-xl mRNA表达均减少（P值均＜0.05）.survivin mRNA和蛋白表达在BxPC3细胞中均减少,而在SW1990细胞中均增加（P值均＜0.05）.2株细胞的pro-caspase-3蛋白表达减少,而cleaved-caspase-3蛋白表达增加（P值均＜0.05）.结论 硼替佐米可抑制胰腺癌细胞BxPC3、SW1990的增殖、诱导凋亡,对BxPC3细胞的作用高于对SW1990细胞,其机制可能与激活线粒体内源性凋亡途径及survivin参与的肿瘤耐药相关.     

Synergetic anticancer effect of combined gemcitabine and photodynamic therapy on pancreatic cancer in vivo

AIM： To investigate the anti-tumor effects of combined cytotoxic drug （gemcitabine） and photodynamic therapy （PDT） on human pancreatic cancer xenograft in nude mice.
METHODS： Human pancreatic cancer cell line SW1990 was used in the investigation of the in vivo effect of combined gemcitabine and PDT on human pancreatic cancer xenograft in mice. Sixty mice were randomly allocated into a control group （without treatment）, photosensitizer treatment group （2 mg/kg photosan, without illumination）, chemotherapy group （50 mg/kg gemcitabine i.p.）, PDT group （2 mg/kg photosan ＋ laser irradiation） and combined treatment group （photosan ＋ chemotherapy）, with 12 mice in each group. Tumor size was measured twice every week. Anti-tumor activity in different groups was evaluated by tumor growth inhibition （TGI）
RESULTS： No significant anti-tumor effect was observed either in photosensitizer treatment group or in chemotherapy group. PDT led to necrosis in cancer lesions and significantly reduced tumor volume compared with photosensitizer on day 6 and at the following time points after initialization of therapy （0.24 ± 0.15-0.49 ± 0.08 vs 0.43 ± 0.18-1.25± 0.09, P 〈 0.05）. PDT significantly reduced tumor volume in combined treatment group compared with photosensitizer treatment group （0.12 ± 0.07-0.28 ± 0.22 vs 0.39 ± 0.15-2.20 ± 0.12, P 〈 0.05）, small dose chemotherapy group （0.12 ± 0.07-0.28 ± 0.12 vs 0.32 ± 0.14-1.16 ± 0.08, P 〈 0.05） and control group （0.12 ± 0.07-0.28 ± 0.12 vs 0.43 ± 0.18-1.25 ± 0.09, P 〈 0.05）. TGI was higher in the combined treatment group （82.42%） than in the PDT group （58.18%）.
CONCLUSION： PDT has a significant anti-tumor effect, which is maintained for a short time and can be significantly enhanced by small doses of gemcitabine.     

吉西他滨联合光动力疗法治疗人胰腺癌裸鼠移植瘤的研究

目的 探讨细胞毒药物吉西他滨(gemcitabine)联合光动力疗法(PDT)对人胰腺癌裸鼠移植瘤的疗效.方法 成功造模胰腺癌裸鼠60只,均分为5组:对照组、光敏剂组(光敏素2 mg/kg,腹腔内注射)、化学治疗组(吉西他滨50 mg/kg,腹腔内注射)、光动力组(光敏素2 mg/kg,腹腔内注射+激光照射)和联合治疗组(吉西他滨50 mg/kg+光敏素2 mg/kg+激光照射).光动力组和联合治疗组在光敏素注射48 h后激光照射(630 nm,120 J/cm2),照射时间为20 min;联合治疗组在激光照射前1 h及照射后第3、6、9天腹腔内注射吉西他滨,共4次;化学治疗组吉西他滨剂量、时间与联合治疗组相同.每周2次测虽肿瘤大小,术后21 d处死所有裸鼠,计算瘤体体积,分析各组时一效关系、抑瘤率以及治疗前、后裸鼠体重变化.结果 对照组、光敏剂组和化学治疗组各时段肿瘤体积随时间延长而增长,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).光动力组治疗后第6、9、12、15、18和21天肿瘤体积显著小于同时间段的对照组和光敏剂组(P值均＜0.05);联合治疗组第18和21天肿瘤体积明显较光动力组小(P值均＜0.05).联合治疗组和光动力组瘤重分别为(0.29±0.20)g和(0.69±0.23)g,联合治疗组瘤重明显低于光动力组(P＜0.05);以上两组瘤重均比对照组、光敏剂组和化学治疗组低[(1.65±0.21)、(1.62±0.12)和(1.37±0.19)g,P＜0.05].联合治疗组和光动力组抑瘤率分别为82.42%和58.18%,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);且以上两组抑瘤率均高于光敏剂组和化学治疗组(1.80%和17.00%,P＜0.05).结论 PDT能抑制小鼠胰腺癌生长,但维持时间较短;吉西他滨联合PDT能显著抑制小鼠胰腺癌生长,且有协同增效作用.     

Hematoporphyrin derivative‐mediated photodynamic therapy inhibits tumor growth in human cholangiocarcinoma in vitro and in vivo

Aim: To investigate the effects of hematoporphyrin derivative‐mediated photodynamic therapy (HPD‐PDT) on cell growth in human cholangiocarcinoma in vitro and in vivo, as well as the underlying mechanisms of these effects. Methods: 3‐(4,5‐Dimethylthiazol‐2‐yl)‐2,5‐diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay was used to evaluate growth status of human cholangiocarcinoma cell line (QBC939). Hoechst 33258 staining and flow cytometry assays were applied to determine cell apoptosis. Western blotting analysis was performed to detect the release of cytochrome c in QBC939 cells, and caspases enzymatic assay was used to investigate the activation of caspase‐3, ‐8, and ‐9. Further, tumor growth after subcutaneous implantation of QBC939 cells in nude mice was monitored. Results: HPD‐PDT inhibits QBC939 cell growth via cell apoptosis in vitro, and initiates cell mitochondria apoptosis pathway by the release of cytochrome c and the activation of caspase‐9 and ‐3. Moreover, HPD‐PDT also inhibits subcutaneous tumor growth of QBC939 cells and reduces tumor cell mitosis in nude mice. Conclusion: HPD‐PDT inhibits tumor growth of human cholangiocarcinoma, suggesting that HPD‐PDT is useful in cholangiocarcinoma therapy.     

MMI-166对人胰腺癌细胞株SW1990体外增殖及凋亡的影响

目的 探讨基质金属蛋白酶抑制剂MMI-166对人胰腺癌SW1990细胞增殖和凋亡的影响.方法 应用不同浓度(25、50、100μg/ml)的MMI-166处理人胰腺癌SW1990细胞24、48 h.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率;采用Annexin V-PI法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 25、50、100μg/ml MMI-166处理细胞24h后,细胞生长抑制率分别为(34.23±3.87)％、(44.81±2.01)％、(53.91±1.74)％;48 h的抑制率为(39.95±1.83)％、(52.26±3.46)％、(63.20±2.48)％,呈浓度及时间依赖性.24h的细胞凋亡率分别为(4.17±0.55)％、(8.22±0.70)％、( 14.10±0.44)％;48 h的细胞凋亡率为(11.19±0.47)％、(23.01±0.53)％、(28.10±0.52)％,均显著高于对照组的(0.09±0.12)％(P＜0.05).结论 MMI-166以浓度和时间依赖性抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

体外转染PTEN对胰腺癌细胞增殖能力的影响

目的选择PTEN低表达胰腺癌细胞系,探讨体外转染PTEN对该细胞系的影响。方法将PTEN转染到PTEN低表达胰腺癌细胞系,应用RTPCR、免疫组化、克隆形成率及观察裸鼠移植瘤生长等方法检测PTEN对胰腺癌细胞系的影响。结果PTEN在ASPC1细胞呈低表达,ASPC1、ApE、ApEP细胞PTENmRNA表达量和克隆形成率分别为203%、150%、568%和333%、317%、240%;ASPC1细胞转染后PTEN蛋白表达水平升高,血管内皮生长因子蛋白下降,表皮生长因子受体蛋白无明显变化;5周时转染前后荷瘤裸鼠瘤结节体积分别为2027mm3和1424mm3,差异有统计学意义(P<001)。结论PTEN低表达ASPC1细胞系经转染PTEN后细胞增殖活性及裸鼠致瘤能力明显降低。     

Cd Se/Zn S quantum dots induce photodynamic effects and cytotoxicity in pancreatic cancer cells

AIM: To investigate the photodynamic effect of Cd Se/Zn S quantum dots(QDs) on pancreatic cancer cells and elucidate the probable mechanisms.METHODS: The pancreatic cancer cell line SW1990 was treated with different concentrations of Cd Se/Zn S QDs(0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 μmol/L), with or without illumination. The viability of SW1990 cells was tested using the Cell Counting Kit-8(CCK-8) assay. The ultrastructural changes of SW1990 cells were observed by transmission electron microscopy. Apoptosis was detected by nuclear staining and flow cytometry(FCM). Reactive oxygen species(ROS) were measured by dichlorofluorescein diacetate via fluorescence microscopy. Expression of Bax, Bcl-2 and caspase-3 was measured by real-time polymerase chain reaction(PCR) and protein immunoblotting 24 h after SW1990 cells were treated with Cd Se/Zn S QDs and illuminated.RESULTS: The CCK-8 assay results showed that both Cd Se/Zn S QDs with and without illumination suppressed SW1990 cell proliferation. Cell viability was significantly lower when illuminated or with a longer incubation time and a higher light dose. Cd Se/Zn S QDs with illumination caused ultrastructural changes in SW1990 cells, such as organelle degeneration and chromatin condensation and aggregation at the periphery of the nucleus. Fluorescence microscopy and FCM showed that Cd Se/Zn S QDs(1.5 μmol/L) with illumination increased SW1990 cell apoptosis(53.2%) and ROS generation compared with no illumination. Real-time PCR showed that expression of Bax and caspase-3 was upregulated and Bcl-2 was downregulated. Immunoblotting results were consistent with real-time PCR results. Inhibition of ROS and apoptosis both attenuated QD-photodynamictherapy-induced cell death.CONCLUSION: Cd Se/Zn S QDs can be used as a photosensitizer to inhibit SW1990 cell proliferation through ROS generation and apoptotic protein expression regulation.