雷公藤甲素单次及多次给药对大鼠肝药酶活性的影响

目的:研究雷公藤甲素对大鼠肝药酶活性的影响。方法:对SD大鼠以雷公藤甲素(150、300、450μg·kg-1)灌胃给药,每天1次,给药1d或14d,分别测定细胞色素P450、细胞色素b5含量及红霉素N-去甲基酶(ERD)、二甲基亚硝胺脱甲基酶(NDMA)、甲氧基异唑脱甲基酶(MROD)、乙氧基异唑脱乙基酶(EROD)和戊氧基异唑脱烷基酶(PROD)活性;CYP3A和CYP2E1蛋白含量采用Westernblotting法分析。结果:单次灌胃雷公藤甲素对肝药酶活性及CYP2E1、CYP3A蛋白表达基本无影响;多次给予雷公藤甲素(450μg·kg-1,14d)能诱导NDMA活性,抑制ERD活性,轻度升高CYP2E1蛋白表达,显著降低CYP3A蛋白表达。结论:长期较高剂量给予雷公藤甲素能抑制CYP3A活性,轻度诱导CYP2E1活性。     

雷公藤甲素对新生大鼠心肌细胞搏动的影响

目的 探讨雷公藤甲素对新生大鼠心肌细胞搏动的影响.方法 新生大鼠心肌细胞予0、2.5、5、10、20、40、80、160和200 μmol/雷公藤甲素处理,采用实时细胞分析系统(RTCA)于给药前至给药后20 h连续记录心肌细胞搏动频率的变化.结果 浓度大于等于2.5 μmol/L的雷公藤甲素于给药后10 min可明显...     

雷公藤甲素对胰腺癌干细胞的影响

目的探讨雷公藤甲素（TPL）对胰腺癌干细胞的影响。方法利用不同浓度TPL处理人胰腺癌细胞PANC 1,流式细胞术检测胰腺癌干细胞相关分子CD44、CD24、ESA、CD133及ALDH1表达,流式分选CD＋44、CD＋24ESA＋表型的PANC 1细胞作为干细胞,再分别通过体外细胞球体形成实验及NOD/SCID小鼠体内移植瘤成瘤实验,验证TPL对胰腺癌干细胞成球及成瘤能力的影响。结果10,25 nmol•L－1 TPL可抑制PANC 1细胞表面CD44、CD24、CD133及ALDH1表达,并可以抑制胰腺癌干细胞成球能力［对照组成球（30±4）个,5 nmol•L－1TPL组（13±2）个,10 nmol•L－1TPL组（5±1）个,P＜0.01］及成瘤能力（抑瘤率76.5%）。结论TPL能够抑制胰腺癌干细胞功能,可能是其抑制胰腺癌的机制之一。     

雷公藤甲素对生殖系统毒性的研究进展

雷公藤甲素为雷公藤的主要活性成分之一,也是雷公藤片、雷公藤多苷片等制剂的主要有效成分。它具有抗炎、抗肿瘤、免疫调节等药理作用,是热点研究的天然活性化合物。但是,雷公藤甲素的副作用在很大程度上影响了其在临床上的应用,其中对生殖系统的毒性及抗生育作用尤为明显,特别是对雄性生殖系统的影响。综述了雷公藤甲素对男性睾丸、附睾和精子等,以及对女性生殖系统的损害及作用机制,并建议系统开展配伍减毒增效的研究,实现对配伍雷公藤甲素安全窗口的拓宽优化,为安全有效地应用于临床提供有力依据。     

雷公藤甲素对小鼠免疫功能的抑制作用

研究了雷公藤甲素对小鼠免疫功能的影响。分别用碳粒廓清实验、DNFB诱导小鼠迟发型变态反应实验、T淋巴细胞转化实验和血清溶血素测定方法,观察雷公藤甲素对小鼠免疫功能的影响。发现雷公藤甲素25μg/kg能抑制小鼠的血清溶血素水平;100μg/kg抑制小鼠迟发型变态反应;雷公藤甲素0.3～25μg/ml处理小鼠T淋巴细胞,其受刺激后增殖情况显著差于正常小鼠;以25、50、100μg/kg雷公藤甲素处理的小鼠,吞噬系数α与正常小鼠比较,有免疫抑制的趋势,但无统计学意义。     

雷公藤甲素对肺动脉高压大鼠肺细小动脉尾加压素-Ⅱ表达的影响

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)发病机制复杂,目前缺乏有效且易于临床应用的肺血管扩张药物,雷公藤甲素(triptolide,TL)是一个具有多种生物活性的二萜内酯,该类化合物具有抗炎、免疫抑制和抗增殖作用.而尾加压素-Ⅱ(Urotensin-Ⅱ,U-Ⅱ)于1998年首次从人体中克隆出来,具有强大缩血管和促平滑肌细胞增殖作用~[1].本实验探讨雷公藤甲素是否部分通过抑制U-Ⅱ而达到治疗肺动脉高压的作用.     

雷公藤甲素对变应性鼻炎大鼠模型Fas表达的影响及机制研究

目的探讨变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜Fas的表达和雷公藤甲素对他们的干预作用,为雷公藤甲素治疗变应性鼻炎提供初步理论依据。方法选健康SD大鼠40只,雌雄不限,随机分为卵清蛋白(OVA)致敏组,雷公藤(TP)处理组,地塞米松(DM)处理组和生理盐水(SC)对照组,每组10只,用卵清蛋白腹腔注射致敏,继之鼻局部激发建立AR大鼠模型,TP处理组、DM处理组和SC对照组分别用TP、DM和SC在激发前30m in腹腔注射和鼻腔滴入。取各组大鼠鼻黏膜,行Fas蛋白免疫组织化学染色,图像分析软件分析阳性区的灰度值。实验数据采用统计软件包SPSS13.0,统计学分析采用单因素方差分析并继以最小显著差(LSD)t检验比较组间差异。结果变应性鼻炎大鼠鼻黏膜Fas主要表达于上皮、腺体、平滑肌及血管周围的炎性细胞中;TP处理组和DM处理组Fas的表达水平显著高于OVA组(P<0.01),TP处理组和DM处理组间表达水平比较无显著性差异(P>0.05)。结论 TB能够促进大鼠鼻黏膜组织Fas的表达、且与DM比较无显著差异,这可能是其药理作用机制之一。     

血红素加氧酶1对实验性肝硬化内毒素血症大鼠肝功能的影响

目的 探讨血红素加氧酶1(HO-1)在实验性肝硬化内毒素血症大鼠中的作用.方法 80只大鼠均分为4组:对照组为正常大鼠+脂多糖(LPS);其余3组用硫代乙酰胺(TAA)诱导大鼠肝硬化模型后,TAA组腹腔内注射生理盐水,TAA+LPS组注射LPS,HM组注射氯化高铁血红素+LPS.造模后检测AST和ALT.结果 与对照组比较,其余3组血浆中ALT和AST水平均明显升高(P＜0.05),且HM组＞TAA+ LPS组＞TAA组.结论 HO-1通过其氧化损伤和促纤维化,促进大鼠肝硬化内毒素血症时肝损害.     

血红素氧合酶-1对急性呼吸窘迫综合征大鼠的防治作用

血红素氧合酶 (hemeoxygenase ,HO)是一种催化血红素降解为一氧化碳、铁和胆红素的起始酶和限速酶 ,有着重要的生物学作用[1] 。故已逐渐成为目前研究的一个热点[2 4] 。本实验拟以油酸型急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)大鼠为模型 ,先用HO 1的作用底物—血红蛋白 (Hb)来诱导HO 1的     

血红素加氧酶-1的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响

目的:探讨血红素加氧酶-1(HO-1)的表达对实验性肝硬化内毒素血症大鼠的影响。方法:32只健康雄性wistar大鼠,随机分为4组,正常+脂多糖(LPS)(对照组)、肝硬化+生理盐水对照组(TAA组)、肝硬化+LPS组(TAA+LPS组)、肝硬化+LPS+hemin(氯化高铁血红素)(HM组)。用硫代乙酰胺(TAA)诱导肝硬化模型时间共计10周,对照组自由饮清水。于模型造成后,向对照组、TAA+LPS组、HM组大鼠腹腔内注入LPS3 mg/kg;TAA组大鼠腹腔内注入等量的生理盐水;HM组于注射LPS 12 h前,腹腔注射HM(40 mg/kg),并在注入LPS 6 h后,各组动物经腹主动脉穿刺采全血观察血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基酸转移酶(AST)、一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的表达。留肝组织用免疫组织化学法观察HO-1的表达。结果:对照组、TAA组、TAA+LPS组、HM组血浆中的ALT/AST、MDA、NO依次升高差异有显著性(P<0.05),对照组、TAA、TAA+LPS、HM组各组大鼠的灰阶值显著依次降低,且有明显差别(P<0.05)。结论:在实验性的肝硬化内毒素中尽管HO-1的表达增加,但它未起到保护作用,它与内毒素对机体的损伤有关。     

辛伐他汀对急性心肌梗死大鼠血红素加氧酶-1的影响

目的探讨大鼠急性心肌梗死后心肌内血红素加氧酶-1(HO-1)水平变化及辛伐他汀对HO-1表达的影响。方法结扎♂SD大鼠冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,24 h后存活大鼠随机分为心肌梗死组(MI组)、辛伐他汀(Sim组)和假手术组(Sham组,只穿线不结扎)。Sim组以辛伐他汀40 mg.kg-1.d-1灌胃,MI组和Sham组以等体积生理盐水灌胃。术后24 h、7 d、28 d处死动物,RT-PCR及Western bolt测定心肌非梗死区HO-1 mRNA和蛋白表达水平,并测非梗死区心肌超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果HO-1 mRNA和蛋白表达水平均在心梗后24 h开始升高,7 d达峰,28 d恢复至基线水平。3个时间点MI组上述指标均高于Sham组;术后7 d和28 d Sim组上述指标均高于MI组(P<0.05)。随HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高,SOD活性升高,MDA含量降低。结论心肌内HO-1水平在急性心肌梗死后28 d内呈现动态变化。辛伐他汀可诱导HO-1表达,发挥抗氧化损伤的心脏保护作用。     

Hepatic expression of heme oxygenase-1 and antioxidant response element-mediated genes following administration of ethinyl estradiol to rats

Heme oxygenase-1 (HO-1) is one of several enzymes induced by hepatotoxicants, and is thought to have an important protective role against cellular stress during liver inflammation and injury. The objective of the present study was to evaluate the role of HO-1 in estradiol-induced liver injury. A single dose of ethinyl estradiol (500 mg/kg, po) resulted in mild liver injury. Repeated administration of ethinyl estradiol (500 mg/kg/day for 4 days, po) resulted in no detectable liver injury or dysfunction. Using RT-PCR analysis, we demonstrate that HO-1 gene expression in whole liver tissue is elevated (>20-fold) after the single dose of ethinyl estradiol. The number and intensity of HO-1 immunoreactive macrophages were increased after the single dose of ethinyl estradiol. HO-1 expression was undetectable in hepatic parenchymal cells from rats receiving Methocel control or a single dose of ethinyl estradiol, however cytosolic HO-1 immunoreactivity in these cells after repeated dosing of ethinyl estradiol was pronounced. The increases in HO-1 mRNA and HO-1 immunoreactivity following administration of a single dose of ethinyl estradiol suggested that this enzyme might be responsible for the observed protection of the liver during repeated dosing. To investigate the effect of HO-1 expression on ethinyl estradiol-induced hepatotoxicity, rats were pretreated with hemin (50 micromol/kg, ip, a substrate and inducer of HO-1), with tin protoporphyrin IX (60 micromol/kg, ip, an HO-1 inhibitor), or with gadolinium chloride (10 mg/kg, iv, an inhibitor/toxin of Kupffer cells) 24 h before ethinyl estradiol treatment. Pretreatment with modulators of HO-1 expression and activity had generally minimal effects on ethinyl estradiol-induced liver injury. These data suggest that HO-1 plays a limited role in antioxidant defense against ethinyl estradiol-induced oxidative stress and hepatotoxicity, and suggests that other coordinately induced enzymes are responsible for protection observed with repeated administration of high doses of this compound.     

转导血红素氧合酶-1蛋白减轻脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤

目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对脑缺血/再灌注损伤沙土鼠海马神经元的影响。方法构建11R(11个精氨酸残基)-HO-1蛋白,50只沙土鼠随机分为5组(n=10):脑缺血/再灌注组(C组),沙土鼠行脑缺血/再灌注损伤。脑缺血/再灌注+生理盐水组(S组)、脑缺血/再灌注+11R组(R组)、脑缺血/再灌注+5 mg·kg-111R-HO-1组(H1组)和脑缺血/再灌注+25 mg·kg-111R-HO-1组(H2组),各组沙土鼠腹腔分别注射5 mg·kg-1生理盐水、5mg·kg-111R蛋白、5 mg·kg-111R-HO-1蛋白或25 mg·kg-111R-HO-1蛋白,3 h后行脑缺血/再灌注损伤。24 h后取沙土鼠海马,电镜下观察海马组织线粒体的变化,检测海马神经元凋亡、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平。结果C组、S组和R组3组间海马神经元线粒体变性率、神经元凋亡率、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平变化无差异(P>0.05);H1组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs C组、S组和R组,P<0.01);H2组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs H1组,P<0.01)。结论 HO-1蛋白转导减轻了脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤。     

右美托咪啶对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织血红素氧合酶-1表达的影响

目的评价右美托咪啶对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织血红素氧合酶-1表达的影响。方法健康Wistar大鼠36只,雌雄不限,体重300~350g,随机分为3组:假手术组(S组)、肾脏缺血再灌注组(IR组)和右美托咪啶组(D组),各12只。采用动脉压夹夹闭双侧肾动脉60min、恢复灌注4h建立大鼠肾脏缺血再灌注模型。D组于夹闭双侧肾动脉前10min尾静脉注射右美托咪啶3μg/kg;IR组于夹闭双侧肾动脉前10min尾静脉注射等容量生理盐水;S组不夹闭双侧肾动脉,分离肾动脉后尾静脉注射等容量生理盐水。术后再灌注4h时处死大鼠取肾组织,采用PCR技术检测血红素氧合酶-1mRNA的表达,Westernblot法测定血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白水平,光镜下观察肾组织病理学结果。结果与S组比较,IR组和D组肾组织血红素氧合酶-1mRNA和HO-1蛋白的表达上调(P<0.05);与IR组比较,D组肾组织血红素氧合酶-1mRNA和HO-1蛋白的表达上调(P<0.05),肾组织病理学损伤减轻。结论右美托咪啶减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤与其上调肾组织血红素氧合酶-1的表达有关。