门静脉高压症患者脾血管内皮素-1 mRNA的表达

门静脉高压症的具体病理生理过程尚不清楚，我们研究了局部缩血管活性物质内皮素-1(ET-1)mRNA在内脏血管中的表达，探讨其在门静脉高压症血管病变中的意义。     

CD40/CD40L和B7-1/CD28在小鼠叶酸性肾病中的作用

目的研究CD40／CD40L、B7—1／CD28在肾小管间质浸润的免疫活性细胞、损伤的肾组织固有细胞上的表达以及其可能的作用。方法一次性腹腔注射叶酸制作CD1小时鼠叶酸性肾病模型。在第1、2、3、7、14、21天分别处死动物，取其右肾进行免疫组织化学染色；取左肾提取蛋白进行蛋白印迹分析；采血检测BUN、Scr。以抗B7—1功能性单克隆抗体（B7-1mAb）联合叶酸应用，观察21d后，采血行BUN、Scr检测，病理图像分析肾病变区域及保护率。结果小鼠在给予叶酸后第1天，CD40、B7-1在肾小管上皮表达上调，并持续至第21天。通过蛋白印迹半定量检测，CD40在各时间点实验组肾组织表达量均增加5倍以上（P均〈0．01），在间质区域浸润的免疫活性细胞上可见CD28和CD40L的表达。经B7-lmAb干预性治疗，小鼠死亡率从47．83％下降到11．01％。P〈0．01；BUN、Scr水平明显降低；肾组织保护率从7．45％上升至66．51％。结论在小鼠叶酸性肾病中．肾组织CD40／CD40L和B7-1／CD28的表达上调并参与了肾小管上皮细胞损伤、免疫活性细胞浸润和肾小管间质纤维化的过程。B7-1mAb干预治疗能减轻上述的肾损害，为肾间质纤维化的特异性免疫治疗提供新的途径。     

肝硬化门静脉高压症脾切除术后门静脉血栓形成的研究进展

门静脉血栓形成(PVT)是肝硬化门静脉高压症脾切除术后的一种严重并发症.它可以引起肝损害、缺血性肠坏死和曲张静脉出血等严重后果.近年来关于PVT的危险因素、诊断、预防及治疗均有大量报道.影像学检查已经可以早期诊断门静脉血栓,这对患者的预后意义重大.     

门静脉高压症脾切除的手术技巧

目的探讨门静脉高压症脾脏切除的技术难点与改进方法。方法自2008年1月至2009年4月,上海交通大学医学院附属瑞金医院外科收治手术治疗的门静脉高压症患者共60例,回顾性分析这些病例的临床资料。结果施行脾切除加近端脾肾静脉分流术30例,脾切除加贲门周围血管离断术29例,单纯脾切除1例。脾切除的平均耗时50 min,平均出血量约200 ml。整个手术的平均输血量为540 ml,其中19例未进行输血。术后并发症包括胸腔积液2例,膈下积液1例。结论脾周狭小间隙的合理显露,脾动脉预处理的妥善施行,以及脾蒂血管的正确处理是门静脉高压症顺利施行脾切除的关键。     

门静脉高压症脾切除临床存在的问题

病理性脾切除是门静脉高压症外科治疗的最常见手术方式,即便临床脾功能亢进不明显,脾切除也常常作为治疗食管胃底静脉曲张破裂出血断流手术的一个组成部分.按照传统的治疗方式与思维理念,病理性脾切除即可消除脾功能亢进,又可减少门静脉系统的血流,从而达到降低门静脉压力的目的.但临床实践中常常会发现许多与临床常规思维不一致的现象,甚至很多基础学科有关脾功能改变的实验室研究成果在临床观察中与动物实验结果大不一样,在此就相关问题讨论如下.     

门静脉高压症脾亢患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞含量与免疫功能研究

目的 研究门静脉高压症(PHT)脾亢患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(Treg)与CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达变化.探讨脾脏免疫功能改变及其可能的调节机制.方法 PHT脾亢患者20例(脾亢组),健康成人18例(对照组),采用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg及CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达变化.结果 脾亢组外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg占CD4+T细胞的比例为(5.3±3.0)%,明显高于对照组的(2.5±0.9)%(P<0.01).脾亢组CD3+、CD4+、CD8+T细胞含量均低于对照组(P<0.05).CD4+CD25+CD127low/-Treg的含量与CD3+T细胞比例呈负相关(r=-0.630,P<0.01),与CD4+T细胞比例呈负相关(r=-0.561,P<0.05).结论 PHT脾功能亢进患者CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞表达量增多,可能对脾脏免疫功能的调节有重要作用.     

乙型病毒性肝炎肝硬化门静脉高压症患者脾切除后CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞的变化及意义

目的 观察乙型病毒性肝炎肝硬化门静脉高压症患者行脾切除术前后外周血中CD4＋CD25＋ CD127low/-调节性T细胞（Treg）的变化,探讨门静脉高压症患者行脾切除术对机体免疫功能的影响.方法 回顾性分析2012年5月至2013年5月河北医科大学第三医院收治的20例乙型病毒性肝炎肝硬化门静脉高压症合并脾功能亢进患者的临床资料,通过流式细胞仪分析乙型病毒性肝炎肝硬化门静脉高压症合并脾功能亢进患者（门静脉高压症组）脾切除术前1d、术后1周、1个月、3个月和来自河北医科大学第三医院的10例健康体检者（对照组）的外周血中CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg含量,分析Treg的变化对全身免疫系统造成的影响.组问比较采用t检验,手术前后数据比较采用重复测量方差分析.结果 门静脉高压症组患者术前和对照组受试者CD4＋ CD25＋ CD127low/-Treg比例分别为5.1％±3.5％和1.4％±0.2％,两组比较,差异有统计学意义（t=2.573,P＜0.05）.门静脉高压症组患者术后1周、1个月、3个月CD4＋CD25＋ CD127low/-Treg比例分别为9.2％±2.7％、5.6％±1.7％、2.5％±2.1％,其中术后1周与术前比较,差异有统计学意义（F=9.814,P＜0.05）;而术后3个月与术前比较,差异无统计学意义（F=2.364,P＞0.05）.结论 脾切除术后短期Treg水平明显升高,随时间延长逐渐下降.从Treg方面表明脾切除对机体免疫系统影响较小.     

门脉高压症脾切除后上消化道大出血误诊分析

本文报告４例诊断为肝硬化门脉高压症脾切除术后再发食管、胃底静脉曲张破裂大出血，而经手术或尸体解剖证实２例为“门脉高压性胃病”的急性胃粘膜出血；另２例分别为十二指肠活动性溃及胃癌出血。作者等提出对门脉高压症脾切除术后再发上消化道大出血时，应常规作急症术前或术中胃镜检查，以免疫误诊治。     

门静脉高压症脾切除术后脑血栓形成1例

患者男,63岁.因酒精性肝硬化门静脉高压症上消化道出血于2000年2月入院,在内科经保守治疗病情稳定后转入外科.红细胞2.9×1012/L,白细胞2×109/L,血小板41×109/L;肝功能分级:Child B级;心电图检查无异常.     

肝硬化并门静脉高压症行脾切除加断流术后肝脏纤维化指标的变化

我院近年共对42例肝炎后肝硬化病人行脾切除加胃底、食管下段血管阻断术(离断近端胃壁周围50%及食管下端4～6cm范围内的血管,也称"去血管",devascularization),术后除外周血象、部分肝功能得到明显改善以外,肝纤维化的生化指标也得到改善。据此认为,切脾加断流术由于改变了区域性的血流分布,肝脏血流灌注得到一定加强,可能对肝纤维化的缓解有益。     

慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达

目的分析慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达,初步探讨其分化表型。方法采集分离健康人和慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC),利用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,再用流式细胞仪检测CD8 和CD4 T淋巴细胞表面CD27和CD28分子的表达。结果31例慢性乙型病毒性肝炎患者CD8 CD27 CD28 T细胞占CD8 T细胞(41.13±24.89)%,低于28例健康对照组的(71.93±14.47)%(P<0.05)。而CD8 CD27-CD28-T细胞占CD8 T细胞(42.16±10.98)%,显著高于健康对照组的(9.16±5.24)%(P<0.01)。慢性乙型病毒性肝炎患者CD4 CD27 CD28 T细胞(80.89±7.93)%和健康对照组(83.17±8.31)%比较,差异无统计学意义。结论健康人外周血T淋巴细胞以CD27 CD28 早期分化表型为主。而慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中不同的亚群分化特征又有所不同,CD4 T淋巴细胞的分化表型仍然以CD27 CD28 早期分化表型为主,而CD8 T淋巴细胞中早期分化表型明显减少,晚期分化表型(CD27-CD28-)显著增加。     

川芎嗪对活动期狼疮性肾炎外周血单个核细胞 B7-1和B7-2 mRNA表达的影响

目的：探讨川芎嗪对活动期狼疮肾炎（LN）外周血单个核细胞（PBMC）的B7－1（CD80）和B7－2（CD86）mRNA表达的,影响,为临床使用川芎嗪治疗LN提供理论依据。方法：取活动期LN患PBMC培养,分别以川芎嗪,地塞米松和川芎嗪＋地塞米松进行处理,以PBS对照,采用半定量反转录PCR的方法,检测PBMC的B7－1和B7－2mRNA表达,结果：与对照组相比,川芎嗪组和地塞米松组均能明显抑制B7－2mRNA表达（P＜0．05）,而川芎嗪＋地塞米松组对B7－2mRNA表达的抑制更加明显（P＜0．01）,各组对B7－1mRNA表达均无显影响（P＞0．05）,结论：川芎嗪能下调活动期LN外周血单个核细胞B7－2mRNA表达,合并使用地塞米检能更好地抑制B7－2mRNA表达。     

乳腺癌患者B7-CD28共刺激通路的研究

目的探讨乳腺癌患者外周血中CD2 8表达阳性的T细胞数量和患者乳腺癌原代细胞表面B7 1(CD80 )、B7 2 (CD86 )的表达水平 ,以探讨乳腺癌患者共刺激通路是否异常。方法采用流式细胞技术检测乳腺癌患者外周血中CD2 8阳性T细胞与乳腺癌患者原代细胞B7分子的表达 ,并与乳腺良性疾病作比较。结果乳腺癌患者CD2 8阳性的T细胞数明显低于对照组 (t =2 879,P <0 0 5 ) ,特别是CD4/CD2 8双阳性T细胞数更低于对照组 (t=3 0 17,P <0 0 0 1)。乳腺癌患者原代细胞表面B7 1和B7 2表达水平都低于对照组。结论乳腺癌患者外周血中T细胞低表达CD2 8分子 ,乳腺癌细胞低表达B7分子 ,从而影响B7 CD2 8共刺激通路 ,使T细胞不能有效地清除肿瘤细胞。     

CD1D基因与B7-1基因共转染胰腺癌细胞及其抗癌作用的实验研究

目的:观察共转染小鼠B7-1和CD1D 基因对小鼠胰腺癌细胞的免疫应答。方法:将表达B7-1和CD1D 基因的逆转录病毒载体导入包装细胞系,然后转染入胰腺癌细胞。用PCR和Western方法鉴定细胞表达;用B7-1和CD1D 阳性的细胞在体内诱导抗肿瘤免疫反应。结果:B7-1和CD1D 阳性的细胞在同基因小鼠体内能诱导抗肿瘤免疫反应并抑制肿瘤生长。结论:B7-1基因和CD1D 基因共转染肿瘤细胞,能抑制肿瘤生长,可能为肿瘤的基因治疗开辟一条新途径。     

B7修饰的肝癌细胞疫苗对细胞因子产生的研究

目的 研究Ｂ７基因修饰的肝癌细胞疫苗刺激产生细胞因子（ＩＬ－２,ＴＮＦ－α和Ｇ－ＣＳＦ）的能力。方法 应用逆转录病毒载体,将Ｂ７－１,Ｂ７－２基因导入小鼠肝癌细胞Ｈｅｐａｌ－６细胞株中,获高表达Ｂ７分子的阳性细胞克隆,经丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ０处理,制备肿瘤细胞疫苗（ＴＣＶ）,观察ＴＣＶＢ７体内外对细胞因子ＩＬ－２,ＴＮＦ－α和Ｃ－ＣＳＦ产生的影响。结果 （１）ＴＣＶＢ７体外能刺激脾细胞分泌细胞因子Ｉ     

Co-stimulation blockade targeting CD154 and CD28/B7 modulates the induced antibody response after a pig-to-baboon cardiac xenograft

BACKGROUND: The induced antibodies against Galalpha1,3Gal (Gal) and non-Gal epitopes may contribute to delayed xenograft rejection (DXR). We asked whether blockade of the CD40/CD154 and CD28/B7 co-stimulatory pathways modulates the baboon elicited antibody response to pig Gal and non-Gal antigens. METHODS: Eighteen baboons received heterotopic heart transplants from pigs transgenic for human decay-accelerating factor (n = 13) or membrane cofactor protein (n = 5). Ten reference 'conventional therapy' animals received cyclosporin A, cyclophosphamide and mycophenolate mofetil, with (n = 4) or without (n = 6) anti-CD20. Eight 'co-stimulation blockade' animals received anti-CD154 mAb (IDEC-131) and anti-thymocyte globulin, with (n = 4) or without (n = 4) anti-CD20; two of these animals also received CTLA4-Fc. Anti-alphaGal IgG and IgM, anti-non-Gal antibodies and graft histology were assessed serially. RESULTS: Excluding two early graft failures, median graft survival with conventional therapy was 15 days (range 6 to 36 days, n = 8). Anti-Gal IgG antibody remained low through day 6 to 10, only one graft failure was accompanied by significant rise in anti-Gal IgG, and the anti-non-Gal response was weak (n = 2) or absent (n = 7). However many recipients succumbed with infection (n = 4) or coagulopathy (n = 2); DXR and ICOS+ T cells were prevalent in long-surviving grafts. With co-stimulation blockade, excluding three early graft failures, median graft survival was 7 days (range 6 to 11 days, n = 5). This regimen was very well tolerated, but increased anti-Gal antibody titer within 14 days was associated with graft failure in four of six animals. Although an anti-non-Gal response was present in three of six animals during IDEC-131 monotherapy (one strong, two weak), it was absent in both cases with additional CTLA4-Fc treatment. CONCLUSIONS: As used here, CD154 blockade alone does not completely prevent induction of Gal and non-Gal anti-pig antibodies. Our preliminary data suggest that other co-stimulation pathways, including CD28/B7 and ICOS, are sufficient to mediate high-titer anti-non-Gal antibody to porcine antigens in baboons, and contribute significantly to the pathogenesis of DXR.     

CD8+CD28-T细胞在脑疝患者的动态变化与临床意义

【摘要】 目的 探讨脑疝患者外周血CD8+CD28-T细胞的动态变化与临床意义。方法〓收集36例脑疝组(A组)患者外周血,以41例未出现脑疝的重型颅脑损伤患者(B组)及32例健康人(C组)作为对照,采用流式细胞术检测外周血CD8+CD28-T细胞及其胞内转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)百分含量。分别在伤后3 h、6 h及12 h观察A及B组患者外周血CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10变化。结果〓三组CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10总体差异均有显著性(P < 0.05),但B组与C组无统计学差异,而A组上述三者均显著低于另外B及C组(P < 0.05)。B组患者在伤后3 h、6 h及12 h的CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10差异均无统计学意义|A组患者3 h、6 h及12 h的CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10均呈进行性下降,表现为任意两个时间点的差异均有统计学意义(P < 0.05),且均显著低于B组(P < 0.05)。结论〓CD8+CD28-T细胞显著下降是脑疝患者的一个重要细胞免疫学特征,其伤后12h内进行性下降与病情进展密切相关。     

A more selective costimulatory blockade of the CD28‐B7 pathway

Progress from the last decade in the understanding of T‐cell activation has led to new immunotherapeutic strategies for the treatment of immunological diseases. Since the discovery of costimulatory molecules in the 1980s, the field of T‐cell costimulation blockade has literally exploded and now spanned ‘from bench to bedside’. Such alternative therapies result in more selective effects specializing their action on Ag‐experienced T lymphocytes. This can potentially prevent the progression of autoimmune diseases, allograft rejection and may even induce immune tolerance. In the 1990s, the CD28/B7/CTLA‐4 pathway was identified as a crucial regulator of T‐cell activation and tolerance induction. Here, we have summarized our current understanding of this complex costimulatory pathway involving co‐stimulatory and co‐inhibitory molecules and the way we can manipulate these molecules to inhibit, stimulate or kill target cells in experimental preclinical models as well as in clinical trials. We have also reviewed the role of costimulation in the biology of CD4+ CD25+ Foxp3+ regulatory T cells.