小鼠自身免疫性睾丸炎模型的建立

小鼠自身免疫性睾丸炎模型的建立聂振英吴俊刘斌（北京医科大学组织学与胚胎学系）本实验用一种新的方法建立小鼠实验性自身免疫性睾丸炎的动物模型（ＥＡＯ）。与以往方法的区别是：排除佐剂的影响，使结果稳定可靠；更加模拟自然发病情况；且简便、价廉。选取成熟雄性昆...     

三七总苷对大鼠自身免疫性睾丸炎的拮抗作用

目的:研究三七总苷(PNS)对自身免疫性睾丸炎模型鼠睾丸组织形态及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和睾酮(T)含量的影响,以探讨PNS对睾丸炎的组织结构拮抗及作用机制。方法:建立大鼠睾丸炎模型,随机分为模型组和PNS拮抗组(200、400和800mg/kg),镜下观察各组睾丸组织结构变化。结果:800mg/kg PNS剂量组睾丸系数、生精小管直径、血清TNF-α和T含量与模型组比较,差异有统计学意义,光镜所见睾丸组织结构接近正常对照组形态;200mg/kg PNS剂量组和模型组生精上皮坏死、脱落,睾丸间质水肿,不同程度炎性细胞增生浸润。结论:400、800mg/kg PNS剂量组对大鼠睾丸炎症损伤具有拮抗作用。     

生精障碍与染色体畸变的检测分析

男性的精子生成和精子输送是个复杂的生理过程。精子的发生受到诸多有序表达的基因控制 ,完成细胞分裂及形态改变 ,染色体结构数目的畸变可影响这些基因的功能进而影响精子的发生导致不育。本文对 89例无精子少精子症病人进行了细胞遗传学分析 ,共发现 8例染色件核型异常 :对其中 2例涉及Ｙ染色体结构异常的无精子症病人还进行了ＹＲＲＭ1ＤＹＳ2 40ＤＮＡ片段的检测 ,对 1例 46 ,ＸＸ男性无精子症病人进行ＳＲＹＤＮＡ片断和ＹＲＲＭ1ＤＹＳ 2 40ＤＮＡ的检测。以下从所涉及的染色体及其片段断裂点对精子发生的作用进行分析。资料与方法对 …     

输精管结扎与吻合术后对兔睾丸细胞功能的影响

家兔31只,分为假手术对照组(C),输精管结扎组(V)和输精管吻合组,后者于结扎后12个月时行吻合术,吻合后3个月与雌兔配对交配,继续观察2个月,根据雌兔孕否再将吻合兔分为吻合育组(VaF)和吻合不育组(VaI)。结果表明,血清睾酮水平在C,VaF,VaI和V组分别是7.1±4.2,11.3±4.7,4.3±2.3和4.9±2.7nmol/L((?)±SD,下同),VaF,VaI和V组分别与C组比较差异不显差(P>0.05),而VaF和VaI组比较差异显著(P<0.01),睾丸细胞核雄激素受体浓度在C、VaF,VaH和V组分别是61.1±17.8,66.2±38.2,44.5±26.8和68.9±22.5fmol/mg.DNA,组间比较无显著差异(P>0.05);睾丸组织cAMP含量在C,VaF,VaI和V组分别是440.0±94.0,324.0±13.0,277.0±48.0和254.0±135.0pmol/g组织,VaF,VaI和V组显著低于C组(P<0.05);而睾丸胞液雄激素结合蛋白浓度分别是27.4±10.5,64.8±18.5,52.8±23.5和44.7±14.7fmol/mg·pro.,VaF,VaI和V组显著高于C组(P<0.05),睾丸细胞膜Na~ ,K~ -ATPase活性分别是78.0±28.7,62.2±10.3,43.7±9.8和32.6±10.0μmol Pi/mg·hr,VaI和V组显著低于C和VaF组(P<0.01),而Mg~(2 )-ATPase活性分别是57.2±27.0,53.6±16.2,30.9±10.9和23.1±9.1μmol Pi/mg.hr,VaI和V组显著低于VaF和C组(P<0.05,P<0.01)。     

男性生精障碍与染色体异常关系探讨

目的探讨染色体异常与男性精子生成异常的关系。方法对2018年1月-2020年6月在我院就诊的648例男性无精及重度少精患者进行外周血染色体核型分析及临床资料分析。结果 648例男性无精及重度少精患者的外周血染色体核型共检出异常核型62例,异常率9.57%,其中包括染色体多态性、染色体罗伯逊易位、染色体平衡易位及克氏征47,XXY,其中:①染色体多态性46例,占74.19%;②染色体罗伯逊易位5例,占8.06%;③染色体平衡易位3例,占4.84%;④克氏征6例,占9.68%,⑤额外小标记染色体2例,占0.32%。2例额外小标记染色体通过基因芯片检测后证实为15号染色体来源。结论染色体异常在男性无精子症和重度少精子症患者发生率较高,是男性精子生成障碍的重要原因之一。     

输精管吻合术后不育原因的实验研究精子密度与睾丸功能

14只成年日本大耳白兔,双侧输精管结扎12月后,以显微外科技术行双侧输精管吻合术,3月后与雌兔配对交配,观察2个月,根据妊娠与否分为输精管吻合育组(VFG)和输精管吻合不育组(VIG),各7只。另设输精管结扎组(VG)和假手术组(SOG)作为对照。结果表明,(1)VFG的精子密度与SOG比较虽为低值(P<0.01),但显著地高于VIG(P<0.01)。(2)精子密度与睾丸ACE活力、Na~+,K~+-ATPasc活力、Mg~(++)-ATPasc活力、睾丸cAMP含量均呈显著的正相关。(3)精子密度、cAMP含量与ABP呈明显的负相关。(4)VFG血清睾酮含量与VIG比较有显著差异(P<0.05)。VFG、VIG中血清睾酮水平与精子密度呈明显的正相关(r=0.60、P<0.05)。     

输精管结扎术后附睾精子及其吻合术后再现精子超微结构的观察

目的观察输精管结扎术后附睾精子和吻合术后再现精子超微结构的演变情况及其相关关系。方法15例要求作输精管吻合术的对象,手术时取出附睾精子（A组）并追踪其吻合术后精液再现精子（B组）,同时应用光镜和电子显微镜分别观察A组、B组的精子形态和结构的改变,并进行统计学分析。结果光镜分析显示：B组与A组比较,精子密度和尾畸比例下降有显著性;而精子活动率和头畸比例升高有显著性;正常形态的比例有增高的趋势。电镜分析显示：B组与A组比较,正常形态精子显著升高,而尾部畸形精子明显降低,两者差异均有统计学的显著性;头畸形和颈畸形的比例在两组间差异没有显著性;而两组间尾部畸形比例呈正相关。透射电镜显示内部结构在头、颈、尾均有多细胞器、多种形式的改变。结论本文用电镜观察进一步证实了输精管结扎术后附睾精子形态向输精管吻合术后精液再现精子变化的规律。不论电镜还是光镜分析,精子尾部异常都是由高比例（A组）向低比例（B组）转化,正常形态的精子均由低比例（A组）向高比例（B组）转化;精子头部的异常光镜分析是一个由低比例（A组）向高比例（B组）转化的过程,而电镜分析没有改变。本文在A组和B组未有发现与输精管结扎术有关的精子形态学上特征性的改变。     

生精障碍患者的染色体核型分析

目的探讨染色体异常与男性生精障碍的关系。方法对429例生精障碍者进行外周血淋巴细胞培养,G显带染色体核型分析。结果检出染色体异常核型44例,检出率为10．3％。其中,无精子症、重度少精子症和少弱精子症的染色体异常检出率分别为15．8％、6．1％和4．7％,以无精子症最高。染色体异常包括性染色体数目、结构异常和常染色体异常,以性染色体数目异常为主。结论染色体异常是导致生精障碍的重要原因之一,生精障碍程度越高,染色体异常检出率越高。对生精功能障碍的男性患者有必要进行染色体核型分析。     

男性生精障碍的细胞遗传学分析

目的分析研究严重少精子症和少、弱精子症及无精子症患者的遗传缺陷与不育男性的关系,并探讨该类患者在接受辅助生育治疗前进行细胞遗传学检测的应用价值。方法采用细胞遗传学实验技术检测严重少精子症和少弱精子症及无精子症患者染色体共149例。结果在被筛查患者中发现染色体核型异常38例,异常核型率25.5%,其中性染色体数目异常16例,占42.1%,常染色体结构异常11例,占28.95%,Y多态性10例,占26.32%,性反转1例,占2.63%。结论染色体核型异常是引起男性生精障碍的重要原因之一,这类不育患者在接受辅助生育治疗前进行染色体核型分析,对于避免将各种遗传缺陷传递给下一代是非常必要的。     

男性性染色体多态与睾丸生精功能障碍的相关性

目的分析男性性染色体多态与睾丸生精功能障碍的相关性。方法选取2012至2017年河北省沧州中西医结合医院生殖医学中心就诊的睾丸生精功能障碍患者作为不育组,进行生殖激素检查、精液分析、染色体核型分析和Y染色体AZF基因微缺失检测,同时选取核型正常,正常生育后代且精液质量正常的男性、核型正常的无精子症患者、核型正常的少精子症患者分别作为对照组,进行比较分析。结果不育组患者中,小Y染色体(Yqh-)在无精子症患者中的发生率显著高于少精子症患者与精子数目正常者;不育组中伴Y染色体多态的无精子症、少精子症患者与核型正常的无精子症、少精子症对照组患者比较,生殖激素水平差异无统计学意义;PCR扩增结果表明,33.3%(10/30)的Y染色体多态患者存在Y染色体微缺失。结论 Y染色体多态可能是导致男性睾丸生精功能障碍的重要因素。     

AZF微缺失与生精障碍症的研究分析

目的探讨Y染色体AZF微缺失与生精障碍症(男性原发性无精子症和少精子症)之间的关系。方法采用多重聚合酶链反应技术对158例生精障碍症患者(包括健康男性50例)进行AZFa、AZFb、AZFc和AZFd四个区域微缺失分析。结果 158例生精障碍症患者中发现AZF微缺失21例,总缺失率为13.3%。结论 Y染色体AZF区域微缺失与男性生精障碍症有着明显的相关性,因此有必要对生殖门诊及准备行辅助生育技术的生精障碍症患者行Y染色体AZF微缺失检测,其对该症的诊断及治疗具有重要的意义。     

112例生精障碍患者细胞遗传学分析

生精功能障碍是男性不育的一个重要原因,约占男性不育的10%,它表现为无精子症和严重的少精子症.本文对自1991年至2002年112例生精障碍患者进行细胞遗传学分析,现报告如下.     

159例生精障碍患者的细胞遗传学分析

病例 159例息者主要来自本院不孕症门诊，年龄22-37岁，精液检查结果为无精子或少弱精子。采用外周血淋巴细胞培养，常规制片，G显带后进行染色体核型分析，镜下计数30个中期分裂相，分析4个核型，异常者加倍计数和分析。结果159例生精障碍患者中，正常核型102例，检出染色体异常57例。异常检出率为35．85％。其中性染色体数目异常34例（59．65％）；性染色体结构异常16例（28．07％），常染色体结构异常7例（12．28％），见表1。     

冬虫夏草对抗环磷酰胺致小鼠生精障碍的作用

目的冬虫夏草(cordyceps)具有清除自由基,抗氧化的作用。本实验研究冬虫夏草对抗环磷酰胺致小鼠生精功能损害的作用。方法随机将小鼠分成3组:正常对照组、模型对照组、冬虫夏草治疗组。模型对照组和冬虫夏草治疗组小鼠按照40mg/kg.d腹腔注射环磷酰胺(cp)连续5天,同时冬虫夏草治疗组小鼠每天给予冬虫夏草混悬液300mg/kg.d灌胃;正常对照组小鼠及模型对照组灌胃等量生理盐水。各组均连续处理28天。末次给药24h后,处死全部小鼠,观察小鼠附睾精子密度,活力,活动率,睾丸组织匀浆后测定超氧化物歧化酶(superoxide d ismutas,SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(glutath ione Peroxidase,GSH-Px),丙二醛(m alon iealdehvde,MDA)含量。结果与模型对照组相比,治疗组精子密度,活力,活动率,睾丸组织SOD与GSH-Px含量等均明显升高(P<0.05,P<0.01),精子畸形率和MDA含量有明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论冬虫夏草可对抗环磷酰胺所致的小鼠生精功能的损害,其作用机制可能与冬虫夏草可清除氧自由基,抗氧化作用有关。     

494例生精障碍患者的染色体核型分析

目的通过对生精障碍患者外周血染色体核型的分析,探讨染色体核型异常与男性不育的关系。方法常规制作外周血染色体G显带,对494例生精障碍患者进行染色体核型分析。结果在494例生精障碍患者中,共检出染色体异常30例,发生率为6.07%(30/494),其中无精症、严重少精症和少精症患者的发生率分别为11.86%(21/177)、3.39%(6/177)、2.08%(3/144)。在异常染色体核型中,有13例(13/30,43.33%)发生染色体数目异常,17例(17/30,56.67%)发生染色体结构异常,其中14例(14/30,46.67%)是性染色体异常,16例(16/30,53.33%)是常染色体异常。在所有核型中,Klinefelter综合征的发生率最高,占异常核型的43.33%。结论生精障碍功能越严重,染色体异常核型检出率越高。因此有必要对生精障碍的患者进行染色体核型分析,从而帮患者找出病因,明确诊断,为进行辅助生育的不育患者提供遗传咨询,避免将缺陷传给后代。     

精原干细胞冷冻保存后再移植的生精功能

背景:精原干细胞的冷冻保存在男性不育治疗方面具有潜在的临床应用价值,但冷冻保存过的精原干细胞移植后,其精子发生过程及生精能力目前尚不完全清楚。目的:观测精原干细胞冷冻保存后移植的生精功能。方法:采用复合酶消化、差速贴壁结合非连续性Percoll密度梯度离心的方法获取雄性SD大鼠及雄性C57BL/6小鼠精原干细胞;以雄性BALB/c裸小鼠为受体,出生后6周予腹腔注射白消安破坏其内源性生精功能。将供体精原干细胞分为冷冻保存组与非冷冻保存组,分别以曲细精管微注射的方法异种移植精原干细胞,采用形态学方法观察生精过程;采集附睾精液,观察精子形态并进行体外受精实验。移植后1,2,3个月取受体睾丸组织,采用免疫组化SABC法检测α6-Integrin蛋白表达情况;移植后1周、1个月、3个月取受体睾丸组织,应用扫描电镜观察生精过程。结果与结论:冷冻保存前的精原干细胞活性率高于冷冻保存后的细胞活性率(P0.01)。冷冻保存组与未冷冻保存组受体睾丸组织精原细胞膜和细胞质中均有α6-Integrin的阳性表达,随时间增加而增加,两组间α6-Integrin蛋白的表达无统计学差异;SD大鼠精原干细胞移植后能在BALB/c裸小鼠生精上皮中克隆增殖,并能分化形成大鼠形态特征的精子,在小鼠精子发生巢内既有大鼠来源的精子发生,又有小鼠内源性精子发生,其供体来源的精子数量较小鼠自身来源的精子数量多。通过体外受精实验提示移植后的精原干细胞在受体内增殖分化形成的精子功能正常,具有受精的能力。结果说明采用常规方法冷冻保存的精原干细胞,移植后能在受体生精上皮中克隆增殖,并能分化形成成熟的精子。     

严重生精功能障碍患者细胞和分子遗传学检查

目的检测严重生精功能障碍患者外周血染色体及Y染色体微缺失,探讨Y染色体微缺失的遗传机制,为拟行ICSI(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术助孕的患者提供遗传咨询。方法按常规方法分析严重生精功能障碍患者的外周血淋巴细胞核型,对核型正常的患者,用多重PCR技术对Y染色体AZF(azoospermua fctor,AZF)所在区域的 15个序列标签位点(sequence tag site,STS)进行扩增,应用琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物,对有AZF缺失的患者,随访其父亲的生育及AZF缺失情况。结果 71例无精子症患者中有25例染色体核型异常,异常率35．1％,1例核型为46,XY (小Y);75例严重少精子症患者中有4例46,XY(小Y);45例染色体核型正常的严重生精功能障碍患者,14例发生 AZF缺失(31．11％)。严重生精功能障碍患者总遗传缺陷发生率26．7％。所有AZF缺失患者父亲平均生育4．0个子女,其中有5例AZF缺失患者的父亲接受AZF检测,均无缺失。结论 1．染色体异常和AZF的缺失是引起无精子和严重少精子并造成男性不育的重要原因之一。AZF缺失可能并非有父亲遗传而来,其遗传机制尚有待进一步探讨。2．ICSI助孕前,夫妇双方须行遗传学检查以避免遗传缺陷后代的出生。     

睾丸生精功能障碍患者染色体异常核型及多态性分析

目的研究男性睾丸生精功能障碍与染色体异常核型及多态性关系。方法对299例睾丸生精功能障碍患者进行染色体核型分析和精液常规检测,并对其结果进行对比分析。结果染色体异常57例(19.1%),染色体多态性62例(20.7%)。染色体异常在无精子症组中为34.5%,在少精子症组中为13.0%;染色体多态性在无精子症组中为32.1%,在少精子症组中为16.3%,两组之间差异均有统计学意义。核型异常主要表现为克氏征和平衡易位,其中克氏征占35.1%,平衡易位占19.3%;无精子症主要以克氏征为主占69.0%;少精子症以平衡易位为主占39.3%。睾丸生精功能障碍患者染色体多态性的类型主要包括小Y、大Y、长臂次缢痕增加、随体多态性、9号染色体倒位。其中Y染色体多态性占所有多态性的64.5%,在无精子症组占63.0%,在少精子症组占65.7%。次缢痕增加和随体多态性分别占所有多态性的11.3%,9号染色体倒位占12.9%。结论染色体核型异常及多态性与男性睾丸生精功能障碍有密切关系。