蟾毒灵诱导人急性早幼粒细胞性白血病细胞凋亡的实验观察

目的 研究蟾毒灵治疗急性粒细胞白血病的作用机理。方法 采用体外细胞培养技术,MTT法,流式细胞术,透射电子显微镜观察法,了解蟾毒灵对人急性早幼粒细胞性白血病细胞株(HL-60)是否有细胞毒及诱导凋亡作用。结果 蟾毒灵对HL-60细胞有很强的细胞毒作用,蟾毒灵在体外作用18h即可诱导细胞凋亡,流式细胞仪检测出典型细胞凋亡峰,透射电镜观察到染色质凝集,碎裂,凋亡小体形成等凋亡细胞形态学改变。结论 蟾毒灵有极强的细胞毒作用,在体外能诱导HL-60细胞凋亡,这可能是其治疗急性粒细胞性白血病的主要作用机理之一。     

电磁脉冲诱导小脑颗粒细胞凋亡的研究

以体外原代培养的小脑颗粒细胞为对象,研究电磁脉冲（场强为6×104V/m）辐照后早期小脑颗粒细胞死亡和凋亡的变化情况。于照射后1、6、12、24和48h分别采用MTT法和流式细胞仪测定细胞活力和凋亡细胞的比例,用HE染色及TUNEL检测细胞凋亡并分别用普通光学显微镜和荧光显微镜进行凋亡观察,探讨电磁脉冲的可能致伤机制。结果显示,电磁脉冲辐照后,小脑颗粒细胞不仅发生快速的坏死,而且还发生细胞凋亡,于辐照后12h达到高峰。结果提示,电磁脉冲辐照后早期可导致小脑颗粒细胞凋亡和坏死,此改变可能与电磁脉冲致细胞DNA损伤有关。     

华蟾素对喉癌细胞株癌基因抑制研究

目的：探讨中药华蟾素对体外培养人喉癌的喉癌细胞株（Ｈｅｐ－２）细胞生长作用及癌基因变化。方法：应用光镜,电镜;四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）检测技术;链霉素抗生物素蛋白过氧化物连接法免疫组化技术,对药物作用后Ｈｅｐ－２细胞的数量,形态,癌基因Ｐ５３,Ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达进行研究。     

钬激光照射后人T-24膀胱癌细胞株中半胱天冬酶-3蛋白的表达及其意义

目的观察钬激光照射后人T-24膀胱癌细胞株中半胱天冬酶（Caspase）-3蛋白的表达，探讨其在T私细胞发生凋亡中的作用。方法取对数生长期人T-24膀胱癌细胞株，分对照组与实验组，试验组以800mJ钬激光直接照射而对照组仅以指示光照射不激发激光能量，照射后48h分别在光镜下观察细胞形态学的改变，免疫细胞化学染色检测半胱天冬酶．3蛋白在T-24细胞中的表达。结果800mJ钬激光照射后实验组细胞形态呈现出凋亡改变，半胱天冬酶-3蛋白呈现阳性表达。结论钬激光照射人T-24膀胱癌细胞株，可诱发肿瘤细胞凋亡，半胱天冬酶-3蛋白在诱导T-24细胞凋亡中可能发挥重要作用。     

白花蛇舌草多糖诱导人胃癌细胞凋亡作用的研究

目的研究白花蛇舌草多糖对体外培养人胃癌7901细胞增殖抑制的影响及其作用机理。方法采用MTT法测定不同浓度白花蛇舌草多糖对人胃癌7901细胞增殖的影响;流式细胞技术检测药物作用后的细胞周期和凋亡率;RT-PCR方法检测药物对人胃癌7901细胞P53和Bcl-2基因表达的影响。结果白花蛇舌草多糖能明显抑制人胃癌7901细胞的增殖,其作用48 h的IC50约为116.52 mg·L-1;流式细胞检测显示40 mg·L-1白花蛇舌草多糖联合5.0 mg·L-1顺铂组总凋亡率为69.42%,明显优于顺铂组的50.85%（P〈0.01）和40 mg·L-1白花蛇舌草多糖组的26.41%（P〈0.01）;PCR结果显示高、中浓度白花蛇舌草多糖可使人胃癌7901细胞的bcl-2 mRNA表达量降低,P53 mRNA表达量增加。结论白花蛇舌草多糖能明显诱导人胃癌7901细胞的凋亡,与顺铂联合可产生协同作用,其作用机制可能与降低细胞bcl-2和增加P53基因表达量有关。     

携带凋亡素的重组腺病毒激活AMPK诱导人膀胱癌EJ-1细胞S期阻滞

目的 探讨携带凋亡素(Apoptin)的重组腺病毒Ad-VT对人膀胱癌EJ-1细胞的杀伤作用及其细胞周期调节机制.方法 取对数生长期的EJ-1细胞分别给予不同感染剂量的腺病毒载体对照(Ad-T)或Ad-VT处理,通过CCK-8法和克隆形成实验检测Ad-T和Ad-VT对EJ-1细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测细胞周期分...     

顺铂和放疗联合应用诱导人喉鳞癌细胞凋亡及其相互作用

本文作者研究了射线和顺铂(DDP)以不同的方式联合应用于早期头颈部癌(HNSCC)细胞株的效应，以探讨它们之间的相互作用和最佳作用顺序。     

bFGF对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡的作用

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡的作用。方法：以^60Coγ射线照射法建立猪主动脉内皮细胞株PAE(porcine aortic endothelial cells)和原代培养的人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)调亡模型。以流式细胞术[膜联蛋白(annexin)-V-FTTC PI标记]评价细胞凋亡率，观察不同浓度的bFGF对细胞凋亡的影响。结果和结论：bFGF对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡有明显的抑制作用。     

流细胞术与图像分析术在细胞凋亡检测上的比较

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是细胞在基因控制下的有序死亡 ,是机体维持自身稳定的一种基本生理功能 ,由于其在机体疾病发生发展中的重要作用以及治疗上的潜在意义 ,对凋亡及其方法的研究已成为生物医学领域的热点之一。本文作者选择了 3种细胞系给予电离辐射作用 ,用ＰＩ和Ｈｏｅｃｈｓｔ33342进行双染 ,流式细胞术与图像细胞术同时检测细胞凋亡的发生 ,目的在于将两种方法加以比较 ,从而以一种更全面的方法检测和评价凋亡的发生。一、材料和方法1 细胞系选用ＥＬ 4、Ｂ16和ＨｅｌａＳ3细胞系 (由卫生部放射生物重点实验室提供 )在ＲＰ…     

PI和Annexin V/PI法在创伤后脊髓凋亡细胞分选中的应用

探讨创伤后脊髓凋亡细胞的流式细胞仪分选方法。使用PI和AnnexinV/PI检测法进行细胞凋亡的检测和分选,并进行结果的比较。提示Annexin V/PI是目前较为理想的细胞凋亡检测和分选方法。     

碳离子射线诱导细胞凋亡的研究进展

碳离子射线治疗肿瘤是利用其剂量分布优势,将能量集中于肿瘤组织释放,同时尽量避免损伤周围正常组织。相较于常规光子射线,碳离子不仅表现出上述物理学优势,还具有优越的生物学特性。笔者概述了碳离子射线在物理、生物学方面的特点,并着重综述了其在诱导细胞凋亡方面的进展。     

MMP—9与膀胱移行细胞癌浸润转移的关系

目的：探讨基质金属蛋白酶－9（MMP－9）的表达与膀胱移行细胞癌浸润、转移和预后的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测61例膀胱移行细胞癌组织及23例癌旁组织基质金属蛋白酶－9的表达。结果：膀胱移行细胞癌MMP－9表达与侵袭程度成正相关（P＜0.01）,预后不良组膀胱移行细胞癌MMP－9表达显著高于预后良好组（P＜0.01）。结论：MMP－9的表达与膀胱移行细胞癌的侵袭、转移和预后有关,是膀胱移行细胞癌侵袭、转移较好的分子标志,可用于膀胱移行细胞癌的预后判断。     

bcl—2在足叶乙甙诱导的K562细胞凋亡中的作用

目的研究ｂｃｌ－２及其表达产物在足叶乙甙诱导的Ｋ５６２细胞凋亡中的作用。方法采用细胞形态观察,ＤＮＡ电泳,ＤＮＡ缺口的原位检测观察Ｋ５６２细胞的凋亡,用原位杂交法检测ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达,用免疫荧光法检测ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果２０μｇ／ｍｌ的足叶乙甙能诱导Ｋ５６２细胞发生凋亡,在此过程中,ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ及ｂｃｌ－２蛋白的表达均下降。结论ｂｃｌ－２及其表达产物的下调在足叶乙甙诱导的Ｋ５６２细胞凋亡中起重要作用。     

热休克蛋白60在人膀胱癌中的表达及意义

 目的 探讨热休克蛋白60在膀胱癌的表达及意义.方法 应用免疫组织化学技术(SP法)检测热休克蛋白60在50例膀胱移行细胞癌标本和15例正常膀胱组织中的表达.结果 热休克蛋白60阳性表达率在膀胱癌和正常膀胱黏膜分别为62%和20%,差异有统计学意义(P＜0.01).不同病理分级和临床分期的膀胱癌中热休克蛋白60的表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 热休克蛋白60在膀胱癌发生和发展中起重要作用,它的表达与膀胱癌细胞分化,肿瘤的浸润深度密切相关.     

EZH2和Ki67蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的研究EZH2和Ki67蛋白在膀胱癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法对72例膀胱癌患者癌组织中的EZH2和Ki67蛋白进行测定。结果膀胱癌组织中EZH2及Ki67蛋白阳性率显著高于膀胱正常黏膜组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 EZH2蛋白表达增高与膀胱癌的临床分期,复发密切相关,并与Ki67正相关。联合检测EZH2及Ki67可以作为反映膀胱癌预后的生物学因子。     

膀胱移行细胞癌患者血管抑素的定量检测及其临床意义

目的 :探讨血清及尿液中血管抑素含量与膀胱移行细胞癌发展、转移、疗效及预后的关系。方法 :采用赖氨酸 -酶联免疫吸附分析 (Lysine -ELISA)法检测 6 9例膀胱移行细胞癌患者治疗前血清及尿液中血管抑素 (angiostatin)的水平 ,以及治疗后血清中血管抑素的水平。结果 :膀胱移行细胞癌患者治疗前血清及尿液中血管抑素的水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,并与肿瘤大小、临床分期、分级及有无远处转移密切相关。膀胱移行细胞癌患者治疗后 2 4h血清中血管抑素的水平并无显著降低 (P >0 .0 5 ) ,治疗后 1周血管抑素水平明显降低 ,与治疗前差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :膀胱移行细胞癌患者血清和尿液中血管抑素的水平在一定程度上可以反应膀胱移行细胞癌的发展及治疗情况。     

膀胱移行细胞癌中促凋亡基因bak mRNA的表达及意义

目的：研究促凋亡基因bak在膀胱移行细胞癌组织中的表达。探讨bak基因在膀胱移行细胞癌发生演变过程中的意义。方法：应用原位分子杂交方法检测52例膀光移行细胞癌组织的bak mRNA的分布与表达。结果：52例膀胱移行细胞癌组织中bak基因mRNA表达的阳性率为57．7％,其阳 率随膀胱癌病理分级,临床分期的上升而降低,结论：促凋亡基因bak在大多数膀胱移行细胞癌细胞中有不同程度的表达。bak基因可能参与膀胱移行细胞癌的凋亡调节,并与膀胱移行细胞癌组织的分化有关。     

人膀胱癌非P-糖蛋白介导的多重抗药性

目的：建立人膀胱癌耐阿霉素细胞系及研究它们的生物学特性及药物耐受性的机制。方法：采用人膀胱癌细胞系EJ，经递增阿霉素剂量的方法，历时一年，建立一株耐药亚株EJ／DOR，对其生物学特性及耐药机制进行了研究，并应用反转录PCR检测了MDR1，MRP和DAN TopoⅡ基因的表达。结果：EJ／DOR对阿霉素的相对耐受度较亲本细胞提高了14．3倍。对蒽环类，长春花属生物碱及DAN TopoⅡ靶制剂足叶乙甙有明显的交叉耐药性，但对顺铂，丝裂霉素无明显的交叉耐受性；耐药细胞对柔红霉素的细胞内聚集量显著减少；EJ／DOR并不表达MDR1基因，而MRP基因过表达，但细胞内DAN TopoⅡ基因表达低于亲本细胞。结论：细胞内DAN TopoⅡ基因表达下降及MRP基因过表达是EJ／DOR表现为多耐药受性亚型的主要原因，这种非P-gp介导的非经典型多耐药受性细胞为寻求包括阿霉素在内的化疗方案提供了良好的实验模型。     

MicroRNA-34a通过Notch1对膀胱肿瘤细胞株T24增殖的影响

目的 探讨膀胱肿瘤细胞株中microRNA-34a(miR-34a)与Notch1的相互作用关系以及过表达miR-34a对T24细胞增殖的影响.方法 通过生物信息学软件预测miR-34a与Notch1的作用位点,并通过荧光素酶实验验证两者的直接调控关系.在膀胱癌细胞株T24过表达miR-34a,采用实时定量PCR和蛋白印迹检测Notch1表达水平的变化;分别通过新型四唑氮盐(MTS)实验和流式细胞术检测细胞增殖、凋亡以及细胞周期的变化.结果 T24细胞中荧光素酶报告基因实验显示,miR-34a在膀胱癌细胞中能与报告基因结合,使萤火虫荧光强度减弱(P=0.006).过表达miR-34a后,T24细胞内源性Notch1的mRNA水平和蛋白水平均明显下调;T24细胞生长明显受抑(P＜0.001),并呈现一定时间依赖性;凋亡率增加(P=0.003),G0-G1期细胞显著增多(P=0.002).结论 过表达miR-34a能通过降低靶基因Notch1的表达,抑制膀胱肿瘤细胞的增殖.     

肿瘤坏死因子在前列腺癌细胞凋亡中的作用

目的 :研究参与维甲酸诱导的前列腺癌细胞DU - 1 4 5凋亡过程的相关基因。方法 :应用浓度为 1 0 - 5mol·L- 1 全反式维甲酸作用前列腺癌细胞系DU - 1 4 5细胞 36h和 72h ,诱导DU - 1 4 5细胞凋亡 ,光镜及电子显微镜观察细胞形态及结构的改变 ,并采用基于PCR的改良消减杂交技术克隆与凋亡相关的基因。结果 :在DU - 1 4 5细胞凋亡过程中 ,有大量TNF基因及其家族成员的参与。结论 :TNF家族基因在由全反式维甲酸诱导的前列腺癌细胞系DU - 1 4 5细胞凋亡过程中 ,起着相当重要的作用