应用单克隆抗体分析甲状腺球蛋白的抗原性

应用自制的10种抗人甲状腺球蛋白(HTg)单克隆抗体(McAb)对HTg 进行抗原性分析。7种McAb同时结合人和狗的甲状腺球蛋白(Tg),3种 McAb仅结合 HTg。根据竞争结合抑制试验的结果,可将McAb 分成反应性不同的5个组,其中8种 McAb对2-ME 处理的HTg的结合力显著下降,2种 McAb对 SDS 解聚及热变性HTg的结合力下降。Graves′病,桥本氏甲状腺炎等抗HTg自身抗体可抑制6种McAb对HTg的结合。这些结果提示:1.HTg分子上至少存在着5个抗原区域,一些抗原决定簇决定着种属特异性,另一些可能为哺乳动物共有。2.抗HTg McAb可以识别依赖二硫键的抗原决定簇。3.与抗HTg自身抗体反应的一些抗原决定簇,可能分布在一定的抗原区域内。     

恶性疟原虫单克隆抗体保护性机制的实验研究

疟疾疫苗的研究,目前主要集中在能诱发保护性反应的疟疾抗原上。获取纯的保护性抗原,结合遗传工程是发展疟疾疫苗的方向。已有两种方法可望得到保护性抗原。其一,应用长期暴露于疟疾感染并具有保护性的免疫血清,来分析,提取相应的抗原;其二,应用杂交瘤技术生产的保护性单克隆抗体(McAb),来分离、纯化特定的抗原。鉴于疟疾抗原成份的复杂性,疟疾感染时不仅能诱发保护性抗体反应,而且还能诱导病理性抗体的产生,但是,McAb具高度的特异性,并可持续不断地人工生产,经保护性McAb提取的保护性抗原,     

疟疾保护性单克隆抗体及抗原的鉴定

疟疾疫苗的研究目前主要集中在能诱发保护性反应的疟疾抗原上。获取纯的保护性抗原,结合遗传工程是发展疟疾疫苗的方向。已有两种方法可望得到保护性抗原。其一,应用长期暴露于疟疾感染并具有保护性的免疫血清,来分析、提取相应的抗原:其二、应用杂交瘤技术生产的保护性单克隆抗体(McAb),来分离、纯化特定的抗原。鉴于疟疾抗原成     

抗淋巴细胞单克隆抗体的临床应用

一、单克隆抗体的特点单克隆抗体(McAb)的最大特点在于抗原特异性.目前正有效地利用这点对很多精制困难的抗原制备McAb.对淋巴细胞上的许多抗原制备了一些McAb,这样不仅易于区别T细胞、B细胞,即使是其亚群也能容易区别.特别是抗T细胞亚群的McAb,     

用单克隆抗体分析霍乱弧菌菌体抗原的初步研究

<正> 用单克隆抗体(McAb)对微生物的抗原性鉴定和分析研究中,国内外已有不少报道。谢正旸等用霍乱弧菌McAb对霍乱弧菌快速诊断及其对抗原的特异性及敏感性进行了研究。然而,用单克隆抗体分析霍乱弧菌抗原性的研究尚未见报道。因此为了对霍乱的防治诊断、病原学及流行病学提供依据,我们用霍乱弧菌McAb对霍乱弧菌的抗原性进行研究。本文是用12株McAb检测50株不同血清型的El Tor型霍乱弧菌的抗原性,并初步分析了它们抗原决定簇的差异。     

抗淋巴细胞单克隆抗体的临床应用

一、单克隆抗体的特点 单克隆抗体(McAb)的最大特点在于抗原特异性。目前正在有效地利用这点,对很多精制困难的抗原制备McAb。对淋巴细胞上许多抗原也制备了一些McAb。这样不仅易于区别T细胞、B细胞,即使是其亚群也能容易区别。特别是抗T细胞亚群的McAb,在临床上也有许多应用的例子。本文叙述以这为重点。     

单克隆抗体对人甲状腺球蛋白抗原性的分析

人甲状腺球蛋白(HTg)是一种分子量660000道尔顿复杂的糖蛋白,与自身免疫性甲状腺疾病机制有关。由于HTg分子太大,目前对HTg抗原性方面等了解甚少。我们使用10种抗HTg单克隆抗体(McAb)为探针,对HTg的抗原性进行分析。 由于7种McAb可以同时结合人和狗的甲状腺球蛋白(Tg),余3种仅可结合HTg,故将10种McAb分成二类。根据McAb竞争抑制另一种McAb结合HTg能力的不同,将10种McAb分成反应性不同的5个组。其中第V组针对的抗原区域几乎包含着Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组7种     

单克隆抗体的免疫测定技术

抗血清是多克隆性的不均一抗体,单克隆抗体则与其相反,它的化学和免疫学性状是均一的,对一种抗原决定簇有很高的特异性.而且可以长期连续获得同一单克隆抗体(McAb).下面介绍应用McAb设计的新免疫测定技术.一、双侧同时结合法(Simultaneoustwo Site):双侧结合法(夹心法)一般是被检材料(包括被检抗原)和固相抗体及标记抗体的反应分两阶段进行.用针对抗原上不同的抗原决定簇的两种McAb同时与     

不同ELISA法对筛选单克隆抗体的影响

单克隆抗体(McAb)的筛选方法要求敏感性高、特异性强、快速简便。ELISA目前已成广为接受的一种筛选方法,其中以固相抗原筛选相应的McAb最常用。但一些文献指出当抗原吸附于固相载体表面时,那些位于和固相载体结合处的某些抗原决定簇由于未能暴露,因而就不可能筛选出识别这些抗原决定簇的McAb。我们在抗CEA McAb的筛选中,为了避免上述可能发生的漏选,采用固相多克隆CEA抗体,结合CEA抗原后,再用于筛选McAb的方     

用斑点酶联免疫吸附试验筛选抗恶性疟原虫单克隆抗体及检测恶性疟抗原

以往筛选抗恶性疟原虫(Pf)单克隆抗体(McAb)常用间接免疫荧光(IFA)或ELISA,以培养的原虫为检测抗原。所得McAb检测培养的Pf抗原效果较好,但检测病人血中Pf抗原时阳性率较低。抗原分析显示这些McAbs多是针对滋养体、裂殖体或裂殖子抗原。为了得到能用于诊断的抗环状体期McAb,我们直接以病人血中Pf为检测抗原,用斑点酶联免疫吸附试验(DotELISA)进行筛选,结果如下。     

用鼠型单克隆抗体鉴定欧洲肾综合征出血热病毒抗原变异特点

本文报道了应用Puumala(Puu)病毒自然宿主—(?)鼠的脾细胞制备抗Puu单克隆抗体(McAb)的方法,并用所制的McAb对11株HFRS病毒的抗原变异进行了分析。Puu病毒为欧洲流行性肾病的病原体。近年来,尽管制备了许多抗汉坦病毒的鼠McAb,     

分析不同单克隆抗体识别的表位特异性的三种ELISA方法比较

<正> 在单克隆抗体(McAb)的特性鉴定中,确定其对抗原构象表位(或抗原决定簇)的特异性是十分重要的。它可为抗原分子的结构和功能分析以及进行生物学方面的研究提供必要的实验依据。本文采用McAb相加试验、竞争抑制试验和双位点夹心法三种简便的ELISA,分析了已建立的抗甲胎     

用单克隆抗体研究和分析霍乱弧菌抗原(摘要)

本文用ELISA以12株单克隆抗体(McAb)对55株EI Tor霍乱弧菌和用遗传学方法突变的28株霍乱弧菌的菌体抗原进行了研究,同时与四种常规分型方法进行对比试验。结果用12株McAb可将55株EI Tor霍乱弧菌分成11种抗原决定簇和18个McAb型,将遗传学方法的突变株分成9种抗原决定簇和10个McAb型。其中一株McAb 2B_1H_1F_3能识别所有55株 EI     

表面表位包埋法制备肿瘤表面抗原P185neu/c-erbB-2单克隆抗体及其性质研究

目的 :细胞表面表位包埋法 (SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径。由于P185 neu c erbB 2 是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志 ,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好 ,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特性以便于临床。方法 :采用细胞表面表位包埋法免疫BALB C小鼠 ,常规杂交瘤技术进行细胞融合 ,ELISA法测定 ,有限稀释法克隆化。结果 :筛选得到 3株能稳定分泌抗人癌基因erbB 2产物P185蛋白的McAb杂交瘤细胞。经间接免疫过氧化物酶染色和流式细胞术分析证明该McAb特异性与P185阳性细胞膜结合 ,而不与结构类似的EGFR膜阳性细胞结合。免疫印迹实验证明这些McAb特异地与P185蛋白结合 ,病理切片免疫组化结果证明该单抗对乳腺癌组织呈特异膜阳性反应。结论 :SEM法制备的肿瘤表面抗原P185的McAb杂交瘤具有很好的用于临床诊断肿瘤抗原P185的价值及工程化改造的前景。     

用菌体抗原筛选霍乱弧菌单克隆抗体的ELISA

<正> 众所周知,ELISA常用作筛选和鉴定可溶性抗原单克隆抗体(McAb)的常规方法。但对颗粒性抗原的淋巴细胞杂交瘤产生的McAb,则缺少准确、敏感、微量、快速的筛选和鉴定的检测系统。Stocken(1979)Nachamkin(1981)曾将细菌等细胞性抗原贴附于微孔塑料板上进行固相免疫测定。我们在     

人肺癌单克隆抗体的制备及其抗原分子的鉴定

用人肺癌细胞株A549的细胞膜蛋白作为免疫原,采用杂交瘤技术成功制备了抗人肺癌细胞单克隆抗体McAb4E7,并利用双向电泳、免疫印迹杂交、肽指纹图谱和MALDI-TOF-MS串连质谱分析鉴定其相关抗原分子,发现其相关抗原在人肺癌细胞株A549及人肝癌细胞株HepG2中有表达,且在A549细胞中表达量较高。最后得到一个在A549细胞中表达的与单克隆抗体McAb4E7特异性结合的蛋白,并鉴定出这个蛋白是ATP合成酶β亚基,从而证明了ATP合成酶β亚基就是肺癌单克隆抗体McAb4E7的靶抗原,其可作为肺癌具有潜在治疗意义的靶点。     

抗ClqC链单克隆抗体对补体Cl的活化

Golan等新近应用抗人Clq单克隆抗体(McAb)证实,当Clq与Clr和Cls或与免疫复合物结合后,Clq分子内有新抗原生成.本文作者为了在此基础上作进一步探讨,观察了一株抗人ClqC链McAb对人补     

抗人甲胎蛋白单克隆抗体的研制及其应用

本文报告将自制的人甲胎蛋白(AFP)抗原免疫小鼠,采用常规杂交瘤技木融合小鼠的脾细胞和SP2/0细胞。经有限稀释法克隆出九株分泌抗人AFP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。分别用血凝抑制试验、琼脂双扩散、ELISA和放射免疫分析等方法鉴定了McAb对抗原的表位特异性、亲和力及其稳定性和小鼠Ig亚类属性。实验结果表明几种McAb分别作用于AFP抗原上相同或不同的抗原表位。其中大多数McAb具有较高的亲和力。抗原表位特异性不同的McAb在免疫沉淀反应中有协同作用。本文报告的AFP McAb双位点夹心ELISA,对一些临床标本的检测结果与AFP放射免疫试剂盒的结果有着良好的相关性。     

空肠弯曲菌共同抗原单克隆抗体的研制及其在细菌检验中应用的研究

应用B-淋巴细胞杂交瘤技术,建立了5株稳定分泌抗空肠弯曲菌共同抗原(CA)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。其中4株的McAb针对CA中的耐热抗原成分,1株的McAb针对CA中的不耐热抗原成分。应用32种其它细菌对这些McAb的特异性检查表明,除与幽门弯曲菌发生交叉反应外,与其它细菌均为阴性反应。应用不同地区、不同来源的516株空弯菌对这些Mc-Ab与空弯菌的反应性进行了检查,结果均为阳性反应。应用BA-ELISA对人(140)、     

单克隆抗体在轮状病毒抗原分析和病原诊断上的应用

轮状病毒(RV)是人类及其他哺乳类、禽类急性胃肠炎的主要病原。RV性腹泻主要见于2岁以下婴幼儿，对新生儿、老年人及免疫缺陷者亦可感染，最近在我国还发现了引起成人腹泻流行的成人腹泻轮状病毒。显然研制出RV疫苗对预防腹泻、保证公众健康是非常必要的。单克隆抗体(McAb)是针对复杂抗原上单一决定基的抗体，鉴予这一性质，McAb可以从分子水平进行抗原定位，分析抗原结构及与功能的关系，对予病毒的病原诊断分型，疫苗研制等有重要作用。国外近几年对RV McAb研究较多，而国内仅见于潘兆千等的报道。本文就RV McAb在抗原分析及病原诊断分型上的应用做一综述。