波棱瓜子总木脂素对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用及机制探讨

目的:本实验为了研究藏药波棱瓜子总木脂素对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用及其机制。方法:用56度北京红星二锅头白酒建立小鼠急性酒精性肝损伤模型,用波棱瓜子总木脂素35mg/ml,25mg/ml和15mg/ml作为实验组,实验第31天,取肝脏,计算肝质量指数,测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,测定肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量、黄嘌呤氧化酶(XOD)、超氧化物岐化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶并且进行肝脏病理学检查。结果:与模型组比较,波棱瓜子总木脂素25mg/kg降低小鼠血清AST和ALT的活力效果最为显著;波棱瓜子总木脂素35、25mg/kg提高小鼠肝脏Na+-K+-ATP酶、GSH-Px和SOD的活力,波棱瓜子总木脂素35、25mg/kg降低小鼠肝脏XOD和MDA的活力;HE显示各组肝细胞不同程度的损伤,部分肝细胞坏死,与模型组比较波棱瓜子总木脂素各组细胞破坏程度较轻。结论:波棱瓜子总木脂素对小鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用,其机制与其提高机体抗氧化作用相关。     

藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用及机制探讨

目的:研究藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用及其机制。方法:60只雄性Wistar大鼠按体质量随机分成正常对照组、模型组、易善复(95 mg/kg)阳性对照组及波棱瓜子总木脂素高(400 mg/m L)、中(200 mg/m L)、低(100 mg/m L)剂量组。各给药组每日上午9点给予2 m L相应药物,0.5 h后,除正常对照组外各组给予56度白酒灌胃,连续造模8 w后,测定各组大鼠血清ALT、AST及肝脏GSH-Px、MDA、SOD、GSH、CAT、TG、ADH、ALDH2水平。荧光定量PCR法测定大鼠肝微粒体CYP2E1 mRNA表达,蛋白质印迹法(Western blot)测定肝微粒体CYP2E1蛋白表达。观察肝组织病理学改变。结果:与模型组比较,除低剂量组TG及高剂量组GSH-Px差异无统计学意义(P>0.05)外,波棱瓜子总木脂素各组大鼠血清ALT、AST水平显著降低;肝组织MDA、TG、ADH水平及肝微粒体CYP2E1 mRNA和蛋白表达显著降低;肝组织SOD、GSH、GSH-Px、CAT、ALDH2水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。HE显示与模型组比较波棱瓜子总木脂素各组肝组织破坏程度较轻。结论:藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠慢性酒精性肝损伤有保护作用。     

藏药波棱瓜子的文献查考

通过对古代、现代藏医药文献的考察整理研究,发现波棱瓜子早在公元8世纪就有应用。文献记载表明,古今用药种类基本一致,少有混乱。但也有用木鳖子、王瓜、西藏赤爬等葫芦科其他属植物种子误作波棱瓜子的情况。为藏药波棱瓜子的开发和临床应用提供了参考依据。     

外翻肠囊法研究波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂的大鼠肠吸收特性

目的利用肠外翻模型,研究波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂(total lignans of Herpetospermum caudigerum nanosuspension,HTL-NS)在大鼠体外的肠吸收特性,并与波棱瓜子总木脂素混悬剂(total lignans of Herpetospermum caudigerum coarse suspensions,HTL-CS)进行对比。方法以波棱甲素与波棱素在大鼠的肠吸收参数为指标,考察不同质量浓度HTL-NS在大鼠十二指肠、空肠、回肠的吸收状况。结果 HTL-NS中2种成分在各肠段的累计吸收量、吸收速率常数和表观渗透系数随着质量浓度的增加而增加,并且明显高于HTL-CS(P0.05或P0.01);波棱甲素与波棱素在空肠吸收最好,而十二指肠与回肠的吸收无显著性差异(P0.05)。结论 HTL在体内的吸收可能为被动吸收,HTL-NS能有效改善HTL肠吸收。     

波棱瓜子化学成分的研究

目的研究波棱瓜子Herpetospermum caudigerum Wall的化学成分。方法波棱瓜子95%乙醇提取物的石油醚部位采用硅胶、Sephedex LH-20、制备薄层TLC和半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到9个化合物,分别鉴定为亚麻酸(1)、亚油酸(2)、9,11,15-十八碳三烯酸(3)、甘油三亚油酸酯(4)、9-十八碳烯酸(5)、1-O-二十六烷酰基甘油酯(6)、(+)-(7'S,7″S,8'R,8″R)-4,4',4″-trihydroxy-3,5',3″-trimethoxy-7-oxo-8-ene [8-3',7'-O-9″,8'-8″,9'-O-7″] lignoid (7)、α-菠甾醇(8)、波棱甲素(9)。结论化合物3、4、6、8首次从该植物中分离得到。     

藏药波棱瓜子抗肝病现代研究进展

藏药波棱瓜Herpetospermumcaudigerum子是藏医临床治疗肝胆疾病的常用药物之一。现代研究表明,波棱瓜子具有保肝降酶、抗乙肝病毒及抗肝纤维化等药理作用,其抗肝病主要药效物质为木脂素类成分;脂肪酸类、多糖类等成分也有一定的保肝降酶活性。对波棱瓜子抗肝病药效物质基础、药理作用及制剂研究等方面的研究进展进行综述,以期为波棱瓜子在抗肝病中的研究、应用及制剂开发提供借鉴和思考,促进民族医药的现代研究与发展。     

波棱瓜子乙酸乙酯提取物对小鼠免疫性肝损伤的影响

目的:观察藏药波棱瓜子乙酸乙酯提取物对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)联合诱导免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法:采用卡介苗联合脂多糖诱导造成免疫性肝损伤小鼠模型,ig给予波棱瓜子乙酸乙酯提取物(0.25、0.35、0.51g/kg)连续12d,比较各组脏器指数,测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、一氧化氮(NO)的含量及肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,HE染色切片观察肝组织病理学变化。结果:波棱瓜子乙酸乙酯提取物(0.25、0.35、0.51g/kg)可显著降低免疫性肝损伤小鼠的肝脏指数及脾脏指数;改善肝脏组织病理学变化;降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST水平;升高肝匀浆中SOD活性,降低MDA含量;但对血清中NO含量无显著影响。结论:波棱瓜子乙酸乙酯提取物对BCG+LPS诱导小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用。     

制备波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂

目的制备波棱瓜子(Herpetospermum caudigerum)总木脂素纳米混悬剂,优化其处方并考察其体外溶出行为。方法采用p H依赖的溶解-沉淀法联合高压均质技术制备纳米混悬剂,Box-Behnken设计-响应面法优化处方,同时对其形态、粒径及晶型结构进行表征。然后,采用桨法测定总木脂素纳米混悬剂的体外溶出度。结果以总木脂素10 mg/m L,PVP K30 3.3 mg/m L,SDS 2.1 mg/m L制得的波棱瓜子总木脂素纳米混悬剂的平均粒径为(306.15±7.06)nm,扫描电镜显示,其呈不规则球形,大小较均匀;X射线衍射图表明,总木脂素在纳米混悬前后,晶型无显著变化,以无定型状态存在;体外溶出实验表明,该纳米混悬剂的溶出量明显高于其物理混合物。结论该制备工艺简单、稳定,适用于弱酸弱碱类难溶性药物纳米混悬剂的制备。     

藏药波棱瓜子总木脂素对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的通过研究藏药波棱瓜子总木脂素(TLHPS)对大鼠肝星状HSC-T6细胞的增殖抑制作用及诱导其凋亡的作用,进一步探讨TLHPS抗肝纤维化的作用机制。方法实验分为对照组,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组,阳性药秋水仙碱0.1μg/mL组。用加入各组药物的培养基分别培养HSC-T6细胞24、48、72 h,采用CCK8法检测各组细胞24、48、72 h的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,Western blotting法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、核转录因子-κB(NF-κB)的表达水平。结果与对照组相比,TLHPS 10、20、30、40μg/mL组对HSC-T6细胞24、48、72 h时的增殖抑制率明显增高(P0.01),且各组HSC-T6细胞早期凋亡率与晚期凋亡率明显升高(P0.05,0.01),G0/G1期细胞数明显增多(P0.01),G2/M期细胞数无明显差异(P0.05),S期细胞数明显减少(P0.01)。Western blotting结果显示,与对照组相比,TLHPS10、20、30、40μg/mL组Bcl-2蛋白表达明显降低(P0.05,0.01),TLHPS 40μg/mL组Bax蛋白表达明显升高(P0.01),TLHPS 20、30、40μg/mL组NF-κB表达明显降低(P0.01)。结论 TLHPS抗肝纤维化的作用机制可能是通过降低Bcl-2、NF-κB的表达抑制肝星状细胞增殖并诱导其凋亡。     

波棱瓜子多糖对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:观察波棱瓜子多糖对刀豆球蛋白A(Con A)诱导的免疫性肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法:治疗组分别ig给予波棱瓜子多糖(0.71、0.99、1.44 g/kg),连续8d,采用一次性尾静脉注射ConA 30mg/kg诱导造成免疫性肝损伤小鼠模型。比较各组脏器指数,测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)的含量及肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,用苏木素-伊红染液(HE)染色切片观察肝组织病理学变化。结果:波棱瓜子多糖(0.71、0.99、1.44g/kg)可明显降低免疫性肝损伤小鼠的肝脾脏器指数;降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST、LDH的活性以及NO、IL-6的含量;升高肝匀浆中SOD的活性,降低MDA的含量;并在不同程度上改善肝脏组织病理学变化。结论:波棱瓜子多糖1.44g/kg剂量组各指标较模型组均有显著性差异,其保肝机制可能与其抗炎、抗氧化、清除自由基以及免疫调节有关。     

波棱瓜子脂肪油抗免疫性肝损伤的谱效关系研究

目的:探讨波棱瓜子脂肪油(HO)抗卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)诱导免疫性肝损伤的药理作用与其化学成分之间的关系,揭示其抗肝损伤的有效物质基础。方法:采用GC-MS建立9批HO的GC指纹图谱,并对各个峰进行标定,获得HO化学成分数据;采用BCG+LPS诱导造成免疫性肝损伤小鼠模型,分为空白组、模型组及9个给药组,给药组ig给予HO(7mL·kg-1)连续12 d,测定小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,获得HO药理活性数据,将两者进行逐步多元回归分析,揭示HO抗肝损伤的有效物质基础。结果:建立了波棱瓜子脂肪油气相指纹图谱,并标定7个色谱峰;抗免疫性肝损伤药效实验中9个给药组均有不同程度的抗肝损伤作用,逐步回归分析表明HO抗免疫性肝损伤药理活性与其亚油酸、油酸、亚麻酸的含量成正相关。结论:HO对BCG+LPS诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用,可能与其含有不饱和脂肪酸有关,增强小鼠抗氧化活性。     

波棱瓜子有效组分配伍对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:探究波棱瓜子中活性成分乙酸乙酯提取物(HE)与脂肪油(HSO)配伍对刀豆蛋白A(Con A)诱导的免疫性肝损伤小鼠的保护作用及其机制。方法:将小鼠80只随机区组分为8组,即空白组,模型组,联苯双酯组(阳性组),HSO组,HE组,组分配伍1∶1,1∶2,2∶1组,每组10只。治疗组分别灌胃(ig)给予波棱瓜子HE,HSO及二者不同剂量配伍药液连续8 d,采用尾静脉一次性注射Con A 30 mg·kg-1诱导造成小鼠免疫性肝损伤模型。造模8 h后采血,制备肝匀浆。计算小鼠的肝脾系数;酶联免疫法(ELISA)检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),一氧化氮(NO)及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)等生化指标的活性及含量;同时对肝组织进行病理学检查。结果:波棱瓜子各治疗组均可降低免疫性肝损伤小鼠的肝脾脏器指数;降低小鼠肝损伤血清ALT,AST水平及NO的含量;增强肝匀浆中SOD活性,降低MDA的含量;减轻Con A对肝组织的病理损伤。其中有效组分HSO-HE 2∶1配伍组各指标较模型组均有显著性差异,护肝作用最佳。结论:波棱瓜子HE与HSO配伍护肝作用优于单一组分,提示配伍时具有协同增效的作用,其保肝机制可能与其抗炎、抗氧化以及清除自由基有关。     

波棱瓜子乙酸乙酯部位抗免疫性肝损伤活性谱效关系分析

目的:探讨波棱瓜子乙酸乙酯部位HPLC特征图谱与其抗免疫性肝损伤活性的相互关系。方法:采用硅胶柱色谱分离结合均匀设计获得不同化学成分组成的9批波棱瓜子乙酸乙酯部位样品,应用HPLC建立9批样品特征图谱并通过聚类分析评价9批样品的差异性;建立卡介苗+脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤模型测定给药组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及肝组织匀浆中丙二醛(MDA)含量;结合灰色关联分析法及偏最小二乘回归分析法(PLSR)研究其谱效相关性。结果:9批不同组合的样品HPLC图谱有明显差异,从其共有模式中标定了16个特征峰。与模型组相比,9批波棱瓜子给药组小鼠血清中ALT,AST活性和肝匀浆中MDA含量明显降低。谱效相关性研究发现6,7,10,15,16号峰(分别代表化合物波棱甲素、波棱素、波棱醇、波棱酮、波棱醛)是与抗免疫性肝损伤作用关联性较大的正相关色谱峰。结论:各样品对免疫性肝损伤均具有治疗作用,其护肝作用主要活性成分为波棱甲素、波棱素、波棱醇、波棱酮、波棱醛。     

甘遂醋制前后对癌性腹水模型大鼠泻水逐饮功效比较

目的考察甘遂醋制前后对癌性腹水模型大鼠泻水逐饮功效的差异。方法以癌性腹水模型大鼠为研究对象,呋塞米为阳性药,分组连续7 d ig生、醋甘遂粉末及醇提加水提物,考察其对大鼠尿量,腹水量,尿钠、钾、氯离子水平,尿液p H值,肾素-血管紧张素II-醛固酮系统(RAAS),抗利尿激素(ADH)水平的影响。结果与模型组比较,各给药组大鼠尿量显著增加(P0.05、0.01);腹水量,尿钠、钾、氯离子水平,尿液p H值显著减少(P0.01);血清肾素(PRA)、血管紧张素II(Ang II)、醛固酮(ALD)、ADH水平显著降低(P0.05、0.01)。其中生、醋甘遂粉末给药功效最为显著,且两组间无显著性差异。结论生、醋甘遂均具显著的泻水逐饮功效,对癌性腹水模型大鼠有良好的症状改善作用。     

肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量测定

目的:建立肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量方法.方法:采用紫外分光光度法,以去氢二异丁香酚为对照品,测定波长275 nm.结果:去氢二异丁香酚质量浓度在1.5～9.0 mg·L-1与吸光度呈良好线性关系,r=0.999 8,平均回收率97.6％(n=6),RSD 1.2％.结论:建立的方法简便、快速、重复性好.     

菊苣降尿酸有效成分及机制研究

目的初步探讨菊苣降尿酸的有效成分,并对其降尿酸机制、安全性进行初探。方法迪法克鹌鹑50只(雄性),随机分为5组,即对照组、模型组、苯溴马隆组(20 mg/kg)、混合物大剂量组(菊苣酸、绿原酸、秦皮甲素剂量均为150 mg/kg)、混合物小剂量组(菊苣酸、绿原酸、秦皮甲素剂量均为50 mg/kg),每组10只。除对照组喂鹌鹑普通饲料外,其余各组均给予高嘌呤饲料(普通饲料拌入酵母提取物15 g/kg)复制高尿酸血症模型。给药3周,动态观察鹌鹑血清尿酸(UA)水平、肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平、肾功能指标肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平、UA代谢相关酶黄嘌呤氧化酶(XOD)和腺苷脱氨酶(ADA)活性的变化。结果造模期间,与对照组相比,第7~21天模型组鹌鹑血清UA水平显著升高(P0.05);与模型比相比,第7~21天混合物大、小剂量组鹌鹑血清UA水平显著降低(P0.05);混合物大、小剂量组鹌鹑血清的ALT、AST、Cr、BUN水平未显著升高(P0.05),且各给药组鹌鹑血清XOD、ADA活性均显示不同程度的抑制。结论菊苣降尿酸活性成分可能为绿原酸、秦皮甲素、菊苣酸,安全性较好,其发挥药效的机制可能与抑制XOD、ADA活性有关。     

白及主要有效成分特征及其影响因素研究进展

白及Bletillae Rhizoma为兰科多年生植物白及的干燥块茎,具有较高的药用价值。为了满足市场的需求,我国许多省份加大了对白及的人工种植,而人工种植白及的品质是我国白及产业高质量发展的基本保障。白及的品质主要由白及多糖、白及苷、总酚等有效成分决定。通过对白及块茎中白及多糖、白及苷、总酚在不同省份、种植年限、年龄的分布特征进行综述,讨论白及块茎中主要有效成分的影响因素。并探讨白及地上部分和须根的药用潜力,及对白及地上部分、块茎、须根下一步在品质、种植方面的研究内容进行展望,为白及地上部分、块茎、须根的资源合理开发利用提供参考依据。     

不同株系一年生石斛苗长势及有效成分比较

目的 通过比较9个不同株系一年生石斛苗(T5、T3、T2、YD-1、W-3、GDYS、TN、W-1和T4)的生长势及有效成分量,筛选具有较高开发利用价值的石斛株系。方法 采用生理学及生药学常规方法测定石斛苗生长情况和有效成分量,并用SPSS 11.5统计分析软件对有效成分的测定值进行系统聚类分析。结果 T4长势最好,T2长势最差,其余株系介于其间;聚类分析将9个株系分为3类:第1类包括GDYS、TN、T5、T4,该类石斛的多数有效成分的量相近且高于其他株系;第2类包括W-3、YD-1、T3,这类石斛的有效成分平均量位于第2位;第3类包括W-1和T2,这2个株系的多数有效成分的量较低。结论 GDYS、TN、T5和T4可作为优良株系进行规模化生产;W-3、YD-1、T3和T2可作为种质资源保存,不宜大规模种植;W-1的生物碱和灰分量较高,可作为专门的提取原料,也可作为回交亲本用于改良优良株系的个别不良性状。     

醋甘遂不同提取部位对癌性腹水大鼠泻水逐饮功效比较研究

目的 考察醋甘遂不同提取部位对癌性腹水模型大鼠泻水逐饮功效的影响。方法 以Walker-256细胞株制备癌性腹水大鼠模型,分组ig给予醋甘遂粉末、醋甘遂醇提物、醋甘遂水提物和醋甘遂醇提加水提物340 mg/kg(生药量),连续7 d;给药后测定大鼠尿量、腹水量,试剂盒法检测尿液中钠、钾、氯离子浓度,检测尿液pH值,测定血清中肾素(PRA)、血管紧张素II(Ang II)及醛固酮(ALD)水平。运用UPLC-QTOF MS联用技术,初步分析醋甘遂各提取部位的成分差异。结果 与对照组比较,模型组大鼠尿量显著减少(P< 0.05);腹水,尿液中钠、钾、氯离子水平,尿液pH值,血清PRA、Ang II、ALD水平均显著增加(P< 0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠腹水均有减少的趋势;阳性药(呋塞米)组及醋甘遂粉末、醇提加水提组大鼠尿量显著增多(P< 0.05);醋甘遂水提组大鼠尿钠离子显著降低(P< 0.05);呋塞米组及醋甘遂粉末、醇提物、醇提加水提物组大鼠尿液中钠、钾、氯离子水平及尿液pH值,血清PRA、Ang II、ALD水平均显著降低(P< 0.05、0.01)。醋甘遂醇提物及醇提加水提物中均检测到二萜类成分,醋甘遂水提物中二萜类成分较少。结论 醋甘遂粉末与醋甘遂醇提加水提物对癌性腹水模型大鼠泻水逐饮作用较为显著,且二者无显著性差异,而醋甘遂水提物作用较弱,为醋甘遂临床用药多入丸散提供依据。醋甘遂二萜类成分可能是其泻水逐饮活性成分。