加校正因子的RP-HPLC法测定不同方法生产的7-氨基头孢烷酸中有关物质

目的建立一种能够准确测定7-氨基头孢烷酸中有关物质的方法,同时进行不同方法生产的产品的含量测定及有关物质检查。方法采用高效液相色谱法。使用C18色谱柱(SB-C18,5μm,4.6mm×250mm);以磷酸盐缓冲液(取5g磷酸氢二钾和5g磷酸二氢钾溶解于1000m L水中,用磷酸调节流动相p H值至6.0)—乙腈(92:8)为流动相;检测波长为254nm;柱温为35℃;进样量20μL。结果 7-氨基头孢烷酸在504~0.02534μg/m L范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9991;去乙酰7-氨基头孢烷酸在10.52~0.0263μg/m L范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9996;去乙酰氧7-氨基头孢烷酸在9.66~0.02415μg/m L范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9998;头孢菌素C在10.5~0.02625μg/m L范围内,线性关系良好,相关系数R2为0.9998。溶液的稳定性及进样精密度、日内精密度、重复性、专属性良好。去乙酰7-氨基头孢烷酸、去乙酰氧7-氨基头孢烷酸和头孢菌素C的校正因子分别为0.80、0.82、1.67。结论此方法可以准确测定7-氨基头孢烷酸中的含量,并采用校正因子法计算有关物质的含量。不同方法生产的7-氨基头孢烷酸的含量及有关物质无明显差异。     

3-(1-甲基-5-甲硫基-1-H-四氮唑)-氨基头孢烷酸二苯基亚甲酯的合成研究

以氨基头孢烷酸为原料合成3-(1-甲基-5-甲硫基-1-H-四氮唑)-氨基头孢烷酸二苯基亚甲酯的研究,目的是通过优化反应条件,简化操作,提高产率,降低合成成本。通过对溶剂、催化剂用量、投料比、反应温度和反应液浓度等条件的优化,以两步80%左右合成收率制备3-(1-甲基-5-甲硫基-1-H-四氮唑)-氨基头孢烷酸二苯基亚甲酯。     

板蓝根化学成分的研究(Ⅰ)

目的 从板蓝根中分离化学成分.方法 将板蓝根的95%乙醇提取物经硅胶吸附,不同溶剂洗脱部分经硅胶柱层析分离纯化,测定所得化合物的理化常数和波谱数据,鉴定化学结构.结果 从石油醚部位分得5个化合物:β-谷甾醇十二烷酸酯(Ⅰ)、十七烷酸(Ⅱ)、棕榈酸(Ⅲ)、豆甾醇(Ⅳ)、β-谷甾醇(Ⅴ).结论 化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ为首次从板蓝根药材中分离.     

茸毛木蓝化学成分研究

目的 研究少数民族用药茸毛木蓝的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、薄层色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定单体化合物的结构.结果 从茸毛木蓝中分离得到10个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、羽扇烯酮(2)、棕榈酸甲酯(3)、羽扇豆醇(4)、豆甾烷-3-酮(5)、表儿茶素(6)、7,3′,5′-三羟基二氢黄酮(7)、胡萝卜苷(8)、豆甾-4-烯-3-酮(9)和β-香树精(10).结论 所有化合物均首次从该植物中分离得到,其中化合物3、5、6、7、9、10为首次从该属植物中分离得到.     

毛细管电泳分析7-氨基头孢霉烷酸生产过程

建立了高效毛细管电泳分析法检测7-氨基头孢霉烷酸生产过程.采用未涂层石英毛细管柱,缓冲液为0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH 8.0),运行电压30kV,检测波长254nm.7-氨基头孢霉烷酸、头孢菌素C和戊二酰基-7-氨基头孢霉烷酸的线性范围(mg/ml)分别为0.05～3(r=0.998)、0.1～3.5 (r=0.992)和0.1～5 (r=0.996),迁移时间和峰面积的RSD分别为0.5%、1.0%、0.6%和2.2%、3.0%、2.4%.     

人参化学成分的研究——12.人参脂溶性成分的研究

鲜人参根(Panax ginseng C.A.Meyer)的醚溶性部分有较强的抗炎作用。从该部分中用砖胶低压柱层析,分得9种单体,经UV、IR、MS及GC等方法鉴定了7种化学结构,分别为二十九烷(1)、三棕榈酸甘油脂(2)、人参萜醇(4)、三亚油酸甘油酯(5)、棕榈酸(6)、β-谷甾醇(7)、α,γ-二棕榈酸甘油酯(9)。其中化合物(1)、(2)、(5)、(9)是首次从人参中分离出的已知成分、化合物(4)系首次在国内分离得到的已知成分。     

HPLC法测定α-硫辛酸注射剂中杂质6,8-上硫辛烷酸的含量

目的 建立α-硫辛酸注射液中有关物质:6,8-上硫辛烷酸的含量测定方法.方法 采用HPLC色谱法进行测定,色谱柱为Sepax C18(150mm×4.6mm,5μm)柱;流动相为5mmol/L的磷酸二氢钾溶液(pH调至3.1)-甲醇-乙腈(50∶42∶8);流速为1.5mL/min;检测波长为215nm.结果 6,8-上硫辛烷酸在0.3～4.5μg/mL范围,呈良好的线性关系,线性方程为y=9588x-2899,R2=0.999;检测限达到2ng(S/N≥3),定量限为12ng(S/N≥10),3批小试和进口市售中α-硫辛酸注射液中6,8-上硫辛烷酸的平均百分含量分别为0.03％,0.03％,0.04％和0.167％,均未超过α-硫辛酸含量的0.2％.结论 所建立的已知杂质6,8-上硫辛烷酸的HPLC法能够快速、灵敏、准确测定6,8-上硫辛烷酸的含量,可适用于α-硫辛酸注射剂内该杂质的检测.     

头孢克肟的合成工艺研究

目的 优化头孢克肟的合成工艺.方法 以7-氨基-3-乙烯基头孢烷酸与2-(2-氨基-4-噻唑)-2-[[(z)-(叔丁氧羰基)甲氧]亚氨]-乙酸苯并噻唑硫酯为起始原料经酰胺化、水解反应得目标化合物.结果 目标化合物经红外光谱和核磁共振氢谱确证化学结构,总收率80%,纯度99.2%.结论 该制备过程操作简单,收率高,易于实现工业化.     

土贝母化学成分的分离与鉴定

目的研究中药土贝母的化学成分.方法用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱法进行分离纯化,通过理化性质及光谱数据,结合化学反应确定化合物的结构.结果分离得到7个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、胡萝卜苷(Ⅱ)、胡萝卜苷棕榈酸酯(Ⅲ)、β-谷甾醇棕榈酸酯(Ⅳ)、5-羟甲基糠醛(Ⅴ)、麦芽酚(Ⅵ)、正丁基-β-D-吡喃果糖苷(Ⅶ).结论除化合物Ⅵ外,其他化合物均为首次从该植物中分离得到.     

银合欢叶的化学成分研究

目的 研究银合欢叶的化学成分.方法 利用硅胶柱层析分离、纯化银合欢叶的乙酸乙酯部位,并通过理化性质和TLC、UV、IR、1HNMR、13CNMR、MS等方法鉴定化合物的结构.结果 分离得到5个化合物,分别鉴定为三十一烷醇(Ⅰ)、十八烷酸(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖(Ⅳ)和胡萝卜苷(Ⅴ).结论 化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ均为首次从银合欢叶中分离出.     

软骨藻酸对H4细胞氨基酸释放和Ca2+浓度的影响

目的　研究软骨藻酸 (domoicacid)对H4细胞的兴奋性、抑制性氨基酸释放和胞内游离Ca2 ( [Ca2 ]i)浓度的影响。方法　应用高效液相色谱 (HPLC)和荧光分光光度计检测 0、0 0 64、0 64和 6 4μmol/L软骨藻酸作用于细胞 2h后的兴奋性、抑制性氨基酸释放和 [Ca2 ]i浓度。结果　天冬氨酸和谷氨酸 :中、高剂量组均高于对照组 ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ;甘氨酸 :仅高剂量组高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;γ 氨基丁酸 :低、中和高剂量组均低于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;兴奋性氨基酸 /抑制性氨基酸 :低、中和高剂量组均高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。胞内[Ca2 ]i :低、中和高剂量组分别为 ( 2 0 8 65± 11 0 1)、( 3 42 3 1± 15 0 8)和 ( 5 81 3 6± 17 2 4)nmol/L ,高于对照组 [( 14 3 2 5±11 97)nmo1/L] ,差异有显著性 (P <0 0 1)。兴奋性氨基酸与 [Ca2 ]i浓度有显著的正相关性 (r =0 93 2 0P <0 0 1)。结论　软骨藻酸能引起H4细胞兴奋性和抑制性氨基酸释放和胞内 [Ca2 ]i变化 ,这种变化可能是软骨藻酸兴奋性神经毒性的重要机制     

The synthesis of tritiated (R)‐2‐methoxy‐N‐n‐propyl‐nor‐apomorphine (MNPA)

A method for the preparation of [³H]‐MNPA ((R)‐2‐methoxy‐N‐n‐propyl‐norapomorphine) has been developed addressing the regioisomer problem as well as the oxidation problem. (R)‐2, 10, 11‐trihydroxy‐N‐n‐propyl‐norapomorphine was protected with 10, 11‐dibenzyl or 10, 11‐acetonide. The pure precursor was then methylated using [³H]‐methyliodide. The product was isolated after deprotection and high‐pressure liquid chromatography (HPLC) purification. Ascorbic acid was used as an antioxidant in the HPLC eluent and the stock solution. Characterization of the intermediates and products with ³H‐ and ¹H‐NMR was performed. A specific activity of 3.1 TBq/mmol (83.8 Ci/mmol) and 98.9% purity was obtained. Copyright © 2007 John Wiley & Sons, Ltd.     

中药红曲中氨基酸和脂肪酸的分析

目的：考察中药红曲中氨基酸和脂肪酸的含存情况。方法：采用氨基酸自动分析仪进行氨基酸的分析,采用气相色谱仪进行脂肪酸的分析。结果：国内8个产地及自制新红白H18中含有19种氨基酸,其中有10种药用氨基酸（48％～63％）,7种人体必需氨基酸（29％～45％）,游离氨基酸的含量（0．81％～1．14％）约为其发酵培养基粳米的15倍～21倍。国内8个产地红曲中多烯不饱和脂肪酸约为总脂肪酸的16％～27％,而新红白H18中多烯不饱和脂肪酸约为总脂肪酸的48％。结论：红曲中富含有多种游离氨基酸及多烯不饱和脂肪酸,新红曲H18与各地产红曲在脂肪酸化学成分的相对百分含量上有较大区别。提示,新红曲H18的产生菌株与各地红曲的原始菌株可能不是同一种或是其一变种。     

叶酸对老年H型高血压预防心脑血管事件的影响

目的：探讨叶酸干预治疗对老年H型高血压患者预防心脑血管事件的影响。方法：将202例老年高血压合并高Hey的H型高血压患者随机分为试验组102例和对照组100例，试验组和对照组均强调生活方式的改变和正规药物降压等常规治疗，试验组在常规治疗的基础上给予口服叶酸5mgqd。随访3个月后两组患者的血浆Hcy水平的变化情况，还要对两组患者无主要心血管事件的生存率进行跟踪随访。结果：与对照组进行比较，试验组的患者应用叶酸治疗3个月后血浆Hcy的水平有了显著下降（P〈0．05）。结论：应用叶酸治疗老年H型高血压能使患者的血浆Hcy水平显著下降，无主要心血管事件的生存率显著升高。     

不同生产企业复方丹参片中丹酚酸B的含量测定

目的分析不同企业生产的复方丹参片的质量控制情况.方法采用高效液相色谱法测定丹酚酸B的含量.结果与结论测定结果看出标准提高后各生产企业不仅重视了丹参药材的质量而且很好的控制了生产工艺,提高了水溶性成分丹酚酸B的含量,合格率达到94%,有效的提高了复方丹参片的质量.     

INTERACTION OF THE NON-STEROIDAL ANTIINFLAMMATORY DRUG FLUFENAMIC ACID WITH GASTRIC ACID SECRETION AND H+/K+ -ATPase

1. The effects of the non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) flufenamic acid on H+ production in isolated and enriched guinea-pig parietal cells and on H+/K(+)-ATPase activity in ion-tight inside-out membrane vesicles from pig gastric mucosa were studied. 2. At low concentrations (0.1 and 1.0 mumol/L), flufenamic acid increased the secretory response of parietal cells to dibutyryl cyclic AMP (dbcAMP). At higher concentrations (10 and 100 mumol/L) it progressively inhibited basal and dbcAMP-stimulated acid production. 3. Flufenamic acid (10 mumol/L) increased K+ (0.5-10.0 mmol/L) and K+ (0.5-1.0 mmol/L) plus gramicidin-stimulated ATPase activity in gastric membrane vesicles. The Km value for K+ (1.6 and 1.0 mmol/L in the absence and presence of gramicidin, respectively) was decreased to 0.8 and 0.5 mmol/L, respectively. At higher concentrations (greater than or equal to 50 mumol/L), flufenamic acid inhibited K+ plus gramicidin-stimulated ATPase activity (inhibited concentration at 50% [IC50] = 186 mumol/L) and reduced the proton concentration (IC50 = 50 mumol/L). 4. It is concluded that flufenamic acid-induced enhancement of dibutyryl cyclic AMP-stimulated H+ production in the parietal cell reflects the stimulation of H+/K(+)-ATPase. We suggest that activation of the enzyme involves increased affinity of K+ towards the K(+)-binding site of the enzyme and/or increased KCl permeability at the vesicle membrane. The inhibitory action of the drug on H+ production in parietal cells results from a detergent and/or protonophoric-like action at the apical parietal cell membrane, and from inhibition of H+/K(+)-ATPase activity.     

反相离子对色谱法测定青木香中马兜铃酸A的含量

建立反相离子对色谱法测定青木香中马兜铃酸A含量。采用HypersilC18色谱柱(2 0 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,以甲醇∶1 2 8%四丁基溴化氨∶pH 3 6醋酸 醋酸钠缓冲液 (体积比2∶1∶1)为流动相 ,流速 1 0mL/min ,检测波长 316nm。线性范围 2 0 8～ 10 4 0 μg/mL(r =0 9998) ,样品平均加样回收率为 97 0 % (n =6 ) ,精密度RSD为 1 5 % (n =6 )。该法简便、快速、准确 ,适用于青木香中马兜铃酸A的定量分析     

十二碳烯酸对人H4细胞毒性作用研究

目的探讨十二碳烯酸对人H4细胞的毒性作用机制。方法采用MTT法、流式细胞仪检测十二碳烯酸对人H4细胞的毒性作用。结果分别给予人H4细胞0．3,0．9,2．7mg·L^-1十二碳烯酸培养48h,十二碳烯酸对人H4细胞增殖抑制率分别为41．64％,70．97％,81．52％,半数抑制浓度（IC50）为0．40mg·L^-1,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0．01）;凋亡率分别为10．16％,18．22％,24．06％。结论十二碳烯酸对人H4细胞具有显著的毒性作用,其机制可能与损伤线粒体结构,抑制细胞分裂等有关。     

Synthesis of N-acetyl-l-aspartyl-l-glutamic acid; [3H]NAAG

[³H]NAAG, N-acetyl-l -aspartyl-l -glutamic acid, has been widely used as a substrate in glutamate carboxypeptidase II (GCPII) reactions, either to determine the inhibitory constants at 50% inhibition (IC₅₀) of novel compounds or to measure GCPII activities in different tissues harvested from various disease models. The importance of [³H]NAAG, combined with its current commercial unavailability, prompted the development of a reliable eight-step synthetic procedure towards [³H₂]NAAG starting from commercially available pyroglutamate. Pure [³H]NAAG of high molar activity (49.8 Ci/mmol) and desired stereochemistry was isolated in high radiochemical yield (67 mCi) and radiochemical purity (>99%). The identity was confirmed by mass spectrometry and co-injection with unlabeled reference.     

丹酚酸B对H_2O_2引起H9c2细胞氧化损伤的保护作用及可能靶点蛋白寻找

观察丹酚酸B对H2O2引起H9c2细胞氧化损伤的影响,在分子水平上探讨丹酚酸B对H2O2诱导氧化损伤保护作用的可能机制。用H2O2刺激H9c2建立体外心肌细胞氧化损伤模型,MTT测定心肌细胞的存活率,Hochest33342染色观察细胞凋亡,并用蛋白质组学技术寻找丹酚酸B在心肌细胞中的可能蛋白质靶点。丹酚酸B可以提高心肌细胞在H2O2处理下的存活率,减少H2O2导致的细胞凋亡,丹酚酸B预处理组与单用H2O2组相比有8个差异表达蛋白,其中Heat shock 27 kua protein蛋白下调,cytochrome C oxidase、myo-sinlight polypeptide 6、myosin、myosin regulatory light chain 2、myosin regulatory light chain 9、tropomyosin和secreted acidic cysteine rich glycoprotein蛋白上调,差异表达的蛋白可能在丹酚酸B的保护机制中发挥重要作用。