苹果酵素生产工艺优化研究

以苹果、白糖、红糖和蜂蜜为原料,采用三因素三水平正交设计进行配方试验以优化苹果酵素生产工艺条件、提高苹果酵素的质量。以感官评价为考查指标,以发酵温度、苹果和糖的比例、糖的种类为影响因素对苹果酵素生产工艺条件进行优化。结果表明:糖的种类为影响苹果酵素口味和品质的主要因素;最佳工艺条件为:糖类选择红糖,水果和糖的比例为1∶1,发酵温度为30℃。     

陈皮酵素发酵工艺优化

以陈皮、浓缩梨汁为原料,通过单因素试验和正交试验研制陈皮酵素的发酵工艺。研究表明,陈皮、浓缩梨汁、水的质量比为7∶20∶73,植物乳杆菌添加量为3%,发酵周期为5 d。在此条件下,所制产品酸甜谐和、爽口,桔香自然。     

陈皮酵素发酵工艺优化

以陈皮、浓缩梨汁为原料,通过单因素试验和正交试验研制陈皮酵素的发酵工艺。研究表明,陈皮、浓缩梨汁、水的质量比为7∶20∶73,植物乳杆菌添加量为3%,发酵周期为5d。在此条件下,所制产品酸甜谐和、爽口,桔香自然。     

拐枣果蔬酵素发酵条件的优化

以拐枣和多种果蔬为原料研制拐枣果蔬酵素,分析原料配比对酵素多酚含量的影响,并优化酵素发酵条件。结果表明,拐枣与混合果蔬的质量比为1∶4时,可以使酵素中的多酚含量上升70%以上;通过单因素试验和正交试验得到拐枣果蔬酵素的最优工艺为混合糖（砂糖和红糖质量比为1∶1）添加量30%、发酵温度35 ℃、四川泡菜水接种量为4%,发酵时间15 d。此优化发酵条件下,拐枣果蔬酵素的超氧物歧化酶（SOD）活力为270 U/mL,还原力（OD700 nm值）为2.165,总酚含量为3.38 mg/mL,且经30 d后熟后品质优良。     

五味子酵素工艺优化

以新鲜五味子为原料,研究制备五味子酵素,以感官评分为评价指标,进行料糖比、发酵时间和发酵温度三个因素的响应面优化试验。确定五味子酵素的最佳制备工艺：料糖比为4∶5,发酵时间为5 d,发酵温度为30℃,得到五味子酵素的感官评判总分为98分。     

雪花梨酵素二步发酵工艺优化

该试验对二步发酵法制备雪花梨酵素的工艺进行了优化。以雪花梨为原料,采用Plackett-Burman试验从影响酵母菌发酵的6因素中筛选出料液比、发酵温度、接种量、发酵时间4个显著影响因素,在此基础上以总酚含量和蛋白酶活力为评价指标通过Box-Behnken试验对酵母菌的发酵条件进行优化,以超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）活力和可滴定酸含量为评价指标,采用单因素试验对植物乳杆菌的发酵条件进行优化,并以总酚含量、蛋白酶活力、SOD活力、可滴定酸含量、pH值及可溶性固形物含量（Soluble Solids Content,SSC）确定最终植物乳杆菌接种时间,最终确定酵母菌和植物乳杆菌二步发酵制备雪花梨酵素最佳工艺参数为：发酵液起始pH值4.5、料液比1:1、糖添加量13%,一步发酵接种酵母菌0.14%、在26 ℃下发酵24 h后,二步发酵接种植物乳杆菌1.50%、在39 ℃下发酵36 h。此条件制得雪花梨酵素酸甜适中,色泽均匀,体态澄清,无杂质,具有发酵梨果特有香气,总酚含量32.32 μg/mL,蛋白酶活力45.15 U/mL,SOD活力1 140 U/mL,可滴定酸4.43 g/L,pH值3.49,SSC 11.3 Brix%,符合食用液态植物酵素对理化指标的要求。该结果可为雪花梨酵素的综合开发提供理论依据。     

糙米酵素混菌发酵工艺优化

为促进混合发酵的糙米酵素中酿酒酵母和植物乳杆菌快速生长,以活菌数为指标对传统糙米酵素发酵培养基组分进行优化,并研究各因素之间的交互作用。由预试验确定各组分适宜浓度范围后通过Plackett-Burman试验得出3个重要影响因子:蜂蜜、糙米和NaCl。根据3个重要影响因子的效应大小设定最陡爬坡试验的方向和步长,采用Box-Behnken试验设计3因素3水平的响应面分析试验。优化后的混菌最佳发酵培养基的组成成分为蜂蜜3.38g/100 mL、糙米10.71g/100mL、NaCl 0.24g/100mL、小麦芽0.25g/100mL、大麦芽0.50g/100 mL、(NH_4)_2SO_40.50g/100 mL和茶叶粉0.025g/100mL。采用以上最佳发酵培养基进行验证实验得出活菌数为5.35×10~7 CFU/mL,是基础糙米酵素培养基活菌数(5.71×10~6 CFU/mL)的9.37倍。验证实验说明响应面法优化得到的函数模型与实际数据较为拟合。     

两种酵素产品抗氧化活性分析

试验通过复合酵素对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除能力以及还原力的大小的测定,来评价、比较两种酵素产品的体外抗氧化能力。结果表明:试验范围内,酵素产品在体外的抗氧化性良好,抗氧化能力总体上与0.1 g/L抗坏血酸相当;其中,产品A的抗氧化性能优于产品B,产品A的总酚含量可达280 mg/m L。     

天麻酵素的发酵工艺优化与品质评价

以天麻粉为原材料制备天麻酵素,通过单因素试验结合响应面试验优化天麻酵素发酵条件,并评价发酵处理对天麻品质的影响。结果表明,天麻酵素的最佳发酵工艺条件为发酵剂用量0.3%、糖添加量11%、发酵温度35 ℃、发酵时间14 d。此优化条件下制得的天麻酵素具有一定的功能性成分和抗氧化活性,天麻酵素中对羟基苯甲醇的含量为0.69 g/L,功能性成分γ-氨基丁酸、对羟基苯甲醛含量分别为0.010 4 mg/mL、0.023 mg/mL,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率、超氧化物歧化酶（SOD）活力、总抗氧化能力（T-AOC）分别为82.37%、5.31 U/mL、2.19 μmol/mL。天麻酵素颜色呈橙红色、体系透明、香气浓郁、滋味协调。     

苹果酵素自然发酵工艺优化及品质分析

为了优化苹果酵素自然发酵工艺,通过Box-Behnken试验设计,研究初始pH值、糖添加量、苹果片质量浓度对苹果酵素感官评分和超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响,并采用超高效液相色谱（UPLC）及液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）分析了酚类物质的组成和含量。结果表明,优化出自然发酵工艺条件为初始pH值4.6,糖添加量15%,苹果片含量200 g/L。在此优化条件下,苹果酵素感官评分为（8.45±0.24）分、SOD活性为（40.26±1.03） U/mL。苹果酵素共检测出15种酚类物质,其中绿原酸含量最高,原花青素B2、表儿茶素、原花青素B1、槲皮素-半乳糖苷、儿茶素以及根皮苷次之。     

基于酶反应动力学理论优化脂肪酶活力测定体系

为了提高棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)法测定脂肪酶活力的灵敏度和准确度,以来源于Rhizopus oryzae的脂肪酶Lipase F-AP 15为研究对象,首先对其最适反应pH和反应温度进行优化,然后将表面活性剂作为激活因子引入酶活力测定体系,探究影响机制,并依据酶反应动力学理论优化测定条件(底物浓度、酶质量浓度、反应时间),对优化的p-NPP法的重复性和准确性进行了检验,最后以另一个来源的脂肪酶Lipase-PPL为模型,以同样思路与方法改进与优化其酶活力测定体系,以考察优化方法和思路的适用性。结果表明：表面活性剂PEG 8000的引入使得覆盖在脂肪酶活性位点的α-螺旋结构被重排而打开,脂肪酶由封闭构象转为并保持在活化构象,脂肪酶活性增强;优化测定体系的最适条件为pH 8.0、反应温度30℃、酶质量浓度1.00 mg/mL、底物浓度6 mmol/L、反应时间5 min,在此条件下测得的酶活力是常用p-NPP法(pH 8.0、反应温度30℃、酶质量浓度2.50 mg/mL、底物浓度10 mmol/L、反应时间8 min)测得酶活力的1.4倍;重复性和准确性试验显示,优化p-NPP法重...     

高产脂肪酶菌株的筛选鉴定及产酶条件优化

采用罗丹明B平板法和脂肪酶活力测定从张弓老酒大曲中分离筛选出一株高产脂肪酶菌株E-11,经形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析,鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。通过单因素和响应面试验设计对该菌株的产酶条件进行优化,结果表明,最佳产酶条件为葡萄糖3%、蛋白胨4%、初始pH值为8.0。优化后的脂肪酶活力达15.09 U/mL,是优化前产酶能力的1.2倍。     

浏阳豆豉发酵中高产酶活菌株的分离鉴定及酶活性分析

从浏阳豆豉发酵过程中分离产高酶活菌株,通过形态观察结合分子生物学技术进行鉴定,并对其产蛋白酶、脂肪酶及纤维素酶的活性进行分析。结果表明,分离得到3株菌（编号为000、5132、621）均被鉴定为溜曲霉菌（Aspergillus tamarri）。3株菌的蛋白酶、脂肪酶及纤维素酶的活性测定结果表明,菌株621蛋白酶活性最强,为（207.98±3.20）U/mL;菌株5132的纤维素酶活性最强,为（3.40±1.40）U/mL;菌株000的脂肪酶活性最高,为（90.7±0.64）U/mL。     

两种常见固定化脂肪酶的酶学性质和微观结构比较

分别对游离脂肪酶、大孔树脂吸附-交联固定化脂肪酶和海藻酸钠固定化脂肪酶的热稳定性、pH稳定性和操作稳定性等方面进行研究。结果显示,固定化脂肪酶在热稳定性、pH稳定性和重复利用次数上均有明显提高。对大孔树脂吸附-交联和海藻酸钠固定化微球进行了表观结构的考察。从SEM图片可以看出:海藻酸钠固定化微球表面和内部为均匀的蜂窝状多孔性结构,孔径较大,约0.1mm;而大孔树脂吸附-交联固定化微球内部具有规则蜂窝状通孔结构,孔径都在几微米以下。说明大孔树脂吸附-交联固定化脂肪酶效果比较理想。     

高产脂肪酶菌株的分离筛选与培养基优化

实验进行了高产脂肪酶菌株的分离筛选与发酵条件优化的研究。通过对35份富含油脂等样品的富集培养、分离筛选,获得320株产脂肪酶的细菌、酵母菌和霉菌,其中细菌X-13产酶活力最高,约为3.5U/mL;X-13发酵产脂肪酶的最佳碳源和氮源分别为可溶性淀粉、牛肉膏,Mg2+、Ca2+、Co2+对X-13菌株产酶有促进作用,Fe2+、Mn2+、Cu2+抑制菌株产酶;正交试验设计优化的培养基成分为：可溶性淀粉6g/L、牛肉膏4g/L、酵母粉0.5g/L、MgSO4 0.2g/L、聚乙二醇（PEG400）0.6mL/L、K2HPO4 1g/L、橄榄油乳化液20mL/L、pH值为7.0。在此优化培养条件下,细菌X-13培养72h的产脂肪酶活力达到9.28U/mL,较优化前提高2.65倍。     

山茶花低糖酸奶工艺优化及其抗氧化活性分析

目的 探讨山茶花低糖酸奶的最佳工艺参数及其抗氧化活性。方法 以山茶花、罗汉果甜苷为主要研究对象,以感官评分、滴定酸度为评价指标,采用单因素试验和正交试验优化山茶花低糖酸奶的工艺参数,并探究其抗氧化活性。结果 山茶花低糖酸奶的最佳工艺参数为山茶花浆添加量8%、罗汉果甜苷添加量0.2%、发酵剂接种量1.5%、发酵时间6 h。此外,相较于对照组,10 g的山茶花低糖酸奶具有更好的抗氧化活性（P<0.05）,其对羟基自由基（hydroxyl radical, ·OH）、超氧阴离子自由基（superoxide anion, O2-）和1,1-二苯基-2-苦基肼（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH）自由基的清除率分别为43.61%、36.12%和48.23%。结论 综上,山茶花的添加能够改善产品风味,同时显著增强了产品的抗氧化活性。     

牛胰脂肪酶交连酶聚体的制备及性能研究

以牛胰脂肪酶（cattle pancreatic lipase,CPL）为研究对象,采用交联酶聚体技术,研究交联酶聚体脂肪酶（CPL-CLEAs）的制备条件、催化性能和酶促反应动力学参数。结果表明,交联酶聚体脂肪酶制备的最优制备条件为:硫酸铵饱和度80%,戊二醛终浓度1.5%,交联时间1 h,在此条件下,所得CPL-CLEAs最高酶活回收率为90%。CPL-CLEAs的最适催化温度是60℃,与游离脂肪酶相比,CPL-CLEAs的最适催化温度提高了10℃,且温度稳定性、储存稳定性和操作稳定性均有所提高。重复使用7次后,CPL-CLEAs仍能保持初始酶活的43%。      

离子液体中脂肪酶活性调控对硬脂酸淀粉酯合成的影响

主要研究了离子液体中脂肪酶活性的调控对硬脂酸淀粉酯合成的影响。结果表明:在离子液体中添加不同水活度(Aw)的水合盐对对脂肪酶催化活性有显著影响,水合盐对为Na_2HPO_4·7H_2O和Na_2HPO_4·2H_2O的混合物,即Aw为0.61,添加量为80%(水合盐对淀粉质量比)时达到最佳的脂肪酶催化效果;冻干酶的pH值、添加量及冻干过程中冻干保护剂的存在对硬脂酸淀粉酯合成过程中脂肪酶活性同样影响显著,冻干酶催化反应的最适pH值为7.1,最适添加量为10.4%(冻干酶淀粉质量比),脂肪酶和有机化合物等冻干保护剂的加入能保护冻干酶的催化活性,提高反应转化率,其中以聚乙二醇效果最佳。     

内生黑曲霉产脂肪酶条件研究及其粗酶酶学特性

针对新疆酿酒葡萄中获得的1株产脂肪酶的内生黑曲霉菌株C2J6,研究了该菌株的产酶条件及酶学特性。结果表明,该菌适宜的产酶条件为1%的乳糖为碳源,1%的蛋白胨为氮源,培养基初始pH值为8.0,培养温度35℃,培养时间约72h,此时所产脂肪酶的活力可达18.75U/mL。该菌所产脂肪酶粗酶液的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为7.0,为中温中性酶;在50℃保温1h酶活力保留54.55%,具有良好的热稳定性;在pH值3.0~7.0范围内较稳定,有一定的耐酸性。金属离子Mn2+对酶活力有促进作用,Zn2+、Fe2+、Cu2+对酶活力有抑制作用,K+、Ca2+、Na+、Mg2+对酶活力影响不大。该酶在以葵花油和谷物调和油为底物时,酶活分别为228%和180%,明显高于橄榄油和油烟机废油。