MG-63骨肉瘤原位模型的建立

目的 建立裸鼠股骨骨肉瘤原位模型.方法 体内连续传代筛选MG-63细胞系获得高成瘤率的细胞,MG-63细胞悬液或MG-63细胞皮下成瘤瘤组织块接种于裸鼠股骨下端.观察MG-63细胞在股骨骨肉瘤原位模型的成瘤特性,并比较两种成瘤方法的成瘤率,常规影像学检查以及肿瘤组织病理检查.结果 两周内可见局部肿瘤形成.术后4周X线片可见股骨下段溶骨及成骨改变、肿瘤样骨形成.光镜下可见典型的骨肉瘤病理特征,成骨作用明显.细胞悬液法成瘤率70%,组织块法成瘤率100%,两种方法成瘤率的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 成功建立了裸鼠股骨下段原位肿瘤移植模型,为骨肉瘤的研究提供了更接近人体内环境的研究基础.     

骨肉瘤铜死亡相关LncRNA预后模型构建与验证

目的：Cuproptosis是一种新发现的程序性细胞死亡形式,被认为在肿瘤治疗中起重要作用。长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)参与调节细胞多种生理与病理活动。本研究旨在探讨铜死亡相关LncRNA在骨肉瘤中的预后意义。方法：从公共数据库UCSC Xena和GTEx数据库下载骨肉瘤样本与正常样本的基因表达谱以及相应的临床数据,从已发表的文献中获取铜死亡基因,采用共表达网络、最小绝对收缩和选择算法（LASSO）和Cox回归模型构建骨肉瘤铜死亡相关lncRNA预后模型并进行内部验证。采用受试者工作特征（ROC）曲线和列线图来评估模型的预测能力。单样本基因集富集分析（ssGSEA）探讨不同风险组与骨肉瘤免疫细胞与功能的相关性。结果：对收集到的19个铜死亡基因进行共表达分析,得到181个铜死亡相关lncRNA,差异分析及单因素Cox分析筛选出10个铜死亡预后相关的LncRNA。随后通过Lasso及多因素Cox回归筛选得到了3个铜死亡相关lncRNA(AC124798.1、AC090152.1、AC090559.1)构建预后模型。根据风险评分中位值将患者分为高...     

可移植性鼠骨肉瘤肿瘤模型的建立

目的建立快速简便的有细胞免疫力的鼠骨肉瘤肿瘤模型。方法取含10×106个对数生长期的UMR106骨肉瘤细胞的混悬液0.5ml,注射至SD大鼠前侧腋窝皮下,或取含5×106个对数生长期的LM8骨肉瘤细胞的混悬液0.3ml,注射至C3h雄性小鼠前侧腋窝皮下。密切观察其生长情况。2～3周时切除肿块,常规病理活检。结果SD大鼠在7～10天时可见明显肿块,3周时可形成1.5cm×1.5cm大小的肿块,肿瘤生成率50%;C3h雄性小鼠在第5天时可见明显肿块,2周时可形成1.0cm×1.0cm大小的肿块,肿瘤生成率100%。肿块经病理检查均证实为骨肉瘤组织。结论种植骨肉瘤细胞LM8于C3h雄性小鼠,可以快速、简便、非常可靠地建立有细胞免疫力的鼠骨肉瘤肿瘤模型。     

骨肉瘤动物模型新进展

骨肉瘤（osteosarcoma,OS）发病率在儿童和青少年恶性肿瘤中居首位,目前的临床治疗方式以外科手术联合药物化疗为主。虽然已经在很大程度上提高了骨肉瘤患者的生存率,但当肿瘤发生转移时,骨肉瘤患者的5年生存率不足20%。因此利用骨肉瘤动物模型对该疾病进行研究,对进一步探索其病因及研发新的治疗药物或方式显得尤为重要。本文就近年骨肉瘤模型的应用做一简要综述。     

PTEN和Caspase-3在骨肉瘤中的表达

目的探讨抑癌基因PTEN蛋白和Caspase-3在骨肉瘤中的表达及在其发生发展中的可能作用。方法用免疫组织化学方法检测PTEN和Caspase-3在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤中的表达。结果PTEN蛋白在骨肉瘤中,表达阳性率为55.3%。在对照组骨软骨瘤中为90.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P<0.01)。Caspase-3在骨肉瘤中表达阳性率为52.6%,在对照组骨软骨瘤中为85.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P<0.05)。结论PTEN蛋白和Caspase-3与骨肉瘤的发生有关。     

Avastin抑制骨肉瘤裸鼠模型血管生成实验研究

目的 观察Avastin抑制骨肉瘤裸鼠移植瘤血管生成并探讨其作用机制.方法 人骨肉瘤细胞9901荷瘤裸鼠12只随机分为3组:对照组、Avastin低剂量组(2mg·kg-1·w-1)和Avastin高剂量组(5mg·kg-1·w-1),每周瘤内注射1次,共治疗2次,治疗过程中观察肿瘤生长情况.治疗后处死裸鼠,计算抑瘤率,并通过病理组织学观察、免疫组织化学和激光共聚焦观察肿瘤内微血管密度、坏死、增殖、凋亡和肿瘤细胞缺氧情况.结果 Avastin低剂量治疗组和Avastin高剂量治疗组的抑瘤率分别为32.87%、39.81%;对照组、Avastin低剂量治疗组和Avastin高剂量治疗组3组坏死的比例分别为2.01%、11.49%和12.15%.Avastin低剂量治疗组和Avastin高剂量治疗组的微血管密度及增殖指数明显低于对照组(P<0.05),凋亡指数明显高于对照组(P<0.05),但Avastin低剂量治疗组和Avastin高剂量治疗组的微血管密度、增殖指数和凋亡指数差异无统计学意义(P>0.05).EF-5和CD31免疫荧光双标激光共聚焦显微镜观察显示Avastin治疗组血管密度降低、组织缺氧加重.结论 Avastin能显著抑制骨肉瘤的血管生成和肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡,进而显著抑制裸鼠原位肿瘤的生长.     

烧烫伤创面感染的小鼠模型构建

【摘要】 目的 探讨一种简单、稳定的烧烫伤创面感染的小鼠模型构建方法,以便进行相关烧烫伤创面修复研究。方法 取30只Balb/C小鼠,采用自制木质烫伤板,沸水浴法烫取直径8 mm的圆形创面,烫伤时间分别为5s、10s、15 s。伤后48 h,取创面组织进行HE染色观察,筛选最佳创面烫伤时间。另取72只小鼠制成深Ⅱ度烫伤创面,采用擦刮法分别接种20 ul菌浓度为1?06、l?07、1?08 CFU/mL金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC 25923的菌液。接种细菌72 h后 ,取创面组织HE染色观察创面炎症反应情况,并测定3d、7d、14 d的皮肤菌负荷,筛选最佳的细菌接种浓度。最后,按最佳条件建模后,观察创面的完全愈合时间以及创面愈中、愈后的组织学变化,以确定此创面感染模型是否建立成功。结果 组织学结果表明,10 s为深Ⅱ度创面的理想致伤时间,最佳接种菌浓为l?08 CFU/ml,此时,14 d内菌负荷均高于l?05 CFU/g。该模型的创面愈合时间（21?.95 d）较正常创面愈合时间（15.92?.34 d）明显延长（P<0.01）,炎性反应明显,愈后不佳。结论 烧烫伤创面感染的小鼠模型构建成功,可作为感染创面防治研究的实验动物模型。     

C60衍生物对鼠骨肉瘤细胞生长的影响

目的;观察C60－赖氨酸在光照条件下对鼠骨肉瘤细胞LM8细胞的生长的影响.方法 在鼠骨肉瘤细胞LM8细胞中加入不同浓度的C60－赖氨酸,在光照条件下,采用四唑盐比色实验观察对细胞增殖的影响,通过荧光显微镜、透射电镜、流式细胞仪观察C60－赖氨酸对鼠骨肉瘤细胞LM8细胞生长的影响.结果 C60－赖氨酸呈浓度依赖方式抑制LM8细胞增殖,并诱导其凋亡,其凋亡比例与C60－赖氨酸也呈浓度依赖关系.结论 C60－赖氨酸能抑制鼠骨肉瘤细胞LM8细胞的生长并且诱导其凋亡.     

PTEN和Gaspase-3在骨肉瘤中的表达

目的探讨抑癌基因PTEN蛋白和Caspase-3在骨肉瘤中的表达及在其发生发展中的可能作用.方法用免疫组织化学方法检测PTEN和Caspase-3在38例骨肉瘤及20例骨软骨瘤中的表达.结果PTEN蛋白在骨肉瘤中,表达阳性率为55.3%.在对照组骨软骨瘤中为90.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P＜0.01).Caspase-3在骨肉瘤中表达阳性率为52.6%,在对照组骨软骨瘤中为85.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P＜0.05).结论PTEN蛋白和Caspase-3与骨肉瘤的发生有关.     

大鼠移植骨肉瘤动物模型的建立及初步评价

目的建立大鼠骨肉瘤动物模型。方法体内连续传代筛选UMR_106细胞系获得高成瘤率的细胞,接种于SD大鼠皮下。肿瘤组织行常规病理HE染色并镜检,同时检测大鼠血清中碱性磷酸酶的活性水平。结果一周内可见肿瘤形成,荷瘤动物存活时间为28～63d,肿瘤组织镜下可见典型骨肉瘤病理特征,成骨作用明显,荷瘤鼠血清碱性磷酸酶水平显著升高。结论成功建立了可移植大鼠骨肉瘤动物模型,为骨肉瘤的肿瘤免疫研究提供条件。     

大鼠骨肉瘤肺转移模型的建立

目的:构建大鼠骨肉瘤的肺转移模型,为骨肉瘤肺转移的机理及治疗研究奠定基础.方法:RPMI1640培养基体外扩增UMR106细胞(大鼠骨肉瘤细胞株),分别用无血清培养基和鼠尾胶稀释成1×107cells/ml混悬液,原位注入3周龄SD大鼠胫骨近端骨髓腔内,每只0.2ml.观察成瘤情况,死后尸检肺转灶数目,X线检查骨质变化,组织学检查确定肿瘤性质.结果:两组大鼠原位成瘤率及肺转移率均达100%.X线检查示明显骨质破坏和瘤骨形成,组织学检查见肿瘤样骨基质形成,符合临床骨肉瘤各项特征.培养基组和鼠尾胶组肿瘤形成时间分别为(10.0±1.65)天和(17.8±0.87)天,差异有显著性(P＜0.0001);肺转移灶数目分别为(155.25±36.63)个和(91.5±29.56)个,差异有显著性(P＜0.0001);大鼠生存时间分别为(21.4±6.67)天和(40.6±9.52)天,差异也有显著性(P＜0.0001).结论:UMR106细胞原位移植SD大鼠建立骨肉瘤模型方法简单、重复性好、实验周期短、肺转移率100%,是研究骨肉瘤肺转移的理想动物模型.无血清培养基稀释法肿瘤形成及肺转移出现时间早,实验周期快,可用于骨肉瘤肺转移机制的研究.鼠尾胶稀释法肿瘤形成时间相对较晚,生存时间长,肺转移数目稍少,适用于骨肉瘤治疗方法的研究.     

干扰素在骨肉瘤治疗中的作用

干扰素(interferon,IFN)是一组具有抗血管生成、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子,在体外和异体移植模型中都显示出有效的抗骨肉瘤活性。临床试验表明,IFN可作为骨肉瘤手术治疗单一辅助药物,并能明显提高患者无瘤生存率。文中就IFN在骨肉瘤中的作用展开综述,以期为骨肉瘤的治疗提供新思路。     

成骨肉瘤新辅助化学药物治疗的疗效分析

目的 探讨恶性骨肿瘤新辅助化学药物治疗(化疗)的治疗经验。方法 自1996年7月至2002年12月,对113例成骨肉瘤的患者实施了术前化疗,局部广泛切除加术后化疗。其中男65例,女48例。年龄7～32岁。肿瘤部位包括：股骨近端6例,股骨干部4例,股骨远端49例,胫骨近端37例,胫骨干部2例,胫骨远端1例,肱骨近端7例,腓骨3例,锁骨1例,肩胛骨1例,骨盆骶骨各1例。外科分期(Enneking)：ⅡA7例,ⅡB106例。术前化疗2个周期,术后继续行3个周期的化疗。结果 完全有效者60例,部分有效者35例,对术前化疗无效者18例。所有术后患者的中位随访时间为3年半,最长者7年,最短者27个月。不同的手术方式术后局部复发率不同,人工关节置换组局部复发5例(8．3％),肿瘤骨灭活再植组局部复发12例(55％)。对术前化疗反应好的60例患者,随访期间有11例患者出现肺转移,占18．3％。其中有10例局部复发,均为行肿瘤骨灭活再植及灭活骨复合人工关节置换的患者。对术前化疗反应中等的35例患者中,13例出现肺转移,占37％。对术前化疗反应差的18例中,14例出现肺转移,约占78％。对本组113例成骨肉瘤的治疗结果进行了Kaplan-Meyer生存曲线分析,5年生存率为71．93％。影响患者预后最重要的因素是肿瘤对化疗的敏感性。结论 化疗原则：(1)个体化超大剂量化疗;(2)术前阿霉素(ADM)和胞嘧啶核苷二磷酸(CDP)动脉插管化疗,使用动脉泵将上述药物泵人,保持血药浓度持续高浓度,甲氨喋呤(MTX)和异环磷酰胺(IFO)静脉内给予,采取动静脉结合的双途径化疗方式;(3)对一线药物化疗效果欠佳的患者,术前加用二线药物IFO、紫衫醇;(4)化疗过程中,仔细观察,详细记录肿瘤对化疗药物的反应,了解该患者对哪种药物敏感,用于指导术后化疗方案的改进;(5)应用有效的升高白细胞药物,缩短化疗周期,提高药物的剂量强度;(6)对于出现肺转移的患者,加用三氧化二砷、紫衫醇。     

原位异种移植性骨肉瘤的动物模型及生物学特性的初步观察

目的：建立大鼠UMR106骨肉瘤细胞株的裸鼠原位移植模型.方法：采用完整瘤组织块原位移植到裸鼠右胫骨骺端,分不同时期处死,观察其生长及转移特性.结果：肿瘤原位移植成功率为100%,移植后1～2w从髓内向髓外生长,3w已侵犯髓外软组织并有明显骨皮质破坏,4～5w有肺转移,6w左右裸鼠出现恶病质,且双肺广泛转移,最终全身衰竭死亡.结论：该模型成功率高,模拟了人类骨肉瘤临床发病和发展过程,可作为研究骨肉瘤较理想的模型.     

骨肉瘤新辅助化疗疗效评价方法研究进展

随着骨肉瘤化疗研究的不断深入,新辅助化疗疗效评价方法成为近年来骨肉瘤化疗研究的热点。作者从病理组织学、影像学检查、分子生物学水平检测的3个方面对骨肉瘤新辅助化疗疗效评价方法的进展情况作一综述。     

mTOR传导通路在骨肉瘤联合化疗中的应用研究

摘要：骨肉瘤是儿童和青少年高发的恶性肿瘤,相比其他肿瘤骨肉瘤具有高侵袭性高转移性。骨肉瘤患者的预后与联合化疗的反应性相关,但是骨肉瘤对现有的化疗药物有较高的耐药性,并且缺乏效果明确的联合化疗方案。最近的研究证实哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路在部分肿瘤起到了控制细胞生长、细胞增殖、细胞迁移、细胞存活、蛋白合成和转运的功能。近十年来学者一直在研究哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路治疗肿瘤的分子机制,这篇综述回顾了哺乳动物雷帕霉素靶点传导通路应用于骨肉瘤治疗和联合化疗的研究。     

骨肉瘤组织中c-myc蛋白表达及其临床意义

目的探讨c－myc基因与骨肉瘤发生发展及预后的关系。方法用S－P免疫络化法，对50例骨肉瘤石蜡包埋标本进行了c－mycp67表达水平的研究。结果骨肉瘤c－mycp67蛋白阳性率高达72％，c－mycp67表达与骨肉瘤患者性别、年龄、病理类型、肿瘤分期等均无明显关系，而c－mycp67阳性表达骨肉瘤患者的3年生存率低于c－mycp67阴性表达者。结论c－mycp67表达可能对判断骨肉瘤预后有一定意义。     

骨肉瘤免疫基因治疗研究进展

复发或肺转移的骨肉瘤威胁着患者的生命。由于尚未发现明确的骨肉瘤特异性抗原,因此,将经过修饰的骨肉瘤细胞作为肿瘤疫苗等免疫基因治疗,为骨肉瘤的生物学治疗提供了一种崭新的治疗手段。     

幽门螺杆菌长期感染鼠腺胃模型的研究

目的 建立适合不同研究需要的Ｈｐ动物模型,方法 二级Ｗｉｓｔａｒ大鼠,二级Ｃ３７ＨＬ／６小鼠及三级ＢＡＬＢ／ｃ小鼠４０只,每种动物随机分为实验组（２０只）及对照组（２０只）。实验组动物拉种Ｈｐ（ｓｙｄｎｅｙｓｔｒａｉｎ１ＳＳ１）小鼠０．４ｍｌ／只,大鼠１．５ｍｌ／只（约１０＾９／ｍｌ）连续５次,１周完成,而对照组则不作相应处理,距最后一次接种Ｈｐ的４,８,１２及２４周（ＢＡＬＢ／ｃ１６周）分别处死