白细胞介素4及受体基因多态性与哮喘易感性研究

目的探讨白细胞介素4（IL-4）及白细胞介素4受体（IL-4R）基因多态性与郑州地区儿童哮喘易感性及与血浆总IgE的关系。方法采用聚合酶链反应一限制性酶切多态性方法（（PCR—RFLP）检测IL-4基因启动子区C-589T位和IL-4Rα亚单位576QR两位点基因多态性，并观察对血浆总IgE的影响。结果白细胞介素4基因C-589T基因多态性与儿童哮喘无相关性；IL-4受体仅亚单位576QR基因型和576R等位基因频率在儿童哮喘与对照组相比差别有显著性（P〈0.01，P〈0.01），且576R与高IgE相关。结论本研究表明IL-4Rα亚单位576R与中国郑州儿童哮喘有关，且与高IgE相关。     

痛风性关节炎患者外周血白细胞中Toll样受体4表达与基因多态性研究

目的 对痛风性关节炎患者外周血白细胞中Toll样受体4(TLR4)表达与基因多态性予以分析,为痛风性关节炎的早期诊断和治疗提供参考.方法 选择2015年1月—2016年6月右江民族医学院附属医院确诊为痛风性关节炎患者及同期体检健康者为观察组和对照组,每组各80例.均行外周血白细胞中TLR4表达测定和基因型鉴定并进行比较和评价.结果 观察组外周血白细胞中TLR4 mRNA、核因子-κBD65、血浆IL-1β及血尿酸水平均显著高于对照组(P<0.05);观察组GGb、GT及G等位基因b与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组TT和T等位基因均显著高于对照组(P<0.05).结论 痛风性关节炎患者外周血白细胞中TLR4表达与TT和T等位基因均表现出较强的表达及较高的的比率,对临床诊断及治疗具有一定的指导价值.     

慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞Toll样受体4的变化及其与IL-6的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎患者(CHB)外周血单核细胞Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)的变化情况及其意义.方法 用流式细胞仪检测30例健康人(对照组),30例HBV携带者(HBV携带组)和65例CHB患者(CHB患者组)外周血单核细胞表面TLR4的表达,ELISA法检测上述患者血清白细胞介素6(IL-6)的水平.结果 外周血单核细胞TLR4的平均免疫荧光强度,CHB患者组明显高于对照组与HBV携带组(P<0.05),HBV携带组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);自对照组到HBV携带组及CHB患者组外周血IL-6水平依次升高,3组间比较差异有统计学意义(P<0.05或<0.01);CHB患者组外周血单核细胞TLR4表达水平与血清IL-6表达水平呈显著正相关(r=0.674,P<0.01).结论 TLR4可能与CHB发病有关.     

重症AP患者外周血中单个核细胞Toll样受体4的表达及与血浆内毒素的关系

目的动态观察重症急性胰腺炎（SAP）患者外周血中单个核细胞Toll样受体4（TLR4）表达的变化,并探讨其与内毒素血症的关系。方法收集31例SAP患者和25例轻型急性胰腺炎（MAP）患者,SAP患者于入院后1、3、5、7、14、21d,MAP患者于入院后1、3、5、7d分别抽取外周静脉血,用RT-PCR法检测TLR4基因表达水平,同时用鲎试剂测定血浆内毒素水平。结果所有患者的血浆中均检出内毒素,与MAP组比较,SAP组内毒素在各个时期浓度都明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。与正常对照组比较,SAP患者在入院后1d外周血单个核细胞TLR4基因水平显著升高（P〈0.05）,达正常对照组的1.55倍,并持续较长时间。相关分析显示,SAP患者在入院后第3、5、7天TLR4mRNA与血浆内毒素水平变化趋势一致,两者呈正相关（P〈0.05）。结论 TLR4通路的异常可能在SAP的发病及炎性反应中均发挥一定作用,其诱生与内毒素刺激密切相关。     

可溶性白细胞介素4受体的研究进展

白细胞介素-4(IL-4)作为一种多功能的细胞因子在免疫反应中起重要作用。由于IL-4能够调控IgE的合成，因此，在哮喘等变应性炎症反应中具有关键作用。IL-4通过结合细胞表面的白介素-4受体(IL-4R)发挥生物学效应。近年来在小鼠和人体内相继发现了天然存在的IL-4Rα链胞外结构域的可溶性白介素4受体(sIL-4R)，sIL-4R具有与膜结合受体同样的IL-4亲和力。由于sIL-4R缺少胞内结构部分，在结合IL-4后不能产生信号传递来介导IL-4的生物学活性，因此，可以作为IL-4的抑制剂用于哮喘等疾病的治疗。本文对sIL-4R的结构、产生途径及在疾病治疗中的应用等方面进行综述。     

Toll样受体4与2型糖尿病及其心血管并发症

Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是模式识别受体之一,可特异地识别病原体相关分子模式,激活细胞信号转导途径,从而导致一系列的炎症和免疫反应的发生.TLR4在2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)及其心血管并发症的发生、发展过程中具有重要作用,本文就其近年来的研究进展作一综述.     

白细胞介素4和13与哮喘的关系

支气管哮喘 (简称哮喘 )是多种炎症细胞包括肥大细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞等参与的一种气道慢性炎症 ,其特征是间歇性、可逆性的气道阻塞 ,吸入非特异性刺激物时气道反应性增高 ,是严重威胁公众健康的一种慢性变态反应性疾病。随着分子生物学技术的发展 ,哮喘的遗传学研究已成为国际热点。现认为哮喘是一种多基因遗传性疾病 ,是由一些基因与环境因素共同作用而致病 ,其遗传度为 70 %～80 %。细胞因子如IL4 (白细胞介素 4 )和IL13(白细胞介素 13)在其发病中起着重要的作用 ,现将国内外的研究的进展综述如下。1　IL4和哮喘IL4主要由TH2…     

白细胞介素-5和白细胞介素-12在哮喘发病中的作用

目的探讨IL-5、IL-12与哮喘的关系。方法大鼠48只,分为正常对照组和支气管哮喘组（模型组）。大鼠尾静脉取血分离血清,应用ELISA法,测量其血清IL-5、IL-12的水平。结果对照组的IL-5、IL-12的检测结果分别为（15.84±3.65）pg/ml,（79.32±6.48）pg/ml,模型组的分别为（39.15±13.13）pg/ml,（34.24±0.78）pg/ml。结论哮喘患者血清IL-5水平升高,IL-12水平下降。     

哮喘患者外周血单个核细胞腺苷受体

目的通过检测哮喘患者外周血单个核细胞（PBMCs）腺苷受体mRNA表达,探讨腺苷受体在哮喘发病中的作用。方法用Ficoll液分离PBMCs,采用逆转录-多聚酶联反应法和图象分析半定量法检测PBMCs腺苷受体mRNA。结果正常人及哮喘患者PBMCs均表达A     

Toll样受体1和3在大鼠哮喘中的表达及甲泼尼龙对其的调控作用

目的观察Toll样受体(TLR)1和TLR3在哮喘大鼠中的表达及甲泼尼龙对其的影响,探讨TLRs在哮喘炎症过程中的可能作用机制。方法采用大鼠哮喘模型,随机分成哮喘组、对照组和甲泼尼龙组,流式细胞术检测血中性粒细胞TLR1的表达,免疫组织化学法检测肺组织TLR3的表达。结果哮喘组肺组织TLR3的吸光度值(A值)(0.20±0.03)与对照组(0.14±0.04)差异有统计学意义(P<0.01);甲泼尼龙组A值(0.20±0.04)分别与哮喘组和对照组差异无统计学意义(均P>0.05)。哮喘组中性粒细胞TLR1的平均荧光强度(MFI)(74.1±6.3)与对照组中性粒细胞TLR1的平均荧光强度(84.4±5.0)差异有统计学意义(P<0.01);甲泼尼龙组MFI(77.8±1.1)与哮喘组差异无统计学意义(P>0.05),但与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。肺组织TLR3和血中性粒细胞TLR1蛋白表达水平呈负相关(r=-0.493,P<0.05)。结论哮喘大鼠肺组织TLR3蛋白的表达升高,血中性粒细胞TLR1蛋白的表达水平则反之,两者呈负相关。甲泼尼龙对它们具有调控趋势,但强度不是很明显。TLRs的表达过度或不足可能是哮喘急性发作的重要原因之一。     

Toll样受体 2、Toll样受体 4 mRNA和蛋白在急性出血坏死性胰腺炎肝损伤中的表达及意义

目的 探讨Toll样受体2(TLR2)、TLR4信使核糖核酸(mRNA)和蛋白在急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)肝损伤中的表达及意义.方法 2019年6月至12月选取健康SD大鼠(郑州大学实验动物中心)60只为研究对象,采用随机数字表法分为模型组和对照组,每组30只,同时模型组和对照组再随机分为3 h组、6 h组和12 h组各10只.模型组采用牛磺胆酸钠建立AHNP模型,对照组注射生理盐水,检测各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和淀粉酶,qRT-PCR和Western blotting检测肝脏组织TLR2、TLR4 mRNA和蛋白表达,HE染色观察肝脏组织.结果 模型组造模后3 h组、6 h组和12 h组血清ALT[(170.02±32.21)U/L、(310.01±80.02)U/L、(720.11±112.28)U/L]、AST[(450.13±100.21)U/L、(980.12±132.21)U/L、(1100.32±145.03)U/L]和淀粉酶[(7099.27±1209.02)U/L、(11010.19±1200.01)U/L、(17003.21±2007.82)U/L],肝脏组织TLR2和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量[TLR2 mRNA(0.962±0.201)、(1.201±0.223)、(1.501±0.212),TLR2蛋白(0.713±0.091)、(1.102±0.100)、(1.343±0.121);TLR4 mRNA(1.701±0.332)、(2.011±0.350)、(2.562±0.313),TLR4蛋白(1.210±0.170)、(1.446±0.182)、(1.788±0.190)]均逐渐增高(P<0.001),且均明显高于对照组[ALT(84.40±14.92)U/L、(85.50±15.20)U/L、(84.19±14.49)U/L;AST(170.02±20.01)U/L、(168.82±21.14)U/L、(171.14±20.11)U/L;淀粉酶(1102.00±183.29)U/L、(1154.49±190.04)U/L、(1160.03±186.27)U/L;TLR2 mRNA(0.030±0.010)、(0.031±0.011)、(0.029±0.009),TLR2蛋白(0.021±0.008)、(0.020±0.009)、(0.022±0.010);TLR4 mRNA(0.882±0.181)、(0.880±0.170)、(0.883±0.179),TLR4蛋白(0.961±0.192)、(0.967±0.181)、(0.966±0.180)](P<0.001).肝组织TLR2、TLR4 mRNA表达与血清ALT、AST和淀粉酶呈正相关(P<0.05),TLR2、TLR4蛋白表达与血清ALT、AST和淀粉酶呈正相关(P<0.05);模型组造模3 h后可见肝细胞气球样变性,6 h后炎性细胞浸润汇管区,小叶周边细胞发生嗜酸性变性,12 h后出现大片状出血坏死及灶性坏死.结论 TLR2、TLR4 mRNA和蛋白在AHNP肝损伤组织中的表达升高,可能在肝脏损伤过程中有重要作用.     

支气管哮喘患儿血清SIL-2R和T淋巴细胞亚群的相关性探讨

目的 探讨血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)和T淋巴细胞亚群在支气管哮喘患儿中的作用.方法 应用双抗体夹心ELISA法和单克隆抗体法对32例支气管哮喘患儿进行了血清SIL-2R和T淋巴细胞亚群的测定,并以35名正常人作对照.结果 支气管哮喘患儿在治疗前血清SIL-2R水平非常显著地高于正常人组(P＜0.01),至恢复期虽然SIL-2R水平有所下降,但与正常人组比较差异仍有显著性(P＜0.01).SIL-2R水平与T淋巴细胞亚群中CD8细胞比值密切相关.结论 检测支气管哮喘患儿血清SIL-2R和T淋巴细胞亚群水平可以作为患者病情变化、预后判断的重要检测指标.     

脂多糖对类风湿关节炎外周血单核细胞Toll样受体4、髓样分化因子88蛋白表达的影响

目的 观察脂多糖(LPS)对类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)蛋白表达的影响。方法 采用活动期RA患者外周血进行单核细胞的分离培养,并与健康志愿者做对照。分为以下5组观察:健康对照组、健康+LPS组、RA对照组、RA+ LPS组、RA+LPS+TAK-242组,并采用Western blot法检测各组TLR4、 MyD88蛋白的表达。结果 健康+LPS组或RA+LPS组TLR4、MyD88蛋白表达与健康对照组或RA对照组比较均明显升高(均P<0.01);RA对照组或RA+LPS组TLR4、MyD88蛋白表达与健康对照组或健康+LPS组比较均明显升高(均P<0.01);RA+LPS+TAK-242组TLR4、MyD88蛋白表达与RA+LPS组比较明显降低(均P<0.01)。结论 RA活动期单核细胞可能存在TLR/MyD88信号通路的激活,且对LPS的刺激反应性增强。     

NOD2和Toll样受体1在哮喘大鼠中的表达及布地奈德对其的影响

目的:观察核苷酸结合寡聚化结构域2(NOD2)和Toll样受体1(TLR1)在哮喘大鼠中的表达及布地奈德对其的影响,探讨模式识别受体在哮喘炎症过程中的可能作用机制。方法:采用大鼠哮喘模型,随机分成哮喘组、对照组和布地奈德组,免疫组织化学法检测肺组织NOD2的表达,流式细胞术检测血中性粒细胞(NEU)TLR1的表达。结果:哮喘组(0.148±0.009,OD值)肺组织NOD2的光密度值显著低于对照组(0.157±0.006,OD值)(P<0.05);布地奈德组(0.149±0.008,OD值)肺组织NOD2的光密度值分别与哮喘组、对照组相比差异无统计学意义(均P>0.05)。哮喘组和布地奈德组(分别为74.07±6.26和78.54±4.65,OD值)NEU TLR1的平均荧光强度均显著性低于对照组(84.37±4.96,OD值)(分别为P<0.01、P<0.05);布地奈德组NEU TLR1的平均荧光强度与哮喘组相比差异无统计学意义(P>0.05)。TLR1与NOD2的表达水平呈显著正相关(n=2 6,r=0.780,P<0.01)。结论:哮喘大鼠NOD2和TLR1的表达水平下降,布地奈德可能对NOD2和TLR1的上调作用较弱,模式识别受体可能参与了哮喘的炎症过程。     

支气管哮喘患者诱导痰中白细胞介素-9水平及其与气道炎症的关系

目的探讨支气管哮喘患者诱导痰中白细胞介素-9（IL-9）的水平及其与炎症细胞和肺功能的关系。方法分别选择28例支气管哮喘急性发作患者（哮喘急性发作组）和28例健康对照（健康对照组）,分别检测哮喘急性发作期和治疗后缓解期及健康对照组的肺功能;并用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定诱导痰上清液中IL-9的水平。结果哮喘发作组患者诱导痰中IL-9水平明显高于哮喘缓解期,比较差异有统计学意义（P〈0.05）,哮喘发作组和缓解期组痰中IL-9水平高于健康对照组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）。哮喘发作组患者诱导痰中IL-9水平与中性粒细胞数及嗜酸性粒细胞数均呈正相关（r值分别为0.68、0.81,P〈0.05）,与第一秒用力呼气容积占预计值的百分比（FEV%）呈负相关（r=-0.65,P〈0.05）。结论支气管哮喘患者诱导痰中增高的IL-9水平与其气道炎症和气流受限有关。     

Toll-like receptor 7 and 9 expression in peripheral blood mononuclear cells from patients with chronic hepatitis B and related hepatocellular carcinoma

AIM: The aim of the present study was to investigate the expression of Toll-like receptors (TLR) 7 and 9 in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of patients with chronic hepatitis B virus (HBV) infection and related hepatocellular carcinoma. METHODS: The study group was comprised of 52 patients: 41 with chronic hepatitis B and 11 healthy controls. The protein and mRNA levels of TLR7 and TLR9 were evaluated using real-time PCR, Western blot analysis, and flow cytometry. We also detected the serum viral load of HBV in the patients and analyzed the correlation between HBV-DNA copies and the TLR expression. RESULTS: Our results demonstrated a lower TLR7 expression in all HBV infection groups compared to the controls. We found that HBV infection led to a decreased expression of TLR9 mRNA, but an increased expression of the TLR9 protein compared to the healthy group. The TLR protein levels are related to serum HBV-DNA (P<0.01). CONCLUSION: There are downregulations of TLR7 expression and TLR9 mRNA in PBMC of HBV-infected patients, but an increased TLR9 expression at the protein level.     

Tacrolimus对糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞Toll样受体2与4表达的影响

目的探讨Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2和TLR4在糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞的表达水平及tacrolimus对其的调节作用。方法将40只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、tacrolimus(0.5、1.0 mg.kg-1)给药组,通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,4周后测大鼠血糖、相对肾质量、尿白蛋白排泄率(UAER),应用免疫组化单染及双染方法检测肾组织ED-1+细胞、NF-κB-p-p65+细胞及ED-1+TLR2+细胞、ED-1+TLR4+细胞的表达。结果 ta-crolimus 1.0 mg.kg-1给药组大鼠相对肾质量明显低于模型组(P<0.05),tacrolimus(0.5、1.0 mg.kg-1)给药组大鼠UAER较模型组明显减少(P<0.05或P<0.01)。免疫组化显示:模型组大鼠肾组织ED-1+、ED-1+TLR2+、ED-1+TLR4+及NF-κB-p-p65+细胞数明显高于对照组(P<0.01),tacrolimus 0.5与1.0 mg.kg-1给药组ED-1+细胞数与模型组比较无差异,而ED-1+TLR2+、ED-1+TLR4+及NF-κB-p-p65+细胞数则明显低于模型组(P<0.05)。结论糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞TLR2和TLR4的过度表达与巨噬细胞的活化及由此引发的炎症反应有关,tacrolimus可通过直接或间接作用下调肾脏巨噬细胞TLR2与TLR4表达,从而抑制与TLR-NF-κB信号转导及调控途径有关的炎症反应。     

支气管哮喘患者外周血单核细胞因子Th1/Th2失衡的检测

目的观察支气管哮喘患者在发病期是否存在Th1／Th2失衡。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测三组（哮喘发作组、哮喘缓解组及健康对照组，每组17例）外周血单核细胞（PBMC）产生的肿瘤坏死因子γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）。结果与健康对照组比较哮喘急性发作组患者PBMC产生的IFN-γ[（139．6±13．0）pg／L]明显降低（P〈0．01），而IL-4[（114．7±20．8）pg／L]水平增高（P〈0．01），哮喘缓解组两种细胞因子水平与健康对照组差异无统计学意义。结论支气管哮喘急性发作期存在着Th1／Th2失衡。     

N-乙酰半胱氨酸对肝缺血再灌注损伤大鼠Toll样受体4表达的影响

目的：探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对肝缺血再灌注(ischemic reperfusion,I/R)损伤大鼠Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响。方法：Wistar大鼠随机分为3组：假手术组(P)、I/R组、I/R+NAC组。P组只开腹不阻断肝血流,另2组阻断大部肝血流后再灌注,其中I/R+NAC组再灌注前5 min尾静脉给予300 mg/kg NAC。各组分别检测不同时间点的血丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、脂多糖(LPS)与肝组织TLR4 mRNA及其蛋白。结果：在各时间点,P组血ALT,AST,LPS和肝绍织TLR4表达无显著差异；另2组较P组均有显著升高,但I/R+NAC组各指标升高低于I/R组。肝组织TLR4 mRNA表达在I/R组从3 h起显著增强并维持高表达,而I/R+NAC组各时相无显著变化；但两者TLR4蛋白表达变化类似,都在6,24 h表达显著增强。结论：LPS及其TLR4参与了I/R肝损伤的病理过程；NAC减弱肠源性LPS及其启动的TLR4炎症信号通路而保护缺血再灌注肝损伤。