结核患者治疗过程中外周血T细胞和B细胞亚群的动态变化

目的 探讨T和B细胞及其各亚型淋巴细胞的数量在结核患者治疗过程中的动态变化,为抗结核疗效判断提供理论依据。方法 纳入对象包括40例活动性结核患者、65例结核潜伏感染者、94例健康对照者。以流式细胞术检测外周血CD3⁺T细胞、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T细胞的绝对计数,CD19⁺B细胞百分比及绝对数和B细胞各亚群的百分比。结果 治疗前活动性结核患者、健康对照者和潜伏感染者CD3⁺细胞绝对计数和百分比例分别为（796±243）个/μL和（68.35±8.94）%、（1 213±449）个/μL和（65.58±6.07）%、（1 391±538）个/μL和（66.75±6.54）%;CD3⁺CD4⁺分别为（438±153）个/μL和（37.91±7.47）%、（630±254）个/μL和（38.88±6.06）%、（709±242）个/μL和（34.62±3.79）%;CD3⁺CD8⁺T分别为（280±112）个/μL和（23.83±7.33）%、（456±208）个/μL和（23.51±6.52）%、（530±253）个/μL和（25.01±5.90）%;CD19⁺B细胞绝对计数和百分比例分别为（111±50）个/μL和（7.32±2.96）%、（163±69）个/μL和（7.91±2.95）%、（188±99）个/μL和（8.59±3.96）%。治疗前活动性结核患者CD3⁺T、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T细胞的绝对计数比健康对照者和潜伏感染者均低,差异均有统计学意义（P<0.001）。活动性结核患者治疗前、治疗3个月和6个月CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺T细胞绝对计数和百分比例稍增加,但差异无统计学意义（P>0.05）。结核患者未成熟B细胞及记忆性B细胞较健康者及潜伏感染者比较均减少,差异有统计学意义（P<0.05）。结核患者外周血初始B细胞较潜伏感染者增加,差异有统计学意义（P<0.01）,与健康者比较无差异。结核患者外周血浆细胞较健康者比较增加,差异有统计学意义（P<0.05）。结核患者治疗3月记忆性B细胞明显增加,差异有统计学意义（P<0.001）。结核患者治疗过程中,浆细胞进行性减少,差异有统计学意义（P<0.001）。结论 结核患者外周血T、B细胞稳态被打乱,随肺结核患者的治疗及治疗时间的延长,被破坏的T、B细胞稳态将逐渐恢复,动态观察T、B细胞亚群的变化对结核病的诊断和疗效转归的判断有一定的指导意义。     

HIV感染者外周血CXCR5+CD4+T细胞水平与HIV病毒载量相关性

目的 研究外周血CXCR5+CD4⁺滤泡辅助性T细胞（follicular helper T,TFH）水平与HIV感染者血浆HIV病毒载量的相关性。方法 纳入2019年1月—2020年12月期间青海省第四人民医院收治的100例HIV感染者,根据CD4⁺T淋巴细胞计数分为A组（CD4⁺T淋巴细胞计数<200/ μL）23例和B组（CD4⁺T淋巴细胞计数200~<500/ μL）77例,以同期行健康体检80名健康者为对照组。分别检测HIV感染者外周血中HIV病毒载量、CD4⁺T淋巴细胞计数和TFH水平以及健康对照组CD4⁺T淋巴细胞计数以及TFH水平,并进行相关性分析。结果 A组血浆HIV病毒载量为（4.70±1.13） log /mL显著高于B组（2.74±0.74）log/mL（P<0.05）。A、B和健康对照组CD4⁺T淋巴细胞计数分别为（113.64±23.44）/μL、（334.10±31.52） / μL和（995.41±49.23） /μL,三者比较差异有统计学意义（P<0.05）。A、B和健康对照组TFH细胞计数绝对值分别为（18.63±5.67） /μL、（59.35±13.73） /μL和(194.85±25.78) /μL,A、B组均低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;A、B和健康对照组TFH细胞百分比分别为（15.83±4.05）%、（17.57±5.08）% 和（19.59±4.25）%,A、B组均低于健康对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关性分析显示,HIV病毒载量与CD4⁺T淋巴细胞计数以及TFH细胞计数呈负相关（P<0.05）。结论 HIV感染者外周血CD4⁺T淋巴细胞计数和TFH计数与HIV病毒载量呈负相关,且TFH计数可作为病情诊断和预后评估的重要指标,并有望成为HIV感染免疫治疗的新靶标。     

白细胞介素-37在活动性肺结核中对单核细胞分泌炎症因子的调节作用

目的 研究白细胞介素(interleukin,IL）-37、干扰素(interferon,IFN)-γ和IL-10在活动性肺结核患者单核细胞中的表达水平,探讨IL-37对IFN-γ和IL-10的调节作用及其临床意义。方法 选取深圳龙岗中心医院2016年9月—2017年4月诊断为活动性肺结核的患者32例为结核组,以同期32例健康人群为对照组,提取外周血单核细胞,经脂多糖（LPS）刺激,IL-37抗体处理后,通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清中IL-37、IFN-γ和IL-10水平,实时荧光定量PCR检测IL-10、IFN-γmRNA表达水平。结果 活动性肺结核组上清中IL-37、IL-10水平较健康对照组升高[(311.49±59.72) pg/mL vs (138.72±42.16) pg/mL、(302.65±38.2) pg/mL vs (65.86±6.06) pg/mL],IFN-γ水平下降[(160.88±11.61) pg/mL vs (200.26±13.84) pg/mL],差异有统计学意义（P<0.05）。经IL-37抗体干预后,活动性肺结核组IFN-γ、IFN-γmRNA较干预前升高[(193.76±12.46) pg/mL vs (160.88±11.61) pg/mL、(0.88±0.11) pg/mL vs （0.23±0.08）pg/mL],IL-10、IL-10mRNA较干预前下降[(160.24±16.76) pg/mL vs (302.65±38.2) pg/mL、（8.32±2.82）pg/mL vs （15.84±4.02）pg/mL],差异有统计学意义（P<0.05）。健康对照组与干预前比较,IFN-γ、IL-10蛋白及mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 活动性肺结核患者外周血单核细胞高表达IL-37;IL-37可抑制IFN-γ分泌,同时促进IL-10分泌,IL-37可能成为结核治疗的新靶点。     

泡型肝包虫患者外周血树突状细胞成熟度

目的 通过研究泡型肝包虫病(alveolar echinococcosis, AE)患者外周血中树突状细胞(dendritic cells, DC)的成熟度,探究DC在AE患者免疫发病机制中的作用。方法 选取2015年9月—2016年6月于青海大学附属医院初诊并经病理证实为AE患者及健康体检者各20例,流式细胞仪检测外周血CD80⁺细胞、CD86⁺细胞、CD83⁺细胞及(CD80%+CD83%+CD86%)/ CD14%比值。选取2016年6月—2017年2月于该院初诊并经病理证实为AE患者及健康体检者各30例,利用流式细胞仪检测DC表面CD83、CD86、CD80表达率。结果 AE组与对照组外周血检测DC表面的共刺激分子(CD80%+CD83%+CD86%)/ CD14%差异无统计学意义（P>0.05),CD86细胞表达（7.94±1.32）较对照组低（P<0.05)。AE组外周血单核源性培养DC表面的共刺激分子CD80、CD83、CD86的表达水平(41.71±8.16、39.69±8.05、50.79±7.72）均低于对照组（62.27±5.94、56.37±7.33、72.00±7.36）（P均<0.05）。结论 AE患者外周血DC成熟度比健康对照组低,存在成熟障碍,可能会导致宿主抗原提呈功能下降,机体抗感染能力降低,从而促进了多房棘球蚴感染的进展。     

IL-37在活动性肺结核中的表达及其与IFN-γ和IL-10的相关性

目的 研究IL-37、IFN-γ和IL-10在活动性肺结核患者血清中的表达水平,分析细胞因子间的相关性,探讨其临床意义。方法 选取深圳龙岗中心医院2016年9月—2017年4月诊断为活动性肺结核的患者25例为结核组,同期25例健康人群为对照组,通过酶联免疫吸附法（ELISA）检测结核组治疗前后及对照组血清中IL-37、IFN-γ和IL-10水平,并分析其相关性。结果 活动性肺结核患者治疗前血清IL-37、IL-10水平较对照组升高[(308.87±62.52)vs.(144.72±45.26) pg/mL;(400.75±46.89) vs.(62.75±5.85) pg/mL],IFN-γ水平下降[(167.25±12.71) vs.(195.50±13.70)pg/mL],差异有统计学意义（P<0.05）。活动性肺结核患者治疗后血清IL-10水平较对照组仍有升高[(120.25±17.04) vs.(62.75±5.85)pg/mL],且差异有统计学意义（P<0.05）,IL-37及IFN-γ水平较对照组差异无统计学意义（P>0.05）。活动性肺结核患者治疗前与治疗后相比,IL-37、IL-10水平上升[(308.87±62.52)vs.(137.88±62.47)pg/mL;(400.75±46.89) vs.(120.25±17.04) pg/mL],IFN-γ水平下降[(167.25±12.71) vs.(195.75±4.99) pg/mL],差异有统计学意义（P<0.05）。相关性分析提示IL-37与IFN-γ具有负相关关系。结论 血清IL-37、IFN-γ和IL-10水平呈现与活动性肺结核病情相关的动态变化,IL-37对抗结核免疫的负性调节可能与抑制IFN-γ分泌有关。     

结核性胸膜炎患者外周血和胸水中Th17、Th1细胞检测分析

目的 探讨结核性胸膜炎患者Th17、Th1细胞免疫应答的特性及作用。方法 应用流式细胞术检测30例健康对照组（HD）、23例潜伏感染组（LTBI）、20例结核性胸膜炎组(TP) 患者外周血单个核细胞（PBMC）与胸水单个核细胞（PFMC）Th17、Th1细胞的变化情况。结果 结核性胸膜炎患组外周血非特异性Th17和Th1细胞百分比分别为（2.81±0.94）和（27.85±11.02）,低于健康对照组（4.63±1.63）、（36.34±9.39）和潜伏感染组（4.13±1.91）、（42.37±13.87）,差异有统计学意义（P<0.001,P<0.05）;结核性胸膜炎患者胸腔积液PFMC的非特异性Th17细胞百分比为（1.85±1.34）,低于外周血PBMC的（2.81±0.94）,差异有统计学意义(P<0.01);同时PFMC结核菌特异性Th17、Th1细胞的百分比分别为（0.68±0.13）和（6.91±1.16）,高于PBMC（0.25±0.11）和（1.98±0.56 ）,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论 结核性胸膜炎患者外周血非特异性Th17、Th1细胞应答及感染局部Th17的非特异性应答反应均受到抑制;感染局部特异性Th17、Th1应答处于高水平状态;Th17、Th1细胞应答在结核性胸膜炎的发病中发挥重要作用。     

初治、复治肺结核患者细胞免疫功能与营养状况比较

目的 探讨初治、复治肺结核患者细胞免疫功能与营养状况。方法 选择2013年12月—2016年12月在河北省胸科医院进行治疗的200例肺结核患者的为研究对象,按照患者是否为初次治疗分为初治组和复治组,其中初治组117例,复治组83例,分析两组患者的细胞免疫和营养状况指标。结果 复治组患者的CD3⁺、 CD4⁺T细胞与CD4⁺ /CD8⁺数值分别为（64.15±9.12）%、（35.21±6.37）%、（1.13±0.09）%,均低于初治组（71.07±8.07）%、（43.28±7.96）%、（1.52±0.13）%,而CD8⁺T细胞计数复治组（36.36±7.58）%高于初治组（28.55±6.89）%,差异均具有统计学意义（P<0.05）;初治组患者的NK细胞、B淋巴细胞、IgG、IgA、IgM数值分别为（12.37±5.98）%、（12.41±7.74）%、（12.37±6.28） g/L、（2.13±0.26） g/L、（1.34±0.52） g/L,复治组为（11.89±6.38）%、（13.21±6.41）%、（13.35±7.24） g/L、（2.17±0.31） g/L、（91.42±0.45） g/L,两组比较差异均不具有统计学意义（P>0.05）;复治组BMI、血红蛋白、总淋巴细胞计数和白蛋白数值分别（18.64±3.68） kg/m²、（110.36±15.57） g/L、（1.63±0.52）×10⁹/L、（30.05±5.84） g/L,均低于初治组相应数值（20.34±3.58）kg/m²、（119.86±17.85） g/L、（1.92±0.61）×10⁹/L、（34.25±6.31） g/L,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 初治与复治肺结核患者的细胞免疫功能指标在疾病的诊断、治疗和预后推断中有着重要意义,在进行临床诊断和治疗过程中,需要对此类指标进行监测。复治肺结核患者身体营养状况较差,需要在治疗过程中保证营养的摄入。     

艾滋病合并肺结核患者IL-6、hs-CRP、TNF-α水平和危险因素分析

目的 探究艾滋病（AIDS）合并肺结核的危险因素及患者白介素-6（IL-6）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平检测的临床意义。方法 在2010年1月—2020年12月发现515例AIDS患者中,选择73例AIDS合并肺结核患者为研究组,分析其感染性特点及临床特征。并以同期51例AIDS未合并肺结核患者为对照组,分别采用Logistic回归、ROC曲线分析AIDS患者合并肺结核的危险因素及各危险因素对其出现肺结核的预测价值;比较研究组及对照组的IL-6、hs-CRP、TNF-α水平,分析其与AIDS患者合并肺结核的关系。结果 研究组和对照组基线CD4⁺T细胞≤200个/μL、吸烟和结核病患者接触史比例分别为57.5%（42/73）和33.3%（17/51）、38.4%（28/73）和19.6%（10/51）、46.6%（34/73）和23.5%（12/51） ,而卡介苗接种史比例分别为24.7%（18/73）和45.1%（23/51） ,差异均有统计学意义（χ²=7.050,4.965,6.834,5.668,P<0.05）;基线CD4⁺T细胞≤200个/μL、有结核病患者接触史为导致AIDS患者合并肺结核的危险因素,有卡介苗接种史为保护因素（P<0.05）;基线CD4⁺T细胞、吸烟、结核病患者接触史、卡介苗接种史联合检测预测AIDS患者合并肺结核的AUC大于各指标单独检测（P<0.05）;研究组IL-6、hs-CRP、TNF-α水平高于对照组（P<0.05）。结论 AIDS合并肺结核患者IL-6、hs-CRP、TNF-α水平显著升高,基线CD4⁺T细胞≤200个/μL、有结核病患者接触史为导致AIDS患者合并肺结核的危险因素,且各危险因素联合检测对AIDS患者合并肺结核具有预测价值。     

乙型肝炎病毒表面抗原和抗体双阳性患者外周血T淋巴细胞亚群分布

目的 观察乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）和表面抗体（HBsAb）双阳性患者外周血T淋巴细胞亚群分布。方法 以2014—2020年上海市第十人民医院和无锡市第九人民医院收治36例HBsAg和HBsAb双阳性患者为实验组,以同期无锡市第九人民医院40例HBsAg阳性、HBsAb阴性患者作为对照组。采用流式细胞术检测并比较实验组和对照组患者外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ T细胞比例,采用Pearson相关分析评价患者外周血T细胞比例及血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平与血清HBsAb水平间的相关性。结果 实验组和对照组患者中位年龄、性别构成、ALT及AST水平、HBV DNA载量> 10³ copies/mL患者比例、HBV E抗原（HBeAg）阳性率、HBV E抗体（HBeAb）阳性率、HBV核心抗体（HBcAb）阳性率差异均无统计学意义（P>0.05）。实验组和对照组患者外周血CD3⁺[（71.83±1.50）% vs （72.75±1.47）%;t=0.66,P>0.05]、CD4⁺[（36.81±1.53）% vs （39.88±1.57）%;t=1.43,P>0.05]、CD8⁺ [（33.17±2.04）% vs （32.40±1.75）%;t=0.77,P>0.05] T细胞比例差异均无统计学意义。Pearson相关分析显示,HBsAg、HBsAb双阳性患者血清HBsAb含量与外周血CD3⁺（r=0.026,P=0.65）、CD4⁺ （r=?0.08,P=0.16）、CD8⁺ （r=0.09,P=0.24）、CD4⁺/CD8⁺ T细胞比值（r=?0.005,P=0.35）及ALT（r=0.04,P=0.56）、AST水平（r=0.002,P=0.69）T细胞比例均无显著相关性。结论 HBsAg、HBsAb双阳性患者与HBsAg阳性、HBsAb阴性患者外周血CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ T细胞亚群比例均无显著差异。     

糖尿病合并感染患者糖化血红蛋白与T淋巴细胞亚群水平相关分析

目的 探讨糖尿病合并感染患者糖化血红蛋白与T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺及CD8⁺水平变化相关性。方法 选取2019年1月—2021年4月泸州市人民医院收治112例糖尿病患者为病例组,以同期接受健康体检的80例为对照组,糖尿病患者根据是否合并感染依次分感染组48例和无感染组64例,观察各组糖化血红蛋白（HbA1c）和T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺及CD8⁺水平变化情况,并分析HbA1c与CD3⁺、CD4⁺及CD8⁺水平相关性;分析糖尿病感染组患者治疗前后CD3⁺、CD4⁺及CD8⁺水平变化。结果 病例组和对照组空腹血糖、餐后2 h血糖以及HbA1c分别为（9.24±0.89）mmol/L和（4.81±0.63）mmol/L、（14.98±1.56）mmol/L和（6.14±0.48）mmol/L、（7.47±0.89）% 和（4.05±0.35）%,病例组显著高于对照组,差异有统计学意义（t=15.012,14.614,12.266,P<0.05）,糖尿病合并感染组空腹血糖、餐后2 h血糖以及HbA1c虽高于无感染组,但差异无统计学意义（P>0.05）;糖尿病合并感染组和无感染组CD3⁺和CD4⁺水平分别为（60.32±2.14）%和（65.57±2.53）%、（33.18±1.59）%和（37.42±1.74）%（t=11.596,13.237,P<0.05）,两组CD8⁺水平差异无统计学意义（P>0.05）;经Pearson相关性分析,HbA1c与CD3⁺和CD4⁺呈负相关（r=-0.354,-0.512,P<0.05）,与CD8⁺呈正相关（r=0.336,P<0.05）;感染组治疗后CD3⁺和CD4⁺显著升高,治疗前后比较差异具统计学意义（t=9.518,8.217,P<0.01）。结论 糖尿病患者血糖水平升高,免疫机能减弱,HbA1c与CD3⁺和CD4⁺呈负相关,与CD8⁺呈正相关。     

IL-6在结核患者血浆中的表达及临床意义

目的 检测不同人群血浆标本中白细胞介素-6（IL-6)的表达情况,探讨其在结核病诊断中的临床意义。方法 以蛋白芯片筛选结核诊断标志物时发现IL-6在结核患者中高表达,扩大样本采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测39例实验室确诊结核病组(patients with tuberculosis, TB)、31例结核潜伏感染组（latent tuberculosis infection, LTBI）及31例健康对照组（healthy control, HC）3组人群血浆中IL-6水平的差异,以评价IL-6对结核病的效能。结果 蛋白芯片检测发现IL-6在TB组、LTBI组和HCTB组中表达分别为（550.39±479.82）pg/mL、(16.67±12.95) pg/mL、(126.89±84.75) pg/mL, TB组明显高于LTBI组及HC组,差异有统计学意义（P<0.01）。以ELISA,TB组、LTBI组和HCTB组中表达分别为（8 359.85±7 487.13） pg/mL、（1 102.54±2 079.32） pg/mL、（1 873.60±4 320.03） pg/mL,TB组明显高于LTBI组及HC组,差异有统计学意义（P<0.01）。分辨TB和HC的效能曲线下面积（Area Under Curve,AUC）为0.857 7,灵敏度为79.49%,特异度为80.65%;分辨TB和LTBI的效能AUC为0.883 4,灵敏度为92.31%,特异度为70.97%。结核患者血浆中IL-6的表达水平显著高于健康对照和结核潜伏感染人群（P<0.01）。结论 结核患者血浆中IL-6的表达显著高于健康对照和潜伏感染者,IL-6可能作为用于区分活动性结核与潜伏结核感染人群的生物标识,用于早期诊断。     

伯氏疟原虫感染小鼠脾脏T淋巴细胞及其表面分子的检测

目的 探讨感染伯氏疟原虫的C57BL/6小鼠脾脏不同免疫细胞的含量及表面分子变化。方法 将C57BL/6小鼠尾静脉注射伯氏疟原虫进行感染,6 d后分离感染组和正常对照组小鼠的脾脏,制备单细胞悬液,然后通过流式细胞术检测小鼠CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞的含量及其表面分子CXCR3、CD69、CD62L的表达水平变化情况。结果 感染伯氏疟原虫的小鼠脾脏CD8⁺T细胞（5.51%±0.76%）、γδT细胞（0.31%±0.03%）和T细胞（18.60%±3.37%）的百分比含量较正常组（14.04%±1.31%、0.75%±0.07%、33.27%±3.76%）明显减低,差异有统计学意义（P<0.01）;与正常组（21.45%±0.10%、33.49%±3.17%、16.72%±2.16%）相比,感染组小鼠脾脏CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞的CXCR3（6.30%±0.15%、18.34%±0.61%、5.25%±0.25%）均明显下调（P<0.05）;感染组小鼠脾脏CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞的CD62L（67.98%±1.18%、54.37%±0.98%、55.06%±1.53%）较正常组（91.96%±0.75%、71.38%±1.02%、82.10%±1.04）%）均明显下调（P<0.05）,而感染组小鼠脾脏CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞的CD69 （28.13%±0.37%、42.58%±2.06%、34.65%±0.43%）表达水平比正常组（3.70%±0.62%、11.59%±0.41%、7.69%±1.56%）高,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 感染伯氏疟原虫的C57BL/6小鼠脾脏CD8⁺T细胞、γδT细胞和T细胞及其表达的CXCR3和CD62L均明显下调,而CD69的表达水平升高,提示机体感染疟原虫后,小鼠的T淋巴系细胞增殖不明显,但其迁移情况有所不同,存在一定的复杂性。