葡萄球菌肠毒素A体内诱导小鼠T细胞增殖的实验研究

目的:观察葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)体内对小鼠脾T淋巴细胞增殖的作用规律.方法:采用SEA不同的注射方式和注射剂量,对小鼠脾T淋巴细胞进行体内单次诱导,用流式细胞术检测CD3的表达和测定胞内、外IL-2水平.结果:四种注射方式均能刺激体内T细胞的增殖,但静脉和腹腔注射对T细胞的影响最显著.根据对T细胞刺激程度和效力维持时间,选择腹腔注射为最佳注射途径.SEA剂量在5-15μg范围内均能促进CD3表达显著上升,最佳剂量为10μg.SEA体内注射后能诱导IL-2的大量合成和释放,促进T细胞的增殖.结论:体内SEA刺激对T细胞具有强大的促增殖作用,并且受SEA注射途径和剂量的影响.     

葡萄球菌A蛋白体内治疗方式对疗效的影响

本文以肉瘤S~(180)、艾氏腹水癌为模型,研究了SPA、SAC和SAW体内注射的治疗方式对疗效的影响。结果表明,纯品SPA对腹水型肿瘤无效,菌体SAC和SAW则效果显著,三者的治疗途径与肿瘤生长部位接近或相同时效果较好,SAC的治疗剂量与疗效有关。     

A蛋白类制剂体内抗肿瘤效应与联合化疗的研究

本文旨在比较A蛋白类制剂(SPA、SAC和SAW)与CP的体内抗肿瘤效应,确定它们的免疫保护强度,寻找提高其免疫疗效的方法。结果表明,A蛋白类制剂体内抗实验性肿瘤的疗效接近CP,尽管它们不足以对付10~7瘤细胞(EAC)的攻击,但其疗效可通过与化疗药物的联合应用而提高。     

因子Ⅶ-金黄色葡萄球菌肠毒素A融合蛋白的抗肿瘤效果

目的研究鼠因子Ⅶ(mfⅦ)与金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)融合蛋白的抗肿瘤生长和转移活性。方法构建表达Ⅶ因子SEA融合蛋白的腺病毒载体,用293包装细胞系制备病毒Ad/mfⅦSEA。局部荧光检测证明其表达能力和安全性后,直接应用病毒感染的293细胞以皮下注射的方式进行试验。采用小鼠205H12肺转移模型和小鼠RM1皮下肿瘤模型检测mfⅦSEA对小鼠皮下肿瘤生长和肺转移形成的抑制情况。结果腺病毒感染的293细胞诱导的二次感染只在注射局部产生,而对心、肝、肾等重要脏器无任何影响。小鼠体内实验结果显示,mfⅦSEA治疗组肺转移数(23±8)与空载体对照组(193±38)和PBS对照组(211±42)相比,差异有统计学意义(P<0.01)。在抗小鼠前列腺肿瘤的动物实验中,mfⅦSEA对皮下肿瘤的抑制非常明显,第23天时,治疗组皮下肿瘤的体积平均为(342.6±107.1)mm3,明显小于空载体对照组(2244.3±350)mm3和SEA对照组(1208.3±210)mm3。结论mfⅦSEA融合蛋白能明显抑制小鼠皮下肿瘤的生长和肺转移的形成。     

莪术提取液体内外抗肿瘤作用的实验研究

目的 探讨莪术对肿瘤的抑制作用,为临床应用其抗肿瘤治疗提供科学依据。方法 应用整体动物实验方法及体外MTT法,检测不同浓度的莪术提取液和抗肿瘤药物环磷酰胺、5-Fu作用下,小鼠移植肿瘤肉瘤S180、肝癌H22、艾氏腹水癌的肿瘤抑制率、生命延长期及肠癌细胞株SW480的细胞抑制率。结果 各试验浓度的莪术提取液对肉瘤S180有不同程度的抑制作用,抑瘤率随提取液剂量的增加而增高,同时毒性也相应增加。莪术提取液对肝癌H22也有较强的抑制作用,延长了艾氏腹水癌小鼠的生存时间,且毒性反应出现较晚,中毒程度也轻于肉瘤S180组。莪术提取液在较高浓度(10.0 PPC)时,明显抑制肠癌细胞SW480的增殖活性,5.0 PPC以下浓度的抑瘤作用不及化疗药物。体内外实验中均产生不同程度的毒性。结论 莪术提取液可有效抑制肿瘤生长,在临床应用时注意观察毒性反应。     

丹参酮ⅡA体内抗肿瘤作用的研究进展

近年来丹参酮ⅡA的抗肿瘤作用备受关注,体外研究证实丹参酮ⅡA对多种细胞具有细胞毒性并可诱导细胞分化和凋亡,但其体内抗肿瘤作用及机制尚未被阐明.丹参酮ⅡA剂量差异大,用药途径有灌胃、皮下注射、腹腔注射和静脉注射等,疗程不等.水溶性差、肠道吸收差、口服生物利用度差等影响了丹参酮ⅡA的应用,这些也是下一步研究丹参酮ⅡA方向.     

体内实验研究“旁观者”效应机理

近来发现遗传变异而表达单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV—tk)的肿瘤细胞在小鼠体内有杀伤肿瘤细胞效果。据证实,这些细胞在接触丙氧鸟苷(GCV)后可能对未经处理过之“旁观者”(Bystander)肿瘤细胞有杀伤效应,而且HSV—tk基因阳性肿瘤细胞对未经转导过之肿瘤细胞之杀伤作用取决于小鼠体内完整的免疫系统。目前正在进行的研究分析了在注射HSV—tk基因转导细胞进入小鼠体内后发生的宿主抗肿瘤免疫反应。该研究用BALB/C小鼠,在第0天,通过向其     

促吞噬肽促进体内生成一氧化氮的抗肿瘤实验研究

脾脏是体内最大的免疫器官 ,脾内产生的脾脏因子促吞噬肽 (ｔｕｆｔｓｉｎ)有着重要的免疫调节功能[1] 。巨噬细胞在淋巴因子诱导下生成的一氧化氮 (ＮＯ )是 1种重要的细胞毒效应分子[2 ] 。本实验通过观察ｔｕｆｔｓｉｎ、ＮＯ与肿瘤生长之间的关系 ,探讨ｔｕｆｔｓｉｎ的抗肿瘤作用机制。1　材料和方法1.1　实验动物及分组昆明种雌性小鼠 32只 ,体重 ( 2 0± 2 )ｇ ,由江西医学院实验动物科学部提供 ,小鼠随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ 4组 ,每组 8只。主要试剂和仪器 :ｔｕｆｔｓｉｎ、ＮＧ 硝基 Ｌ 精氨酸 (Ｌ ＮＮＡ )为美国Ｓｉｇｍａ公司…     

绿色荧光蛋白转染胶质瘤细胞的体内实验研究

 目的　利用体外转染绿色荧光蛋白 (Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因的胶质瘤细胞建立大鼠移植模型 ,并探索利用该模型研究肿瘤体内侵袭的可行性。方法　携有EGFP基因的 p EGFP- N3质粒体外转染 C6胶质瘤细胞 ,筛选稳定表达 GFP的细胞克隆并以立体定向法植入 SD大鼠脑实质内建立肿瘤移植模型。 4周后处死大鼠并制作连续石蜡切片 ,相邻切片分别作 HE、免疫组化染色和荧光显微镜检测。结果　GFP于体内稳定表达 ,在荧光显微镜下可较容易区分肿瘤细胞和非肿瘤细胞 ,并能检测到侵袭至远端的单个肿瘤细胞 ,其检测效率明显高于HE和免疫组化染色。结论　EGFP基因体外转染 C6胶质瘤细胞并建立大鼠脑内肿瘤移植模型 ,是研究胶质瘤体内侵袭的有效模型和方法。     

5－Fu佐剂包裹物的抗肿瘤机理的实验研究

本文较系统地作了福氏完全佐剂（Ｆｒｅｕｎｄ＇ｓｃｏｍｐｌｅｔｅａｄｊｕｖａｎｔ，ＦＣＡ）包裹５－Ｆｕ的抗肿瘤机理的实验研究。ＦＣＡ包裹５－Ｆｕ相的对包封率平均为：８４．５％。５－Ｆｕ－ＦＣＡ体外缓释试验结果和Ｗｉｓｔａｒ大鼠体内５－Ｆｕ及５－Ｆｕ－ＰＣＡ吸收试验均表明：５－Ｆｕ用ＦＣＡ包裹后，在体内外具有缓慢释放的作用。５０～２００μｇ浓度的５－Ｆｕ在不同作用时间里对肿瘤细胞增殖抑制率随作用时间延长而增加，统计三次实验结果（对Ｈ＿（２２）肝癌细胞），５－Ｆｕ２００μｇ／ｍｌ作用１０分钟对肿瘤细胞增殖抑制率为３４．６６±６．０２；５０μｇ／ｍｌ作用２４小时的抑制率为６１．３５±７．１７。两者比较差别显著（Ｐ＜０．０８）。结果提示：在肿瘤局部低浓度５－Ｆｕ的持续存在，在一定情况下，对肿瘤的抑制作用更强。     

5－Fu佐剂包裹物的抗肿瘤机理的实验研究

 本文较系统地作了福氏完全佐剂(Freund'scompleteadiuvant，FCA)包裹5-Fu的抗肿瘤机理的实验研究。FCA包裹5-Fu相的对包封率平均为：84.5%。5-Fu-FCA体外缓释试验结果和wistar大鼠体内5-Fu及5-Fu-PCA吸收试验均表明：5-Fu用FCA包裹后，在体内外具有缓慢释放的作用。50～200μg浓度的5-Fu在不同作用时间里对肿瘤细胞增殖抑制率随作用时间延长而增加，统计三次实验结果(对H＿(22)肝癌细胞)，5-Fu200μg/ml作用10分钟对肿瘤细胞增殖抑制率为34.66±6.02；50μg/ml作用24小时的抑制率为61.35±7.17。两者比较差别显著(P<0.08)。结果提示：在肿瘤局部低浓度5-Fu的持续存在，在一定情况下，对肿瘤的抑制作用更强。     

重组人Endostatin/MBP 融合蛋白的体内外抗肿瘤作用研究 *

血管生成是实体肿瘤生长和转移的必要条件,新生血管为异常增殖的肿瘤细胞提供充足的营养。为了刺激血管生成,肿瘤分泌一系列促血管生长因子,如成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ和ｂＦＧＦ）等,新近研究发现,许多恶性肿瘤还可产生血管生成抑制因子,如血小板因子４（ＰＦ４）、凝血栓蛋白、Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ［１］和Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ［２］等。越来越多的实验表明,血管生成是受血管刺激因子和抑制因子的网络来调节的,肿瘤生长是在血管生长因子和抑制因子失衡情况下血管大量再生而引起的。我国徐根兴等也在研究内皮细胞过程中发…     

毛蚶蛋白抗肿瘤活性研究

目的： 分离得到毛蚶蛋白活性组分并研究其体外抗肿瘤机制及对免疫细胞的作用。方法：低温水提及硫酸铵沉淀法获取毛蚶蛋白活性组分;MTT法检测50、100、200和400 μg/mL的毛蚶蛋白活性组分分别作用24、48和72 h后对人结直肠癌细胞HT-29、HCT116,人肝癌细胞HepG-2,人肺癌细胞A549的细胞毒活性;倒置相差显微镜下观察细胞活性及Giemsa染色观察毛蚶蛋白活性组分对肿瘤细胞及核形态变化的影响,流式细胞术检测毛蚶蛋白活性组分对人结直肠癌HT-29细胞周期及凋亡的影响;MTT法检测毛蚶蛋白活性组分对小鼠巨噬细胞RAW264.7生长的影响,中性红法测定其对小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬能力的影响,Griess法检测其对小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌NO的影响。结果：毛蚶蛋白活性组分对多种人肿瘤细胞系有抑制作用,且呈作用时间与剂量依赖性;流式细胞术结合Giemsa染色发现,其主要引起HT-29细胞G2~M期阻滞,多核细胞增加,并具一定的诱导细胞凋亡作用;在50～100 μg/mL下能刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7生长,增强其吞噬能力及NO分泌活性。结论：毛蚶蛋白活性组分具有一定抗肿瘤活性,主要机制为引起肿瘤细胞G2~M期阻滞及诱导其凋亡,且具一定免疫激活作用。     

亚甲蓝体内抗肿瘤作用及药理学研究

Methylene blue can inhibit the growth of Ehrlich ascitic tumor, L1210 leukemia and P388 leukemia in mice. The average life span of the treated animals was obviously longer than that of the controls. Methylene blue was superior to 5-Fu in the treatment of L1210 leukemia of mice and two thirds of the mice with P388 leukemia were healthy and survived for more than 60 days after administrated different doses of methylene blue. When adriamycin was given simultaneously with methylene blue to mice, the acute toxic effect of adriamycin was decreased and the survival time prolonged. Methylene blue is a highly ionized and a rapidly eliminated drug which can combine well with tissues at higher concentration maintained for several hours and can easily pass through the blood-brain barrier.     

紫杉醇脂质体的体内外抗肿瘤作用研究

[目的]研究注射用紫杉醇脂质体的体外细胞毒作用和体内抗瘤作用及药物毒性。[方法]用MTT法检测紫杉醇脂质体对人肺腺癌细胞株SPC-A1的体外杀伤作用;建立小鼠实体型S180肿瘤模型,共50只,随机分为5组:5%葡萄糖溶液组(空白对照组)、紫杉醇注射液10mg/kg组和15mg/kg组,紫杉醇脂质体10mg/kg组和15mg/kg组,观察各组抑瘤作用和小鼠一般状态的变化,并检测肝功能和骨髓像改变。[结果]紫杉醇脂质体对体外培养的人肺腺癌细胞株SPC-A1在浓度为2.5ng/ml、5.0ng/ml和10.0ng/ml时,其抑制率分别为39.1%、51.9%和55.8%。体内给予紫杉醇脂质体10mg/(kg·d),15mg/(kg·d)3d,对小鼠S180实体型的抑瘤率分别为31.12%和45.29%,与同样剂量紫杉醇注射液组比较无显著性差异;给药后动物行为和小鼠体重变化率较紫杉醇注射液组接近对照组;骨髓抑制程度亦低于同剂量紫杉醇注射液组。[结论]相同给药剂量下,紫杉醇脂质体的体内外抗肿瘤活性与紫杉醇注射液相接近,但药物毒副反应明显降低。     

葡萄球菌A蛋白(SPA)治疗肿瘤的研究进展

葡萄球菌A 蛋白(SPA)是某些血浆凝固酶阳性、金黄色葡萄球菌细胞壁的一种蛋白,具有与人和多种哺乳动物血清中IgG 分子Fc段结合的特点,人们利用此特点建立了许多新的实验方法。此外,也发现SPA 具有免疫、过敏原性、抗吞噬、固定补体、促有丝分裂、抑制ADCC 和去封闭等多种生物活性。因此,有的学者应用SPA 治疗肿瘤以及由某些抗体和免疫复合物所引起的疾病。据文献报导,经动物试验和临床使用均取得了一定进展,特综合介绍如下:     

单克隆抗体导向的超抗原葡萄球菌肠毒素A抗肝癌实验研究

目的:制备超抗原(SAg)葡萄球菌汤毒素A(SEA)与搞人肝细胞癌单克隆抗体(McAb)F(ab’)_2段的结合物,并观察其介导外周皿单个核细胞(PBAMC)的抗人肝癌作用,方法:提取McAb HAbl8,用木瓜蛋日酶制取其F(ab’)_2段,再用N-琥珀酰亚氨基-3-(2二硫吡啶)丙酸酯(SPDP)制备HAb18 F(ab’)_2-SEA结合物;经凝胶色谱柱纯化后用SDS-PAGE鉴定各收集峰,免疫组化ABC法鉴定此结合物的抗体活性,MTT法观察HAb18 F(ab’)_2SEA介导PBMC的抗肝癌作用.结果:成功地制备了HAb18 F(ab’)_2-SEA结合物,并且此结合物具有明显的介导PBMC靶向杀伤肝癌细胞的作用,并与其剂量呈正相关.对照组无此作用结论:MCAb与SAg结合物导向治疗肝癌是一种有发表前景的肝癌免疫治疗模式.     

重组人Endostatin/MBP融合蛋白的构建纯化及其体内外抗肿瘤研究

血管生成是实体肿瘤生长和转移的必要条件,新生血管为异常增殖的肿瘤细胞提供充足的营养.血管生成是受血管刺激因子和抑制因子的网络来调节的,在众多的血管生长抑制因子中,angiostatin和endostatin可特异性抑制内皮细胞增殖.O′Reilly等从鼠血管内皮瘤细胞株(EOMA)得到一种分子量为20kD的新蛋白质,测序证明它是胶原蛋白十八C末端的片断,并将其命名为endostatin,用重组鼠endostatin治疗几乎可完全抑制肿瘤引起的新血管生成,显示了极大的抗癌效果.徐根兴等也在研究内皮细胞过程中发现了endo-statin,并从人肝脏cDNA文库中筛选克隆得到人endostatin基因,通过T7和SP6进行DNA序列测定,Endostatin由522个核苷酸组成,共184个氨基酸.与小鼠Endostatin氨基酸序列比较,具有83.33%同源性.由于endostatin基因产物难溶,     

天花粉蛋白对荷人结肠癌SW-1116裸鼠的体内实验研究

目的：研究天花粉蛋白（TCS>）体内抗结肠癌作用。方法：将人结肠癌SW－1116移植于Swiss-Df品系8周龄裸小鼠肾包膜下，次日以不同剂量TCS注射入探小鼠腹膜腔内，以丝裂霉素（MMC）为阳性对照，生理盐水（NS）为阴性对照，每日给药一次，连续五日，观察天花粉蛋白对移植瘤体内抑制情况。结果：TCS剂量为0.75mg/kg组对移植瘤SW－1116的抑癌率为41.2％（P＜0．001），较1.0mg／kgMMC组（抑癌率31.28％）为佳；0.5mg/kgTCS组抑癌率为27.50％（P＜0.05），远小于TCS对小鼠的半数致死量（13．4mg/kg）。结论：TCS对结肠癌SW－1116裸鼠有体内抑癌作用。