哮喘大鼠肺组织p38蛋白激酶表达的变化及地塞米松对其影响

p38蛋白激酶 (p38MAPK)是新近发现的与炎症、应激反应密切相关的蛋白激酶 ,参与了肥大细胞、嗜酸性粒细胞的定位迁移和淋巴细胞的发育、分化、成熟和活化的全过程 ,提示p38MAPK可能与支气管哮喘的气道炎症机制相关。为探讨p38MAPK在哮喘发病机制中的作用 ,我们选择了雄性SD大鼠 2 0只 ,体重 2 2 0± 4 0g ,2～ 3月龄。随机分成 3组 :A组为正常对照组 ,以生理盐水代替抗原进行注射和雾化吸入 ;B组为阳性对照组 ,给予鸡卵清蛋白 (OVA ,美国Sigma公司 )致敏和刺激复制哮喘模型 ;C组为地塞米松 (DEX)干预组 ,每天予以OVA雾化吸入前分…     

肾上腺髓质素对高肺血流大鼠肺组织氧化应激的调节作用

目的:研究肾上腺髓质素(ADM)对高肺血流性肺动脉高压大鼠肺组织氧化应激的调节作用及其机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为对照组、分流组和分流+ADM组。对后2组大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术。8周后,对分流+ADM组大鼠皮下埋微量渗透泵持续予ADM 1.5μg·kg~(-1)·h~(-1)。继续饲养2周后,右心导管法测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室/(左心室+室间隔)重量比值,检测肺中、小肌型动脉相对中膜厚度(RMT),比色法测定肺组织匀浆丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,Western blot法检测肺组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)的表达。结果:与对照组相比,分流组大鼠的mPAP、右心室肥厚程度以及肺中、小肌型动脉RMT均明显增加,肺组织MDA含量明显升高,T-AOC、SOD活性和GSH-Px活性均明显降低,肺组织NOX4表达明显升高。ADM使肺动脉压力明显回降,右心室肥厚程度减轻,肺血管结构改变缓解,肺组织MDA含量明显下降,T-AOC、SOD活性和GSH-Px活性明显升高,肺组织NOX4表达明显降低。结论:ADM能够抑制大鼠高肺血流性肺动脉高压和肺血管结构重构形成中的氧化应激反应,作用机制可能与其下调肺组织NOX4表达以及增强抗氧化活性有关。     

地塞米松下调哮喘大鼠肺组织bFGF的表达

支气管哮喘(简称哮喘)是由多种细胞和细胞组分参与的慢性炎症性疾病,反复炎症刺激导致气道高反应和气道重塑,目前认为气道重塑是难治性哮喘及哮喘气道不可逆损伤的主要原因。研究表明,碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob last growth factor,bFGF)参与了哮喘气道重塑过程,但目前国内外对哮喘时bFGF表达变化的研究多集中在慢性哮喘气道重塑方面,而对于哮喘急性期bFGF的表达变化却鲜见报道。本实验通过建立哮喘大鼠模型,研究bFGF蛋白和mRNA在哮喘急性期的表达并观察地塞米松治疗对其影响,探讨早期地塞米松干预抑制气道重塑的可能机制…     

支气管肺炎患儿血清ADM及相关细胞因子测定

目的：探讨支气管肺炎患儿血清肾上腺髓质素（ADM）及相关细胞因子测定的临床意义。方法：血清ADM及细胞因子均采用放射免疫分析。结果：35例支气管肺炎患儿治疗前血清ADM、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）及IL-8水平均极显著高于对照组（P均〈0．01）;治疗后ADM及TNF-α水平与对照组比较差异已无显著性（P均〉0．05）;IL-6和IL-8与治疗前比较下降显著（P均〈0．05）;但仍显著高于对照组（P均〈0．05）。结论：4项指标的测定对于了解患儿肺炎的发病机理及疗效观察有一定的临床价值。     

哮喘患儿血清肾上腺髓质素(ADM)及细胞因子测定的临床意义

研究表明,肺不仅是个呼吸器官,而且还是个具有广泛代谢功能的脏器。它参与许多生物活性物质的合成、释放和代谢。当肺部因病原体的侵入而产生病理改变时,可释放大量的炎性介质,甚至导致人体免疫机制的调节紊乱。为探讨患儿哮喘发病与相关细胞因子的关系,本文测定了30例支气管哮喘患儿血清ADM、ET-1、IL-6及IL-8水平,以探讨本文测定指标与患儿哮喘发病及疗效的关系。现报道如下。     

地塞米松对哮喘小鼠肺组织中GPR43表达的调节作用

目的 研究G蛋白耦联受体43(GPR43)在哮喘小鼠肺组织内的表达,同时探讨地塞米松对GPR43表达的影响.方法 30只BALB/C6小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组,每组10只;卵清白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型;肺泡灌洗液(BALF)细胞计数;HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变情况;RT-PCR测定各组小鼠肺组织GPR43mRNA的表达变化;免疫组化观察肺中GPR43的表达及定位.结果 哮喘组BALF嗜酸性粒细胞(EOS)与对照组相比明显增高,地塞米松组明显低于哮喘组(P＜0.01);HE染色提示哮喘组气道上皮出现EOS等大量炎性细胞浸润,管壁厚度较对照组明显增加(P＜0.01);RT-PCR结果提示GPR43受体mRNA的表达量在哮喘组最低,与对照、地塞米松组相比有统计学差异(P＜0.01);免疫组化图像分析提示GPR43蛋白表达哮喘组明显降低,与对照组、地塞米松组相比均有显著性差异(P＜0.01).结论 哮喘小鼠肺组织中GPR43表达下降,地塞米松能部分上调其表达,从而减轻气道炎症反应.     

地塞米松抑制哮喘模型大鼠肺组织血管内皮生长因子表达

哮喘是一种由多种细胞和细胞组分参与的慢性气道炎症性疾病,反复炎症刺激可导致气道高反应性和气道重塑,气道细胞合成和分泌的血管内皮生长因子(vascular endothe-lial growth factor,VEGF)参与了哮喘气道重塑过程,但对哮喘急性发作期VEGF的变化及影响因素的研究却鲜见报道。本     

地塞米松对哮喘豚鼠肺组织嗜酸细胞bcl-2表达的影响及意义

目的 研究哮喘豚鼠肺内不同密度嗜酸细胞（Eos）凋亡与bcl-2 mRNA表达的关系及地塞米松（DM）对它们的影响。方法 应用DM干预哮喘豚鼠,分离哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中不同密度Eos,以TUNEL法检测细胞凋亡,以原位杂交检测bcl-2 mRNA表达。结果 哮喘组Eos凋亡率较正常组明显降低（P〈0．01）,应用DM后均显著增加（P〈0．01）。正常豚鼠Eos可检测到bcl-2 mRNA表达,不同密度Eos表达无显著差异（P〉0．05）。哮喘组bcl-2mRNA明显增加,应用DM后其表达明显减少。结论凋亡调节的缺失是导致组织及血中Eos增多的重要原因,bcl-2参预了哮喘Eos凋亡的调节。DM可促进哮喘肺组织中的Eos细胞凋亡,bcl-2可能是DM调节Eos细胞凋亡的重要途径之一。     

地塞米松对哮喘小鼠肺组织IL-21及其受体表达的干预作用

目的研究慢性哮喘小鼠肺组织IL-21与IL-21受体(IL-21R)表达的变化,探讨地塞米松(Dex)对小鼠肺组织IL-21与IL-21R表达的影响。方法 SPF级BALB/c雌性小鼠33只,随机分为对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组,每组11只。卵清白蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠支气管哮喘模型;HE染色观察气道炎症程度;测量支气管壁厚度及平滑肌厚度;免疫组织化学和免疫印迹法分析小鼠支气管肺组织中IL-21蛋白与IL-21R蛋白的表达。结果哮喘组小鼠支气管壁厚度及平滑肌厚度较对照组增加(P<0.01),地塞米松组支气管壁厚度与平滑肌厚度低于哮喘组(P<0.01)。哮喘组小鼠肺组织IL-21蛋白与IL-21R蛋白的表达高于对照组(P<0.05),地塞米松组IL-21蛋白与IL-21R蛋白表达低于哮喘组(P<0.05)。结论哮喘小鼠肺组织IL-21与IL-21R的表达增强,地塞米松抑制哮喘小鼠肺组织IL-21与IL-21R的表达。     

老年男性高血压患者血浆ADM和ET-1含量变化的意义

目的:探讨老年男性高血压患者血浆肾上腺髓质素(ADM)、内皮素-1(ET-1)含量变化的临床意义.方法:用放射免疫分析测定62例老年男性高血压患者血浆ADM、ET-1含量,并与35例年龄、性别匹配的健康老年人对照.结果:高血压组血浆ADM、ET-1含量显著高于正常对照组(P＜0.01),两者均随高血压分级1、2、3级组逐渐递增(P＜0.01,＜0.05);血压控制不良者明显高于血压控制良好者(P＜0.01),病情重组显著高于病情轻组(P＜0.01);伴肾功能受损者也显著高于肾功能正常者(P＜0.01);血浆ET-1含量平均增幅明显高于血浆ADM(P＜0.01);高血压组血浆ADM与ET-1含量呈正相关(r=0.394,P＜0.01);正常对照组两者含量不相关(r=0.172,P＞0.05).结论:老年男性高血压患者血浆舒血管活性肽ADM含量显著增高,可能是机体的一种代偿性自身调节机制,以此抑制ET-1等缩血管活性肽增高对血压调节产生不良的影响,对机体起到自身代偿性保护作用.     

地塞米松对哮喘豚鼠气道壁厚度的影响

目的:探讨哮喘时气道壁厚度变化及地塞米松对气道壁厚度的影响。方法:豚鼠30只,随机分为对照组、哮喘组和地塞米松干预组各10只。以腹腔注射10%卵蛋白和1%卵蛋白雾化吸入复制慢性哮喘模型。治疗组在每次激发前给予地塞米松干预。对右肺行支气管肺泡灌洗后分离固定,石蜡切片,行HE染色,用Luzex-F图像分析系统,测量小气道内周长和厚度,计算厚度百分比。结果:哮喘组支气管肺泡灌洗液的细胞总数多于对照组(P<0.05),哮喘组气道壁厚度%[(11.21±3.11)%]显著大于对照组[(5.82±1.29)%](P<0.05);地塞米松干预组的支气管肺泡灌洗液细胞总数、嗜酸性粒细胞%和气道壁厚度%均明显低于哮喘组,有显著差异(P<0.05)。结论:慢性哮喘时气道壁厚度增加,结构重建;早期地塞米松治疗可减轻厚度的增加。     

地塞米松对哮喘大鼠嗜酸性粒细胞中p53表达的影响

目的： 研究支气管哮喘支气管肺泡灌洗液（BALF）嗜酸性粒细胞中凋亡相关基因p53的表达以及地塞米松对其的作用及其机制。方法： 将36只大鼠随机分为对照组、哮喘组和激素组，并对其BALF的嗜酸性粒细胞进行计数，以免疫印迹法(Western blotting)检测嗜酸性粒细胞中p53的表达。结果： 哮喘组BALF的 总细胞数及嗜酸性粒细胞均高于激素组及对照组（P<0.01）。哮喘组BALF的嗜酸性粒细胞中p53表达弱于激素组和对照组（P<0.01）。结论： 哮喘气道炎症与嗜酸性粒细胞生存增加亦即嗜酸细胞凋亡减少密切相关。糖皮质激素可诱导嗜酸性粒细胞凋亡，其机制可能与促嗜酸性粒细胞凋亡的p53表达有关。     

肾上腺髓质素对oxLDL诱导的HUVECs组织因子及其抑制物表达的干预作用

目的：探讨肾上腺髓质素（AM）对氧化低密度脂蛋白（oxLDL）影响脐静脉内皮细胞（HUVECs）组织因子（TF）及其抑制物（TFPI）表达的干预作用，并探讨可能的信号转导途径。 方法： 进行人HUVECs原代培养，分别采用发色底物法和RT-PCR技术检测TF及TFPI蛋白活性及mRNA水平的变化，并给予8-溴-环腺苷酸（cAMP拮抗剂）、PD098059（MAPKK抑制剂）及H7（PKC抑制剂）观察AM影响TFPI表达的信号途径。 结果： AM呈剂量依赖性地抑制oxLDL诱导的HUVECs TF蛋白活性和mRNA表达的升高；AM可增加HUVECs TFPI的表达，并能减轻oxLDL所致的TFPI蛋白活性和mRNA水平的降低；AM通过cAMP和MAPK途径影响TFPI的变化。 结论： AM可以减低oxLDL对HUVECs TF和TFPI表达的影响，进而改善动脉粥样硬化的凝血状态，延缓其进程。     

地塞米松抑制哮喘小鼠肺RANTES的表达

目的 研究地塞米松对哮喘小鼠调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子(RANTES)蛋白和mRNA表达的影响.方法 将30只雌性BALB/c小鼠随机分为3组(每组10只):对照组、哮喘组、激素干预组,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),行白细胞和嗜酸粒细胞(EOS)计数;酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF和血清中RANTES含量;肺组织切片HE染色,光镜下计数细胞总数和EOS百分比;部分行免疫组化染色检测肺组织RANTES蛋白;用原位杂交法检测肺组织RANTES mRNA表达.结果 哮喘组白细胞总数、EOS百分比、RANTES浓度明显升高(P＜0.01),干预组明显低于哮喘组(P＜0.01);哮喘组肺组织RANTES蛋白及mRNA表达显著高于对照组(P＜0.01),主要表达于上皮细胞;干预组肺组织RANTES蛋白及mRNA表达显著低于哮喘组(P＜0.01).结论 地塞米松可抑制RANTES表达和活性而发挥抗EOS炎症作用,这可能是其控制哮喘发病的重要机制之一.     

败血症休克大鼠组织中性内肽酶与肾上腺髓质素的相关关系研究

目的:观察败血症休克大鼠组织肾上腺髓质素(ADM)含量和中性内肽酶(NEP)的活性及其表达水平,以探讨NEP的变化在休克时组织ADM水平变化中的意义。方法:盲肠结扎穿孔方法复制大鼠败血症性休克模型,采用放射免疫方法和荧光分光光度法分别检测血浆和组织的ADM含量和NEP的活性,用半定量RT-PCR和免疫组织化学法分别检测NEP的mRNA及其蛋白的组织分布。结果: ADM和NEP广泛分布于大鼠的血浆和组织。休克早期,大鼠各组织ADM含量普遍高于对照组,NEP活性在心脏和小肠低于对照组,在血浆中高于对照组,在肺、肾和主动脉无明显变化。免疫组化结果显示,休克早期NEP在大鼠心脏、主动脉内膜和中膜的分布低于对照组。休克晚期,除大鼠小肠的ADM含量低于休克早期,血浆和其余组织的ADM含量均高于休克早期;与休克早期比较, NEP的活性除在大鼠肾脏无明显变化外,在血浆和其余组织均明显降低。NEP的免疫组化结果显示,休克晚期,NEP在大鼠心脏、主动脉内膜和中膜、肺和肾的分布弱于休克早期,在主动脉外膜无明显变化。RT-PCR结果显示,休克晚期大鼠心脏、主动脉、肺脏和小肠的NEP mRNA 表达均显著低于对照组。 结论:NEP在大鼠败血症休克的不同时期和不同组织中的变化与ADM含量的变化不一致,提示休克过程中,不同组织局部的NEP对ADM含量的影响不同。     

激素预处理树突状细胞对哮喘Th2型反应的影响

目的： 研究激素预处理的树突状细胞（DCs）对哮喘DCs与T细胞共培养上清液中T辅助细胞1(Th1)和Th2型细胞因子的影响及其机制。方法: 采集哮喘组和健康组外周血,分别常规培养和加入地塞米松培养至成熟DCs。将2组常规培养和地塞米松预处理的DC-T细胞共培养72 h。流式细胞仪测定2组常规培养或地塞米松培养成熟DCs的表型。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测DC-T细胞共培养上清液中白细胞介素-5(IL-5)和干扰素-γ（IFN-γ）的含量。结果: 哮喘组常规培养的DC-T细胞共培养上清液中IL-5水平高于健康组（P<0.01）,其IFN-γ含量较健康组有减少的趋势,但无显著差异（P>0.05）;地塞米松预处理的DC-T细胞上清液中IL-5水平低于常规培养组（P<0.01）。无论哮喘组或健康组,地塞米松预处理的DC-T细胞共培养上清液中IFN-γ水平均低于未用地塞米松预处理的DC-T细胞共培养上清液（P<0.01）。2组地塞米松预处理的DCs均部分抑制了肿瘤坏死因子-α(TNF-α)所诱导的DCs表型CD83上调（P<0.01）,而上调了CD14的表达（P<0.01）。结论: 哮喘患者常规培养的DCs与同种自体T细胞共培养后呈Th2型反应,地塞米松预处理的DCs可使Th2型反应减弱,其机制可能与地塞米松影响DCs的分化、成熟有关。     

地塞米松对急性肺损伤中TREM-1表达的影响

目的　探讨地塞米松（Dexamethasone,Dex）对脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）诱导的急性肺损伤(acute lung injury, ALI)小鼠肺组织中髓样细胞表达的触发受体1（triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1）表达的影响。 方法　以昆明小鼠为研究对象,腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立ALI模型,30 min后给予不同浓度的Dex（5、10、20、40 mg/kg）处理6 h;选用Dex(10 mg/kg)处理不同的时间（6、12、24、36 h）。HE染色法观察肺组织病理损伤程度; RT-PCR检测肺组织TREM-1mRNA的表达;ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液中可溶性TREM-1（sTREM-1）蛋白水平。 结果　Dex可减轻肺病理损伤;Dex呈时间依赖性地下调ALI小鼠肺组织的TREM-1 mRNA的表达,且在6 h即可降低;Dex呈剂量依赖地下调ALI小鼠肺组织中TREM-1 mRNA的表达,并在10 mg/kg时开始降低。Dex可降低ALI小鼠支气管肺泡灌洗液中sTREM-1的蛋白水平。 结论　Dex可呈剂量及时间依赖性下调ALI小鼠肺组织中的TREM-1mRNA的表达,并减少肺内髓样细胞胞膜TREM-1的脱落,提示Dex可能通过调节TREM-1的表达,从而抑制ALI早期的炎症级联反应,参与保护肺组织。     

肾上腺髓质素m RNA在慢性缺氧大鼠右心室中的表达

目的:探讨肾上腺髓质素(AM)在慢性低氧性肺动脉高压发病中的作用。方法:16只大鼠随机分为低氧组和对照组,间断常压低氧14d复制肺动脉高压模型,静脉右心导管测定右室收缩压(RVSP)的变化,分离心室检测右室/(左室+室间隔)(RV/LV+SP)比值,原位杂交法检测AMmRNA在右心室中的表达。结果:低氧组大鼠右室压为(63.63±3.42)mmHg,显著高于对照组的(34.13±3.40)mmHg(P<0.01)。低氧组大鼠(RV/LV+SP)比值为0.439±0.039,显著高于对照组的0.23±0.025(P<0.01)。AMmRNA在对照组大鼠的右室心肌细胞也有少量表达,低氧组大鼠其表达显著多于对照组。图像分析表明,低氧组的平均吸光度、平均表达面积分别为0.1061±0.0188,0.1421±0.0165,均显著高于对照组的0.0872±0.0171,0.0967±0.0135。结论:低氧时右心室AMmRNA表达增加,提示可能在肺动脉高压的发病中起保护作用。     

卡介菌多糖核酸对哮喘大鼠肺组织IL-12/STAT4信号通路的影响

目的探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对支气管哮喘大鼠肺组织白介素12/信号转导子及转录激活子4(IL-12/STAT4)信号通路的影响及其在气道炎症中的作用。方法将40只雄性SD大鼠随机分成正常对照组(A组),哮喘模型组(B组),卡介菌多糖核酸组(C组)和地塞米松组(D组),每组10只。采用鸡清卵蛋白(OVA)致敏和激发的方法制备哮喘大鼠模型。苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态学改变,用免疫组化法观察IL-12和STAT4在大鼠哮喘模型肺组织中的表达分布。结果模型组肺组织IL-12和STAT4蛋白表达较少,其平均灰度值显著高于对照组(P<0.01);地塞米松组和卡介菌多糖核酸组肺组织IL-12和STAT4蛋白表达较多,其平均灰度值显著低于哮喘组(P<0.01),而地塞米松组和卡介菌多糖核酸组之间差异无统计学意义;卡介菌多糖核酸组STAT4的表达与IL-12呈正相关(r为0.908,P<0.01)。结论卡介菌多糖核酸调节气道炎症可能是通过调控IL-12/STAT4信号通路的基因表达实现的。