健脾补肾方对BALB/c鼠大肠癌肝转移模型中VEGF表达的影响

目的:观察健脾补肾方是否对BALB/c鼠结直肠癌肝转移模型VEGF表达产生影响。方法:将40只大肠癌肝转移的BALB/c鼠随机区组分为生理盐水组、健脾补肾方高剂量组、健脾补肾方中剂量组、健脾补肾方低剂量组4组。健脾补肾方高剂量组43.7 g/(kg·d),健脾补肾方中剂量组21.85 g/(kg·d),健脾补肾方低剂量组10.925 g/(kg·d),对照组则予以生理盐水,4组均为0.2 m L/只,每天灌胃1次,共2周。根据各组HE染色观察肝脏的转移情况、免疫组化和Western blot测量每组的VEGF的表达。结果:HE染色观察:健脾补肾方中、高剂组肿瘤肝转移面积明显小于对照组,免疫组化及Western blot结果均表明健脾补肾方可以下调VEGF蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:健脾补肾方可改善BALB/c鼠大肠癌肝转移的情况,可能通过降低VEGF的表达。     

NM23、VEGF蛋白表达与大肠癌肝转移的关系及其意义

目的：探讨NM23及VDGF蛋白表达与大肠癌肝转移的关系。方法：采用免疫组织化学方法，分别对45例大肠癌原发灶、肝转移组织及癌旁肠粘膜进行NM23、VEGF蛋白表达的检测和分析。结果：45例大肠癌原发灶、肝转移组织、癌旁肠粘膜中VEGF表达阳性率分别为48．9％、100％、8．9％。肝转移灶中VEGF表达阳性率高于其它组织(P＜0．05)，而NM23表达阳性率分别为40．0％、18．8％、82．8％，肝转移灶中NM23表达阳性率明显低于其它组织(P＜0．05)。在肝转移组原发灶和肝转移灶中同时检测NM23及VEGF蛋白表达，可知NM23表达降低而VEGF呈过表达。结论：NM23表达降低和VEGF表达增强与大肠癌肝转移的发生有密切关系，同时检测大肠癌NM23和VEGF表达能反映大肠癌的恶性程度，是判断预后的有效指标。     

不同分期大肠癌组织中VEGF、CEA、Endostatin的表达及其与肝转移的关系

目的：探讨血管内皮生长因子(VEGF)、癌胚抗原(CEA)、内皮抑素(Endostatin)在不同分期大肠癌中的表达及其与肝转移的关系。方法选取我院大肠癌手术患者116例,术中采集大肠癌组织(癌症组,116例)和癌旁正常大肠组织(正常组,100例),采用免疫组织化学方法检测VEGF、CEA、Endostatin表达情况,比较三者在不同临床分期大肠癌中的表达及其与肝转移的相关性。结果癌症组VEGF、CEA阳性率明显高于正常组,Ⅲ~Ⅳ期大肠癌组织VEGF、CEA阳性率明显高于Ⅰ~Ⅱ期,比较差异均具有统计学意义(P<0.05);癌症组Endostatin阳性率明显低于正常组,Ⅲ~Ⅳ期大肠癌组织Endostatin阳性率明显低于Ⅰ~Ⅱ期,比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。同时性肝转移者VEGF、CEA阳性率明显高于无肝转移者,Endostatin阳性率明显低于异时性肝转移和无肝转移者,异时性肝转移者CEA阳性率明显高于无肝转移者,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 VEGF、CEA在大肠癌组织中显著高表达,Endostatin在大肠癌组织中显著低表达,其中临床分期越高,合并肝转移,VEGF、CEA阳性率越高,Endostatin阳性率越低,三者表达在评估临床分期、肝转移类型中具有重要价值。     

RNAi沉默VEGF表达对大肠癌细胞肝转移的影响

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对大肠癌肝转移的影响。方法:根据VEGF基因mRNA设计合成小干扰RNA,采用荧光实时定量PCR检测VEGF mRNA水平,分别以软琼脂集落培养试验和Boyden模型观察癌细胞锚着不依赖性增殖和癌细胞侵袭能力。以脾切除法建立大肠癌肝转移模型,以不同方法处理的癌细胞接种模型,观察对大肠癌细胞肝转移的影响。结果:转染组VEGF基因mRNA水平明显降低,且呈浓度和时间依赖性。经VEGF siRNA转染处理的癌细胞软琼脂集落形成数和穿膜细胞数明显减少,且呈浓度依赖性(P<0.05,P<0.05)。体内试验发现,对照组10只全部出现大肠癌肝转移灶,而siRNA组仅仅1只出现肝转移,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论:VEGF基因在大肠癌肝转移中起着重要的作用;以RNAi技术沉默VEGF基因表达,可抑制大肠癌细胞肝转移。     

反义血管内皮生长因子(VEGF)转染体内抑制胆囊癌VEGF及其受体表达的研究

目的:探讨Oligofectamine介导的血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)转染对人胆囊癌GBC-SD细胞裸鼠移植瘤的生长及VEGF、Flt-1和KDR表达的影响。方法:通过裸鼠皮下接种体外培养的人胆囊癌GBC-SD细胞建立人胆囊癌裸鼠移植瘤模型,并将裸鼠分为对照组(A组)、VEGF SODN Oligifectamine组(B组)和VEGF ASODN Oligifectamine组(C组),各组裸鼠在接种后24h内,在接种部位皮下分别缓慢注射200μl磷酸缓冲液(PBS)、VEGF SODN100μg Oligofectamine0.5μl(总体积为200μl)及VEGF ASODN100μg Oligofectamine0.5μl(总体积为200μl),每3天1次,连续治疗5周,观察各组裸鼠的成瘤性、体积及瘤重的变化,并运用免疫组化技术检测胆囊癌裸鼠移植瘤中VEGF、Flt-1和KDR的表达变化。结果:A、B、C组裸鼠2周时的成瘤率分别为87.5%、87.5%和37.5%,C组显著低于A、B组(P<0.05),5周时各组的成瘤率均为100%。各组裸鼠移植瘤5周时的体积和瘤重分别为:A组(253.49±27.11)mm3和(1.96±0.17)g,B组(255.84±26.51)mm3和(1.86±0.21)g,C组(125.45±17.49)mm3和(0.97±0.13)g,C组显著低于A、B组(P<0.05),C组的抑瘤率为(50.79±9.19)%。A、B组裸鼠移植瘤VEGF、Flt-1和KDR的表达均无统计学差异(P>0.05),而C组裸鼠移植瘤VEGF、Flt-1和KDR的表达较A、B组明显减弱(P<0.05)。结论:VEGF ASODN在体内能显著抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的增殖,降低其在裸鼠体内的成瘤性,抑制VEGF、Flt-1和KDR在蛋白水平的表达,抑制裸鼠移植瘤的生长及血管的形成。     

杜蛭胶囊对急性心梗动物模型心肌组织内VEGF表达的影响

目的 通过观察杜蛭胶囊对急性心梗动物模型心肌组织内血管内皮生长因子表达的影响,探讨其对梗死心肌保护作用及机制.方法 采用结扎左冠状动脉分支法复制心肌梗死动物模型,通过免疫组化法定量分析动物心肌组织内血管内皮生长因子(VEGF)的变化.结果 与模型组相比,杜蛭胶囊给药组可显著增强心肌组织中VEGF的表达.结论 杜蛭胶囊可通过提高VEGF的含量以增加梗死心肌中侧枝循环的建立而改善其缺血的情况.     

三氧化二砷对CO2气腹下小鼠肿瘤细胞CD44、VEGF表达影响的实验研究

目的:研究腹腔内注射三氧化二砷(As2O3)对小鼠CO2气腹下肝癌H22转移的影响。方法:昆明鼠40只(清洁级),中腹部穿刺置入1mm套管针,自套管针注入1×106肿瘤细胞后,建立CO2气腹,压力8mmHg,时间30min。术后随机分4组,每组10只,分别腹腔内注入:生理盐水,1ml;As2O3(2mg/kg),1ml;As2O3(4mg/kg),1ml;As2O3(4mg/kg) 肝素(10U/ml),共1ml。气腹后第3、7天测量CD44、VEGF的变化;比较各组生存状态、腹围、体重变化及转移瘤直径。结果:与对照组相比,As2O3组CD44、VEGF表达,转移瘤直径均明显降低。高剂量组比低剂量组效果稍好。As2O3肝素组戳口种植率最低。结论:As2O3对CO2气腹腹腔镜肿瘤生长转移有抑制作用。     

VEGF mRNA、KDR mRNA及蛋白在非小细胞肺癌中表达的意义探讨

目的探讨非小细胞肺癌中血管内皮生长因子(VEGF)、受体KDRmRNA和蛋白表达的意义。方法应用原位杂交技术及免疫组织化学PV-9000法分别检测30例新鲜非小细胞肺癌标本中VEGFmRNA、KDRmRNA及蛋白的表达。结果VEGF、KDRmRNA和蛋白均主要分布在肺癌细胞、血管内皮细胞及纤维母细胞,肺癌细胞VEGFmRNA和蛋白的阳性率分别为66.67%(20/30)和60.00%(18/30),两者的表达有极显著正相关性(r=0.86,P<0.01);KDRmRNA和蛋白的阳性率分别为73.33%(22/30)和76.67%(23/30),两者的表达亦有极显著正相关性(r=0.7366,P<0.01);VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白在肺癌细胞中的表达均呈极显著性正相关(原位杂交r=0.853,免疫组化r=0.5148,均P<0.01);肺癌细胞VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白的阳性表达率在不同大小的3组肺癌标本间,差异均具有显著性(确切P=0.014,P=0.002;P=0.0087,P=0.0016);淋巴结有转移组的VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白在肿瘤细胞中的阳性表达率显著高于淋巴结无转移组者(确切P=0.007,P=0.003;P=0.0008,P=0.0073)。结论肺癌细胞产生的VEGF通过自分泌环作用于癌细胞上的KDR受体促进癌细胞生长;VEGF及KDR的检测可作为肺癌淋巴结转移的有效评估指标;VEGF及KDR有望成为肺癌治疗的新靶点。     

LPS诱导小鼠肺微血管内皮细胞VEGF表达的探讨

目的：研究小鼠肺微血管内皮细胞分离培养方法并探讨脂多糖(LPS)诱导小鼠肺微血管内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达．方法：贴块法培养小鼠肺微血管内皮细胞,并进行系列鉴定．采用ELISA方法检测正常组、LPS(1μg／ml)作用2、8、16、24、36、48h组的VEGF变化水平。结果：获得的小鼠肺微血管内皮细胞具有鹅卵石形态,但LPS对小鼠肺微血管内皮细胞形态影响明显。对异植物血凝素结合试验,CD31及Ⅷ因子抗原免疫组化染色为阳性。LPS(1μg／ml)分别作用小鼠肺微血管内皮细胞2h组可见VEGF表达升高,8h组达最高,16、24、36、48h组的表达量低于8h组。结论：LPS作用后,小鼠肺微血管内皮细胞VEGF表达呈抛物线型下降。LPS损伤内皮细胞功能和形态。     

血管内皮生长因子(VEGF)在血管外膜成纤维细胞的表达研究

目的 探讨血管内皮生长因子及其受体在血管壁外膜成纤维细胞的表达.方法 采用ELISA方法 来检测外膜成纤维细胞血管内皮生长因子的分泌及TGF-β、bFGF、AngⅡ、PDGF对血管内皮生长因子分泌的影响,使用Western blot法观察TGF-β、bFGF、AngⅡ、PDGF等对血管内皮生长因子I型受体表达的影响.结果 血管外膜成纤维细胞能够分泌血管内皮生长因子.TGF-β能显著增高血管内皮生长因子分泌(n＝5,P<0.05),而PDGF、bFGF、AngⅡ对血管内皮生长因子分泌比较没有统计学差异(n=5,P>0.05).TGF-β、PDGF、bFGF、AngⅡ均可刺激外膜成纤维细血管内皮生长因子I型受体表达增高(n=4,P<0.05).结论 血管壁外膜成纤维细胞可以分泌血管内皮生长因子,血管局部活性物质能有效刺激其受体表达增高.因此推测血管内皮生长因子可能介导血管外膜成纤维细胞参与血管壁的重构.     

子宫腺肌病在位、异位内膜组织中VEGF及Flk1的表达

目的:探讨子宫腺肌病患者在位、异位内膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)及受体1(Flk-1)的表达情况及其相关性。方法:采用SP法检测98例子宫腺肌病患者在位、异位内膜及44例正常体检者(对照组)子宫内膜组织中的VEGF及Flk-1的表达。结果:子宫腺肌病异位内膜、在位内膜中VEGF、Flk-1蛋白阳性表达与对照组差异均有统计学意义(P均<0.01);VEGF、Flk-1蛋白阳性表达在异位、在位内膜中及各增生期与分泌期比较差异均有统计学意义(P均<0.01);VEGF及Flk-1阳性表达在异位、在位内膜中均有相关性(P<0.05)。结论:子宫腺肌病患者在位、异位子宫内膜组织中VEGF及Flk-1高表达,二者可能在子宫腺肌病的发生、发展中发挥重要作用。     

抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌影响的研究

乳腺癌是危害妇女身心健康的重大疾病,目前越来越多的肿瘤医家们将目光投向了多靶向性、毒副作用低且价格低廉的抗肿瘤中药的研发。中医认为,乳腺肿瘤属“乳岩”、“乳石痈”等范畴,主要由正气亏虚、脏腑阴阳失调引发。《医宗金鉴》云:“乳癌由肝脾两伤,气郁凝结而成”。湖南中医药大学附属第一医院肿瘤科结合临床乳岩处方经验,研制出了抗癌防移片这一效验方,该方由红参、黄芪、半枝莲、重楼、姜黄、莪术等16味中药组成。综观全方,诸药大都归于肝、脾二经,使得湿热瘀毒得清,先天、后天之本得固,标本同治,符合肿瘤的治疗原则,临床上用于控制乳腺癌术后复发与转移,获得了可喜的疗效。【目的】 观察抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌的影响。 【方法】 通过建立4T1乳腺癌小鼠模型,动态观察给药期间小鼠生活状况。经过小鼠体质量增加百分数、测量剥离瘤体积、计算瘤体积抑制率以及计数肺转移瘤灶个数的测定来观察抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌的影响。 【结果】 抗癌防移片组接种部位肿瘤体积较模型组显著缩小,乳腺癌肺转移瘤结节数较模型组也明显减少,同时与模型组比较,抗癌防移片组小鼠生活质量改善,体质量明显增加(6.58% vs 2.89%),差异均有统计学意义。 【结论】 抗癌防移片能抑制4T1小鼠乳腺癌生长与转移,改善小鼠生存质量。鉴于实验得出的数据,我们进行了分析讨论。实验结果证实了该复方既有抑制4T1小鼠乳腺癌生长与向肺部转移的作用,同时也能一定程度上增加小鼠体质量,改善小鼠生存质量,为抗癌防移片用于临床乳腺癌的治疗提供了依据。     

丁基苯酞对大鼠局灶缺血脑组织VEGF及bFGF表达的影响

目的研究丁基苯酞(NBP)对大鼠缺血脑组织中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维生长因子(bFGF)表达的影响。方法健康雄性SD大鼠,用大鼠大脑中动脉线栓法(MCAO)建立永久缺血模型。实验分为假手术组、模型对照组和NBP组,每组各20只大鼠。NBP组术后予以NBP灌胃,每天2次,每次25mg/kg;假手术组、模型对照组每天灌胃相应剂量食用植物油。局灶性缺血72h后行神经功能评分(Longa评分),然后断头取脑。TTC染色观察脑梗死体积,免疫组织化学(SP)方法观察梗死周围区、海马区和梗死核心区脑组织VEGF和bFGF蛋白的表达,原位杂交方法(POD法)检测VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达。结果NBP组神经功能缺损评分低于模型对照组(P<0.05),NBP组在梗死周围区和海马区VEGF和bFGF蛋白,VEGF mRNA和bFGFmRNA表达均高于模型对照组和假手术组(P<0.05),在梗死核心区差异均无统计学意义(P>0.05)。结论NBP明显改善缺血后大鼠的神经功能,上调大鼠梗死周围区和海马区脑组织VEGF、bFGF蛋白和mRNA的表达,可能通过此机制治疗保护缺血脑组织。     

羊膜载体对人子宫内膜细胞HGF、MMP-9、VEGF表达的影响

目的:观察羊膜对在其基质面生长的人子宫内膜细胞肝细胞生长因子(HGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:将原代培养正常人子宫内膜细胞接种于羊膜的基质面作为羊膜载体组,以无羊膜载体培养的子宫内膜细胞为对照组。培养8 d后,实时荧光定量PCR法检测2组细胞HGF、MMP-9、VEGF mRNA表达的变化,ELISA法检测2组细胞上清液MMP-9蛋白含量。结果:羊膜载体组子宫内膜细胞HGF mRNA相对表达量为(2.033±0.922),MMP-9 mRNA相对表达量为(1.356±0.399),VEGF mRNA相对表达量为(0.976±0.597);对照组分别为(1.299±1.003)、(0.871±0.529)、(0.426±0.193)(t=3.061、2.613、3.313,P均<0.05)。ELISA法检测细胞上清液MMP-9蛋白含量,羊膜载体组为(0.762±0.085)μg/L,对照组为(0.089±0.008)μg/L(t=29.370,P<0.001)。结论:羊膜载体可以增强人子宫内膜细胞HGF、VEGF、MMP-9的表达。     

COX-2、VEGF及TGFβ1在急性白血病的表达及其临床意义

目的:检测不同类型急性白血病(AL)患者在不同阶段的COX-2、VEGF、TGFβ1等指标的表达变化情况,分析各检测指标在AL的诊断、治疗及预后判断中的临床意义.方法:选择90例AL患者为研究对象,以该院体检中心健康体检者40例为正常对照,采用ELISA方法检测血清COX-2、VEGF及TGFβ1水平,并对AL患者进行治疗前、后两个不同阶段的动态检测.结果:(1)初诊时,AL组的血清COX-2及VEGF的表达量较正常对照组明显升高,而TGFβ1表达量较正常对照组明显降低(P＜0.001).(2)治疗前AML组血清VEGF、COX-2及TGFβ1水平与ALL组患者比较,无显著差异.(3)CR(完全缓解)时,与治疗前比较VEGF与COX-2水平明显下降,TGFβ1显著升高(P＜0.001).(4)治疗前血清VEGF及COX-2表达水平与骨髓原始加幼稚细胞数呈正相关,而TGFβ1表达水平与之呈负相关,VEGF、COX-2的水平均与TGFβ1呈负相关.结论:COX-2及VEGF在AL患者血清中含量显著增加,完全缓解后其水平显著下降,而血清TGFβ1明显减低,完全缓解后其水平明显升高,提示血管生成可能在AL的发生、发展中具有一定作用.因此,动态监测AL患者血清COX-2、VEGF及TGFβ1水平,可作为AL病情评估进展的重要参考指标.     

VEGF、PlGF与儿童星形细胞瘤分级及预后关系的相关性研究

血管新生与肿瘤生长密切相关,星形细胞瘤又是富含血管的肿瘤,故为评价其预后而研究血管内皮生长因子家族(VEGF)尤为重要,胎盘生长因子(PlGF)系VEGF家族新成员,为了进一步明确儿童星形细胞瘤预后影响因素,指导临床治疗,选取病变典型的105例星形细胞瘤进行免疫组化检测,并对所得结果进行了统计学分析.     

抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌影响的研究

目的观察抗癌防移片对4T1小鼠乳腺癌的影响。方法建立4T1乳腺癌小鼠模型．随机分为空白对照组、模型组、环磷酰胺组和抗癌防移片组,分别给予药物或生理盐水,动态观察给药期间小鼠生活状况。给药4周后处死小鼠,测定小鼠体质量增加百分数,测量剥离瘤体积,计算瘤体积抑制率以及计数肺转移瘤灶个数。结果与模型组比较,抗癌防移片组小鼠肿瘤生长缓慢,肺转移瘤灶数量明显减少（P〈0．05）;与环磷酰胺组比较,抗癌防移片组药物毒副作用小（P〈0．05）,生活质量高,但其抑瘤防转移作用不及环磷酰胺（P〈0．05）。结论抗癌防移片能抑制4T1小鼠乳腺癌生长与转移,改善小鼠生存质量。     

鼻咽癌组织中HGF、MMP-7和VEGF的表达及意义

[摘要] 目的 探讨肝细胞生长因子（HGF）、基质金属蛋白酶(MMP)-7和血管内皮 生长因子（VEGF）在鼻咽癌及其淋巴结转移中的表达及意义。方法 采用免疫组化SABC法检测23例鼻咽黏膜慢性炎、32例鼻咽癌和16例鼻咽癌颈部淋巴结转移中HGF、MMP-7和VEGF的表达。结果 HGF、MMP-7和VEGF在鼻咽黏膜慢性炎组中的阳性表达率分别为30.4%、30.4%和56.5%；鼻咽癌组则分别为50.0%、65.6%和90.6%；淋巴结转移组则分别为75.0%、18.8%和81.3%。MMP-7和VEGF在黏膜慢性炎和鼻咽癌组中的表达差异均有显著性（P＜0.05或P＜0.01）；MMP-7在鼻咽癌和淋巴结转移组中的表达差异有显著性（P＜0.01）。HGF在黏膜慢性炎和淋巴结转移组中的表达差异有显著性（P＜0.01）；鼻咽癌组中HGF与VEGF呈显著正相关性（P＜0.01）；淋巴结转移组中HGF与VEGF、MMP-7均呈显著正相关性（P＜0.05或P＜0.01）。结论 MMP-7和VEGF过表达与鼻咽良、恶性病变有关；HGF可能通过诱导VEGF表达，有利于鼻咽癌的肿瘤血管生成和转移。 ［关键词］ 鼻咽肿瘤 HGF MMP-7 VEGF 免疫组织化学