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日本血吸虫（中国大陆株）FABPc重组抗原高效融合表达,纯化及 … 总被引：1，自引：1，他引：0
目的 构建Ｓｊ－ＦＡＢＰｃ表达克隆,获得大量纯化ｒＳｊ－ＦＡＢＰｃ重组（日本血吸虫脂肪酸结合蛋白）抗原,了解其作为侯选疫苗抗原的潜能。方法 以ＰＣＲ法从Ｓｊ－ｃＤＮＡ库中扩增出目的基因片段后亚克隆入表达载体ｐＧＥＸ－６Ｐ－１进行融合表达,经Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＾ＴＭ ４Ｂ亲和层析柱和ＰｒｅＳｃｉｓｓｉｏｎ＾ＴＭ Ｐｒｏｔｅａｓｅ酶切后纯化出ｒＳｊ－ＦＡＢＰｃ,Ｗｅｓｔｅｒｎ 相似文献
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重组质粒pGEX—6P—1／Sj—FABPc的构建及在大肠杆菌中的表达 总被引：7，自引：2，他引：7
目的 构建基因工程菌株、获得重组蛋白Ｓｊ－ＦＡＢＰｃ（日本血吸虫脂肪酸结合蛋白）。方法 用ＰＣＲ法从日本血吸虫ｃＤＮＡ文库中扩增Ｓｊ－ＦＡＢＰｃ基因片段，再将该片段重组于ｐＧＥＭ－Ｔ中并进行ＤＮＡ测序鉴定，经酶切后将目的片段构建成重组质粒ｐＧＥＸ－６Ｐ－１／Ｓｊ－ＦＡＢＰｃ，转化于大肠杆菌ＢＬ２１，ＩＰＴＧ诱导表达。用Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ＾ＴＭ ４Ｂ亲和层析柱对表达产物进行纯 相似文献
3.
Chen K Han BG Ma XK Zhang HQ Meng L Wang GH Xia F Song XG Ling SG 《World journal of gastroenterology : WJG》1999,5(6):550-552
ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＨｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓ（ＨＢＶ）ｉｓａＤＮＡｖｉｒｕｓｗｉｔｈａｎｅｎｖｅｌｏｐｅ,ｉｔｓｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅｐｒｅＳ／ＳｈａｖｅｔｈｒｅｅｐａｒｔｓｐｒｅＳ１,ｐｒｅＳ２ａｎｄＳ,ｔｈｅｒｅｉｓａｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎｉｎｉｔｉａｔｉｏｎｃｏｄｏｎＡＴＧｉｎｅａｃｈｏｆｔｈｅｍ．ＢｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔＡＴＧ,ｔｈｅｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎｇｅｎｅｃａｎｂｅｔｒａｎｓｌａｔｅｄｉｎｔｏｔｈｒｅｅｋｉｎｄｓｏｆｐｒｏｄｕｃｔｓ,ｉ．ｅ．ｔｈ… 相似文献
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垂体瘤转化基因 (ＰＴＴＧ)是从大鼠垂体瘤ＧＨ4细胞克隆出的一种肿瘤基因。ＰＴＴＧ在垂体泌乳素瘤的表达受雌激素的调控 ,其致肿瘤作用可能与刺激成纤维细胞生长因子(ＦＧＦ)和激活Ｃ Ｍｙｃ有关[1 ] 。此外 ,ＰＴＴＧ与抑制姐妹染色单体分离的ｓｅｃｕｒｉｎ序列一致[2 ] 。ＰＴＴＧｍＲＮＡ和蛋白质的表达水平呈细胞周期依赖性[3] 。因此 ,我们推测高表达ＰＴＴＧ有可能抑制某些肿瘤细胞的生长。材料与方法 材料 :肺癌Ａ549和子宫颈癌ＨｅＬａ细胞购自美国ＡＴＣＣ公司。ｐｌＲＥＳｎｅｏ表达质粒购自美国Ｃｌｏｎｔｅｃｈ公司。抗ｐ2 … 相似文献
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肿瘤特异性生长因子 (Ｔｕｍｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＴＳＧＦ)是恶性肿瘤形成及生长时促使肿瘤及周边毛细血管大量增殖的因子。 1 999年 7月我们测定了 1 0 1例白血病患者ＴＳＧＦ含量 ,旨在了解白血病患者血清ＴＳＧＦ水平变化及其与治疗效果的关系。1 资料与方法1 .1 研究对象白血病组 1 0 1例为均经临床血液学、骨髓细胞学检查而确诊的患者 ,男 45例 ,女 5 6例 ,年龄1 3～ 74岁 ,平均 3 1 .6岁。其中急性非淋巴细胞白血病 (ＡＮＬＬ) 5 3例 (Ｍ1 3例 ,Ｍ2 1 5例、Ｍ31 1例 ,Ｍ44例 ,Ｍ51 7例 ,Ｍ63例 ) ,急性… 相似文献
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转化生长因子与消化系疾病研究新进展 总被引：2，自引：1，他引：1
转化生长因子 (ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＴＧＦ)包括ＴＧＦ α和ＴＧＦ β,两者在结构和功能上完全不同 (表 1)。由于其在炎症修复、损伤再生、肿瘤生长等方面的重要作用 ,近年来ＴＧＦ与消化系疾病间的关系已成为研究热点 ,本文就其进展作简要综述。一、胃及十二指肠疾病(一 )急性胃十二指肠黏膜损伤 (ａｃｕｔｅｇａｓｔｒｏｄｕｏｄｅｎａｌｍｕｃｏｓａｌｌｅｓｉｏｎｓ,ＡＧＭＬ) :乙醇 (酒精 )、药物 (如ＮＳＡＩＤ)、胆酸、胰酶等物质均可破坏胃十二指肠黏膜屏障 ,引起ＡＧＭＬ。ＴＧＦ及受体在消化道黏膜… 相似文献
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《国际脑血管病杂志》2000,(5)
ＰＡＲＳ ｐｏｌｙ(ＡＤＰ ｒｉｂｏｓｅ)ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ 聚ＡＤＰ核醣合成酶ＰＣＤ ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ 程序化细胞死亡ＰＣＲ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ 聚合酶链反应ＰＤＧＦ ｐｌａｔｅｌｅｔ ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ 血小板衍化生长因子ＰＥＣＡＭ 1 ｐｌａｔｅｌｅｔｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌａｄｈｅ ｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ 1 血小板内皮细胞粘附分子 1ＰＥＴ ｐｏｓｉｔｒｏｎｅｍｉｓｓｉｏｎｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ 正电子发射体层摄影ＰＦ… 相似文献
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患者男 ,2 9岁。因乏力、食欲下降反复发作 2年 ,伴恶心、尿黄 2周于 2 0 0 1年 4月以“慢性乙型肝炎”第 2次入院。患者曾于 2 0 0 0年 8月以慢性乙型肝炎 (中度 )入院 ,当时查总胆红素 (ＴＢＩＬ)为 2 8.5 μｍｏｌ/Ｌ ,丙氨酸转氨酶(ＡＬＴ)为 10 0Ｕ/Ｌ ,天门冬氨酸转氨酶 (ＡＳＴ)为 80Ｕ/Ｌ ,ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｃ阳性 ,ＨＢＶＤＮＡ 4 4 0 0ｍｅｑ/ｍｌ(ｂＤＮＡ法 ) ;肝活检病理报告 ,慢性乙型肝炎 (Ｇ2Ｓ3 ) ;免疫组化 :ＨＢｓＡｇ阳性和ＨＢｃＡｇ阳性 ;原位杂交 :ＨＢＶＤＮＡ阳性。经拉米夫定 10 0ｍｇ 1次 /ｄ、… 相似文献
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《中华结核和呼吸杂志》2000,23(3):154
第八届欧洲基因治疗学会会议 (8ｔｈＭｅｅｔｉｎｇｏｆｔｈｅＥｕｒｏｐｅａｎＳｏｃｉｅｔｙｏｆＧｅｎｅＴｈｅｒａｐｙ) ,将于 2 0 0 0年 10月 7～ 10日在瑞典的斯德哥尔摩召开。会议交流的内容包括 :心血管病、全科医学、遗传学、血液病学和肿瘤学、ＨＩＶ/ＡＩＤＳ、免疫学、肌肉骨骼与结缔组织病、神经系疾病、呼吸系疾病。欲参加该会的同志 ,可通过以下方式联络 :电话 : 4 6 845 96 6 0 0 ;传真 : 4 6 86 6 1912 5 ;电子邮件 :ｅｓｇｔ @ｃｏｎｇｒｅｘ.ｓｅ ;通信 :ＣｏｎｇｒｅｘＳｗｅｄｅｎＡＢ ,Ａｔｔｎ .ＥＳＧＴ ,Ｐ .Ｏ .… 相似文献
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《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2000,(5)
ＱＩＡＮＭｉｎ1,ＢＡＩＹａｎ ｊｕｎ1,ＺＨＡＮＧＰｉｎｇ1,ＷＵＺｉ ｒｏｎｇ1,ＹＡＮＺｉ ｚｈｕ2(1 ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｌｏｇｙ ,ＥａｓｔＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ,Ｓｈａｎｇｈａｉ 2 0 0 0 6 2 ;2 ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＰｒｅｖｅｎｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅ ,ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰａｒａｓｉｔｉｃＤｉｓｅａｓｅｓ ,Ｓｈａｎｇｈａｉ 2 0 0 0 2 5 )ＴｈｅｅｇｇｏｆＳｃｈｉｓｔｏｓｏｍａｊａｐｏｎｉｃｕｍｉｓａｃｈｉｅｆｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｆａｃｔｏｒ .Ｔｈｅｐｒｅｐ… 相似文献
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DNA聚合酶a反义寡聚脱氧核苷酸抑制人胃癌细胞生长的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
肿瘤的特异性治疗一直是医学上的难题，常规的化疗药物对肿瘤的治疗效果不满意，而且副反应明显．近年来，应用人工合成的反义寡聚脱氧核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ，ＡＳＯＤＮ）与靶基因或ｍＲＮＡ特异性互补结合，通过抑制与肿瘤发生及发展密切相关的基因产物的表达而达到特异性治疗目的［１，２］．我们设计并合成了互补于ＤＮＡ聚合酶ａ（ＤＮＡｐｏｌｙｍｅｒａｓｅａ，ＤＮＡｐｏｌａ）的ＡＳＯＤＮ，作用于人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１和ＭＧＣ８０３，并用正常人脐静脉内皮细胞（Ｈ… 相似文献
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转化生长因子β1基因转染间充质干细胞对关节软骨的保护作用 总被引：2，自引：0，他引：2
我们于 1999年 3月至 2 0 0 0年 5月将组织工程学与分子生物学结合 ,把具有促进种子细胞增殖分化、抑制多种炎性介质活性等多重生物学效应的转化生长因子 β1(ＴＧＦ β1)基因转入关节软骨缺损修复的首选种子细胞———间充质干细胞 (Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＭＳＣｓ) ,探讨ＴＧＦ β1基因能否在ＭＳＣｓ中得到表达及其对ＭＳＣｓ定向分化的影响 ,评价其对关节软骨的保护作用 ,为用分子组织工程学技术高质量地修复关节软骨缺损提供实验基础〔1 3〕。 一、材料与方法 1.ＴＧＦ β1基因转染的瞬时表达检测 :取 2月… 相似文献
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错配修复基因hMSH2与突变p53在散发性消化道肿瘤中的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
人类ＤＮＡ错配修复系统 (ｍｉｓｍａｔｃｈｒｅｐａｉｒｓｙｓｔｅｍ ,ＭＭＲ )是由一系列特异性修复ＤＮＡ碱基错配的酶分子组成 ,此系统的存在 ,能避免遗传物质产生突变 ,保证ＤＮＡ复制的高保真度[1] 。ｈＭＳＨ2是目前研究较广泛的ＤＮＡ错配修复基因 ,它的失活可导致ＤＮＡ错配修复能力的降低 ,引起微卫星不稳定性 (ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ ,ＭＳＩ) ,可使癌基因激活或抑癌基因失活 ,诱发细胞癌变[2 ] 。我们对 30例散发性消化道肿瘤ＤＮＡ上ｈＭＳＨ2基因与肿瘤组织中突变ｐ5 3的表达进行研究 ,以探讨ｈ… 相似文献
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半随病毒载体介导帕金森病基因治疗的实验研究 总被引：2，自引：0，他引：2
一、材料和方法 1.腺伴随病毒 (ａｄｅｎｏ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｖｉｒｕｓ,ＡＡＶ)载体的制备 :酪氨酸羟化酶 (ｔｙｒｏｓｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ ,ＴＨ)质粒〔芳香族氨基酸脱羧酶 (ａｒｏｍａｔｉｃａｍｉｎｏ ａｃｉｄｄｅｃａｒｂｏｘｌａｓｅ ,ＡＡＤＣ)或三磷酸鸟苷环水解酶Ｉ(ＧＴＰｃｙｃｌｏｈｙｄｒｏｌａｓｅＩ,ＧＣＨ)质粒〕是ＡＡＶ基因组反向末端重复序列之间依次含巨细胞病毒早期响应启动因子、人类生长激素第 1内含子、人源性ＴＨ(ＡＡＤＣ或ＧＣＨ)基因、ＳＶ40多聚腺苷信号的载体质粒。以磷酸钙沉积法共转染载… 相似文献
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患者男 ,2 7岁。临床诊断 :心肌炎、心律失常型。图示 3条为ＬＯＮＧ -ＴＥＲＭ(Ⅱ )导联 (ｃａｌ1 2 ,12 .5ｍｍ ｓｅｃ)连续描记。图中可见 3种形态ＱＲＳ波 :①正常窦性心律 ,频率为 79次 ｍｉｎ。②提早出现前无Ｐ波呈ＱＳ形者 (ＰＶＳＡ) ,联律间期为 0 .4 5ｓ。早搏后的Ｒ′ -Ｒ间期为 1.0 2ｓ。③继长间期后出现宽大畸形呈Ｒ型者 (ＰＶＳＢ) ,Ｔ波与主波方向相反 ,并以 0 .5 8ｓ的固定间期与前窦性激动形成二联律。心电图诊断 :①窦性心律 ;②频发多源性室性早搏 (ＰＶＳ)二联律。图 1 说明见正文讨论 ＰＶＳ二联律法则是折返性Ｐ… 相似文献
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１．材料与方法：乳哺动物细胞表达载体ｐＢＫ－ＣＭＶ,长约４．５ｋｂ,带有Ｔ_７公用序列。ｐＣＰ１０是ｐＢＲ３２２ＥｃｏＲＩ位点中插入双拷贝头尾相接的ＨＢＶａｙｗ亚型全基因ＨＢＶＤＮＡ重组质粒。ＰＣＲ引物ＸＩ１：１４２８－１４４８ｎｔ５'ＣＧＴ ＣＣＣＧＴＣ ＧＧＣＧＣＴＧＡＡＴＣＣ３',ＸＩ_２：１６７２－１６５３ｎｔ５'ＡＧＴＣＣＡＡＧＡＧＴＣＣＴＣＴＴＡＡＧ３'。人肝癌细胞系ＳＭＭＣ－７７２１,出上海细胞所提供。将ＥｃｏＲＩ酶切后回收的全基因ＨＢＶ片段。在Ｔ_４ＤＮＡ连接酶作用下,与ＥｃｏＲＩ酶切… 相似文献
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ＳｅｒｕｍｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎｅｎｈａｎｃｅｓＤＮＡｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｍａＳＭＭＣ７７２１ｃｅｌｓＪＩＡＮＧＳｈｉＭｉｎｇａｎｄＸＵＺｈａｏＨｕｉＳｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓｌｉｖｅｒｎｅｏｐｌａｓｍｓ;ｃａｒｃ... 相似文献
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本文应用胶银染色法检测胃肠道平滑肌肿瘤 (ｇａｓｔｒｏｉｎ ｔｅｓｔｉｎａｌｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｔｕｍｏｒｓ,ＧＩＳＭＴ)中核仁组成区嗜银蛋白 (ａｒｇｙｒｏｐｈｉｌｉｃｎｕｃｌｅｏｌａｒｏｒｇａｎｉｚｅｒｒｅｇｉｏｎｓｐｒｏｔｅｉｎｓ,ＡｇＮＯＲｓ)的表达情况 ,旨在探讨其临床病理及预后价值。材料与方法一、临床病理资料从本院 1977～ 1996年 4月间手术切除的ＧＩＳＭＴ标本中 ,选择诊断明确、病历完整者 86例。其中男 49例 ,女 37例。年龄为 1～ 77岁。肿瘤发生于食管 11例 ,胃 30例 ,小肠 2 7例 ,结直肠 18例。以核分… 相似文献
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刺五加皂甙对胃癌细胞膜电位和亚细胞结构的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
刺五加皂碱 (ａｃａｎｔｈｏｐｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓ ,ＡＳＳ)为五加科植物 ,具有益气健脾、补肾安神和增强抗肿瘤免疫活性等作用[1] 。我们曾用流式细胞仪观察到ＡＳＳ作用于ＨｅｐＧ2肝癌细胞的Ｓ期 ,抑制肝癌细胞ＤＮＡ合成[2 ] 。我们用细胞膜片钳 (ｐａｔｃｈｃｌａｍｐ)技术及透射电镜观察ＡＳＳ对胃癌细胞的离子通道和超微结构的影响 ,从分子水平探讨ＡＳＳ对胃癌细胞的作用机制 ,以寻找治疗胃癌的新途径。一、材料与方法1.细胞和材料 :人ＳＧＣ 790 1胃癌细胞株 (日本东京大学医学部提供 ) ,ＡＳＳ由白求恩医科大学化… 相似文献
