金属离子诱导人单核细胞凋亡并释放肿瘤坏死因子的实验研究

目的 探讨人工关节磨损产物金属离子钴(Co2 )、铬(Cr3 )对人工关节无菌性松动的影响.方法 将金属离子Co2 、Cr3 分别与人单核细胞共培养,分别于12、24、48小时取细胞上清液,用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量,并测定细胞悬液中细胞凋亡情况.结果 Co2 、Cr3 均能刺激人单核细胞产生TNF-α且TNF-α量随时间上升,一定时间后达到峰值,随后缓慢下降.而随时间发展,人单核细胞凋亡率逐步升高.结论 金属离子Co2 、Cr3 能通过刺激人单核细胞合成和释放肿瘤坏死因子,诱发人单核细胞凋亡从而引起假体周围骨溶解,进而引起假体松动.     

肿瘤坏死因子与细胞凋亡

肿瘤坏死因子具有多种生物学活性，其与细胞膜上特异性受体结合后，能诱导某些非肿瘤细胞和大多数肿瘤细胞凋亡，对清除病理状态下机体受损的细胞及杀灭肿瘤细胞，起着重要的作用。ＤＮＡ? 转录和蛋白合成抑制剂可增强其诱导的凋亡效应，其他协同因素也得到进一步的研究     

口腔扁平苔藓中肿瘤坏死因子α和肿瘤坏死因子受体Ⅰ表达及与细胞凋亡的关系

目的：探讨口腔扁平苔藓肿瘤坏死因子-α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ的表达意义及其与细胞凋亡的关系。方法：采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL法)、免疫组化技术检测50例口腔扁平苔藓及10例正常口腔粘膜中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、肿瘤坏死因子受体Ⅰ(TNFRⅠ)的表达及细胞凋亡情况。结果：口腔扁平苔藓的上皮角质细胞TNFRⅠ及固有层TNF-α表达均明显高于正常对照组，而上皮TNF-α及固有层TNFRⅠ的表达则明显少于正常对照组。口腔扁平苔藓的上皮层可见大量凋亡细胞，而固有层单个核细胞的凋亡指数则低于正常对照组。结论：口腔扁平苔藓中同时存在角质细胞的凋亡亢进及单个核细胞凋亡的减少，这种凋亡的异常可能与口腔扁平苔藓的发生发展密切相关。     

甲状腺癌中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体的表达

目的　研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体(TRAILR)在甲状腺癌中的表达及意义。　方法　采用免疫组织化学方法 ,检测 5例正常甲状腺、13例乳头状甲状腺癌、3例滤泡状甲状腺癌和 12例甲状腺癌旁组织中TRAIL和TRAILR的表达和分布。　结果　乳头状、滤泡状甲状腺癌组织和正常甲状腺组织中的甲状腺滤泡细胞均表达TRAIL和全部的TRAILR ,其中诱捕受体TRAILR4在正常甲状腺组织和甲状腺癌旁组织表达较弱。　结论　甲状腺癌组织中的甲状腺滤泡细胞表达TRAIL和全部的TRAILR ,提示癌变的甲状腺滤泡细胞通过自身表达TRAIL ,以自分泌或旁分泌的形式和其死亡受体TRAILR1、TRAILR2结合 ,诱导癌变的甲状腺滤泡细胞发生凋亡 ,诱捕受体TRAILR3、TRAILR4的存在也不能影响其对TRAIL诱导的细胞凋亡的敏感性     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其生物学作用

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (ＴＮＦ -ｒｅｌａｔ ｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ -ｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ ,ＴＲＡＩＬ)是 1995年首次分离和鉴定出来的、与ＦａｓＬ(Ａｐｏ - 1Ｌ或ＣＤ95 )具有较高同源性的ＴＮＦ超家族成员[1] ,它的编码基因位于染色体 3ｑ2 6。它在人和小鼠分别由 2 81和 2 91个氨基酸组成 ,二者有 6 5 %同源性。一定浓度的ＴＲＡＩＬ蛋白可引起不同来源转化细胞系的凋亡。1996年 ,Ｐｉｔｔｉ等[2 ] 独立地从表达序列标签 (ｅｘｐｒｅｓｓｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅｔａｇ ,ＥＳＴ)数据库中发现并分离出由 2 81个氨基酸…     

人肿瘤坏死因子α基因对绒毛膜癌耐药细胞凋亡影响的体内研究

目的　研究转染人肿瘤坏死因子α(huTNF α)基因对裸鼠绒毛膜癌 (绒癌 )耐药细胞移植瘤组织细胞凋亡的影响。　方法　用人绒癌耐药细胞系JEG 3 VP2和转染了huTNF α的绒癌耐药细胞系JEG 3 VP2 huTNF接种裸鼠各 6只 ,行足叶乙甙 (VP16 )化疗后 ,采用RT RCR、HE染色和TUNEL检测方法 ,观察移植瘤细胞的凋亡情况。结果　在接种JEG 3 VP2 huTNF α的移植瘤组织中 ,存在huTNF α基因的表达 ;JEG 3 VP2 huTNF α组出现凋亡小体的细胞和TUNEL阳性细胞明显多于JEG 3 VP2组 ,P <0 0 5。　结论　转染huTNF α基因促进了绒癌耐药细胞的凋亡。     

肿瘤坏死因子—α对中性粒细胞凋亡的影响

细胞凋亡是生物界普遍的生命现象,是由基因控制的细胞自主的有序性的死亡,与临床疾病关系密切。中性粒细胞（ＰＭＮ）是一种主要的炎性细胞,本实验通过光镜、电镜、电泳。流式细胞仪等方法研究了重要的炎性介质肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）对正常和炎症状态下外周血ＰＭＮ凋亡的影响。结果表明,ＴＮＦ－α可以诱导ＰＭＮ凋亡,且与作用时间作用浓度相关,ＰＭＮ的凋亡在炎症微环境中被改变,ＰＭＮ凋亡延迟,对ＴＮＦα反应性下     

口腔扁平苔藓中肿瘤坏死因子α和肿瘤坏死因子受体I表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨口腔扁平苔藓肿瘤坏死因子-α、肿瘤坏死因子受体I的表达意义及其与细胞凋亡的关系。方法采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL法)、免疫组化技术检测50例口腔扁平苔藓及10例正常口腔粘膜中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、肿瘤坏死因子受体I(TNFRI)的表达及细胞凋亡情况。结果口腔扁平苔藓的上皮角质细胞TNFRI及固有层TNF-α表达均明显高于正常对照组,而上皮TNF-α及固有层TNFRI的表达则明显少于正常对照组。口腔扁平苔藓的上皮层可见大量凋亡细胞,而固有层单个核细胞的凋亡指数则低于正常对照组。结论口腔扁平苔藓中同时存在角质细胞的凋亡亢进及单个核细胞凋亡的减少,这种凋亡的异常可能与口腔扁平苔藓的发生发展密切相关。     

恒磁场对金属离子钻、铬作用下人单核细胞分泌肿瘤坏死因子和细胞凋亡的影响

目的 探讨恒磁场对金属离子钴、铬作用下人外周血单核细胞分泌肿瘤坏死因子的影响,并探讨其对细胞凋亡的动态变化与Caspase-3活性的影响.方法 将CoCl2粉末与CrCl3粉末溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和CrCl3溶液,从健康人外周血提取单核细胞,将金属离子Co2+Cr3+分别与人单核细胞在不同的磁场强度(10Gs、100Gs、1000Gs)下共培养.实验分8组:Co2+Cr3+组(对照组)、Co2+、Cr3+分别+不同磁场强度(10Gs、100Gs、1000Gs)组,各组细胞于培养12、24、48小时用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子(TNF-a)的含量:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况,比色法测定Caspase-3酶活性.结果 经磁场暴露12h之后,各磁场处理组TNF-a量均低于非磁场处理组(P＜0.05),并呈现强度时间依赖性.在100Gs和1000Gs磁场处理组,细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.05),并随着磁场强度的逐渐增大,Caspase-3酶活性逐渐增强.而10Gs磁场组对细胞凋亡及Caspase-3酶活性的改变无明显影响(P＞0.05).结论 一定强度的恒磁场町拮抗金属离子钴、铬刺激人外周血单核细胞分泌TNF-a并且促进其凋亡,为磁场疗法防治假体周围骨溶解提供了理论依据.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体参与雷帕霉素诱导血管内皮细胞功能损伤的体外研究

目的: 探讨雷帕霉素对内皮细胞凋亡和增殖、迁移能力的影响,以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的变化。方法: 用浓度为0、1、10、100 μg/L 的雷帕霉素孵育内皮细胞24 h,应用CCK8法检测血管内皮细胞的增殖能力,Transwell小室和划痕试验检测细胞迁移能力,DAPI染色观察凋亡细胞核形态改变,Western blotting法检测caspase-3活性以显示血管内皮细胞的凋亡,并用 Western blotting检测TRAIL在凋亡的内皮细胞中的表达。结果: 雷帕霉素(1-100 μg/L)能诱导血管内皮细胞凋亡并抑制其迁移能力(P<0.01)。除雷帕霉素1 μg/L外, 10 μg/L和100 μg/L雷帕霉素均能抑制内皮细胞增殖能力(P<0.01),同时雷帕霉素(10-100 μg/L)使TRAIL蛋白表达增加,两者作用均呈浓度依赖性(P<0.01)。结论: 雷帕霉素能诱导内皮细胞发生凋亡并抑制其增殖和迁移能力。TRAIL表达上调与雷帕霉素诱导血管内皮细胞损伤有一定的相关性。     

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂在肿瘤研究中的进展

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)作为肿瘤坏死因子超家族的新成员可表达在多种细胞表面,也表达在多种肿瘤细胞和组织中,可诱导人肠腺癌细胞系HT29、人口腔鳞状细胞癌HSC3等肿瘤细胞凋亡,介导HepG2、HLE和SK-Hep-1等肿瘤细胞增殖,诱导巨噬细胞在肿瘤浸润区的杀伤活性,潜在介导肿瘤血管。     

中波紫外线诱导HaCaT细胞凋亡与扇贝多肽的影响：肿瘤坏死因子α/肿瘤坏死因子受体1通路的研究

背景：扇贝多肽可以通过Fas通路及NF-κB通路发挥对中波紫外线照射后的人角质形成细胞株(HaCaT)的保护作用。 目的：观察中波紫外线辐射后HaCaT细胞的凋亡情况和细胞内肿瘤坏死因子α/肿瘤坏死因子受体1的活化情况,以及扇贝多肽的干预作用。 方法：实验以20 mJ/cm2中波紫外线辐照HaCaT细胞0.5 h建立细胞辐射损伤模型,药物低、中、高剂量组、阳性对照组、抑制剂组分别在造模前2 h加入1.42,2.84,5.69 mmol/L的扇贝多肽、5.68 mmol/L的维生素C及50 mg/L的抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体。 结果与结论：中波紫外线辐照后,HaCaT细胞凋亡增多,肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体1 mRNA及磷酸化JNK蛋白表达量增加;1.42,2.84,5.69 mmol/L的扇贝多肽均可降低中波紫外线辐照引起的细胞内肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体1 mRNA及磷酸化JNK表达,抑制HaCaT细胞凋亡,以5.69 mmol/L扇贝多肽的作用效果最明显,与5.68 mmol/L维生素C的作用相当,且50 mg/L抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体也可明显降低中波紫外线辐照引起的细胞内磷酸化JNK表达。说明扇贝多肽能抑制中波紫外线辐照引起的HaCaT细胞凋亡,其可以通过肿瘤坏死因子α/肿瘤坏死因子受体1通路发挥抗凋亡作用。     

肿瘤坏死因子-α对Graves病甲状腺细胞凋亡的调节

Ｇｒａｖｅｓ病 (ＧＤ)是一种器官特异性自身免疫病 ,肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)参与其病理过程 ,但对ＧＤ甲状腺细胞凋亡的作用尚未见报道。为此 ,本文系统观察ＴＮＦ α对ＧＤ甲状腺细胞凋亡和凋亡相关蛋白Ｆａｓ基因及蛋白表达的影响 ,旨在探讨ＴＮＦ α在ＧＤ发病机理中的作用。甲状腺组织取自ＧＤ手术标本 ,采用原代细胞培养方法。孵育 5ｄ后 ,以含或不含ＴＮＦ α的试验液 (0、1、10、10 2 Ｕ ｍｌ)培养 72ｈ。采用流式细胞术测定甲状腺上皮细胞凋亡和凋亡相关蛋白Ｆａｓ表达阳性率。细胞培养上清液中ｓＦａｓ含量采用ＥＬＩＳＡ法…     

HSV—Ⅰ感染人单核细胞诱生肿瘤坏死因子α

以纯化ＨＳＶ－Ⅰ感染人外周血单个核细胞，发现ＨＳＶ－Ⅰ可感染粘附活化的单核细胞和经ＰＨＡ活化的淋巴细胞，并诱导细胞毒因子分泌。ＬＰＳ诱导ＴＮＦ抑制剂多粘菌素Ｂ不能阻断ＨＳＶ－Ⅰ感染单核细胞分泌细胞毒因子，但紫外线灭活的ＨＳＶ－Ⅰ不能诱导单核细胞分泌细胞毒因子。用重组分ＴＮＦα中和抗体完全中和ＨＳＶ－Ⅰ感染单核细胞培养上清中的细胞毒活性，表明其中含有的细胞毒因子为ＴＮＦα。而重组人ＴＮＦα中和抗体对     

肿瘤坏死因子a促进人冠状动脉内皮细胞的凋亡

背景：研究表明冠状动脉内皮细胞凋亡参与了动脉粥样硬化的发生、发展过程。 目的：观察肿瘤坏死因子a对人冠状动脉内皮细胞的诱导损伤作用。 方法：取对数生长期的人冠状动脉内皮细胞c-12221,分别加入含0(对照),200,400,600 mg/L肿瘤坏死因子a的培养液,采用MTT检测细胞增殖率变化,Hoechst 33258/PI双染观察凋亡细胞形态变化,Annexin V-FITC和PI双染流式检测细胞凋亡率变化,高内涵活细胞成像系统检测细胞线粒体膜电位变化。 结果与结论：肿瘤坏死因子a呈剂量依赖性抑制人冠状动脉内皮细胞的增殖。Hoechst 33258/PI染色观察可见凋亡细胞染色质凝集、细胞核碎裂成碎片等典型细胞凋亡的特征性变化,不同质量浓度肿瘤坏死因子a组细胞凋亡率高于对照组(P < 0.05),线粒体膜电位低于对照组(P < 0.05),且呈剂量依赖性。表明肿瘤坏死因子a呈剂量依赖性促进人冠状动脉内皮细胞凋亡,抑制其增殖,作用机制与线粒体凋亡通路有关。     

恒磁场对金属离子钴、铬作用下人单核细胞分泌肿瘤坏死因子和细胞凋亡的影响

目的探讨恒磁场对金属离子钴、铬作用下人外周血单核细胞分泌肿瘤坏死因子的影响,并探讨其对细胞凋亡的动态变化与Caspase-3活性的影响。方法将CoCl2粉末与CrCl3粉末溶于无菌注射用水配制成CoCl2溶液和CrCl3溶液,从健康人外周血提取单核细胞,将金属离子Co^2＋、Cr^3＋分别与人单核细胞在不同的磁场强度（10Gs、100Gs、1000Gs）下共培养。实验分8组：Co^2＋、Cr^3＋组（对照组）、Co^2＋、Cr^3＋分别＋不同磁场强度（10Gs、100Gs、1000Gs）组,各组细胞于培养12、24、48小时用ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子（TNF-α）的含量;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡情况,比色法测定Caspase-3酶活性。结果经磁场暴露12h之后,各磁场处理组TNF-α量均低于非磁场处理组（P〈0．05）,并呈现强度时间依赖性。在100Gs和1000Gs磁场处理组,细胞凋亡率显著高于对照组（P〈0．05）,并随着磁场强度的逐渐增大,Caspase-3酶活性逐渐增强。而10Gs磁场组对细胞凋亡及Caspase-3酶活性的改变无明显影响（P〉0．05）。结论一定强度的恒磁场可拮抗金属离子钴、铬刺激人外周血单核细胞分泌TNF-α并且促进其凋亡,为磁场疗法防治假体周围骨溶解提供了理论依据。     

肿瘤坏死因子-β抑制人胰腺癌细胞增殖的病理学研究

目的：探讨肿瘤坏死因子－β（ＴＮＦ－β）对人胰腺癌ＪＦ３０５细胞增殖的抑制作用。方法：采用免疫细胞化学染色方法观察增殖细胞核抗原、ｂｃｌ－２蛋白的表达、３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入经放射自显影显示ＤＮＡ合成、核仁组成区嗜银蛋白染色及末端脱氧核苷转移酶标记法凋亡原位染色，观察ＴＮＦ－β的作用。结果：ＰＣＮＡ及ｂｃｌ－２蛋白的表达，在ＴＮＦ－β处理前后变化不甚明显；ＡｇＮＯＲ染色后，银染颗粒的数量差异无统计学意义，但颗粒面积减少显著（Ｐ＜０．０５）；３Ｈ－胸腺嘧啶核苷放射自显影表明，Ｓ期细胞数明显减少，且差异显著。凋亡原位染色显示，在ＴＮＦ－β处理后的较短时间内即出现多量染色阳性细胞，与对照片比较，变化明显。结论：ＡｇＮＯＲ染色颗粒面积减少及凋亡原位染色出现多量凋亡细胞，能较敏感地反映ＴＮＦ－β处理对人胰腺癌细胞的增殖抑制作用。     

肿瘤坏死因子-a对中性粒细胞凋亡的影响

细胞凋亡是生物界普遍的生命现象,是由基因控制的细胞自主的有序性的死亡,与临床疾病关系密切.中性粒细胞(PMN)是一种主要的炎性细胞,本实验通过光镜、电镜、电泳、流式细胞仪等方法研究了重要的炎性介质肿瘤坏死因子-a(TNF-a)对正常和炎症状态下外周血PMN凋亡的影响.结果表明,TNF-a可以诱导PMN凋亡,且与作用时间和作用浓度相关.PMN的凋亡在炎症微环境中被改变,PMN凋亡延迟,对TNF-a反应性下降.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在外周血单个核细胞中的表达

目的 :研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)在外周血单个核细胞 (PBMC)中的表达及其意义。方法 :用免疫组织化学的方法检测PBMC中TRAIL的表达情况。结果 :淋巴细胞分离液得到的PBMC中 ,淋巴细胞占 (97.4 8± 3.4 3) % ,单核细胞占 (3.15± 0 .83) % ,TRAIL免疫反应阳性的淋巴细胞占总数的 (2 6 .31± 3.18) % ,呈TRAIL免疫反应阳性的单核细胞占总数的(1.0 4± 0 .13) % ,TRAIL免疫反应阳性物质分布于胞质内 ,核呈阴性反应。结论 :正常人外周血分离的淋巴细胞及单核细胞有TRAIL表达。     

肿瘤坏死因子α诱导胶质瘤细胞凋亡和p38丝裂素活化蛋白激酶表达

一、材料和方法1.材料 :胶质瘤细胞Ｃ6购自本校全军神经外科研究所。重组人肿瘤坏死因子α(ＲｈＴＮＦ α)购自Ｓｉｇｍａ公司 ,按照所需浓度以ＰＢＳ稀释。噻唑蓝 (ＭＴＴ)购自Ａｍｒｅｓｃｏ公司。二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)购自Ｆｌｕｋａ公司。ＲＰＭＩ 16 40培养液购自Ｓｉｇｍａ公司。小牛血清购自杭州四季青生物制品公司。ｐ38丝裂素活化蛋白激酶 (ｐ38ｍｉｔｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｓ,ｐ38ＭＡＰＫ)抗体由新加坡国立大学林圣彩教授惠赠。免疫组织化学ＳＡＢＣ试剂盒购自武汉博士德公司。2 .方法 :(1)Ｍ…