结膜细胞外基质移植的实验研究

目的：观察结膜细胞外基质（extracellular matrix,EcM）作为结膜组织的替代材料用于结膜成形的特点及效果。方法：饲养42只大白兔,将其中6只大白兔的球结膜制作结膜缺损模型,并将剩余的大白兔随机分为3组,每组12只。实验组兔结膜采用组织工程技术制备的结膜ECM行结膜移植修补术,对照Ⅰ组采用新鲜异体结膜移植,对照Ⅱ组采用低温冷冻保存的羊膜移植,以观察移植修补术后结膜成形的情况,并行肉眼、镜下、免疫组化及淋巴细胞毒检查。结果：动物实验组,结膜ECM移植后1周可见新生血管自移植边缘长入,8周外观已接近正常结膜,无免疫排斥反应;光镜下可见移植后4周的移植区上皮已接近正常结膜上皮。对照Ⅰ组术后2周,移植片可见大量炎性细胞浸润。对照Ⅱ组术后4周。移植区仍有部分上皮未覆盖。结论：结膜ECM为目前比较理想的结膜替代材料,并可有效地用于角、结膜表面重建。     

人的毛囊可在裸鼠体内移植

第三军医大学附属西南医院皮肤科日前完成了毛囊在老鼠体内移植的实验 ,发现人的毛乳头细胞和毛囊上皮细胞在裸鼠体内相互作用可共同促进其体内形成类似人类的完整毛囊结构 ,并能诱导裸鼠毛发再生。实验证明 ,毛囊生长调控基因没有种族特异性。这一重大发现为人类以及动物毛囊再生研究打下了坚实的基础。毛囊是哺乳动物皮肤重要的附属器 ,目前 ,医学界对有关毛囊性疾病如各种原因所致的脱发的发病原理尚缺乏足够的认识 ,治疗上亦缺乏根本有效的手段。西南医院皮肤科先后获得了 5项有关毛囊生长研究的国家自然科学基金资助课题 ,在著名皮肤科…     

细胞外基质分子影响人颊癌细胞侵袭力的体外实验研究

为探讨人颊癌细胞侵袭性生物学行为的有关分子机制。采用体外人羊膜侵袭模型,以建株人颊癌细胞系ＢｃａＣＤ８８５ 为研究对象,观察了细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ）活性分子层粘连蛋白（Ｌａｍｉｎｉｎ,ＬＮ） 、纤粘连蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ,ＦＮ）及其结合位点序列肽ＲＧＤ（Ａｒｇ Ｇｌｙ Ａｓｐ） 对人颊癌细胞侵袭力的影响。结果表明,不同浓度的ＬＮ、ＦＮ（１０～５０μｇ／ｍｌ）均明显地增强了人颊癌细胞的侵袭力,并呈现出一定的剂量效应关系;ＲＧＤ不仅能降低颊癌细胞的侵袭力,而且能阻抑ＦＮ 的促颊癌细胞侵袭力。由此提示,ＬＮ、ＦＮ 可能是人颊癌细胞侵袭过程中的重要调节分子,利用ＥＣＭ分子结合位点序列肽有望成为一种新的抗癌侵袭转移治疗方法。     

兔自体移植静脉狭窄与细胞外基质的关系

目的观察胶原和弹性纤维的积累及其与自体移植静脉（atuologous vein grafts,AVG)狭窄的关系,方法建立兔自体颈外静脉移植模型,用计算机图像分析,测量胶原和弹性纤维在新生内膜的面积以及Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白表达灰度值,结果,移植后2－12wk胶原和弹性纤维面积逐渐增加,Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白表达也逐渐增强。结论静脉移植后胶原和弹性纤维逐渐积累,其含量与管腔减少正相关,胶原在管腔中的作用大于弹性纤维,胶原蛋白中Ⅰ型胶原作用大于Ⅲ型胶原。     

不同转移潜能人肝癌细胞株与细胞外基质的粘附研究

目的：探讨肿瘤生物学特性对肝癌转移的影响。方法：采用荧光标记的体外细胞粘附方法，确定粘附最佳条件，比较高，低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97，SMMC7721与细胞外基质成分的粘附百分比。结果：SMMC7721细胞与玻璃蛋白，纤连蛋白和纤维蛋白原的粘附百分比分别为44．9％，47．4％，59．3％，MHCC97细胞则分别为73．6％，76．4％，80．6％，对应比较均有显差异（P＜0．05），结论：肿瘤细胞粘附能力的改变与其生物特性有关，人肝癌细胞的高转移特性与其高粘附性，细胞表面粘附分子（主要是整合蛋白）表达上的差异有关。     

人脐血源基质细胞移植促进裸鼠造血损伤修复的实验研究

目的 观察人脐血源基质细胞 (hUCBSCs)移植对裸鼠造血损伤的修复效果.方法 6.5Gy辐照裸鼠后,分别从尾静脉输入1×105个人脐血源基质细胞及生理盐水,分别于移植 1、 3、 5、 7、 10、 14、 21d观察裸鼠血象、骨髓象以及不同时相点CFU-F、CFU-GM、BFU-E、CFU-Meg动态变化.结果 HUCBSCs移植组裸鼠在血象、骨髓象恢复时间、不同时相点骨髓CFU-F、CFU-GM、BFU-E、CFU-Meg等方面与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HUCBSCs移植具有促进裸鼠造血损伤修复的作用.     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用

目的：探讨薏苡仁酯(coixenolide,CXL)对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤辐射效应的影响。方法：将该肿瘤细胞株CNE-2Z移植到裸鼠,成瘤后经CXL预处理再进行γ射线外照射。结果：CXL以量效方式提高移植瘤的放射敏感性。与对照组比较,肿瘤生长缓慢,放射损伤修复时间延长。放射增敏率7．19％～26．28％。结论：CXL对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤具有放射增敏作用。     

巨噬细胞移植对大鼠心肌梗死后细胞外基质修复的影响

目的探讨移植巨噬细胞对大鼠缺血再灌注引起的心肌梗死后细胞外基质修复和心室重塑的影响。方法贴壁法培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,建立Wistar大鼠心肌缺血-再灌注模型,随机分为对照组(AMI组,n=23),巨噬细胞移植组(MΦ组,n=20),假手术组(n=12)。术后第7天和第28天,取大鼠左室心肌组织进行组织病理学分析,分别测定膨展指数、梗死面积、非梗死区心肌细胞横截面积(CSA)、梗死区及非梗死区胶原容积分数(CVF)、梗死区胶原成熟程度。结果与AMI组比较,MΦ组术后第7天膨展指数[(0.27±0.13)vs(0.41±0.19),P<0.05]、非梗死区CSA[(330.65±57.30)μm2vs(408.00±99.98)μm2,P<0.01]均显著减少,MΦ组术后第28天膨展指数[(0.30±0.11)vs(0.48±0.12,P<0.01]、非梗死区CSA[(335.80±92.52)μm2 vs(515.41±93.13)μm2,P<0.01]也均显著减少;术后第7天和第28天MΦ组梗死区CVF显著大于AMI组[(53.51±5.82)%vs(45.05±3.66)%,(79.17±5.58)%vs(73.17±5.94)%,P<0.01],非梗死区CVF显著小于AMI组[(2.37±0.65)%vs(4.84±1.81)%,(2.64±0.63)%vs(6.01±1.34)%,P<0.01],梗死区胶原成熟程度显著大于AMI组[(0.566±0.009)vs(0.509±0.011),(2.162±0.047)vs(1.454±0.020),P<0.01]。结论巨噬细胞心肌内移植促进梗死区胶原沉积和成熟度增加,减少梗死范围,减轻非梗死区纤维化程度和心肌肥厚程度,从而改善心肌梗死后左室重塑。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子和基质金属蛋白酶在恶性肿瘤中作用的研究进展

恶性肿瘤的演变进程包括正常细胞恶性表型的形成、恶性生长、原发性肿瘤的浸润、肿瘤细胞的脱落、转移和继发性生长等环节，是一种多因素参与及多步骤的复杂过程。而肿瘤基质与肿瘤细胞间的相互作用在肿瘤恶性演变中日益受到人们的关注。本主要对细胞外基质金属蛋白酶诱导（extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN）和基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）在肿瘤中的相互作用的研究进展综述如下。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与基质金属蛋白酶-2在卵巢肿瘤组织中的表达及意义

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）与基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在上皮性卵巢癌（EOC）组织中的表达及意义,探讨其与EOC侵袭、转移及EOC生物学行为的关系。方法1997年～2001年采用免疫组化二步法检测了47例EOC,17例良性上皮性卵巢肿瘤（EOT）组织中的EMMPRIN及MMP-2的表达,分析其与肿瘤细胞分级、临床分期及淋巴结转移的关系。结果①MMP-2,EMMPRIN蛋白在EOT的实质和间质均表达,主要在肿瘤实质细胞表达。MMP-2,EMMPRIN在EOC组织中的表达率高于良性EOT,但差异无显著性（P〉0.05）;②MMP-2的阳性表达与EOC的临床分期、淋巴结转移情况及肿瘤细胞学分级有关;③EMMPRIN在EOC中的表达明显高于良性卵巢肿瘤,并与EOC的临床分期、淋巴结转移情况有关,与细胞学分级无关。结论本研究结果表明EMMPRIN可能是卵巢癌细胞侵袭转移的间接标志。     

止消通脉宁对糖尿病大鼠肾小球细胞外基质成分的影响

采用链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型 ,观察中药复方止消通脉宁对其肾小球细胞外基质 (ECM)成分的影响。结果显示 :止消通脉宁能够明显减少糖尿病大鼠肾小球ECM主要成分ColIV、FN、LN的积聚 ,具有抑制ECM增生的作用 ,从而可以延缓糖尿病肾病发生发展的病理进程     

β-葡糖醛酸酶在恒河猴组织中的分布

采用2周龄强制断奶和3周龄自然断奶的2组裸鼠用皮下塞入法将手术切除的人肿瘤组织（肿瘤表面组织和深部组织）作异体移植,并将已长成的人肿瘤的异体瘤切除以残瘤的形式继续在裸鼠皮下增殖,观察移植瘤在不同周龄的裸鼠以及肿瘤组织取材差异的成瘤影响和残瘤的生长特性。结果表明,2周龄裸鼠移植瘤的成瘤性较2周龄裸鼠为优,在相同移植天数,2周龄的成瘤期比3周龄的裸鼠提前了约4d, 成瘤率也提高了一倍以上（P＜0．01）,移植时取肿瘤表面组织比肿瘤深部组织的成瘤提高3倍以上（P＜0．005）,残瘤的传代率100％,且成瘤期只有8d,结果提示,使用2周龄的裸小鼠可提高移植瘤的成瘤率,如接种时选择肿瘤表面组织更可提高移植瘤的成瘤率,在移植瘤成瘤后用残瘤的方式传代时,可使成瘤期提前。     

生长因子和细胞外基质与脊髓损伤

脊髓损伤(SCI)是神经科学领域内一道尚未解决的难题。多项研究表明生长因子和细胞外基质是构成中枢神经系统微环境的必不可少的成分,研究它们在SCI和修复中所起的作用,有利于找到针对性的治疗手段,从而最大程度地提高SCI后的功能恢复。本文对神经生长因子、脑源性神经营养因子、神经营养因子3、血管内皮生长因子、转化生长因子β1、细胞因子和促进或抑制轴突再生的细胞外基质蛋白在SCI中的作用作一综述。     

小鼠肝枯否细胞分离培养与免疫组化鉴定

门静脉灌注ＧＢＳＳ以清除肝内淤血，链霉蛋白酶Ｅ选择性破坏肝脏实质细胞，可以获得肝间质细胞悬液。经Ｐｅｒｏｃｌｌ梯度离心，贴壁养得到大量纯化枯否细胞，数量大约为４．１＊１０＾６个／克肝组织。     

D-葡萄糖对系膜细胞产生细胞外基质的时效与量效研究

目的探讨不同浓度葡萄糖在不同时间对系膜细胞产生细胞外基质（ECM）的影响。方法人系膜细胞分别在不同浓度D-葡萄糖（5．5、10、20、30mmol／L）条件下培养不同时间（6、12、24、48h）,ELISA法检测各组细胞上清液纤维连接蛋白（Fn）、Ⅳ型胶原（ColⅣ）含量。结果（1）10、20、30mmol／LD-葡萄糖条件下,培养6、12、24、48h均能引起细胞上清液中的Fn、Col Ⅳ显著升高（P〈0．05）,以24h最明显（P〈0．05）。（2）在相同的时间点上,随浓度增加,5．5、10、20、30mmol／LD-葡萄糖培养均能引起细胞上清液中的Fn、Col Ⅳ显著升高（P〈0．05）,以30mmol／LD-葡萄糖组最明显（P〈0．05）。结论葡萄糖可以时间和剂量依赖的方式刺激系膜细胞Fn、Col Ⅳ产生。     

苯那普利对FSGS大鼠肾组织细胞外基质影响

目的探讨苯那普利对局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)大鼠肾组织细胞外基质(ECM)的影响。方法建立单侧肾切除合并阿霉素静脉双次注射大鼠FSGS模型,经苯那普利进行灌胃治疗8周,然后采用半定量病理分析苯那普利对肾组织ECM影响,以及生化检测尿蛋白、血脂、肾功能变化。结果FSGS大鼠经苯那普利治疗后,肾组织ECM积聚减少(P<0.01),血脂、肌酐、尿素氮和尿蛋白较模型组降低(P<0.05-0.01)。结论苯那普利可以抑制肾组织ECM积聚,改善肾功能,防治肾纤维化。     

RNA干扰IGF-1受体和EGF受体表达对鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞周期的影响

目的探讨RNA干扰IGF-1受体和EGF受体表达对鼻咽癌裸鼠移植瘤的增殖状态和鼻咽癌CNE2细胞的细胞周期趋势的影响及其作用机制。方法应用免疫组织化学S-P方法和形态计量技术对鼻咽癌裸鼠移植瘤（实验组和对照组）组织切片进行PCNA染色、HE染色以及流式细胞仪检测鼻咽癌CNE2细胞（实验组和对照组）在细胞各期的细胞比例和增殖指数。结果实验组鼻咽癌皮下移植瘤PCNA标记指数为27．19±10．20,核分裂像计数为18．80±7．47;质粒对照组和正常对照组鼻咽癌皮下移植瘤PCNA标记指数别为36．47±9．03和37．07±8．63,核分裂像计数分别为37．53±5．25和38．03±6．15,同一组的两指标显著正相关（P〈0．01）。实验组鼻咽癌CNE2细胞处于G0／G1期、S期和G2／M期的细胞比例分别为63．80±0．64、33．29±0．21和2．91±0．04,而两对照组鼻咽癌CNE2细胞处于G0／G1期、S期和G2／M期的细胞比例分别为47．91±0．65（44．64±0．28）、42．71±0．11（45．70±0．15）和9．38±0．14（9．65±0．01）。实验组鼻咽癌CNE2细胞的增殖指数为36．2±0．65,而两对照组鼻咽癌CNE2细胞分别为52．09±0．08和55．35±0．08。结论EGFR和IGF-1R基因治疗鼻咽癌机理之一可能是通过改变鼻咽癌CNE2细胞周期趋势和降低移植瘤的增殖水平达到的;PCNA标记指数、核分裂像计数和G2／M期的鼻咽癌细胞比例在一定程度上均可反应鼻咽癌细胞的增殖水平,三者可作为评估鼻咽癌增殖活性的有用指标。     

透明质酸对小鼠卵丘细胞外基质的影响

目的 观察透明质酸(HA)对小鼠卵丘细胞外基质的影响。方法 取3～4周龄的雌鼠(含野生型和bikunin基因敲除小鼠)诱导排卵，取卵丘-卵母细胞复合体(COC)，镜下计数诱导排卵后卵母细胞。免疫荧光双重染色后观察HA及血清来源的HA相关蛋白(SHAP)在卵丘细胞外基质的分布。结果 SHAP-HA复合体缺失引起卵丘细胞外基质的变化，并影响到随后的排卵。结论 SHAP-HA参与卵丘细胞外基质的构建．细胞外基质的受损引起卵母细胞功能的破坏。     

阿托伐他汀对自身免疫性心肌炎小鼠心肌细胞外基质重构的影响

目的:探讨阿托伐他汀对自身免疫性损伤所致心肌细胞外基质重构的影响。方法:人工合成多肽诱导BALB/c小鼠自身免疫性心肌炎,分为非治疗组和阿托伐他汀组[10 mg/(kg.d)],另设正常对照组。免疫后第21天,观测心身比值、心肌炎症评分、胶原容积分数(CVF)、心肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和Ⅲ型胶原(COLⅢ)mRNA的表达、纤维连接蛋白(FN)的表达。结果:与正常对照组相比,非治疗组的心身比值、炎症评分、CVF、TNF-α和COLⅢmRNA的表达、FN蛋白的表达均显著升高(P<0.01);阿托伐他汀组的各项指标均显著低于非治疗组(P<0.05或P<0.01)。结论:阿托伐他汀可以改善自身免疫性心肌损伤后的心肌细胞外基质重构,这可能与其下调心肌局部炎性细胞因子的表达、减少细胞外基质成分的沉积有关。