多非替利衍生物V03(CPU228)与多非替利对再灌注性心律失常、血管收缩和诱发尖端扭转室速(TdP)作用的比较

目的　研究多非替利衍生物V0 3(CPU2 2 8)心血管活性。方法　结扎麻醉大鼠冠状动脉左前降支及再灌 ,建立再灌注心律失常模型 ;用甲氧胺给药的家兔模型考察诱发TdP作用 ;以无钙、复钙液中KCl(大鼠 )和苯肾上腺素 (豚鼠 )引起的胸主动脉环的收缩 ,考察对内钙动员和外钙内流的影响。结果　①CPU2 2 8可降低最大心律失常分数 ,明显缩短VF和VT持续时间 ,减少心律失常分数 -时间曲线下面积 ,作用强于多非替利。②CPU2 2 8的TdP诱发率低于多非替利。③CPU2 2 8可浓度依赖性地抑制无钙液中的KCl和Phe引起的血管收缩 ,亦抑制复钙后KCl引起的血管收缩但对Phe的复钙收缩无影响 ,多非替利仅高浓度对无钙液中的KCl引起的血管收缩具有抑制作用。结论　CPU2 2 8增强了抗再灌注性心律失常作用 ,减弱了诱发Tdp作用 ,新增了对L 型钙通道的拮抗作用和α受体的阻断作用 ,具有复合型Ⅲ类药物的特点     

肿瘤坏死因子α对大鼠心室肌细胞钙转运的影响

AIM: To study the effects of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) on calcium movement in rat ventricular myocytes. METHODS: Intracellular free Ca2+ concentration was measured with calcium fluorescent probe Fluo-3/AM and laser confocal microscope. L-type calcium current (ICa,L) was recorded with the whole-cell configuration of the patch-clamp techniques. RESULTS: At 2, 20 and 200 microg/L, TNF-alpha was found to increase intracellular free Ca2+ concentration in a dose-dependent manner illustrated by the increment of calcium fluorescence density with laser confocal microscope. Nicardipine 0.5 micromol/L slightly attenuated TNF-alpha-induced response. When the cardiac myocytes were exposed to caffeine (100 mmol/L) for 30 min, TNF-alpha failed to induce any change of intracellular free calcium. However, it was found that TNF-alpha inhibited I(Ca,L) in whole-cell patch-clamp experiments. At 2, 20, and 200 microg/L, TNF-alpha decreased peak I(Ca,L) by 3.9 % (-5.1 pA/pF+/-0.3 pA/pF vs -4.9 pA/pF+/-0.2 pA/pF, n=9, P>0.05), 15.7 % (-5.1 pA/pF+/-0.3 pA/pF vs -4.3 pA/pF+/-0.3 pA/pF, n=9, P<0.05) and 19.6 % (-5.1 pA/pF+/-0.3 pA/pF vs -4.1 pA/pF+/-0.4 pA/pF, n=9, P<0.01), respectively. It shifted the steady-state inactivation curve of I(Ca,L) to the left (V1/2 shifted from -28.7 mV+/-0.3 mV to -37.8 mV+/-1.4 mV, n=7, P<0.05), while it took no effects on steady-state activation and recovery from inactivation. CONCLUSION: TNF-alpha inhibited I(Ca,L) in rat ventricular myocytes, while increasing the intercellular free Ca2+ level due to the release of Ca2+ from intracellular stores.     

Dofetilide对成年豚鼠心室肌细胞钠钙交换的影响

目的　研究dofetilide对豚鼠心室肌细胞Na+ /Ca2 + 交换电流的影响。方法　酶法分离成年豚鼠心室肌细胞 ,全细胞膜片钳方式、斜坡电压刺激程序 (从钳制电位 - 4 0mV去极化至 +6 0mV ,然后以 90mV/s的速率超极化至 - 12 0mV)记录Na+ /Ca2 + 交换电流 (INa/Ca)及dofetilide 0 0 3～ 1 0μmol·L-1对该电流的影响。结果　dofetilide 0 0 3～ 1 0μmol·L-1浓度依赖性地增强Na+ /Ca2 + 交换外向及内向电流 ,对外向电流的EC50 (5 0 %最大效应浓度 )为 0 178μmol·L-1(95 %可信限为 0 0 4 0～ 0 787μmol·L-1) ,对内向电流的EC50 为 0 178μmol·L-1(95 %可信限为 0 0 38～ 0 84 2μmol·L-1)。结论　dofetilide对豚鼠心室肌细胞Na+ /Ca2 +交换外向及内向电流均有浓度依赖性的明显增强作用。     

赛庚啶对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞记录式膜片钳技术研究了赛庚啶(Cyp)对豚鼠心室肌细胞慢钙电流(I_(Ca))的影响,Cyp 3和8μmol·L~1对I_(Ca)的电流-电压关系曲线(I-V曲线)之各电流均有降低作用,使I-V曲线上抬;在指令电位0 mV时,I_(Ca)为次最大值,Cyp 0.3～10μmol·L~1使该I_(Ca)呈浓度依赖性降低,IC_(50)值为1.98μmol·L~1,还观察到Cyp 1μmol·L~1明显增加外向电流(I_(out)),且四乙基铵(TEA)1 mmol·L~1对其有显著的拮抗作用,但对控制电位从80 mV跃升至-40 mV时所出现的瞬时快内向电流,无明显影响.以上结果直接证明了Cyp对心室肌细胞钙跨膜转运有明显降低作用,还可能增加钾外流。     

异丙肾上腺素对豚鼠离体心室肌细胞延迟整流钾电流的影响(英文)

观察异丙肾上腺素对豚鼠离体心室肌细胞延迟整流钾电流(I_K)的作用.方法:分离单个离体豚鼠心室肌细胞,采用电压钳技术观察I_K.结果:在用不同去极化时程脉冲(40—300ms)激活I_K的条件下,异丙肾上腺素(1 μmol·L~(-1))仅增加长时程脉冲(150—300 ms)激活的I_k,这一作用在预先用BAPTA缓冲细胞内钙的条件下仍然存在,而细胞内注射BAPTA则降低长时程脉冲激活的I_K.结论:豚鼠离体心室肌细胞I_K有二个成分,其中一个成分受异丙肾上腺素和细胞内钙的调控.     

双苯氟嗪对豚鼠心室肌细胞L-钙电流的影响

目的:观察双苯氟嗪(Dip)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(I_(Ca-L))的影响。方法:酶解法制备单个心室肌细胞。应用全细胞膜片箝技术记录豚鼠单个心室肌细胞钙电流。结果:在0.3-30μmol/L范围内,Dip可浓度依赖性地降低电压依赖性激活I_(Ca-L)峰值,被Dip 3μmol/L所抑制的I_(Ca-L)在冲洗5min后可得到部份恢复。但Dip对I_(Ca-L)的电压依赖特征,最大激活电压,以及I_(Ca-L)稳态激活无明显影响。在Dip3μmol/L存在下,半数激活电压(V_(0.5))和斜率参数(к)与对照组相比,差异均无显著性。V_(0.5)分别为(-12.8±1.7)mV和(-13.2±2.4)mV,к分别为(7.1±0.4)mV和(7.5±0.5)mV(P>0.05)。Dip3μmol/L可明显使钙电流稳态失活曲线左移,加速钙通道电压依赖性稳态失活。V_(0.5)分别为(-19.7±2.4)mV和(-31±6)mV,к分别为(3.6±0.3)mV和(1.8±0.2)mV(P<0.05).Dip 3μmol/L还使I_(Ca-L)从失活状态下的恢复明显减慢。结论:Dip主要作用于L-型钙通道的失活状态,加速钙通道失活,并使其从失活状态下恢复减慢,从而抑制I_(Ca-L)。     

藻酸双酯钠对豚鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的　研究藻酸双酯钠 (PSS)对豚鼠心室肌细胞动作电位和L 型钙电流的影响。方法　采用全细胞膜片钳记录技术。结果　PSS明显缩短动作电位时程 (APD) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使APD90 缩短 2 4 9% (P <0 0 5 ,n=6 )、37 7%和 4 7 7% (P <0 0 1,n =6 ) ,使APD50 缩短2 1 1% (P <0 0 5 ,n =6 )、4 5 0 %和 6 3 2 % (P <0 0 1,n =6 ) ,呈明显的剂量依赖关系。PSS浓度依赖性减小L 型钙电流 (Ica L) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使其峰值降低34 3% (P <0 0 5 ,n =6 )、5 8 4 %和 74 9% (P <0 0 1,n =6 )。随着PSS浓度的增加 ,L 型钙电流的I U曲线逐渐上移 ,但其最大激活电压保持为 0mV不变。结论　PSS明显缩短APD ,抑制Ica L,且呈浓度依赖关系     

红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响

目的　观察红花黄素对豚鼠单个心室肌细胞动作电位和钙电流的影响。方法　采用膜片钳全细胞式记录技术。结果　红花黄素（３３ μｇ· Ｌ－ １） 能延长单个心室肌细胞动作电位时程,由（３５９３３ ±２７１８） ｍｓ 延长至（４１３３３ ±６１８８）ｍｓ（ Ｐ＜ ００５ ,ｎ ＝ ６） 。同时增加内向 Ｌ 型钙电流的峰值,由（ － １０２１ ±７４） ｐ Ａ 至（ － １４３６ ±２１２） ｐ Ａ（ Ｐ＜ ００５ ,ｎ ＝ ７） 。结论　由于红花黄素具有上述电生理作用,可用于心力衰竭和快速性心律失常的治疗     

大豆苷元对大鼠心室肌细胞I_(Na)的影响

目的观察大豆苷元对大鼠心室肌细胞钠通道电流(I_(Na))的影响,探讨其抗心律失常的机制。方法 MTT比色法检测大豆苷元对心室肌细胞活力的影响;单酶解法分离大鼠单个心室肌细胞;全细胞膜片钳技术观察、记录、分析大豆苷元给药前后大鼠心室肌细胞I_(Na)及其动力学特征的变化。结果 MTT实验表明,大豆苷元的IC_(50) 30～100μmol·L~(-1),由此选定用于后续实验的药物浓度为0.3～10μmol·L~(-1)。膜片钳实验结果表明,当给予终浓度为0.3、1、3、10μmol·L~(-1)大豆苷元后,药物对I_(Na)呈浓度依赖性抑制现象;大豆苷元0.3μmol·L~(-1)时对I_(Na)作用的时间过程也具有一定影响,随时间推移缓慢减小;1、3、10μmol·L~(-1)大豆苷元使I-U曲线上移;在此同等条件下,激活曲线向去极化方向移动、稳态失活曲线向超极化方向移动和失活后恢复曲线的τ值延长。结论大豆苷元对大鼠心室肌Na~+通道有明显的抑制作用,这可能是其抗心律失常的机制之一。     

17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的抑制作用

目的观察17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响及其与雌激素受体(estrogen receptor,ER)的关系。方法酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;膜片钳全细胞模式观察17β-雌二醇对单个心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的影响,并通过加入雌激素受体阻断剂tamoxifen(TAM)研究该作用与雌激素受体的关系。结果 17β-雌二醇(10-9～10-7mol.L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6)pA.pF-1分别减少至(-2.4±0.3)pA.pF-1、(-1.9±0.3)pA.pF-1和(-1.1±0.3)pA.pF-1(与对照组比较,均为P<0.01,n=5)。TAM(10-7 mol.L-1)预处理后,17β-雌二醇(10-7mol.L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6)pA.pF-1减少到(-1.0±0.2)pA.pF-1(与对照组比较,P<0.01,n=5),与未应用TAM(10-7 mol.L-1)预处理时比较,ICa-L峰电流密度值无变化(P>0.05,n=5)。结论 17β-雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L的作用呈浓度依赖性,雌激素受体阻断剂TAM不能阻断17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞ICa-L的抑制作用,提示17β-雌二醇对ICa-L的抑制作用可能与ER作用无关。     

KB-R7943对豚鼠心室肌细胞Na~ -Ca~(2 )交换电流的作用

目的　观察KB R7943对豚鼠心室肌细胞Na Ca2 交换电流 (INa Ca)的内向电流成分和外向电流成分的影响。方法　采用缺血再灌时胞内Na 超载的细胞模型 ,在同时记录内向、外向电流的双向离子条件下 ,用膜片钳全细胞技术 ,记录INa Ca的电流 电压关系曲线。结果　 10 -6和 10 -5mol·L-1KB R7943 ,在 5 0mV时 ,对INa Ca的抑制率分别是 2 9 4%和 6 1 7% ;在 - 80mV时抑制率分别是 2 2 1%和 5 6 9%。结论　KB R7943对豚鼠心室肌细胞INa Ca有抑制作用 ,但对外向成分和内向成分的抑制不具选择性。     

银杏酮酯对缺血豚鼠心室肌细胞Ⅰ_(Ca-L)和游离钙的影响

目的观察银杏酮酯GBE50对模拟缺血游离豚鼠心室肌细胞L型钙电流和游离钙浓度的影响,探讨GBE50抗心肌缺血的作用机制。方法应用单酶酶解法分离游离单个豚鼠心室肌细胞,采用膜片钳全细胞记录心室肌细胞L型钙电流,通过激光共聚焦显微镜扫描测定细胞内游离钙浓度的动态变化。结果缺血抑制豚鼠心室肌细胞的ICa-L(n=9,P<0.01),使豚鼠心室肌细胞内游离钙增加(n=10,P<0.01),而50mg·mL-1GBE50减轻缺血对ICa-L的抑制效应(n=6,P>0.05),减少缺血后心室肌细胞内游离钙浓度的增加(n=10,P>0.05)。结论GBE50可减轻心肌缺血区域与非缺血区域电生理的异质性,维持缺血后豚鼠心肌细胞电生理的稳定性,并减轻缺血后心肌细胞内钙超载介导的心肌损伤。     

壬基苯酚对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和动作电位的影响

目的：观察环境内分泌干扰物质——壬基苯酚（Nonylphenol,NP）对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和动作电位的影响。方法：应用酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳方法记录不同浓度NP作用下单个心室肌细胞L-型钙电流（如。）和动作电位（AP）的变化。结果：1）NP（10^-5、10^-7、10^-6、10^-5mol．L^-1）使ICa-l峰值电流密度分别从-3．72&#177;1．5pA／pF减少到-2．44&#177;0．4pA／pF（P〈0．05）,-2．34&#177;0．6pA／pF（P〈0．05）,-1．79&#177;0．8pA／pF（P〈0．01）,以及-1．66&#177;0．7pA／pF（P〈0．01）;2）NP使ICa-l的I—V曲线上移,但其形状和峰值电压无明显变化;3）NP对ICa-l稳态激活曲线无明显影响;4）NP可缩短动作电位复极50％和90％的时程（APD50,APD50）,但对静息电位（RP）和动作电位幅值（APA）无明显影响。结论：NP能剂量依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞ICa-l,并能够缩短动作电位时程。     

绞股蓝总皂甙对单个豚鼠心室肌细胞的钙、钠、钾电流及动作电位的影响

目的研究绞股蓝总皂甙（ＧＰ）对成年豚鼠单个心室肌细胞的动作电位（ＡＰ）、Ｌ－型钙通道电流（ＩＣａ）、快钠通道电流（ＩＮａ）以及内向整流钾通道电流（ＩＫ１）的影响。方法膜片钳全细胞记录。结果５０ｍｇＬ－１ＧＰ能使动作电位时程（ＡＰＤ９０）由给药前的（７０８±２４）ｍｓ缩短到给药后的（３９６±１６）ｍｓ（Ｐ＜０．０１），抑制率５８．１％，动作电位幅值（ＡＰＡ）由给药前的（１２１±７．２）ｍＶ降到给药后的（８６±８．６）ｍＶ（Ｐ＜０．０１），抑制率２４．１％，静息膜电位无明显影响；５～５０ｍｇＬ－１的ＧＰ能浓度依赖性阻滞ＩＣａ和ＩＮａ，但对ＩＫ１无明显影响。结论ＧＰ对缺血心肌的保护作用在于减少“钙超载”和抑制异常兴奋性的产生。     

IQ_(23)对豚鼠心室肌细胞复极和延迟整流钾电流两种成分的作用(英)

采用膜片钳全细胞记录技术，研究了具有抗心律失常作用的苄基异喹啉衍化物IQ23对豚鼠心室肌单细胞动作电位（AP）和钾电流的作用。结果表明：IQ_23在10，30，100μmol·L~-皇呈浓度依赖性的减慢AP复极，APD_90分别延长15％，28％和31％，此效应不依赖细胞外Ca~2 。电压钳制下记录延迟整流钾电流，IQ_23对其两种成分，即I_ks和I_kr，都有阻断作用，30和100mol·L-1IQ_23阻断I_ks达21％和26％，对Ikr为67％和86％。即使在100mol·L-1,IQ_23也不影响内向整流钾电流（Ikl）。本实验表明，IQ23能浓度依赖性的延长心室肌细胞动作电位时程（APD），此效应与胞外Ca2 无关。1Q23对Iks和Ikr两种成分都有阻断作用，无明显的选择性。     

黄芪皂苷Ⅳ对缺血大鼠心肌钙运转和心功能的影响(英文)

目的:研究黄芪皂苷IV(XGA)对缺血大鼠心肌钙运转和心功能的影响.方法:84只Wistar大鼠分为3组:对照组(12只);缺血组(12只),皮下注射异丙肾上腺素(30 mg/kg);XGA组(60只),皮下注射异丙肾上腺素后给予XGA.测定大鼠血流动力学指标、心脏功能和心肌细胞内外钙的变化,观察XGA对缺血大鼠心肌钙运转和心功能的量-效和时-效关系.结果:给予XGA后缺血大鼠心功能和血流动力学明显改善,随着XGA剂量的增加和XGA作用时间的延长,缺血大鼠的心输出量、心率、每博量、平均动脉压、动脉收缩压、左心室搏出功、左室和右室收缩末期压力和右心室的 dp/dt逐渐恢复到对照组水平;给予XGA后心肌细胞游离钙和心肌组织总钙与缺血组比较明显下降,而红细胞膜钙泵活性较缺血组明显增加,但心肌细胞游离钙和心肌组织总钙下降的幅度及红细胞膜钙泵活性增加的幅度并没有随XGA剂量的增加而增加;随XGA作用时间的延长,心肌细胞游离钙逐渐下降.结论:XGA能够明显改善缺血大鼠的心功能,减少心肌细胞内过多的钙积聚是其作用机制之一.     

左旋四氢巴马汀对单个豚鼠心室肌细胞钙电流的阻滞作用(英文)

目的:研究左旋四氢巴马汀(l-THP)对L-钙电流的作用。方法:用全细胞膜片箝记录心室肌细胞的L-钙电流。结果:l-THP 1-100μmol·L~(-1)将I_(Ca~(2 )-max)从(999±93)PA分别减少到(700±111)pA(582±66)pA和(420±112)pA(n=6,P<0.01)。l-THP对钙通道有紧张性阻滞作用及使用依赖性。l-THP可将钙通道的恢复时间从(94±39)ms延长到(170±42)ms(n=6,P<0.01)。结论:l-THP对L-钙通道有阻滞作用。     

AMP579与腺苷对大鼠心室肌细胞Na~+/Ca~(2+)交换电流作用的比较(英文)

目的阐明AMP579与腺苷不同药理作用与临床效果的机制。方法采用全细胞膜片钳记录Na+/Ca2 +交换电流。结果AMP579对Na+/Ca2 +交换的外向和内向电流均呈浓度依赖性增强。灌流腺苷A1受体阻断剂PD116948 30μmol·L-1,A2受体阻断剂DMPX10μmol·L-1,蛋白激酶A特异阻断剂KT5720 0 .2μmol·L-1或蛋白激酶C特异阻断剂GF109203X0 .4μmol·L-1对AMP579 Na+/Ca2 +交换电流的激动作用均无影响,提示AMP579对Na+/Ca2 +交换电流具有直接的激动作用。结论AMP579对Na+/Ca2 +交换电流可能具有直接的激动作用。     

神经对大鼠骨骼肌小电导钙激活钾通道(SK3)表达的影响

目的小电导钙激活的钾通道(SK3)介导了动作电位后的后超极化电位的产生,在调节可兴奋细胞的膜电位中起关键作用。使去神经支配和肌强直营养不良患者骨骼肌SK3表达显著上调。本实验拟观察神经对骨骼肌SK3钾通道表达的调节作用。方法在Wistar大鼠,分别通过切断坐骨神经和局部注射河豚毒素(TTX)建立比目鱼肌去神经支配模型,和通过钳夹损伤比目鱼肌神经建立比目鱼肌去神经后神经再支配模型。在体给予去神经比目鱼肌频率为30Hz的电刺激(100脉冲/100 s)。实验结束后,免疫荧光法测定比目鱼肌中SK3钾通道的表达和定位;提取比目鱼肌组织总mRNA和蛋白,逆转录PCR和Western Blot分别检测SK3 mRNA和蛋白水平。结果切断坐骨神经能显著上调比目鱼肌SK3 mRNA和蛋白表达,且分别在术后第6 d和第9 d到达稳定。TTX诱导肌肉瘫痪也能显著上调比目鱼肌SK3 mRNA和蛋白表达。钳夹比目鱼肌神经所造成的暂时神经损伤能诱导SK3蛋白表达上调,而随着神经功能的恢复SK3蛋白表达也随之显著下调。在切断除坐骨神经术后6 d,在体给予电刺激6 d能显著下调比目鱼肌SK3的高表达;而且,在去除坐骨神经的同时给予电刺激则能阻止比目鱼肌SK3表达的上调。结论神经对骨骼肌SK3钾通道表达具有抑制作用,其作用与唤起肌肉活性密切相关。在体电刺激能抑制和防止去神经诱导的骨骼肌SK3蛋白表达上调,可能是改善神经损伤后或相关疾病所致的肌强直症状的有效手段之一。     

小檗胺对高钾、去甲肾上腺素及咖啡因引起大鼠心肌细胞内钙动员的拮抗作用(英文)

目的:研究小檗胺(Ber)对氯化钾、NE及咖啡因引起大鼠培养心肌细胞[Ca~(2 )]_i动员的影响,方法:Fluo 3-AM负载后,共聚焦法测定心肌细胞[Ca~(2 )]_i荧光强度的变化。结果:Ber对心肌细胞静息[Ca~(2 )]_i水平无影响,但可剂量依赖性地抑制KCl60mmol·L~(-1)及NE 30 μmol·L~(-1)引起的内钙动员(P<0.01),此作用与维拉帕米相似.Egtazic acid3 mmol·L~(-1)并不能增强Ber对NE引起的[Ca~(2 )]_i升高的抑制作用,无外钙时,咖啡因80-160μmol·L~(-1)的[Ca~(2 )]_i动员不受Ber的影响(P>0.05),结论:Ber与维拉帕米相似,对大鼠心肌细胞靠电压依赖性和受体操纵性钙通道而升高的胞[Ca~(2 )]_i有拮抗作用,并不影响[Ca~(2 )]_i释放。