丹参素对压力超负荷性心肌肥厚大鼠治疗机理的研究

目的建立压力超负荷性心肌肥厚大鼠模型并探讨丹参素防治左室肥厚的作用机制。方法采用腹主动脉部分缩窄术复制大鼠心肌肥厚模型，18只8周龄的Wistar大鼠随机分成对照组，模型组和丹参素（radix salviae miltiorrhizae，RAM）治疗组，测量大鼠尾动脉收缩压及心脏指数并检测大鼠心肌组织中超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、一氧化氮（nitrcoxide，NO）和血管紧张素-Ⅱ（Angiotensin-Ⅱ，Ang-Ⅱ）的含量。结果同对照组相比，模型组大鼠SBP、心脏指数、MDA和Ang-Ⅱ含量明显增高，而NO水平和SOD活性显著降低；同模型组相比，丹参素可以降低SBP、心脏指数、MDA和Ang-Ⅱ的含量并增强心肌组织SOD的活性和NO的生成。结论丹参能有效防治压力超负荷性大鼠心肌肥厚的发生，它的作用机制与丹参调整和改善心脏局部氧自由基代谢，增加NO的生成并抑制Ang-Ⅱ的生成有关。     

法舒地尔对压力超负荷诱导大鼠心肌肥厚的影响

目的 研究Rho激酶抑制剂法舒地尔(fasudil)对大鼠腹主动脉缩窄压力超负荷诱导的心肌肥厚的影响及机制.方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为5组:假手术组、压力超负荷模型组、法舒地尔低剂量组、法舒地尔高剂量组及阳性对照(卡托普利)组,每组10只.除假手术组外,其他4组大鼠结扎肾上方腹主动脉制备压力超负荷模型,4周后建立心肌肥厚模型并开始给药,疗程4周.给药结束后,检测各组血流动力学指标,心脏重量指数(HW/BW)及左心室重量指数(LVW/BW);取心肌组织,经不同染色方法,观察心肌病理改变并检测心肌细胞直径(MD)和心肌胶原百分比(CVF);RT-PCR法检测心肌组织中RhoA、Rho激酶mRNA的表达.结果 与假手术组比较,模型组的LVEDP明显增加,LVSP明显下降;HW/BW、LVW/BW明显增加;MD增大(P＜0.01),CVF明显增加(P＜0.05);RhoA、Rho激酶mRNA的表达明显上调(均P＜0.01).与模型组比较,经法舒地尔及阳性药物治疗后,上述指标均有不同程度的改善(均P＜0.05,P＜0.01).结论 Rho激酶抑制剂法舒地尔可以改善心功能,抑制心肌胶原的合成及心肌纤维化,改善压力超负荷所引起的心肌肥厚.     

运动预处理对压力超负荷诱导的大鼠病理性心肌肥厚的影响

目的：探究运动预处理（EP）对压力超负荷引起的大鼠病理性心肌肥厚和心力衰竭（心衰）的影响。
　　方法：雄性6周龄SPF级SD大鼠60只分为Sham组、主动脉缩窄（TAC）组和运动预处理+主动脉缩窄（EP+TAC）组,每组20只。分别在TAC术后4周和8周时行超声心功能评价、病理检查以及心衰标志物检测来探讨EP的作用。
　　结果：超声心动图和病理检测提示两个手术组的检测指标相比Sham组均有明显变化,而且两手术组间比较, EP+TAC组的各项指标均优于TAC组,特别是在术后8周时,左心室射血分数增加15%,心脏重量指数减少15.7%和左心室重量指数减少20%（P<0.05）,差异有统计学意义。从心衰标志物心钠肽和脑钠肽信使核糖核酸（mRNA）和蛋白表达来看,与Sham组比较,TAC组在两个时间点表达量均明显升高,EP+TAC组的变化在TAC术后4周时不明显,但在术后8周时升高明显。与TAC组相比,EP+TAC组的mRNA表达量在术后4周时分别下降47%和62%,术后8周时减少44.0%和28.1%（P<0.05）;蛋白表达量术后4周时下降42.3%和48.0%,术后8周时下降21.5%、38.3%（P<0.01）,在术后8周时两手术组心衰标志物表达量差异较术后4周时减小。
　　结论：EP能改善压力超负荷诱导大鼠病理性心肌肥厚,且在早期的保护作用明显,能够延缓心衰的进程,为进一步探究作用机制提供模型基础。     

卡维地洛减弱肥厚心肌能量代谢向胚胎型转换的分子机制

目的 :观察压力负荷性大鼠肥厚心肌能量代谢的转换模式及卡维地洛的作用 ,探讨卡维地洛减弱压力负荷性心肌能量代谢胚胎型转换的分子调控机制。方法 :用卡维地洛治疗腹主动脉缩窄术后 4周的雄性 Waster大鼠 ,治疗 12周后观察假手术组、腹主动脉缩窄组和卡维地洛干预组大鼠血流动力学参数、心室重构指标、血清和心肌游离脂肪酸的含量及肌型肉毒碱棕榈酰转移酶 I（ M-CPT-I）和中链脂酰辅酶 A脱氢酶 （ MCAD） m RNA的表达变化。结果 :术后 16周大鼠左室心肌明显肥厚 ,血清和心肌游离脂肪酸的含量增加 ,左室肥厚心肌 M-CPT-I和MCAD m RNA的表达下调。卡维地洛治疗 12周后能够明显改善上述变化。结论 :压力负荷性大鼠肥厚心肌能量代谢模式发生胚胎型转换 ;卡维地洛能够减少左室心肌脂肪酸氧化限速酶和关键酶的基因表达 ,减弱心肌胚胎型能量代谢的转换     

心复康丸对压力超负荷大鼠心肌肥厚的影响

目的观察心复康丸对压力超负荷性心肌肥厚大鼠超声心动指标及心肌肥厚程度的影响。方法 Wistar雄性大鼠采用腹主动脉缩窄的方法复制心肌肥厚和心室重构的模型。造模4周后,随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)、依那普利组(E组)、心复康丸低剂量组(L组)、心复康丸高剂量组(H组)。分别于术后8周、12周采用超声心动评价心功能,并观察心脏肥大指数变化。结果术后8周,M组大鼠出现压力超负荷介导的向心性肥厚,术后12周,M组大鼠心功能进入失代偿期,E组和H组大鼠上述病理性改变均能被抑制;此两组还具有降低心脏肥大指数的作用(P0.01)。结论心复康丸具有改善超声心动指标,延缓心肌肥厚的作用,并存在一定量效关系。     

心肌细胞核兰尼碱受体在大鼠压力超负荷心肌肥厚发生中的作用

目的：探讨大鼠心肌细胞核上兰尼碱受体（ryanodine receptor,RyR)在心肌肥厚发生中的作用和意义，以及蛋白激酶A（PKA），钙调素（CaM)，佛波酯（PMA）和核外[Ca^2 ]对其影响，方法：制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型，差速离心和密度梯度离心提纯心肌细胞核，3H放射配基受体分析心肌细胞核膜RyR的动力学特性。结果：腹主动脉缩窄术后4周大鼠心肌显著肥厚，伴有明显的血流动力学异常，其细胞核RyR的最大结合（Bmax)较对照组减少57．8％（P＜0．001），离解常数（Kd)较对照组降低54．4％（P＜0．05），PKA使对照组细胞核RyR与3H兰尼碱的结合增加20．6％（P＜0．05），而对心肌肥厚组无显著作用，Ca^2 /CaM不影响其结合，而CaM抑制剂和内源性激活蛋白激酶C（PKC）则抑制其结合（P＜0．05），在核外[Ca^2 ]为10^-8-10^-4mol/L范围时，细胞核RyR与3H兰尼碱的结合呈先升高后降低趋势，在核外[Ca^2 ]为10^-6mol/L时达最大结合，结论：心肌细胞核上受磷酸化调节的RyR，压力超负荷心肌肥厚发生时，该受体密度下调而亲和力增加。     

心肌肥厚机制的探讨

心肌肥厚是一种临床常见的心血管疾病的病理改变，本文从细胞生物学和分子生物学角度就心肌肥厚发生的机制作一综述。     

三联降压药物对压力超负荷性大鼠心肌肥厚的影响

目的 缬沙坦、氨氯地平、螺内酯联用对心肌肥厚大鼠进行干预,旨在比较对肥厚心肌的逆转效果.方法 30只SD大鼠随机分为5组,除假手术组外,模型不处理组、缬沙坦组、缬沙坦联合螺内酯组、缬沙坦联合氨氯地平与螺内酯组均通过部分结扎大鼠腹主动脉构建心肌肥厚模型,测血压.给药8周后检测室间隔舒张末期厚度（IVSTd）、左室后壁舒张末期厚度（LVPWTd）、左室舒张末期内径（LVDd）、左室收缩末期内径（LVDs）和射血分数（EF）.处死大鼠,计算心脏质量指数（HMI）、左室质量指数（LVMI）.结果 不处理组血压及各项检测指标均高于假手术组（P＜0.05）.各给药组血压及各项检测指标与不处理组相比有不同程度的下降（P＜0.05）,其中三药联用组效果最佳,各指标与单药及两药组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）,而血压及HMI、LVMI与假手术组相比差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 三种药物使用方式均能不同程度降低大鼠心肌肥厚模型血压（P＜0.05）,且对肥厚心肌有不同程度的逆转效果,其中缬沙坦、氨氯地平及螺内酯三药联用的效果最好.     

川芎嗪对压力超负荷大鼠心肌凋亡的干预作用

目的 :观察川芎嗪对压力超负荷大鼠心肌凋亡动态变化的影响。方法 :SD大鼠 ,缩窄腹主动脉建立压力超负荷模型 ;按缩窄与否随机分为手术组 （OG）、手术 +川芎嗪干预组 （OG+ TMP）和假手术组 （SOG）。采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端原位标记 （TUNEL ）法 ,检测心肌细胞凋亡指数 （CAI）。结果 :OG组与 OG+ TMP组各时间点的 CAI均高于 SOG组 （CAI为 0 ）。OG组与 OG+ TMP组相比较 ,OG+ TMP组的 CAI呈显著性降低趋势（多数 P<0 .0 5）。结论 :川芎嗪不能逆转压力超负荷大鼠的心肌凋亡 ,但有减缓心肌凋亡发生的趋势 ,具有心脏保护作用     

衰老大鼠心肌线粒体PT孔开放对线粒体呼吸功能的影响

目的研究衰老大鼠心肌线粒体通透性转换(PT)孔开放对线粒体呼吸功能的影响及机制。方法左心室插管检测大鼠心功能;透射电镜检测大鼠心肌组织线粒体形态学改变;线粒体肿胀法检测心肌线粒体PT孔开放程度;氧电极法检测大鼠线粒体呼吸速率;荧光法检测线粒体膜电位。结果同3月龄组大鼠相比,15和18月龄组大鼠线粒体出现空泡肿胀、线粒体内膜脊出现断裂;大鼠左室收缩压(LVSP)和左室压上升/下降最大速率(±dp/dtmax)降低(P0.01);线粒体PT孔开放幅度明显增强(P0.01),左室舒张末压(LVEDP)升高(P0.01);线粒体膜电位下降(P0.01);线粒体呼吸速率明显降低(P0.01)。线粒体PT孔开放抑制了线粒体呼吸功能,降低了线粒体膜电位(P0.01),但是抑制线粒体呼吸功能对线粒体PT孔开放和线粒体膜电位无影响(P0.05)。结论衰老大鼠线粒体PT孔开放可能通过降低线粒体膜电位抑制线粒体呼吸功能。     

氯沙坦对压力超负荷小鼠心肌肥厚和高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的探讨氯沙坦对压力超负荷小鼠心肌肥厚和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响及机制。方法采用主动脉弓缩窄(TAC)方法建立压力超负荷小鼠心肌肥厚模型,并将小鼠随机分为假手术组、TAC+生理盐水组、TAC+氯沙坦组。术后2周行心脏超声检测并分析心肌组织学变化。同时,检测小鼠血清和心肌组织中HMGB1基因和蛋白表达水平,并检测心肌组织中细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、P38和核转录因子(NF-κB)的表达及活化水平。结果TAC小鼠术后2周出现心肌肥厚,且氯沙坦可有效改善由TAC导致的左心室室壁增厚(P<0.05)。同时,TAC不仅升高小鼠血清HMGB1水平(P<0.05),还增加心肌HMGB1 mRNA和蛋白表达(P<0.05),而这些变化都可以被氯沙坦部分抑制(P<0.05)。此外,TAC导致心肌组织中p-ERK1/2、p-P38、p-NF-κB水平明显升高(P<0.05),且同样可以被氯沙坦部分抑制(P<0.05)。结论氯沙坦在改善压力超负荷所致心肌肥厚时伴随HMGB1表达减少,该作用可能与其阻断丝裂原活化蛋白激酶家族(MAPKs)及NF-κB信号通路有关。     

TRPM7抑制剂对压力超负荷大鼠心肌肥厚的影响

目的研究瞬时受体电位通道M7(Transient receptor potential melastatin 7 channels,TRPM7)抑制剂对压力超负荷所致心肌肥厚及炎症反应的影响。方法雄性SD大鼠20只,随机分为三组:假手术组(n=6)、主动脉缩窄组(TAC组)(n=7)、TAC+2-Aminoethoxydiphenyl Borate(2-APB)组(TRPM7抑制剂组)(n=7)。通过在右侧无名动脉和左侧颈总动脉之间缩窄胸主动脉而诱导大鼠心肌肥厚模型。抑制剂组造模前一天开始给药,腹腔注射,每3天一次,2.5mg/kg。造模2周后取各组大鼠左心室,将心肌样本切片,苏木素-伊红染色观察心肌形态学改变;Masson染色检测心肌组织胶原沉积,免疫荧光检测TRPM7、巨噬细胞标记分子CD68和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达。结果 TAC组与假手术组相比,心肌细胞直径增大,胶原沉积增多,TRPM7、CD68、MCP-1表达均增加;TRPM7抑制剂处理后,上述情况均有改善。结论 TRPM7的表达在压力超负荷诱导的心肌肥厚模型中显著增加,抑制TRPM7改善心肌肥厚,减少心肌组织胶原沉积及巨噬细胞浸润。     

法舒地尔对压力超负荷大鼠心肌肝细胞生长因子表达的影响

目的:观察法舒地尔对压力超负荷大鼠心肌肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,探讨法舒地尔防治心肌纤维化的作用机制。方法:采用腹主动脉缩窄法建立压力超负荷心肌纤维化大鼠模型。假手术组(n=8)仅分离但不予结扎腹主动脉。术后4周末,将手术组存活的28只大鼠随机分为模型组(n=10)、法舒地尔高剂量组(FH组,n=9)和法舒地尔低剂量组(FL组,n=9)。药物干预4周后,计算大鼠心脏质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI)。观察心肌病理学改变,测量胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原容积分数(PCVF)。免疫组织化学法分析心肌α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶蛋白亚基1(p-MYPT1)、HGF和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果:FH和FL组较模型组HMI、LVMI、CVF、PCVF及α-SMA、p-MYPT1、TGF-β1的平均光密度值明显降低,HGF的平均光密度值明显升高(P均0.05),且FH组与FL组相比作用更明显。结论:法舒地尔改善压力超负荷大鼠心肌纤维化的作用可能与促进HGF的表达有关。     

增龄对大鼠心肌线粒体DNA氧化损伤的影响

目的　探讨增龄对大鼠心肌线粒体 DNA(mt DNA)缺失、线粒体呼吸链酶复合体及 ATP合成的影响。方法　 Wistar雄性大鼠分为 3组 :幼年组 (1月龄 )、青年组 (6月龄 )各 1 2只和老年组 (2 4月龄 ) 1 0只。心肌线粒体 DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体及腺苷三磷酸 (ATP)合成分别用聚合酶链反应 (PCR)、酶动力学和生物发光技术进行测定。结果　 3组大鼠均有不同程度 mt DNA缺失。老年组 mt DNA缺失 (2 .0 9± 1 .62 )较幼年组 mt DNA缺失 (0 .77± 1 .1 6)明显增高 (P<0 .0 5) ;较青年组 mt DNA缺失 (1 .54± 1 .1 7)也有升高的趋势 (P>0 .0 5)。老年组心线粒体呼吸链复合酶 活力 (2 347.2 1± 62 3.33)均较青年组 (3 859.1 2± 70 3.53)、幼年组 (4776.90± 548.63)明显降低 (P<0 .0 1 )。老年组心线粒体 ATP合成量 (1 96.95± 33.2 6)较青年组 (337.53± 62 .1 8)明显降低 (P<0 .0 1 )。心线粒体呼吸链复合酶 活力 3组间无明显性差异 (P>0 .0 5)。结论　大鼠线粒体 DNA氧化损伤与衰老有一定的相关性。     

线粒体功能障碍与心肌肥厚的病理发生机制

【摘要】心肌肥厚是心脏对本身超载做出的适应性反应,适度的肥厚能保持心脏功效,但持久的肥厚终究会致使心力衰竭,探究心肌肥厚的发病机制对防止恶化为心力衰竭有重要意义。线粒体是有氧呼吸的主要场所,不仅提供细胞生存所必需的能量,还介导细胞分化、信息传递和细胞凋亡等,线粒体出现任何改变都会影响细胞的存活。由于心肌细胞线粒体密度高,且心肌收缩完全依赖于线粒体氧化磷酸化产生的ATP,因此心脏组织的病理改变往往与线粒体代谢及功能密切相关。越来越多的研究证明线粒体形态和功能异常是心肌肥厚发生发展的重要机制,本文就线粒体功能障碍作为心肌肥厚的发病机制作一论述。     

压力超负荷性心肌肥厚大鼠心肌细胞内钙激活蛋白酶活性分布的研究

目的研究大鼠心肌肥厚时,钙激活蛋白酶(Calpain)在心肌细胞胞浆和细胞核的活性分布,并探讨细胞核钙摄取的改变,以进一步阐明心肌肥厚的发生机制.方法将100只健康雄性Wistar大鼠(150～200g)随机分为对照组(n＝50)和腹主动脉缩窄组(n＝50),制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型、差速离心和密度梯度离心提纯心肌细胞核,荧光法测酶活性,以45Ca2+测定细胞核摄取能力.结果与对照组相比,腹主动脉缩窄组大鼠左心室重量指数增加,伴有明显的血流动力学异常,有非常显著性差异(P＜0.01);其心肌细胞核Calpain活性亦增加40.78%,有显著性意义(P＜0.05);细胞浆Calpain活性下降21.71%,有非常显著性意义(P＜0.05).对照组心肌Calpain在细胞浆的活性显著高于在细胞核的活性,有非常显著性意义(P＜0.01),而腹主动脉缩窄组心肌Calpain在细胞核的活性与在细胞浆的活性无显著差异;细胞核45Ca2+摄入量也显著增加(较对照组高28%～97%,P＜0.01).结论肥厚心肌Calpain由细胞浆向细胞核转位、细胞核内Calpain活性增加,细胞核钙摄取能力增强,提示压力超负荷时Ca2+与Calpain调节的细胞核反应水平加强,可能在介导心肌肥厚的细胞核功能调控中起重要作用.     

压力超负荷时心肌闰盘的改变

目的 研究压力超负荷时心肌闰盘的变化。方法 采用大鼠腹主动脉缩窄模型,在透射电镜下观察心肌闰盘的超微结构变化;免疫组化观察钙粘素（ｐａｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ）,连续蛋白４３（ｃｏｎｎｅｘｉｎ４３,Ｃｘ４３）,桥粒蛋白（ｄｅｓｍｏｐｌａｋｉｎ）的表达。结果 术后１０周手术组心肌闰盘的粘着膜、桥粒、间隙连接结构模糊,连接间隙增宽;Ｐａｎ－ｃａｄｈｅｒｉｎ,Ｃｘ４３,ｄｅｓｍｏｐｌａｋｉｎ在心肌细胞表面呈     

在超负荷诱导的心脏疾病中心肌细胞自噬

由各种原因引起的心室压力超负荷是导致心力衰竭的始动因素,如高血压或心肌梗死后,导致心肌能量代谢和心肌纤维蛋白组成的改变,进而心室扩张、泵功能降低最终发生心力衰竭。研究表明,在某些病理状态下,自噬活动在心肌病中被激活。超负荷的压力使细胞自噬活动增加,会使疾病进一步恶化。随着对自噬分子机制的深入研究,自噬活动对于心室重塑及其在心脏疾病中的潜在作用逐渐被认识。     

卡维地洛对心力衰竭病人左心室功能的影响

目的 :探讨卡维地洛对心力衰竭病人左心室功能的影响。方法 :77例心力衰竭病人随机分为两组 ,对照组 3 7例 ,应用洋地黄、利尿剂及ACEI常规治疗。治疗组 40例 ,在上述基础上加用卡维地洛。结果 :治疗组总有效率为90 .0 % ,对照组为 67.6% ,两组比较具有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,两组治疗前后左心室收缩及舒张功能比较有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :卡维地洛能明显改善左心室收缩及舒张功能 ,治疗心力衰竭疗效肯定。