甲橙比色法测定附子、附子须根及4种附片的总生物碱含量

<正> 测定乌头类生物碱含量,已报道有中和法、紫外分光光度法、非水滴定法、比色法和高压液相色谱法等,但这些方法在基层单位工作中不十分理想。本文根据离子对萃     

草乌、川乌及附子中生物碱类成分的UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS/MS对比分析

利用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS/MS液质联用技术对草乌、川乌及附子中的生物碱类成分进行系统分析,并对比分析三者所含生物碱类成分的差异。利用固相萃取柱对样品进行预处理后,采用0.1%氨水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,在ESI正离子模式下建立3种药材中生物碱类成分的LC-MS表征方法,采集对照品与样品的高分辨质谱数据。结合对照品裂解行为、保留时间、精确相对分子质量等信息以及相关参考文献,最终从草乌、川乌及附子中鉴定得到155种成分,其中草乌中有130种,川乌中有127种,附子中有92种。结果表明,草乌、川乌及附子中以单酯型生物碱与醇胺型生物碱为主,且草乌与川乌的生物碱种类更为相似。该文可为阐明3种乌头属中药的药理作用和临床应用差异研究提供借鉴。     

不同产地附子炮制品对急性心衰大鼠心功能指标作用的比较研究

目的：研究不同产地四川江油附子、四川凉山附子、云南禄劝附子、陕西汉中附子对急性心衰大鼠心功能指标的影响及其作用机制。方法：用戊巴比妥钠建立大鼠急性心衰模型,各组均以给药前各项指标对照,16道生理记录仪同步记录左室内压（LVSP）,左室内压最大上升速率（+dp/dt_max）,左室内压最大下降速率（-dp/dt_min）,动态观察不同产地附子醇提物（5 g?kg^-1）对急性心衰大鼠心功能指标及血浆中精氨酸加压素（AVP）、内皮素-1（ET-1）、心钠素（ANP）、血管紧张素（AⅡ）水平变化及脑钠素（BNP）基因合成与表达的影响。结果：不同产地附子均能升高急性心衰大鼠左室内压,提高左心室+dp/dt_max和-dp/dt_min;并能降低心衰大鼠血浆中AVP水平含量、抑制心室肌内BNP基因的合成和表达,与抑制缩血管因子ET-1、AⅡ水平及ANP基因表达无关。结论：不同产地附子炮制品均能改善大鼠心功能指标,其作用机制与左室功能抑制,心室肌收缩有关;对血管收缩导致的心脏后负荷增加有抑制作用,对前负荷增加无影响。并以道地产区江油附子作用最为明显,表明以功效为核心的中药质量评价模式来评价药材品质、控制药材质量的可行性。     

酸性染料比色法测定川乌、草乌中总乌头生物碱的含量

目的：摸索快速简便的毒性中药川乌、草乌的含量测定。方法：用酸性染料比色法测定川乌、草乌中的总乌头生物碱含量。结果：在浓度１．８５～１８．５２μｇ／ｍｌ范围内线性关系良好，加样回收率为１０１．２３％，ＲＳＤ为１．４２％。结论：建立的方法可用于川乌、草乌的定量测定。     

制川乌不同饮片质量比较研究

目的比较制川乌有无“白心”对饮片质量的影响。方法按药典法分别测定有“白心”和无“白心”饮片中的酯型生物碱和总生物碱含量。结果浸泡7 d水煮6 h后除去“白心”部分酯型生物碱含量最低,“白心”部分含量较高;加热水煮时间越长总生物碱含量越低。结论有无“白心”对制川乌饮片质量有一定影响,但不能作为唯一的判断依据。     

附子、含羞草、河豚中毒的解救

附子 学名：Aconitum carmichaeli Debx．（乌头） 别名：盐附子、黑顺片、白附片、淡附片、天雄。 基原：为毛茛科乌头属植物乌头的肥大子根。 性味：大热，辛、甘，有毒；生附子有极毒。     

川乌和附子的毒性与热性的细胞实验研究

目的:研究川乌和附子的毒性与热性之间的关系,探讨本实验室前期建立的评价寒热药性的方法是否适用于有毒中药。方法:用噻唑蓝(MTT)比色法考察川乌和附子对Hela细胞体外增殖的影响,倒置显微镜观察对细胞形态特征的影响。结果:川乌、附子在所选浓度范围(5~800μg/m L)内对细胞增殖的影响皆表现为抑制。形态学观察表明川乌和附子在≤10μg/m L时使细胞密度增加,促进细胞的生长增殖。而当浓度≥10μg/m L时使细胞密度减小,死亡细胞增加,而细胞形态变化不大。台盼蓝染色表明川乌和附子在低浓度下没有细胞毒作用,而在高浓度下对这试药细胞具有细胞毒作用。结论:研究结果表明川乌和附子性热,在低浓度下表现为热性,而在高浓度下表现为细胞毒作用,可以杀死细胞。本实验室前期建立的评价寒热药性的方法适用于有毒中药。     

从化学、药理学和炮制的角度探讨附子、川乌和草乌的传统应用

毛茛科植物附子、川乌、草乌在化学成分上既具有相似性又存在着差异性,因而其药理作用和传统应用上也表现出一定的相似性和区别.本文从化学、药理学和炮制的角度去理解其传统用药方法之差异,对三种药物更科学、更合理的使用,具有重要的意义.     

生川乌片炮制过程中生物碱含量随炮制时间变化的规律研究

目的:探寻生川乌片制备制川乌的适宜炮制方法和加热时间。方法:按照药典方法,以生川乌片制备制川乌,采用HPLC法,检测蒸制1~8 h和煮制1~6 h(间隔为1 h)的制川乌中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰乌头原碱等6种生物碱的含量,分析制川乌片中单、双酯型生物碱的总量随炮制时间的变化规律。结果:生川乌片制备的制川乌双酯型生物碱含量均在炮制1 h达到《中华人民共和国药典》规定的不超过0.040%的限量要求,且内无白心,但此时麻舌感强烈,随炮制时间延长,麻舌感逐渐减弱。蒸2~8 h制品单酯型生物碱含量符合《中华人民共和国药典》的0.070%~0.15%的含量要求,在蒸5 h达最高,较生品升高约142%;煮制品均低于《中华人民共和国药典》规定的含量范围。结论:以制川乌传统质量和生物碱含量要求为指标,生川乌片制备制川乌选用蒸法炮制4~6 h为宜。     

附子不同炮制品的指纹图谱研究

目的研究附子3种主要炮制品的高效液相指纹图谱,为建立附子的行业质量标准提供依据。方法利用高效液相色谱(HPLC)方法,色谱条件为:Alltimate C18分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:35℃;流动相40 mmol.L-1醋酸铵(氨水调pH=10.00)-乙腈梯度洗脱;流速1.0 ml.min-1;检测波长为240 nm。对附子3种炮制品进行指纹图谱研究,采用指纹图谱相似度软件和聚类分析对指纹图谱进行分析。结果附子3种炮制品之间的指纹图谱差异较大。结论该方法的精密度、重复性和稳定性良好,可为附子炮制品的质量控制提供依据。     

毒-效双组分控制有毒中药附子临床单煎工艺研究

目的 研究加水量、煎煮时间、煎煮次数、浓缩条件等水煎工艺控制因素对附子毒效组分含量相关性的影响.方法 以生附子和常用炮制品为对照,采用离子对分光光度度法与异羟肟酸铁法分别测定总生物碱(TA)、酯型生物碱(EA)组分含量,并以毒效因子[W= (TA- EA)/ TA]为综合评价指标,研究工艺因素对毒效因子的影响.结果 不同炮制品和生附子药材毒效因子差别较大;水煎过程中,煎煮条件对生品影响较大,黑顺片的毒效因子基本保持稳定为97%左右,白顺片为81%,煎煮时间和次数是主要影响因素.结论 炮制品水煎过程毒效因子的相对稳定可能是附子汤剂发挥药效、安全使用的先决条件,毒效组分不同比例可能是附子不同炮制品发挥不同药效的物质基础.     

一阶导数紫外分光光度法测定制川乌、制草乌、附子中生物碱含量

用一阶导数光谱法测定了制川乌、制草乌、附子中生物碱含量。测定结果与药典法比较，无显著差异。本法更简便、灵敏。     

不同产地附子炮制品抗休克、抗缓慢型心律失常作用的品质评价研究

目的:研究四川江油附子、四川凉山附子、云南禄劝附子、陕西汉中附子对小鼠抗休克及大鼠缓慢型心律失常的作用,探讨附子道地性的中药质量生物学评价方法。方法:按2010版《中国药典》一部附子项下含量测定方法检测附子黑顺片及提取物中总生物碱和酯型生物碱含量;以内毒素致小鼠死亡的保护作用观察不同产地附子水提物(7.5g/kg)的抗休克作用;用维拉帕米注射液造成大鼠心动过缓模型,观察不同产地附子醇提物(5g/kg)对该心律失常动物HR、P-R间期、P波、QRS波等指标变化。结果:不同产地附子水提物(7.5g/kg)均能明显减少内毒素攻击所致小鼠死亡数,其中以四川江油附子作用最为明显;四川江油附子醇提物(5g/kg)对维拉帕米注射液所致大鼠HR降低、P-R间期延长、P波幅度降低、QRS波宽大畸形有全面的改善作用,心电图接近正常对照组;云南禄劝附子醇提物(5g/kg)有提高HR、恢复P-R间期、改善QRS波异常的作用;四川凉山附子与陕西汉中附子醇提物(5g/kg)有提高HR、恢复P-R间期的作用,但对P波、QRS波的异常作用不明显。结论:不同产地附子炮制品中,传统附子道地产区四川江油附子黑顺片对维拉帕米注射液诱发的大鼠缓慢型心律失常作用,对内毒素致小鼠死亡的保护作用最强,表明以功效为核心的中药质量评价模式来评价药材品质、控制药材质量的可行性。     

附子的化学成分研究

目的:研究附子的化学成分.方法:通过反复硅胶柱色谱和重结晶的方法分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定结构.结果:分离得到9个化合物,分别为美沙乌头碱(1)、海帕乌头碱(2)、宋果灵(3)、去氢松果灵(4)、一枝蒿乙素(5)、penduline(6)、β-谷甾醇(7)、胡萝卜苷(8)、单棕榈酸甘油酯(9).结论:化合物5,6,8,9为首次从该植物中分离得到.     

不同炮制工艺对附子生物碱类成分的影响

目的研究不同炮制工艺对附子生物碱类成分的影响。方法采用酸性染料比色法及高效液相色谱法对附子不同炮制品的生物碱类成分进行分析。结果江油产的生附片质量最优;去皮可以提高附子中有效成分的相对含有量;与传统白附片有胆巴的炮制工艺相比,采用无胆巴炮制工艺得到的白附片,总生物碱、单酯型生物碱、双酯型生物碱含有量均较高,保存药效的同时,去毒能力不足;熟附片的蒸制时间较长,生物碱类成分的含有量低于白附片,可能蒸制时间较长会造成生物碱类成分流失;经对市售的有胆附片与无胆附片检测分析,无胆蒸制或炒制附片去毒存性效果较好,且工艺简单、不易引入无机杂质。结论不同炮制工艺均能不同程度的降低附子的毒性成分双酯型生物碱含有量,增加有效成分单酯型生物碱含有量,达到增效减毒的目的。     

附子、乌头与食疗的关系探讨

食疗之风盛行与中医药食同源有关。一般认为食疗药品应是药性平和之药,或辛香调味之品,或菜蔬类,很少有人会相信有大毒的附子、乌头会用于食疗,但民间确有将附子、乌头,甚至草乌、川乌用于食疗的,只是鲜见于杂志书籍,故对这些食疗方法作一介绍与探讨。     

制川乌白芍合煎微波提取工艺研究

目的优选微波法提取制川乌配伍白芍中有效成分乌头总生物碱和芍药苷的工艺条件。方法采用单因素结合正交设计法,优选出65%乙醇为提取溶媒,进一步考察了微波功率、微波辐射时间、乙醇体积分数及料液比4个因素,用紫外可见分光光度法测定乌头总生物碱,采用HPLC法测定芍药苷,并以其量及浸膏得率作为评价指标。结果以65%乙醇为提取溶媒,在微波功率800 W,微波辐射时间为0.5 h,固液比为1∶10时乌头总生物碱和芍药苷的提取量最高且浸膏得率最低。结论微波提取时间短,有效成分提取率高,此方法是一种有发展潜力的工艺。     

盐附子去盐方法及其工艺研究

目的:研究盐附子去盐方法和工艺。方法:以附子总生物碱、多糖及析盐量为指标,并与原去盐工艺相比较,优化盐附子去盐工艺。结果:新方法去盐后附片总生物碱、多糖的含量与原工艺无明显差异,且去盐时间由原来的7天(168 h)缩短至1.5 h。结论:新的去盐方法显著缩短去盐时间,节省用水量,并保证去盐产品的质量;本实验研究对盐附子去盐方法及其工艺进行了填补,另外,本实验采用总生物碱含量、多糖含量及析盐量多指标优选附子去盐方法,为附子其他炮制研究提供思路和方法,为附子炮制品质量评价提供依据。     

温热药(附子、干姜、肉桂)复方及小复方对交感神经、肾上腺、TSH、LH等的影响

用附子、干姜、肉桂复方及小复方喂大鼠,研究其对交感神经系统,肾上腺皮质素,垂体TSH、LH合成及释放的影响以选择有效组方,简化热证动物模型用药。结果证明各复方均使心率略为加快,动情周期略有缩短,肾上腺皮质素合成增多,垂体TSH,LH的合成和释放均增多。其中附子和干姜组与大复方的作用一致,可用作虚热证动物模型的复方。     

温热药(附子、干姜、肉桂)复方及小复方对交感神经、肾上腺、TSH、LH等的影响

用附子、干姜、肉桂复方及小复方喂大鼠,研究其对交感神经系统,肾上腺皮质素,垂体TSH、LH合成及释放的影响以选择有效组方,简化热证动物模型用药。结果证明各复方均使心率略为加快,动情周期略有缩短,肾上腺皮质素合成增多,垂体TSH,LH的合成和释放均增多。其中附子和干姜组与大复方的作用一致,可用作虚热证动物模型的复方。