丹酚酸B对培养的新生大鼠海马神经元的影响

目的:本研究旨在观察丹酚酸B对体外培养新生大鼠海马神经元的影响,为丹酚酸B对中枢神经系统的作用提供实验依据。方法:体外培养新生大鼠海马神经元,神经元微管相关蛋白-2(MAP-2)免疫荧光染色对培养细胞进行鉴定,实验分为对照组和给药组(终浓度分别为5 mg/L和10 mg/L),荧光显微镜下观察细胞形态,MTT比色法检测丹酚酸B对海马神经细胞的活性,细胞核染色(DAPI)观察丹酚酸B对海马神经细胞增殖的影响。结果:免疫荧光染色显示细胞呈MAP-2阳性,丹酚酸B作用7 d后,能明显促进海马神经细胞的存活与增殖,且10 mg/L的丹酚酸B作用更明显。结论:丹酚酸B能明显促进海马神经细胞的存活与增殖,提示其具有改善脑功能的重要作用。     

补阳还五汤通过抑制p38有丝分裂原激活蛋白激酶通路改善大鼠缺血性脑损伤

目的:探讨补阳还五汤针剂对缺血性脑卒中的治疗作用及机制.方法:大鼠分为假手术组,模型组,补阳还五汤高、低剂量组.参照Zea-Longa线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型.术后H-E染色观察海马区神经细胞形态变化,免疫组织化学法和免疫印迹法检测海马区磷酸化有丝分裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)和环氧化酶-2(COX2)表达...     

丹酚酸B对脂多糖诱导许旺细胞损伤的保护作用机制

背景：丹酚酸B是中药丹参的有效单体成分,近年已被证实有保护神经、促进神经损伤恢复的作用,但其机制尚未清楚。 目的：探讨丹酚酸B对脊髓损伤大鼠许旺细胞的保护机制。 方法：实验分为正常组、模型组、10 μmol/L甲强龙组、丹酚酸B组(0.1,1,10,100 μmol/L)。除正常组外,其他3组建立脂多糖诱导建立许旺细胞损伤模型,后2组进行对应的药物干预。以此观察丹酚酸B对脊髓损伤大鼠许旺细胞生长曲线、增殖活性、β-catenin和核因子κB蛋白与基因的表达情况。 结果与结论：干预48,72,96 h,模型组细胞活性与正常组比较显著减低(P < 0.01),与模型组比较,干预72,96 h,丹酚酸B组(10 μmol/L)细胞活性较模型组显著升高(P < 0.05)。干预72 h时,与模型组比较,甲强龙组和丹酚酸B组许旺细胞核因子κB mRNA和蛋白表达显著降低(P < 0.01),丹酚酸B组β-catenin mRNA和蛋白表达显著升高(P < 0.05)。说明丹酚酸B能够改善脂多糖刺激的大鼠许旺细胞活性损伤;同时抑制脂多糖诱导的大鼠许旺细胞核因子κB基因和蛋白的表达,促进β-catenin基因和蛋白的表达,这可能是其许旺细胞保护作用机制之一。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

火绒草对2型糖尿病大鼠海马神经元Aβ_(1-42)蛋白表达和形态学的影响

目的:观察火绒草水提取物对2型糖尿病(T2DM)大鼠海马区Aβ1-42蛋白表达和形态学的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠30只,随机均分为对照组、T2DM组和火绒草组。血糖仪检测大鼠空腹血糖,免疫组化法检测海马CA1区,CA3区,DG区Aβ1-42蛋白的表达,尼氏染色检测海马神经元数量和形态学的变化。结果:T2DM组与对照组比较,空腹血糖明显升高(P0.01),海马CA1区,CA3区,DG区Aβ1-42蛋白表达较明显增多,海马区神经元数、细胞浆尼氏小体数量减少;火绒草组与T2DM组比较,空腹血糖明显降低(P0.01),海马区CA1区,CA3区,DG区Aβ1-42蛋白表达明显减少,海马区神经元损伤程度明显减轻,神经元、尼氏小体数量增多。结论:火绒草能降低T2DM大鼠血糖,减少海马区Aβ1-42蛋白表达,对T2DM大鼠神经元损伤有保护作用。     

2000 μW/cm2电磁辐射对大鼠海马NR2A蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨2000 μW/cm2 电磁辐射对大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位2A(NR2A)蛋白及其mRNA水平表达的影响,揭示电磁辐射对大鼠学习记忆功能的损伤机制.方法:实验分为空白对照组,假辐射组,1 h/d、2 h/d、3 h/d辐射组.将辐射组大鼠固定体位,头部接受功率密度为2000 μW/cm2 的近场辐射,连续辐射30 d.通过Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,采用免疫组化法和Westernblot法检测大鼠海马组织NR2A蛋白表达的变化,RT-PCR法检测大鼠海马组织NR2A mRNA表达的变化.结果:假辐射组大鼠各项指标与空白对照组相比均无统计学差异(P>0.05);而各辐射组大鼠寻找安全平台的逃避潜伏期较空白对照组明显延长(P<0.05);各辐射组大鼠海马神经元排列紊乱,NR2A阳性细胞比率显著下降,海马组织NR2A蛋白及其mRNA表达水平明显降低(P<0.05).结论:2000 μW/cm2 电磁辐射可导致大鼠学习记忆功能下降,其机制可能与大鼠海马组织NR2A蛋白及其mRNA的表达降低有关.     

低氧对大鼠海马神经元酪氨酸蛋白激酶Fyn表达的影响

目的:探讨低氧对大鼠酪氨酸蛋白激酶Fyn表达的影响.方法:大鼠随机分为正常对照组和低氧组,低氧组大鼠进行6周常压缺氧饲养.低氧结束后,采用免疫组织化学、RT-PCR方法,分别观察大鼠海马的Fyn蛋白以及mRNA水平的变化.结果:Fyn在两组大鼠海马CA3区均有表达,与对照组相比,Fyn在低氧组大鼠海马CA3区辐射层表达...     

孕酮对大鼠脑损伤后大脑皮质及海马CA1区环氧合酶-2和诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的: 观察孕酮对大鼠脑损伤后皮质及海马CA1区COX-2和iNOS表达的影响.方法: 雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑损伤组和孕酮治疗组,按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型.孕酮治疗组伤后1h、 6h腹腔注射孕酮16mg/kg.各组于伤后24h取材.用免疫组织化学法及免疫蛋白印迹法,观察大鼠皮质及海马CA1区COX-2、iNOS的免疫阳性细胞数和蛋白表达水平变化.结果: 与假手术组大鼠相比,脑损伤组大鼠皮质及海马CA1区COX-2、 iNOS阳性细胞数和蛋白表达水平较假手术组增加;孕酮治疗组与脑损伤组比较,大鼠皮质及海马CA1区COX-2、 iNOS阳性细胞数和蛋白表达水平减少,差异有统计学意义.结论: 孕酮可能通过降低COX-2、 iNOS的表达发挥脑损伤保护作用.     

银杏内酯B对新生大鼠缺血性损伤海马MMP-2及MMP-9表达的影响

目的:观察银杏内酯B(GB)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马内基质金属蛋白酶MMP-2及MMP-9的影响,探讨GB的脑保护作用机制。方法:192只新生7天SD大鼠随机分为正常组(N组)、假手术组(S组)、HIBD模型生理盐水组(H组)和银杏内酯B治疗组(G组)。选择模型成功后24 h、4 d、10 d三个时间点,应用免疫组化、RT-PCR法检测各组大鼠海马CA1区MMP-2、MMP-9蛋白及mRNA的表达变化。结果:HIBD后海马MMP-2蛋白表达明显升高,4 d达高峰,10 d后开始下降;同时MMP-9蛋白表达也明显升高,但表达高峰在HIBD后24 h,4 d后开始下降。mRNA的表达趋势与蛋白表达相一致。N组可见极少量阳性表达细胞,S组中可见少量阳性表达细胞,G组的大鼠海马CA1区MMP-2、MMP-9的表达也明显升高,但是小于H组,G组的MMP-2、MMP-9的表达与H组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:HIBD可引起MMP-2、MMP-9表达异常,并且呈动态变化;GB对脑保护作用机制之一可能与其抑制MMP-2、MMP-9高表达有关。     

白花丹参根制剂对AD大鼠学习记忆和海马CA1区神经元凋亡的影响

目的:探讨白花丹参根制剂对Aβ1-40诱导的AD模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元凋亡的影响。方法:采用双侧海马微量注射凝聚状态Aβ1-40诱导AD大鼠模型。测定白花丹参根制剂干预前后AD模型大鼠学习记忆能力,海马CA1区Ach含量、Ch AT和Ach E活性,海马神经元凋亡率以及海马区Bax和Bcl-2蛋白表达的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越站台次数和第三象限游泳时间减少,大鼠海马CA1区神经内Ach含量减少,而Ch AT和Ach E活性升高,同时海马CA1区神经元凋亡率增加,Bax蛋白表达水平上调,Bcl-2蛋白表达水平下调,Bcl-2/Bax比值降低。与模型组比较,治疗组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越站台次数明显和第三象限活动时间增加,大鼠海马CA1区神经内Ach含量升高,而Ch AT和Ach E活性降低,同时海马CA1区神经元凋亡率降低,Bax蛋白表达水平下调,Bcl-2蛋白表达水平上调,Bcl-2/Bax比值升高。结论:白花丹参根制剂可有效提高AD模型大鼠学习记忆能力,其机制可能与改善胆碱能系统的功能、上调Bcl-2和下调Bax蛋白表达水平有关。     

亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆及海马CA3区Fos表达的影响

目的:通过研究铝对大鼠学习记忆及e-fos基因表达的影响,探究铝损伤记忆功能的机制。方法:将Wistar大鼠按体重随机分为对照组(control)、低剂量染毒组(AI-L)、中剂量染毒组(AI-M)和高剂量染赤组(AI-H),染毒时限为大鼠出生当天(1 d)至90 d。染毒结束后,通过Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,石墨炉原子吸收光谱法检测大鼠海马铝含量,HE染色法观察海马CA3区神经细胞形态、RT-PCR检测大鼠海马c-fos基因表达,免疫组化法检测大鼠海马Fos蛋白表达。结果:随着铝暴露剂量增加,大鼠空间记忆能力降低,海马CA3区神经细胞形态受损加重,海马铝含量增加,海马CA3区c-fosmRNA表达降低,海马CA3区Fos蛋白含量降低。结论:亚慢性铝暴露损伤大鼠空间记忆功能,其机制可能与海马CA3区c-fos mRNA表达和蛋白含量降低有关。     

海马CA1区5-HT_(1A)受体调控PTSD大鼠空间记忆的作用

目的:观察创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马长时程增强(LTP)的变化以及5-羟色胺1A受体(5-HT_(1A)受体)和突触后致密物蛋白95(PSD-95)的表达,探讨5-HT_(1A)受体调控PTSD大鼠空间记忆的机制。方法:健康成年SD大鼠36只,随机分为正常对照组和模型组,每组18只。模型组采用连续单一刺激构建PTSD大鼠模型。Morris水迷宫实验检测2组大鼠的学习和记忆能力,电生理实验检测强直性高频刺激对海马LTP的影响Western blot法和免疫荧光实验检测海马5-HT_(1A)受体和PSD-95蛋白的表达。结果:Morris水迷宫实验结果显示在各实验日模型组大鼠逃避平台的潜伏期较对照组显著延长(P0.05)。电生理实验结果显示在强直性高频刺激后,2组大鼠海马诱发电位的幅值明显升高,模型组诱发电位的幅值显著低于对照组(P0.01)。Westem blot实验和免疫荧光实验结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马CA1区5-HT_(1A)受体的表达显著增加(P0.05),但PSD-95的表达明显减少(P0.05)。结论:PTSD大鼠空间记忆能力减退,可能与海马CA1区5-HT_(1A)受体的表达增加和PSD-95的表达减少有关。     

慢性低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响

目的:探讨低压低氧暴露对小鼠海马CA1区神经元树突棘形态及细丝蛋白A表达的影响。方法:6～8周龄C57BL/6雄性小鼠分为常氧暴露7 d组、常氧暴露14 d组、低压低氧暴露7 d组和低压低氧暴露14 d组。低压低氧暴露组置于低压舱模拟6 000 m海拔高原进行低压低氧暴露。Golgi染色法观察小鼠海马CA1区树突的分支数,以及基树突棘和顶树突棘长度和密度的变化; Western blot方法检测小鼠海马细丝蛋白A表达水平的变化;免疫组织荧光染色法检测小鼠海马CA1区细丝蛋白A的表达及分布变化。结果:与常氧暴露组相比,低压低氧暴露后,小鼠海马CA1区树突分支数的差异无统计学显著性,但基树突棘和顶树突棘的长度显著增加(P 0. 05),密度显著降低(P 0. 01)。低压低氧暴露后,小鼠海马细丝蛋白A表达水平低于常氧暴露组(P 0. 01或P0. 05)。免疫组织荧光染色显示细丝蛋白A在小鼠海马CA1区表达,低压低氧暴露后,海马CA1区细丝蛋白A表达水平降低(P 0. 05)。结论:慢性低压低氧暴露可影响小鼠海马CA1区细丝蛋白A表达,并导致海马CA1区神经元树突棘形态发生改变。     

高压氧降低缺氧缺血性脑损伤大鼠脑组织内caspase-3表达

目的 探讨高压氧(HB0)对缺氧缺血新生大鼠神经细胞凋亡及easpase-3表达的影响.方法 建立缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠模型,将其分为HIBD组及HBO处理组,并设立假手术组(n=24).观察3组大鼠不同时间脑组织病理学改变,同时用免疫组化的方法检测3组大鼠脑组织内ca8pase-3蛋白表达的动态变化.结果 HIBD组18、24、48和96 h时间点海马及皮层区ca8pase-3蛋白的表达均明显高于假手术组(P相似文献   

丹酚酸B后给药对脂多糖引起的大鼠肠系膜细静脉微血管通透性变化的作用及机制

<正>目的:探讨丹酚酸B后给药对脂多糖(LPS)引起的大鼠肠系膜细静脉血管通透性变化的改善作用及其机制。方法:实验取雄性SD大鼠,分为对照组、丹酚酸B本底组、LPS模型组和LPS+丹酚酸B后给药组。     

暴露丙烯酰胺对Wistar大鼠学习记忆及海马CA1区c-Fos表达的影响

目的:探讨丙烯酰胺(ACR)暴露对Wistar大鼠学习记忆能力、大脑海马CA1区c-Fos蛋白和c-fos mRNA表达的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠40只,体重180～220 g,随机分为对照组、腹腔注射ACR 9 mg/kg组、18 mg/kg组和36 mg/kg组,每组各8只,对照组以同样方式腹腔注射等量生理盐水。1周后用Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆功能,HE染色观察海马CA1区神经细胞形态,用免疫组化法检测海马CA1区c-Fos蛋白表达,RT-PCR法检测c-fos基因表达。结果:ACR组大鼠表现为海马CA1区神经纤维稀疏、神经细胞减少,可见空泡样变性等。与对照组比较,ACR作用后大鼠学习记忆功能明显降低(P 0. 05),且具有剂量依赖性(r=0. 820～0. 891,P均0. 05)。ACR中、高剂量组海马区c-Fos蛋白和c-fos mRNA表达水平明显低于对照组(P 0. 01),同时随ACR剂量增加,c-Fos蛋白和c-fos mRNA表达水平降低,与ACR剂量明显相关(r=-0. 824,0. 857,P均0. 05)。结论:模型大鼠暴露于ACR可以损害学习记忆功能,同时有海马区c-Fos蛋白和c-fos mRNA表达水平下降,其机制可能是ACR造成大鼠海马区神经细胞功能减弱所致。     

白藜芦醇对脑缺血大鼠海马β淀粉样蛋白和Tau蛋白的影响

目的:观察白藜芦醇对实验性脑缺血大鼠海马神经元β淀粉样蛋白(Aβ42)和磷酸化Tau蛋白(pTau)表达影响及与学习记忆功能障碍的关系。方法:选取Wistar雄性成年大鼠96只,按随机数字表法分为假手术组、脑缺血组、白藜芦醇组。采用线拴法建立左侧大脑中动脉脑缺血大鼠模型。采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力;干湿重法测定脑组织含水量;免疫组织化学法检测Aβ42和p-Tau在海马CA1区的分布情况;Western Blot法检测Aβ42、Tau,p-Tau在海马CA1区的蛋白表达量。结果:脑缺血组较假手术组相比脑组织含水量增加,逃避潜伏期延长,穿越平台次数及平台象限停留时间均减少,并且海马CA1区Aβ42和p-Tau蛋白的表达显著上调,差异均有统计学意义(P0.05)。白藜芦醇可显著减少脑组织含水量,改善学习和记忆功能障碍,下调海马CA1区Aβ42和p-Tau蛋白的表达,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:白藜芦醇可改善脑缺血大鼠脑水肿及学习记忆障碍,这种脑保护作用可能与下调海马CA1区Aβ42和p-Tau蛋白的表达相关。     

GAP-43和Sema3A蛋白在戊四氮点燃慢性癫痫大鼠海马的表达

目的:探讨神经生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP-43)和semaphorin3A(Sema3A)蛋白在慢性癫痫模型大鼠海马的表达。方法:将成年雄性SD大鼠41只随机分为正常对照组和癫痫组,通过腹腔注射戊四氮(40 mg/kg)诱导慢性癫痫模型,取大脑海马组织,应用免疫组织化学和蛋白免疫印迹分析(Western Blot)方法,观察GAP-43蛋白及Sema3A蛋白在大鼠海马各区的表达变化。结果:免疫组织化学结果显示:GAP-43免疫阳性颗粒主要位于阳性细胞的胞浆和细胞膜表面,胞浆和突起被染成深棕色,靠近轴突一侧的胞浆染色较深;Sema3A免疫阳性颗粒主要位于阳性细胞的胞浆中,分布比较均匀,胞浆被染为棕黄色,染色较浅。在海马的齿状回及CA3区,癫痫组大鼠GAP-43蛋白的表达高于对照组大鼠,而Sema3A蛋白的表达则低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);在海马的CA1区,癫痫组大鼠GAP-43和Sema3A蛋白的表达均显著高于对照组大鼠,差异具有统计学意义(P0.01)。Western Blot结果显示:在整个海马组织内GAP-43蛋白在癫痫组的表达为0.45±0.21,明显高于对照组(0.28±0.23),差异具有统计学意义(P0.05);Sema3A蛋白在癫痫组和对照组的表达分别为1.18±0.55和1.55±1.96,虽有差异,但并无统计学意义(P0.05)。结论:GAP-43蛋白在癫痫大鼠海马中表达升高,Sema3A在癫痫大鼠海马中具有区域性差异表达;这两种蛋白的表达变化可能参与了癫痫的发病机制。     

反式转录激活因子-X连锁凋亡抵制蛋白融合蛋白对阿尔茨海默病模型大鼠Caspase-3表达与活性的抑制

目的:探讨β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)海马内注射所致的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑内Caspase-3表达与活性变化及反式转录激活因子-X连锁凋亡抵制蛋白(TAT-XIAP)融合蛋白的干预作用.方法:SD大鼠随机分为盐水对照组、AD模型组及治疗组,采用双侧海马内注射Aβ25-35建立AD模型,造模后6周尾静脉注射TAT-XIAP融合蛋白,连续给药4周后处死动物,通过RT-PCR和免疫组织化学研究AD大鼠大脑皮质与海马Caspase-3 mRNA表达及蛋白的活性变化,TATXIAP融合蛋白对上述作用的干预.结果:AD模型组大鼠大脑皮质与海马Caspase-3 mRNA表达上调,模型组大脑皮质和海马Caspase-3表达分别是对照组的2.03倍和1.72倍;活化的Caspase-3位于细胞核,AD模型组大鼠大脑皮质与海马Caspase-3蛋白活性增强,模型组大脑皮质和海马Caspase-3活性分别是对照组的1.62倍和1.64倍.应用TAT-XIAP融合蛋白后,大鼠皮质与海马Caspase-3表达与活性均降低;治疗组与模型组比较大脑皮质和海马Caspase-3表达分别下降了9％和44％,Caspase-3活性分别下降了36％和28％.结论:本实验结果表明Aβ25-35可上调Caspase-3 mRNA表达,活化Caspase-3;TAT-XIAP融合蛋白可抑制AD模型大鼠Caspase-3 mRNA的表达和活性.     

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠海马补体3表达的影响

目的:观察β-淀粉样蛋白(Aβ)对大鼠海马补体3(C3)表达的变化及雷公藤内酯醇对其的影响.方法:SD雄性大鼠随机等分成对照组、模型组、用药组.在大鼠双侧海马定向注射凝聚态Aβ1-40作为模型组,注射等量生理盐水设为对照组,大鼠在海马注射凝聚态Aβ1-40后腹腔注射雷公藤内酯醇则为用药组.应用免疫组织化学、RT-PCR方法检测各组大鼠海马C3的表达.结果:免疫组织化学显色显示,模型组C3阳性细胞数与对照组比较明显增多、模型组C3阳性细胞平均光密度与对照组比较明显增高.用药组C3阳性细胞平均光密度较模型组明显降低.RT-PCR结果显示,模型组C3 mRNA的表达水平比对照组明显增高;而用药组C3 mRNA的表达水平低于模型组.结论:雷公藤内酯醇对Aβ所致的大鼠海马C3的活化有抑制作用.     

脑室注射同型半胱氨酸对脑缺血大鼠β淀粉样蛋白及认知功能的影响

目的:观察脑室注射同型半胱氨酸(Hcy)对实验性脑缺血大鼠脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)的表达及学习记忆的影响。方法:Wistar雄性成年大鼠按随机数字表法分为假手术组、脑缺血组、Hcy组。采用线栓法建立左侧大脑中动脉脑缺血大鼠模型,2 h后同侧脑室立体定向注射Hcy(3μmol/L)。采用Morris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力;化学定量法检测血浆中Hcy含量;免疫荧光组织化学检测Aβ42、β-分泌酶(BACE1)在海马CA1区神经元中的共定位;免疫印迹检测Aβ42、BACE1在海马CA1区中的表达变化;结果:与假手术组相比,脑缺血组逃避潜伏期延长,穿越平台次数及平台象限停留时间均减少,并且Aβ42和BACE1表达明显上调,差异均有统计学意义。Hcy脑室注射后显著增加Aβ42和BACE1表达,明显加重脑损伤后的学习和记忆功能障碍。结论:Hcy可以导致脑缺血大鼠的学习记忆功能障碍,海马CA1区Aβ42和BACE1表达升高可能是其机制之一。