十堰地区市售淡水鱼虾吸虫囊蚴感染情况调查

目的:了解十堰地区市售淡水鱼虾吸虫囊蚴感染情况。方法:收集十堰市两大集贸市场和路边商贩所销售的本地常见野生淡水鱼虾。肌肉直接压片法制作鱼虾肌肉压片,用光学显微镜在低倍或高倍镜下查找囊蚴,根据囊蚴形态、排泄囊结构和囊壁厚度等特征区分囊蚴种类。结果:共采集鱼类样本562尾,虾类样本1 005份,其中淡水鱼阳性尾数共计39尾,总感染率为6.94%(39/562);淡水虾(青虾)阳性尾数共计675尾,总感染率为67.16%(675/1005)。分别在鱼、虾肌肉内查到4种吸虫囊蚴,经初步判定为后睾属类吸虫囊蚴。调查的4种淡水鱼(白鲦、鲫鱼、黄颡、鲈鱼)样品中,仅在白鲦中查获囊蚴,呈低度感染。结论:十堰市市售的野生鱼虾均有吸虫囊蚴感染,其中虾类感染率较高,需要重点控制该类传染源。     

系统进化树分析慢性丙型肝炎患者HCV基因分型

目的了解浙江省慢性丙型肝炎患者HCV基因型分布情况。方法参考Ohno的分型方法,采用巢式RT-PCR法扩增抗HCV抗体阳性患者的血清样品HCV核心(core)基因部分区段(-12nt～+343nt),克隆并测序[1];以Clustalw软件对所克隆片段进行系统进化树分析并分型。结果在60份HCV抗体阳性血清中,HCV检出率为55%(33例);系统进化树分析提示共有1b、2a、3a、3b、6a 5个不同的基因型,以1b、3b和2a基因型为主,其中1b阳性率为52%(17例)。结论浙江省慢性HCV感染者中HCV基因型呈现出以1b、3b和2a为主、多基因型存在的特点。     

自建HBV-DNA实时荧光定量PCR检测系统性能验证方法及结果分析

目的探讨自建乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)实时荧光定量PCR检测系统性能验证的方法和程序,充分了解其检测性能,评估并确认分析性能是否符合预期用途。方法参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)颁布的EP系列文件及中国合格评定国家认可委员会(CNAS)对实验室检测系统评估的要求,对实验室自建的HBV-DNA实时荧光定量PCR检测系统进行精密度、正确度、线性范围、检测下限等性能参数的验证和评价。结果 HBV-DNA定量检测低值和高值的批内精密度CV分别为3.4%和1.8%,总精密度CV分别为3.8%和1.8%。正确度初次验证有两项不符合要求,经厂家校准后重新验证符合要求。线性回归方程为Y=0.997X+0.012,R2=0.999,线性范围为500-108IU/ml。检测下限为500 IU/ml。结论自建HBV-DNA实时荧光定量PCR检测系统的性能符合要求,能够应用于临床检测。     

海南省2019年9例登革病毒的鉴定及E基因序列分析

目的 对2019年海南省暴发的16例疑似登革热（dengue fever, DF）患者血清标本进行调查研究,从分子水平对登革病毒（Dengue virus, DENV）的E基因进行分析,对此次登革病毒进行鉴定,并对登革热的防控给出可行性意见。方法 对患者血清进行核酸检测、分型,将登革病毒阳性标本进行分离及核酸检测,利用实时荧光定量PCR技术对病毒进行分型,通过RT-PCR扩增E基因片段RT-PCR产物经过琼脂凝胶电泳成像系统观察条带结果,根据条带的有无判断阴性或阳性,根据条带的大小判断登革病毒的型别,得到9条DENV-1型E基因序列,基因测序之后与2019年中国其他省、国外选取的共11条DENV-1型E基因序列进行比较中,通过MEGA7.0.26软件从分子水平进行同源性比较以及系统进化树构建。结果 通过血清学鉴定结果以及实时荧光定量PCR技术检测得出的Ct值,可知研究的16份患者血清中,有9份经过鉴定为DENV-1型,7例为阴性结果。系统进化树表明,2019年海南9例DENV-1病例与参考序列MK517727 Guangzhou 2019、MK517719 Guangzhou 2019、MK517720 Guangzhou 2019同源性最高为99.73%~99.80%,与3株作为参考序列的外源株,序列相似度都相对较低,结果可靠。结论 得到的E基因长度为1 485 bp,2019年海南省9株DENV-1型为输入型流行株,根据进化树亲缘性分析,此次海南DENV-1病例与广州省的登革病例同源性最高。     

国产PCR试剂和COBAS系统血清HBV-DNA检测结果不一致的原因分析

目的探讨国产PCR试剂和COBAS系统血清HBV-DNA检测结果不一致的原因。方法收集2013年12月~2015年10月来本院肝病中心就诊的慢性HBV感染者230例,国产PCR试剂血清HBV-DNA结果均为阴性,应用COBAS系统予以复查,分析两种方法 HBV-DNA检测结果的差异及可能的影响因素。结果 106例(46.09%)患者两种方法血清HBV-DNA检测结果均低于检测下限;124例(53.91%)患者在COBAS系统可检测到不同载量的HBV-DNA,包括3例(1.30%)隐匿性HBV感染。随着患者血清HBV-DNA载量的增加,性别比、HBe Ag效价和阳性率、血常规和凝血功能等指标差异均无统计学意义(P0.05),但血清HBs Ag效价、终末期肝病构成比、肝功能酶类指标、AFP等逐渐升高(P0.05)。血清HBV-DNA与HBs Ag效价、肝功能指标、AFP均有一定相关性(P0.05),与HBe Ag效价无相关性(P=0.87)。结论针对肝功能指标异常、HBs Ag效价较高、病情较重(特别是终末期肝病)的慢性HBV感染患者,国产PCR试剂检测血清HBV-DNA阴性时有必要应用COBAS系统复查。     

Roche定量试剂和国产PCR试剂检测HBV-DNA的比较分析

目的探讨Roche定量试剂和国产PCR试剂检测慢性HBV感染者血清HBV-DNA的差异。方法收集慢性HBV感染患者366例,包括慢性乙型肝炎患者247例,乙肝肝硬化失代偿患者72例,乙肝相关性肝癌患者28例,乙型慢加急性肝衰竭患者19例;采用Roche定量试剂(试剂A)和和国产PCR试剂(试剂B)检测患者血清HBV-DNA,比较检测结果的差异、相关性及影响因素。结果试剂B 124例(33.88%)低于检测下限而试剂A高于检测下限(包括24例超过1.00×10~3IU/m L,考虑试剂B为假阴性);试剂A的阳性率(70.49%)显著高于试剂B(36.61%)(P0.01)。试剂A的HBV-DNA检测均值高于试剂B(P0.05),HBe Ag滴度低者、终末期患者更容易出现COBAS系统的血清HBV-DNA检测值高于国产试剂的情况。Spearman相关分析显示,两种试剂在1.00×10~3IU/m LHBV-DNA1.00×10~7IU/m L时的相关性较好(r=0.74,P0.01)。结论国产PCR试剂可以满足慢性HBV感染患者抗病毒治疗随访、监测的需求;但针对那些怀疑有低病毒复制状态或病毒变异导致HBV-DNA检测结果假阴性的患者,有必要用COBAS系统予以复核。     

全自动核酸提纯及实时荧光PCR系统的性能验证与评价

目的 评估全自动核酸提取纯化及实时荧光PCR分析系统检测新型冠状病毒核酸的性能。方法 根据新型冠状病毒感染防控方案,研究购自上海生工的全自动核酸提取纯化及实时荧光PCR分析系统、2019-nCoV试剂盒、不同浓度的新型冠状病毒核酸检测标准品,对样品的阴阳性符合率、精密性、变异系数、最低检出限、重复性、检测时长等指标进行检测,并根据检测结果验证、评估自动核酸提取纯化及实时荧光PCR分析系统性能。结果 样本的阴、阳性符合率均为100.00%,精密性阳性符合率均为100.00%,变异系数(coefficient of variation,CV)为≤5.00%,最低检出限循环阈值(cycle threshold, Ct)<43.00,阳性检出率为100.00%,重复性阴、阳性符合率均为100.00%,设备检测时长2h以内。结论 根据本研究结果,该系统特异性强、重复性好,同时最低检出限和精密性均符合现场使用要求,可有效降低操作风险,且检测时长较传统PCR短,可大规模适用于口岸一线。     

荧光定量PCR溶解曲线分析技术检测多系统萎缩患者TCRβ链CDR3谱序初探

目的利用荧光定量PCR溶解曲线分析技术检测多系统萎缩病人TCRβ链CDR3谱序。方法提取1例多系统萎缩病人外周血单个核细胞中的总RNA逆转录成cDNA,以26个人TRBV基因家族设计上游引物,共同的TRBC基因设计下游引物,用荧光定量PCR（FQ—PCR）扩增26个TRBV基因各家族CDR3谱系,根据其溶解曲线图分析各家族CDR3谱系的单／寡／多克隆增生。结果该病例外周血T细胞TCRβ链26个家族CDR3表达频率不一致,有的家族呈现缺失状态,有的家族出现寡克隆状态。结论该多系统萎缩病人TCRβ链CDR3存在谱系漂移,有的表达呈寡克隆,有的无表达呈缺失。     

荧光定量PCR与COBAS Taqman系统在血清HBV-DNA检测中的应用及临床意义

目的 探讨荧光定量PCR（QF-PCR）与COBAS TaqMan系统定量检测血清标本中乙型肝炎病毒（HBV）DNA水平的相关性及一致性,并分析HBV感染不同临床情况的HBV-DNA水平及意义.方法 96例HBV-DNA高水平（〉103copies/mL）患者的血清标本,分别采用QF-PCR和COBAS TaqMan系统平行检测分析.并对HBV感染相关肝脏疾病不同临床表现的HBV-DNA水平进行分析.结果 COBAS TaqMan系统定量结果与QF-PCR法比较差异有统计学意义（P〈0.01）;≥106copies/mL组中两种检测方法的相关性好;〈40岁患者的HBV-DNA平均水平高于〉140岁患者,HBeAg阳性患者HBV-DNA平均水平高于HBeAg阴性患者,慢性乙型肝炎（CHB）患者的HBV-DNA平均水平高于乙型肝炎肝硬化（LC）患者,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 QF-PCR相比较COBAS TaqMan系统有较好的一致性,适用于HBV的临床检测.HBV-DNA的负荷量随年龄增长趋于减少.虽然HBeAg阴性CHB患者及IC患者的HBV-DNA平均水平相对较低,但只要符合指征,均需要予以积极抗病毒治疗.     

金湖县2006-2015年南水北调东线工程血吸虫病监测和防治

目的 了解金湖县南水北调东线工程所涉区域血吸虫病疫情变化,做好监测预警工作.方法 每年春季,采用机械抽样结合环境抽样设框法对金宝航道及其一级支流、高邮湖区和新三河的部分滩地开展钉螺调查.每年6-9月份,采用网捞法和稻草帘诱螺法在金宝航道退水闸段开展钉螺监测;采用淘洗法在金湖站对清污机打捞的漂浮物进行钉螺检测.采用胶体染料试纸条法(DDIA)对金宝航道和高邮湖区域的流行村居民、渔船民和门诊病人进行血吸虫病筛查,阳性者用Kato-katz法(1粪3检)进行检测.同时开展钉螺控制、病人治疗及阳性者化疗、健康教育、粪便管理等防控措施落实情况调查.结果 2006-2015年累计调查河道面积443.84 hm2,结果未发现钉螺;调查湖滩面积2 568.19 hm2,结果新发现有螺条块2个,有螺面积20.23 hm2.在金宝航道退水闸段累计打捞漂浮物5 455 kg,投放稻草帘800块,在金湖站检测漂浮物750 kg,均未发现钉螺.完成血清学(DDIA)查病21 398人,阳性407人,阳性率1.90％;门诊人群血检阳性率高于疫区居民和渔船民,渔船民血检阳性率又高于疫区居民,差异均有统计学意义(P＜0.01).粪检8 983人,发现血吸虫病人1例.累计环境改造面积31.24 hm2,药物喷洒灭螺36.75 hm2巩固性灭螺200.79 hm2.2014年起未再发现活钉螺.治疗病人1例,扩大化疗407例.疫区居民和渔船民血吸虫病防治知识总体知晓率为98.55％、行为正确率为98.02％;中小学生血吸虫病防治知识总体知晓率为98.95％、行为正确率为98.18％.修建无害化公厕9座.结论 金湖县南水北调东线工程输水河道未发现血吸虫病疫情和钉螺扩散现象,但在毗邻湖区新发现了钉螺和输入性病人,应加强风险监测.     

南水北调中线水源区儿童肺吸虫病临床特征分析

目的分析南水北调中线水源区工程启用后对某三甲医院肺吸虫病住院病人的发病率、临床诊治情况的影响。方法回顾性分析2010-2017年某院感染性疾病科和儿科住院确诊的肺吸虫病病人的流行病学资料、临床特征,并与本院南水北调中线水源区启动前肺吸虫病临床诊疗情况作对照,分析南水北调中线水源区启动对该地区肺吸虫病的影响。结果住院肺吸虫病病人共19例,男性16例、女性3例,年龄6～12岁(平均8. 9±1. 1岁);病前1～6月有疫源接触史(18例生食溪蟹,1例饮用溪水);病人以水源区上游安康市居多;呼吸系统症状为主诉6例,神经系统症状为主诉5例,皮下包块为主诉4例,全身水肿为主诉1例,消瘦、消化不良为主诉1例,腹痛为主诉1例,发热为主诉1例。体检:肺部啰音、胸腔积液10例次;肝脏肿大4例次;皮下包块3例次;颈强、皮疹、全身水肿、腹腔积液、扁桃腺肿大各1例次。外周血嗜酸性粒细胞(Eosinophils,EOS)显著增高100. 00%;肺吸虫抗原皮试阳性100. 00%; CT和MRI(增强MRI)发现颅内肺吸虫病病灶1例、胸肺部病灶22例次、心包积液1例、肝脏肿大4例、腹腔积液1例。出现症状到确诊的时间1周～1年。全部病例予吡喹酮治疗(2～4个疗程)均治愈。结论南水北调中线水源区启用后水源区肺吸虫病住院病人显著减少,误诊率上升。详细病史询问、仔细体检、科学分析EOS、影像学检查,配合肺吸虫抗原皮试,是早发现、早诊断、早治疗的关键。     

南水北调山东受水区人体重要寄生虫感染基线调查

目的调查南水北调东线工程通水前山东受水区土源性线虫和华支睾吸虫感染现状,为制定通水后干预措施提供科学依据。方法沿着输水干渠分布县,以随机抽样的方法确定目标人群,应用改良加藤氏（Kato-kata）厚涂片法检查全部目标人群,以透明胶纸肛拭法检查目标人群中的1-12岁儿童。结果共计调查7个县的21个点,粪检10510人。检出蛔虫、钩虫、鞭虫、蛲虫和肝吸虫5种寄生虫,土源性线虫感染率3.72％,肝吸虫感染率为0.06％,肠道寄生虫总感染率为3.79％。各县寄生虫感染率差异较大,性别间感染率无显著性差异,学龄前儿童感染率最高,感染度普遍较轻,多虫种感染现象少见,感染1种寄生虫者占76.69％,结论受水区生态环境的改变,可能促进土源性线虫病和肝吸虫病流行和扩散。通过建立监测点、加强健康教育和消除传染源等干预措施,可有效降低土源性线虫病和肝吸虫病在受水区的流行程度。     

广州市水源水基本情况分析

目的 通过调查广州市市政自来水的水源水中的基本污染物质和霍乱弧菌存在的情况,为监督管理等提供科学依据.方法 对广州市2007-2009年市政自来水水厂的水源水的检测结果进行整理分析,按GB3838-2002<地表水环境质量标准>Ⅲ类进行分析评价.结果 广州市市政水厂水源水监测项目中,霍乱弧菌、pH值和阴离子表面活性剂的合格率为100%,耗氧量、氨氮、溶解氧和耐热大肠菌群合格率分别为92.11%、27.83%、8.57%和7.83%.枯水期水源水氨氮的合格率明显低于丰水期,SD水道水源水监测项目中的溶解氧、氨氮和耐热大肠菌群合格率明显高于其余河道水源水.结论 广州市市政自来水的SD水道水源水、LX河水源水、ZJ航道水源水和DJ北干流水源水霍乱弧菌方面目前还具有安全的保证,水源水可能受到有机物、粪便等的污染,应重点加强水源防护.     

丰宫、小睾并殖吸虫囊蚴或后尾蚴在溪蟹体内的分布和囊蚴脱囊的比较

对丰宫、小睾并殖吸虫在溪蟹体内的分布、囊蚴或后尾蚴形态特点以及囊蚴脱囊进行比较研究 .实验结果显示 :从溪蟹体内分离得到的丰宫并殖吸虫囊蚴占 11 7% ,后尾蚴占 88 3 % ,囊蚴在 10min内全部自然脱囊而成为后尾蚴 .这一现象在并殖科虫种中较为独特 ,在虫种分类上有一定意义 .二种并殖吸虫囊蚴或后尾蚴在溪蟹体内的定居部位以胸肌分布最多 ,内脏次之 ,附肢最少 .     

南水北调中线引江济汉水利工程对血吸虫病流行的影响

目的 了解南水北调中线引江济汉水利工程对血吸虫病流行的影响趋势,对工程区荆州、沙洋和潜汀3个县(市、区)开工前的疫情进行5年纵向观察,为制定防治对策提供依据.方法 制定统一的调查方案,对工程区进行钉螺和病情调查.结果 5年来工程区域内现有钉螺面积徘徊在39.54～58.42 hm2之间.慢性血吸虫病人感染率在2.98%～6.53%之间.结论 工程区上游水系存在着钉螺向工程渠扩散的威胁.荆州区工程渠道开口处的钉螺面积、钉螺密度逐年减少,血吸虫病人感染率呈逐年下降的趋势.引江济汉工程区存在着血吸虫病流行的潜在风险.     

云贵地区淡水湖中类蛭弧菌多样性分析

目的：对贵州阿哈湖、百花湖及云南滇池不同深度湖水中分离的类蛭弧菌进行分类鉴定,了解云贵地区淡水中类蛭弧菌多样性.方法：培养云贵地区3个湖泊中分离的类蛭弧菌,进行16S rRNA基因测序分析,用MEGA 6.0软件以邻接法构建3个湖泊中类蛭弧菌16S rRNA序列的系统发育树,并以最大似然法（PHYLIP3.1软件）加以验证.结果：从阿哈湖、百花湖及滇池不同深度湖水中分离的类蛭弧菌覆盖率C值为75％,根据类蛭弧菌16S rRNA构建发育树,本研究所得的类蛭弧菌分属3个簇群,γ-Proteobacteria （8.3％）、δ-Proteobacteria（50.0％）及Sphingobacteria（41.7％）;在百花湖中分离得到1株路德维希肠杆菌,分离自贵州阿哈湖的6株菌株与噬菌弧菌属的Bacteriovorax sp.EPA同源性较高,分离于滇池的5株菌株的序列为不可培养细菌序列.结论：云贵地区阿哈湖、百花湖及滇池不同深度湖水中的类蛭弧菌具有较高多样性,推测在云南滇池区域存在着尚未开发的新型类蛭弧菌资源.     

南水北调东线工程运西线运行后对血吸虫病传播影响的监测

目的 了解南水北调东线工程运西线运行后对血吸虫病传播的影响,完善血吸虫病监测预警体系,提高监测预警及疫情处置能力水平.方法 采取查阅资料、现场勘察法了解南水北调东线工程运西线建设和运行、历史有螺环境分布与改造、水文气候和湿地分布情况;采取系统抽样结合环境抽样法对运西线内的重点环境开展钉螺监测;采用网捞法和稻草帘诱螺法开...     

某地区饮用水及水源水致突变性研究

目的 探讨某地区丰水期和枯水期的饮用水及水源水的致突变性。方法 采用AMES试验。结果 各水样中有大量的碱基移码型的直接致突变物和少量的需经代谢活化的碱基移码型的直接致突变物。各水样中的需经代谢活化的碱基置换型致突变物比不需代谢活化的碱基置换型致突变物多。黄河水枯水期的结果大于丰水期，有明显的季节性差别。结论 各水样在净化过程中不能除去这些有机致突变物，反而增加了新的致突变物。     

G市某地水源水和管网末梢水水质检测分析

目的：了解G市某地水源水和管网末梢水的水质现状,为饮用水卫生学评价及水源保护提供参考.方法：采集G市某地水源水和管网末梢水水样,根据《生活饮用水标准检验方法》（GB/T5750-2006）,采用化学法、微生物学方法及电感耦合等离子体质谱法对水质常规项目进行检测,利用固相萃取及气相色谱-质谱法检测水样中的有机物,比较水源水和末梢水水样的合格率.结果：水源水和末梢水各检测118个水样,合格率分别为75.42％和83.90％,水源水的合格率较末梢水降低,差异无统计学意义（P＞0.05）;水样的pH值、总硬度、硝酸盐、菌落总数、总大肠菌群、锰、铁、铜、锌、砷的检测结果均未超过《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2006）的限值,水源水中不合格的检测项目有色度、混浊度、耗氧量、硒、铅,末梢水中不合格的检测项目有耗氧量、硒、铅;水源水水样中检出10种有机物,末梢水水样中检出12种有机物,水源水水样中邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）及邻苯二甲酸二丁酯（DBP）的最高值分别为0.019 6 mg/L和0.0048 mg/L,末梢水中DEHP及DBP的最高值分别为0.018 4 mg/L和0.004 2 mg/L,均超过《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2006）中的限值要求,其余有机物检测值均低于卫生标准或检出限.结论：该地饮用水的硒、铅及有机物污染亟待改善.