不同方式下气管内滴注脂多糖方法制作急性呼吸窘迫综合征大鼠模型

目的探讨内窥镜下辅助滴注脂多糖及气管暴露法滴注脂多糖诱导急性呼吸窘迫综合征（ARDS）大鼠动物模型的差异。 方法32只Sprague Dawley大鼠分为EC组（内窥镜下辅助气管插管滴注等渗NaCl溶液）、EL组（内窥镜下辅助气管插管滴注脂多糖）、IC组（气管暴露法滴注等渗NaCl溶液）、IL组（气管暴露法滴注脂多糖）,每组各8只。记录制作动物操作时间。滴注脂多糖24 h后采集动脉测定动脉血氧分压（PaO₂）及氧合指数,计算肺组织湿/干重比值（W/D）,检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量,血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）,并进行弥漫性肺泡损伤（DAD）评分。 结果EC组、IC组、EL组及IL组大鼠手术操作时间分别为（212 ± 24）、（296 ± 53）、（233 ± 44）、（321 ± 56）s,四组大鼠间比较,差异有统计学意义（F = 9.808,P < 0.001）,且与IC组和IL组比较,EC组、EL组制作动物模型的操作时间均明显缩短（P均< 0.05）。四组大鼠间PaO₂、氧合指数、肺W/D、BALF蛋白含量、血清TNF-α、IL-6及DAD评分比较,差异均有统计学意义（F= 124.752、123.920、73.775、65.922、48.342、419.548、655.623,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,与EC组及IC组比较,EL组及IL组大鼠的PaO₂ [（104 ± 10）、（105 ± 9）、（54 ± 3）、（53 ± 4）mmHg]、氧合指数[（498 ± 48）、（502 ± 43）、（261 ± 17）、（255 ± 21）mmHg]均显著降低,肺W/D [（4.14 ± 0.16）、（4.36 ± 0.18）、（5.53 ± 0.31）、（5.58 ± 0.29）]、BALF蛋白含量[（0.39 ± 0.07）、（0.34 ± 0.05）、（2.19 ± 0.13）、（2.15 ± 0.11）g/L]、血清TNF-α [（177 ± 38）、（186 ± 51）、（414 ± 61）、（440 ± 74）ng/L]、IL-6 [（104 ± 11）、（113 ± 28）、（584 ± 42）、（603 ± 56）ng/L]及DAD评分[（0.90 ± 0.29）、（0.82 ± 0.38）、（11.65 ± 0.89）、（12.23 ± 0.97）分]均显著升高（P均< 0.05）。 结论采用内窥镜下辅助气管插管滴注脂多糖能简单、有效地建立大鼠ARDS模型。     

尿胰蛋白酶抑制剂对重症结核病患者的免疫调节作用

目的探究尿胰蛋白酶抑制剂（UTI）对重症结核病患者的免疫调节作用。 方法选取杭州市红十字会医院2015年1月至2017年11月收治的84例重症结核病患者,采用随机数字表法分为UTI组和对照组,每组各42例。对照组给予常规治疗,UTI组在常规治疗基础上于入住ICU第2天给予UTI 10万单位静脉注射,每8小时1次,连续治疗7 d。比较两组患者的一般资料、急性病生理学和长期健康评价（APACHE）Ⅱ评分和外周血液中白细胞介素2（IL-2）、IL-6、IL-10、IL-12、干扰素γ（INF-γ）、转化生长因子β（TGF-β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺T淋巴细胞、Tregs细胞及诱导性共刺激分子（ICOS）⁺Tregs细胞表达水平。 结果治疗后,UTI组及对照组重症结核病患者APACHEⅡ评分[（22.5 ± 2.2）分vs.（25.8 ± 1.5）分,t = 2.025,P = 0.043]、IL-6 [（137 ± 33）ng / L vs.（116 ± 42）ng / L,t = 2.785,P = 0.045]、IL-10 [（29 ± 6）ng / L vs.（26 ± 5）ng / L,t = 2.143,P = 0.039]、IL-12 [（84 ± 26）ng / L vs.（65 ± 22）ng / L,t = 2.009,P = 0.043]、TGF-β [（8.5 ± 2.3）ng / L vs.（9.8 ± 2.8）ng / L,t = 1.613,P = 0.045]、CD8⁺T淋巴细胞[（43 ± 13）% vs.（38 ± 12）%,t = 1.856,P = 0.043]及Tregs细胞[（5.8 ± 1.1）% vs.（5.1 ± 0.9）%,t = 1.645,P = 0.045]比率比较,差异均有统计学意义;而IL-2[（835 ± 188）ng / L vs.（744 ± 324）ng / L,t = 0.656,P = 0.458]、INF-γ [（200 ± 88）ng / L vs.（203 ± 78）ng / L,t = 0.912,P = 0.061]、TNF-α [（854 ± 256）μg / L vs.（808 ± 213）μg / L,t = 0.956,P = 0.785]、CD4⁺T淋巴细胞[（48 ± 8）% vs.（49 ± 14）%,t = 0.756,P = 0.985]及ICOS⁺Tregs细胞[（1.0 ± 0.7）% vs.（1.0 ± 0.9）%,t = 0.956,P = 0.089]比率比较,差异均无统计学意义。 结论UTI能够调节危重症结核病患者的细胞免疫,减轻重症结核病患者体内炎症因子的释放,从而改善其APACHEⅡ评分及预后。     

老年2型糖尿病患者肠道菌群多样性及其炎症因子与胰岛素抵抗的相关性研究

目的探讨老年2型糖尿病（T2DM）患者肠道菌群多样性及其炎症因子的变化与胰岛素抵抗的相关性。 方法选取80例老年T2DM患者作为T2DM组,另选取80例健康体检者作为对照组,检测两组患者肠道菌群拟杆菌、普雷沃氏菌、乳杆菌、双歧杆菌和肠杆菌数量。测定并计算两组患者的稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,同时比较两组患者的白细胞介素6（IL-6）、IL-10、IL-22、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和干扰素γ（IFN-γ）水平。采用Pearson相关性分析老年T2DM患者肠道不同菌群与HOMA-IR相关性,肠道不同菌群与各炎症因子的相关性。 结果老年T2DM组的拟杆菌[（10.0 ± 0.3）logN/g vs.（8.1 ± 0.9）logN/g]和肠杆菌[（9.86 ± 0.27）logN/g vs.（7.05 ± 0.19）logN/g]的菌落数显著高于对照组（t = 3.162、3.016,P均< 0.05）,普雷沃氏菌[（7.22 ± 0.27）logN/g vs.（9.35 ± 0.39）logN/g]、乳杆菌[（5.12 ± 0.25）logN/g vs.（7.67 ± 0.43）logN/g]和双歧杆菌[（7.2 ± 0.4）logN/g vs.（11.0 ± 0.5）logN/g]的菌落数显著低于对照组（t = 5.230、4.163、7.115,P均< 0.05）。T2DM组的HOMA-IR[（6.4 ± 0.8）vs.（3.1 ± 0.4）]、IL-6[（154 ± 15）ng/L vs.（81 ± 10）ng/L]、IL-22[（628 ± 36）ng/L vs.（106 ± 11）ng/L]、TNF-α[（208 ± 23）ng/L vs.（118 ± 11）ng/L]和IFN-γ[（136 ± 15）ng/L vs.（76 ± 13）ng/L]的水平显著高于对照组（t = 7.156、3.167、5.026、3.557、2.134,P均< 0.05）,而IL-10[（127.7 ± 18.7）ng/L vs.（376.8 ± 1.8）ng/L]水平显著低于对照组（t = 2.272,P < 0.05）。相关性分析结果显示,普雷沃氏菌、肠杆菌与血浆HOMA-IR呈显著正相关（r =0.613、0.437,P均< 0.05）,拟杆菌、乳杆菌和双歧杆菌与HOMA-IR呈显著负相关（r = -0.617、-0.575、-0.616,P均< 0.05）。拟杆菌、普雷沃氏菌、乳杆菌和双歧杆菌数量与IL-6（r = -0.617、-0.526、-0.575、-0.616,P均< 0.05）、IL-22（r = -0.636、-0.587、-0.621、-0.573,P均< 0.05）、TNF-α（r = -0.593、-0.633、-0.476、-0.539,P均< 0.05）和IFN-γ（r = -0.475、-0.538、-0.602、-0.573,P均< 0.05）水平呈显著负相关性,与IL-10呈显著正相关性（r = 0.535、0.623、0.459、0.506,P均< 0.05）;肠杆菌与IL-6、IL-22、TNF-α和IFN-γ水平呈显著正相关性（r = 0.437、0.599、0.576、0.518,P均< 0.05）,与IL-10呈显著负相关性（r = -0.518,P < 0.05）。 结论老年T2DM患者肠道菌群与胰岛素抵抗具有相关性,推测其机制可能与炎症因子水平有关。     

微小RNA-142-3p在脓毒症患者血清中的表达及其临床意义

目的通过观察脓毒症患者血清中微小RNA-142-3p（miR-142-3p）的表达,探讨其与脓毒症的关系。 方法选取41例脓毒症患者作为研究对象,同期住院的非脓毒症患者20例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测血清中miR-142-3p的表达,酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测白细胞介素6（IL-6）和IL-10的表达。采用Spearman相关分析miR-142-3p与患者临床特点和实验室指标的相关性,受试者工作特征（ROC）曲线评价miR-142-3p、IL-6、IL-10、C反应蛋白（CRP）、前降钙素原（PCT）、白细胞计数和乳酸表达水平对脓毒症的预测价值。 结果脓毒症组患者的白细胞计数[（14.4 ± 7.8）× 10⁹/L vs.（8.4 ± 2.1）× 10⁹/L,t = 4.571,P < 0.001]、CRP [（127 ± 80）mg/L vs.（80 ± 45）mg/L,t = 2.436,P= 0.018]、乳酸[（2.3 ± 1.8）mmol/L vs.（1.5 ± 0.6）mmol/L,t = 2.421,P = 0.019]、PCT [5.70（1.49,26.37）μg/L vs. 0.25（0.10,0.63）μg/L,Z= 75.500,P < 0.001]、IL-6 [342.33（64.98,2 618.44）ng/L vs. 14.95（3.21,54.51）ng/L,Z = 84.000,P < 0.001]、IL-10 [23.16（6.19,85.56）ng/L vs. 2.75（1.39,5.36）ng/L,Z = 198.500,P = 0.001]和miR-142-3p [95.74（23.19,278.23）vs. 25.64（18.59,56.05）,Z = 222.000,P = 0.004]均显著高于对照组。miR-142-3p与乳酸、IL-6、PCT均呈正相关（r = 0.427、0.340、0.309,P = 0.005、0.030、0.049）。根据脓毒症患者28 d生存情况分为存活组（29例）和死亡组（12例）。存活组的急性病生理学与长期健康评价（APACHE）Ⅱ评分[（14 ± 6）分vs.（25 ± 6）分]、序贯性器官衰竭估计（SOFA）评分[（6.0 ± 2.8）分vs.（10.7 ± 3.5）分]和乳酸[（1.6 ± 1.0）mmol/L vs.（3.8 ± 2.6）mmol/L]水平均显著低于死亡组（t = 5.406、4.482、2.835,P均< 0.05）。ROC曲线分析结果显示,miR-142-3p [曲线下面积（AUC）= 0.729,95%CI（0.602,0.856）,P = 0.004]、IL-6 [AUC = 0.898,95%CI（0.820,0.975）,P < 0.001]、CRP [AUC = 0.698,95%CI（0.566,0.831）,P = 0.013]、PCT [AUC = 0.908,95%CI（0.835,0.981）,P < 0.001]、IL-10 [AUC = 0.758,95%CI（（0.631,0.885）,P = 0.001]和白细胞计数[AUC = 0.776,95%CI（0.659,0.893）,P = 0.001]对脓毒症均有预测价值。 结论脓毒症患者血清中miR-142-3p的表达升高,且与乳酸、IL-6、PCT呈正相关,其在脓毒症发生发展中可能发挥着重要作用。     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体在脓毒症急性肾损伤大鼠肾脏组织的表达及其影响

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白（NLRP3）炎性小体在脓毒症急性肾损伤（AKI）大鼠中的作用及其机制。 方法采用随机数字表法将18只雄性Wistar大鼠分为脂多糖（LPS）组、LPS +抑制剂组及阴性对照组3组,每组6只。LPS组大鼠给予腹腔内注射LPS（3.5 mg/kg）,LPS +抑制剂组大鼠腹腔内注射LPS（3.5 mg/kg）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）抑制剂Belnacasan（VX-765,100 mg/kg）,而阴性对照组大鼠则给予腹腔内注射0.3 mL等渗NaCl溶液。比较3组大鼠建模前及建模后24 h血清肌酐水平变化,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测3组大鼠建模24 h后血清白细胞介素1β（IL-1β）、IL-18及肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达水平,采用Western-blotting检测3组大鼠建模24 h后NLRP3及Caspase-1蛋白表达水平。 结果3组大鼠建模前后血清肌酐水平比较,差异有统计学意义（F = 146.910,P < 0.001）。进一步两两比较发现,建模后,LPS +抑制剂组及阴性对照组大鼠血清肌酐水平均较LPS组显著降低[（1.57 ± 0.20）、（0.54 ± 0.39）、（2.31 ± 0.24）mg/L],且阴性对照组大鼠血清肌酐水平较LPS +抑制剂组更低（P均< 0.05）;而LPS组[（2.31 ± 0.24）mg/L vs.（0.53 ± 0.16）mg/L]及LPS +抑制剂组[（1.57 ± 0.20）mg/L vs.（0.56 ± 0.08）mg/L]大鼠建模后血清肌酐水平均较建模前显著升高（P均< 0.05）。LPS组、LPS +抑制剂组及阴性对照组大鼠血清IL-1β [（9.33 ± 1.16）、（1.93 ± 0.30）、（1.88 ± 0.30）ng/L]、IL-18 [（23.8 ± 2.8）、（19.6 ± 1.5）（16.6 ± 1.2）ng/L]、TNF-α [（42.3 ± 2.1）、（23.9 ± 2.5）、（23.5 ± 1.3）ng/L]及NLRP3蛋白[（2.04 ± 0.25）、（2.04 ± 0.27）、（1.49 ± 0.28）]和Caspase-1蛋白[（0.62 ± 0.07）、（0.51 ± 0.09）、（0.50 ± 0.09）]表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 217.015、20.590、168.766、8.723、3.905,P均< 0.05）。进一步两两比较发现,LPS +抑制剂组及阴性对照组大鼠血清IL-1β、IL-18、TNF-α表达水平均较LPS组大鼠显著降低,且阴性对照组大鼠IL-18表达水平较LPS +抑制剂组更低（P均< 0.05）。阴性对照组大鼠NLRP3蛋白表达水平均较LPS组及LPS +抑制剂组显著降低,LPS +抑制剂组及阴性对照组大鼠Caspase-1蛋白表达水平均较LPS组显著降低（P均< 0.05）。 结论大鼠发生脓毒症时,通过激活炎性小体NLRP3,进而通过Caspase-1通路造成急性肾损伤。     

俯卧位通气对肺内源性急性肺损伤大鼠的影响

目的探讨俯卧位通气对脂多糖（LPS）诱导的肺内源性急性肺损伤（ALI）大鼠的治疗作用及其机制。 方法32只雄性SD大鼠随机分为对照组、ALI组、ALI仰卧位通气组（ALIS组）及ALI俯卧位通气组（ALIP组）,每组各8只。通过气管内滴注LPS 6 mg/kg建立ALI动物模型,24 h后ALIS组及ALIP组分别实施仰卧位或俯卧位通气4 h。之后观察动脉血氧分压（PaO₂）、二氧化碳分压（PaCO₂）、肺组织湿/干重比（W/D）;比较血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）水平;光镜下观察肺组织病理形态学变化。 结果与对照组比较,ALI组、ALIS组和ALIP组PaO₂明显降低（F = 57.369,P < 0.001）,ALI组、ALIS组PaCO₂均明显升高（F = 8.448,P < 0.001）,ALI组、ALIS组和ALIP组肺W/D及血清中TNF-α、IL-6均明显升高（F = 13.609、6.443、23.849,P = 0.001、0.017、< 0.001）;与ALI组比较,ALIS组和ALIP组PaO₂明显升高,PaCO₂、肺W/D比值、血清中TNF-α、IL-6均明显降低（P均< 0.05）。与ALIS组相比,ALIP组PaO₂升高[（83 ± 6）mmHg vs.（71 ± 5）mmHg,P < 0.05],PaCO₂降低[（50 ± 7）mmHg vs.（58 ± 6）mmHg,P < 0.05],肺组织W/D比值降低[（4.65 ± 0.56）vs.（4.82 ± 0.41）,P < 0.05]及TNF-α、IL-6在血清中的水平均降低[（293 ± 68）ng/L vs.（366 ± 44）ng/L;（358 ± 39）ng/L vs.（440 ± 38）ng/L,P均< 0.05]。同时肺组织病理形态学显示,与ALIS组相比,ALIP组腹侧过度膨胀区域减少（F = 63.423,P < 0.001）,正常通气区域增加（F = 73.229,P < 0.001）;ALIP组背侧塌陷区域减少（F = 68.586,P < 0.001）,正常通气区域及过度膨胀区域增加（F = 61.871,P < 0.001;F = 9.800,P = 0.001）。 结论俯卧位通气能促进LPS诱导的肺内源性ALI大鼠的气体交换,减轻肺水肿,降低炎症反应。     

急性呼吸窘迫综合征患者肺泡微环境对肺成纤维细胞生物学活性的影响

目的探讨不同程度急性呼吸窘迫综合征（ARDS）肺泡微环境的变化对肺成纤维细胞（LF）的影响。 方法以2014年1月至2016年12月绍兴市人民医院重症监护病房（ICU）收治的58例符合ARDS诊断标准的患者,依据患者氧合指数和柏林定义标准将患者分为轻度组（26例）、中度组（15例）、重度组（17例）,另纳入10例行机械通气但无肺部疾病患者作为无肺损伤组。所有入选患者均进行支气管肺泡灌洗,留取支气管肺泡灌洗液（BALF）标本,酶联免疫吸附法（ELISA）检测其中白细胞介素1β（IL-1β）、角质细胞生长因子（KGF）和肝细胞生长因子（HGF）水平,并进行蛋白定量及细胞计数。同时,体外培养肺成纤维细胞系MRC-5细胞,与各组患者BALF共培养,采用Transwell法检测细胞迁移能力,采用Western-blotting法检测各组细胞Collagen Ⅰ和血小板源性生长因子α受体（PDGF-Rα）表达。 结果与无肺损伤组比较,ARDS轻度组、中度组及重度组患者的IL-1β[12（8,21）、776（449,943）、802（691,1 004）、886（548,1 130）ng/L]、KGF[2.0（1.0,2.2）、19.0（15.8,24.5）、41.4（36.2,57.3）、64.7（49.2,82.1）ng/L]、HGF[90（75,106）、514（373,785）、867（674,1 248）、940（660,1 344）ng/L]、蛋白含量[（0.09 ± 0.03）、（0.29 ± 0.10）、（0.45 ± 0.09）、（0.68 ± 0.16）g/L]及细胞总数[（2.4 ± 0.6）、（16.5 ± 2.1）、（17.8 ± 2.0）、（18.2 ± 2.0）× 10⁹个/mL]均明显升高（Z=26.182、55.871、36.354,F=72.860、177.291,P均<0.05）,且与重度组患者比较,轻度组及中度组患者的KGF水平及蛋白含量显著降低（P均<0.05）,轻度组仅HGF水平及总细胞数明显降低（P均<0.05）,而ADRS各组间IL-1β比较,差异均无统计学意义（P均>0.05）。同时,与无肺损伤组比较,ARDS各组间趋化指数均明显升高（F=12.291,P=0.003）,且重度ARDS组患者明显高于轻度及中度组患者（P均<0.05）。四组间CollagenⅠ蛋白及PDGF-Rα蛋白比较,差异均有统计学意义（F=358.943,P=0.001;F=4.574,P=0.002）。ARDS各组CollagenⅠ蛋白明显高于无肺损伤组,且中度、重度组明显高于轻度组（P均<0.05）。而PDGF-Rα蛋白在无肺损伤组和轻度组几乎无表达,但在中度、重度组均有明显表达（P均<0.05）。 结论随着ARDS程度的加重,BALF中KGF、HGF明显上升,BALF可通过诱导LF表达PDGF-Rα和CollagenⅠ,促进LF的迁移与分化。     

类风湿关节炎共病抑郁症大鼠模型的建立及评价

目的建立并评价类风湿关节炎（RA）共病抑郁症动物模型。 方法通过复合造模思路,在Ⅱ型胶原诱导关节炎（CIA）大鼠模型基础上联合慢性不可预知温和刺激抑郁症模型,建立RA共病抑郁症大鼠模型。采用糖水消耗和旷场测试进行大鼠行为学测定。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定外周血清IL-27、IL-17和IL-10水平。采用单因素方差分析比较大鼠体质量、糖水饮用量、旷场实验得分以及血清因子水平的差异,组间两两比较采用LSD-t检验。 结果RA共病抑郁症组大鼠踝关节肿大、畸形,伴有运动迟缓、快感缺乏等抑郁状态。造模后第28天时大鼠体质量方面抑郁症组［（63.6±2.5）g］、RA共病抑郁症组［（152.2±3.2）g］均低于正常对照组［（179.5±3.7）g］,差异均有统计学意义（t=-2.383,P=0.019;t=-3.887,P=0.010）。慢性应激刺激后第22天时,大鼠饮用糖水量方面抑郁症组［（19.8±0.3）g］、RA共病抑郁症组［（18.9±0.1）g］明显小于正常对照组［（31.7±0.8）g］,差异具有统计学意义（t=6.71,P=0.016;t=5.12,P=0.023）。抑郁症组大鼠刺激后旷场实验水平得分、垂直得分均低于正常对照组［（54.41±6.42）分vs（98.34±4.83）分;（19.83±2.31）分vs（36.03±2.75）分］,差异均有统计学意义（t=5.31,P=0.023;t=2.34,P=0.042）。RA共病抑郁症组大鼠刺激后水平得分、垂直得分均低于正常对照组［（38.35±3.28）分vs（98.34±4.83）分;（12.73±3.42）分vs（36.03±2.75）分］,差异均有统计学意义（t=3.96,P=0.032;t=3.26,P=0.035）。IL-27、IL-17和IL-10水平在RA共病抑郁症组均高于正常对照组［（297.97±34.23）ng/L vs （212.43±14.52）ng/L;（184.62±33.71）ng/L vs （109.40±9.81）ng/L;（162.74±25.38）ng/L vs （131.51±20.43）ng/L ］,差异均具有统计学意义（t=4.78,P=0.0291;t=2.57,P=0.032;t=5.33,P=0.023）。 结论RA共病抑郁症组大鼠模型符合临床上RA共病抑郁症患者特征,该模型具有重复性高、易操作特点,是研究RA共病抑郁症理想动物模型。     

瑞芬太尼与丙泊酚双通道靶控输注在纤维支气管镜中的应用

[目的]探讨瑞芬太尼与丙泊酚双通道靶控输注（TCI）用于无痛纤维支气管镜检查中的合理配伍.[方法]选择40例次需行纤支镜（经口）检查的患者,ASAⅠ～Ⅱ级,随机分为四组.分别输注瑞芬太尼0.2 ng/mL、0.4 ng/mL、0.6 ng/mL、0.8 ng/mL,待瑞芬太尼达稳定血药浓度后,靶控输注丙泊酚3.0 μg/mL.观察进镜不同时期的平均动脉压（MAP）、心率（HR）、脉搏血氧饱和度（SpO2）、脑电双频指数（BIS）值以及诱导时间、唤醒时间和定向力恢复时间,记录呼吸抑制、体动、呛咳等不良反应发生的情况.[结果]与其他三组相比,输注瑞芬太尼0.6 ng/mL组的各项观测指标优于其他三组.[结论]使用3.0 μg/mL丙泊酚复合0.6 ng/mL瑞芬太尼为纤支镜检查的一种安全有效的配伍方案.     

维生素D对脓毒性休克导致急性呼吸窘迫综合征患者的干预价值研究

目的探索维生素D对脓毒性休克致急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的干预效果。 方法选取2017年6月至2019年6月入住山西医科大学第一医院重症监护室发生脓毒性休克导致ARDS的80例患者，根据25-羟维生素D水平分级分为维生素D正常组（17例，25-羟维生素D ≥ 50 nmol /L）和维生素D降低组（63例，25-羟维生素D < 50 nmol /L）。然后再根据25-羟维生素D水平的降低程度进一步将维生素D降低组分为维生素D缺乏组（35例，30 nmol /L ≤25-羟维生素D ≤ 49.9 nmol /L）和维生素D严重缺乏组（28例，25-羟维生素D <30 nmol/L）。采用随机数字表法将维生素D缺乏组患者分为A组（对照组，17例）和B组（干预组，18例），将维生素D严重缺乏组患者分为C组（对照组，14例）和D组（干预组，14例）。A、C组患者给予经胃管、肠内营养管补充淀粉胶囊0.5 g/d；B、D组患者给予经鼻胃管、鼻肠管补充阿法骨化醇软胶囊0.5 g/d，疗程均为7 d。记录所有患者的年龄、性别、25-羟维生素D、氧合指数、急性病生理学和长期健康评价（APACHE）Ⅱ评分、血管外肺水指数（EVLWI）、肺血管通透性指数（PVPI）及28 d死亡情况，采用Cox回归分析影响脓毒性休克致ARDS患者28 d病死率的危险因素。 结果维生素D正常组和维生素D降低组患者25-羟维生素D [（57 ± 4）nmol /L vs.（33 ± 8）nmol /L]、氧合指数[（135 ± 25）mmHg vs.（114 ± 18）mmHg]、APACHEⅡ评分[（14.7 ± 1.6）分vs.（16.0 ± 2.0）分]、EVLWI [（11.4 ± 2.1）mL/kg vs.（14.5 ± 2.7）mL/kg]、PVPI [（3.61 ± 0.32）vs.（5.05 ± 0.68）]及28 d死亡情况（1/17 vs. 20 /63）比较，差异均有统计学意义（t = 11.448、3.872、8.864、5.097、8.409，χ² = 4.626；P均< 0.05）。Cox回归分析结果显示，25-羟维生素D [相对危险度= 4.183，95%置信区间（1.787，10.594），P = 0.012]是脓毒性休克致ARDS患者预后的保护因素。且干预后，C、D组患者25-羟维生素D [（25 ± 4）nmol /L vs.（37 ± 4）nmol /L]、氧合指数[（152 ± 18）mmHg vs.（171 ± 13）mmHg]、APACHEⅡ评分[（12.8 ± 1.4）分vs.（11.0 ± 1.7）分]、EVLWI [（9.5 ± 0.9）mL /kg vs.（7.9 ± 1.4）mL /kg]及PVPI [（3.63 ± 0.28）vs.（2.95 ± 0.48）]比较，差异均有统计学意义（t = 7.493、3.246、3.016、3.420、4.373，P均< 0.05），而28 d死亡情况（6 /14 vs. 4 /14）比较，差异无统计学意义（χ² = 0.622，P = 0.430）。 结论维生素D降低在脓毒性休克致ARDS患者中普遍存在，且维生素D是脓毒性休克ARDS患者28 d病死率的保护因素，而补充维生素D可改善维生素D严重缺乏者ARDS的严重程度。     

肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎致全身炎症反应中的作用

目的 通过肠系膜淋巴管结扎(MLDL)阻断肠淋巴液回流,观察肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)致全身炎症反应中的作用.方法 将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组、结扎组和假手术组,每组8只.采用胰胆管逆行注入牛黄胆酸钠溶液制备SAP合并多器官损伤模型;MLDL于制模前进行.术后24 h测定血中二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和内毒素水平及胰腺、肺脏、肝脏组织髓过氧化物酶(MPO)活性.处死大鼠取材,光镜下观察小肠组织形态学变化;培养肠系膜淋巴结细菌并计算细菌移位率.结果 与假手术组比较,模型组血中DA0、D-乳酸、TNF-α、IL-6和内毒素水平均显著升高[DAO:(0.64±0.17)kU/L比(0.37±0.07)kU/L,D-乳酸:(8.16±1.79)ng/L比(3.24±1.00)ng/L,TNF-α:(65.21±13.38)ng/L比(22.16±5.04)ng/L,IL-6:(7.95±1.83)ng/L比(4.26±1.23)ng/L,内毒素:(0.068±0.019)kEU/L比(0.033±0.009)kEU/L],肠系膜淋巴结细菌移位率显著提高(75.0%比0),胰腺、肺脏、肝脏MPO活性显著升高[胰腺:(5.14±1.24)U/g比(2.88±0.75)U/g,肺脏:(9.07±2.52)U/g比(4.38±1.29)U/g,肝脏:(6.36±1.63)U/g比(3.19±0.96)U/g,均P<0.01];与模型组比较,结扎组血中DA0((0.50±0.13)kU/L3、D-乳酸[(6.23±1.25)ng/L]、TNF-α[(48.50±13.23)ng/L3、IL-6((6.06±1.64)ng/L]和内毒素[(0.048±0.014)kEU/L]均显著降低,肠系膜淋巴结细菌移位率(12.5%)显著减少,胰腺、肺脏、肝脏MPO活性(胰腺:(4.01±1.05)U/g,肺脏:(6.58±1.96)U/g,肝脏:(4.64±1.34)U/g]显著下降(P<0.05或P<0.01).结论 MLDL可以降低SAP大鼠肠道细菌和内毒素移位,减轻胰腺、肺脏、肝脏组织炎症损伤,保护肠屏障功能.     

谷氨酰胺对内毒素血症大鼠肠道损伤的保护作用及对血红素加氧酶-1表达的影响

目的 探讨谷氨酰胺(Glu)对内毒素血症大鼠肠道损伤的保护作用以及对血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响.方法 按随机数字表法将32只雄性SD 大鼠分为正常对照组、模型组、Glu组和Glu+锌原卟啉(ZnPP)组,每组8只.腹腔注射内毒素脂多糖(LPS)10 mg/kg制备内毒素血症动物模型.Glu组注射LPS前12 h灌胃Glu 1 g/kg;Glu+ZnPP组注射LPS前12 h灌胃Glu 1 g/kg,注射LPS前1 h静脉注射ZnPP 10 mmol/kg.术后12 h取回肠组织,测定髓过氧化物酶(MPO)活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)含量,并进行肠组织学评分;用免疫组化法检测回肠组织HO-1表达.结果 与正常对照组比较,模型组回肠组织学评分、MPO活性及TNF-α、IL-10含量显著升高[组织学评分(分):3.3±0.4比1.1±0.6,MPO活性(U/g):0.40±0.08比0.26±0.07,TNF-α含量(ng/g):25.2±6.9比6.5±2.8,IL-10含量(ng/g):27.6±10.2比5.7±2.9,均P<0.01];HO-1表达较低.与模型组比较,Glu组组织学评分、MPO活性和TNF-α含量明显减低[组织学评分(分):1.6±0.5比3.3±0.4,MPO活性(U/g):0.25±0.05比0.40±0.08,TNF-α含量(ng/g):13.4±3.2比25.2±6.9,均P<0.01],IL-10含量(ng/g)显著升高(47.3±5.5比27.6±10.2,P<0.01),HO-1表达明显增加.Glu+ZnPP组与模型组各指标比较差异无统计学意义.结论 Glu能明显增强内毒素血症大鼠肠组织HO-1表达,明显减轻肠道炎症反应,从而保护肠黏膜.

Abstract：

Objective To investigate the protective effect of glutamine (Glu) pretreatment on intestinal injury induced by endotoxin and expression of heme oxygenase-1 (HO-1) in rats.Methods Thirty-two male Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into four groups (n=8 in each group): normal control group, model group, Glu group and Glu+zinc protoporphyrin (ZnPP) group. In model group, endotoxemia was produced by intraperitoneal injection of lipopolysaccharide (LPS, 10 mg/kg). In Glu group, the rats received intragastraiclly 1 g/kg of Glu 12 hours before LPS intraperitoneal injection. In Glu+ZnPP group, the rats received 1 g/kg of Glu by gavage 12 hours before LPS intraperitoneal injection and ZnPP 10 mmol/kg intravenously via tail vein 1 hour before LPS injection. The distal ileum was harvested in full thickness 12 hours after LPS injection. The myeloperoxidase (MPO) activity, tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10) in the intestine were determined, the pathologic changes were observed and expressed in Chiu grade. The expression of HO-1 was evaluated by immunohistochemistry method. Results Compared with normal control group, the Chiu grade, MPO activity, the content of TNF-α and IL-10 were significantly increased in model group [Chiu grade: 3.3±0.4 vs. 1.1±0.6, MPO activity (U/g): 0.40±0.08 vs. 0.26±0.07, TNF-α (ng/g): 25.2±6.9 vs. 6.5±2.8, IL-10 (ng/g): 27.6±10.2 vs. 5.7±2.9, all P<0.01], and the expression of HO-1 was decreased. Compared with model group, the Chiu grade, MPO activity, the content of TNF-α in Glu group were significantly decreased [Chiu grade: 1.6±0.5 vs. 3.3±0.4, MPO activity (U/g): 0.25±0.05 vs. 0.40±0.08, the content of TNF-α (ng/g): 13.4±3.2 vs. 25.2±6.9, all P<0.01], while the level of IL-10 (ng/g) elevated (47.3±5.5 vs. 27.6±10.2, P<0.01), and the expression of HO-1 was increased. There was no difference in above mentioned indexes between model group and Glu+ZnPP group. Conclusion Glu pretreatment significantly ameliorates the expression of HO-1 of intestinal tissue induced by LPS in rats, and intestinal mucosa is protected with alleviation of inflammatory reaction in intestinal tract.     

微小RNA-320检测在体外循环所致急性呼吸窘迫综合征中的临床价值及其机制研究

目的研究微小RNA（microRNA）在体外循环（CPB）诱导的急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者中表达,并初步探讨其机制。 方法设定体外循环转流开始前（T1）、转流结束后4 h（T2）、术后8 h（T3）、术后16 h（T4）等4个时间点,采用microRNA微阵列芯片分析32例因CPB诱发ARDS患者microRNA变化,并通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术加以验证。酶联免疫分析法检测患者肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）在T1~T4等4个时间点的水平变化,同时计算呼吸指数和氧合指数。Pearson相关性分析研究microRNA-320（miR-320）与TNF-α、IL-6、呼吸指数、氧合指数、Murray急性肺损伤评分以及急性病生理学和长期健康评价（APACHE）Ⅱ评分的相关性。体外培养人肺腺癌A549细胞,并转染pcDNA3.1-miR-320,采用细胞增殖检测试剂盒8（CCK-8）法和流式细胞术分析pcDNA3.1-miR-320转染对A549细胞48 h存活和凋亡率的影响。 结果在T1与T4时间点,ARDS患者血液标本中共有8个microRNA表达差异有统计学意义（t=28.313、30.014、25.313、20.312、29.442、21.443、18.427、22.369,P均< 0.001）,其中5个出现降低,3个出现增高,其中miR-499的降低程度（0.28 ± 0.09）最为显著,而miR-320的增高程度（1.62 ± 0.12）最为显著（P均< 0.05）。qRT-PCR证实从T1至T4时间点,miR-320相对表达水平（1.00、1.14 ± 0.07、1.34 ± 0.06、1.71 ± 0.08）逐渐升高,差异有统计学意义（F=20.648,P < 0.05）。CPB诱发ARDS的患者T1与T4时间点相比,TNF-α[（110 ± 10）ng/L vs.（254 ± 16）ng/L]、IL-6[（86 ± 8）ng/L vs.（165 ± 11）ng/L]、呼吸指数[（0.182 ± 0.021）vs.（0.381 ± 0.032）]均增高,氧合指数[（350 ± 22）vs.（245 ± 18）]下降,差异均有统计学意义（P均< 0.05）。Pearson相关性分析发现,miR-320的表达水平与Murray急性肺损伤评分,APACHEⅡ评分,T4时间点TNF-α、IL-6、呼吸指数均呈正相关（r=0.685、0.744、0.737、0.711、0.846,P均< 0.05）,而与氧合指数呈负相关（r=-0.745,P < 0.05）。pcDNA3.1-miR-320转染的A549细胞组与对照组48 h细胞存活率[（82% ± 8%）vs. 100%]、凋亡率[（20.0% ± 1.1%）vs.（9.4% ± 0.8%）]相比,差异均具有统计学意义（P均< 0.05）。 结论miR-320水平与TNF-α、IL-6等肺部损伤指标具有相关性,miR-320的高表达可能介导CPB导致的ARDS,作用机制为诱导肺泡上皮细胞的凋亡,因此miR-320具有临床诊断、评估ARDS生物学指标的潜能。     

急性心肌梗死老年患者NLRP3基因多态性与炎症指标的关联性

目的探究急性心肌梗死老年患者NLRP3基因多态性与炎症指标的关联性。 方法选择2019年1月至2021年1月于蚌埠医学院第二附属医院就诊的急性心肌梗死老年患者126例作为研究组,选择同期体检的健康者100例作为对照组。抽取所有研究对象的空腹静脉血,检测血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）、白介素1β（IL-1β）、白介素18（IL-18）以及NLRP3水平,比较研究组和对照组的差异。检测研究组患者NLPR3基因rs10754558位点、rs35829419位点的多态性,比较不同基因型患者血清hs-CRP、IL-1β、IL-18水平的差异。 结果研究组患者hs-CRP、IL-1β、IL-18、NLRP3水平均显著高于对照组［（4.8±2.3）mg/dl vs（1.4±0.9）mg/dl,P＜0.001;（186.4±18.3）ng/ml vs（46.3±16.7）ng/ml,P＜0.001;（241.6±32.5）pg/ml vs（124.6±28.1）pg/ml,P＜0.001;（1.94±0.65）pg/ml vs（0.92±0.54）pg/ml,P＜0.001］,肌钙蛋白阳性比例显著高于对照组（72.22% vs 0,P＜0.001）。研究组中,rs10754558位点GG基因型血清hs-CRP［（5.6±2.4）mg/L］、IL-1β［（217.6±16.7）ng/ml］、IL-18［（264.3±24.7）pg/ml］水平最高,GC基因型次之［（4.6±2.1）mg/L、（177.1±16.3）ng/ml、（236.8±24.1）pg/ml］,CC基因型最低［（4.0±2.1）mg/L、（156.4±15.9）ng/ml、（210.2±23.9）pg/ml］,组间差异均具有统计学意义（P＜0.05）。rs35829419位点AA基因型hs-CRP［（7.0±1.9）mg/L］、IL-1β［（229.2±17.2）ng/ml］、IL-18［（285.3±28.6）pg/ml］水平最高,AC基因型次之［（5.3±2.0）mg/L、（194.3±16.8）ng/ml、（253.4±28.9）pg/ml］,CC基因型最低［（4.6±1.8）mg/L、（183.0±17.0）ng/ml、（236.3±28.2）pg/ml］,组间差异均具有统计学意义（P＜0.05）。GG+GC（OR=1.726,95%CI：1.306~4.018,P＜0.001）、AA+AC（OR=4.617,95%CI：2.512~8.019,P＜0.001）是影响急性心肌梗死的独立危险因素。 结论急性心肌梗死老年患者NLRP3基因rs10754558位点、rs35829419位点基因多态性影响血清炎症指标水平。