介绍两种鉴定白色念珠菌的方法

应用含０．０１％阿尼林蓝ＷＳ染料的ＹＭ固体培基（ＹＭＡＢ）和以对－硝基苯酚－Ｎ－乙酰－β－Ｄ－氨基半乳糖苷（ＮＧＬ）为底物鉴定白色念珠菌（白念菌），同时进行芽管试验。生长于ＹＭＡＢ上的白念菌温育１２～１８小时后在伍德灯下可观察到黄绿色荧光。ＮＧＬ酶法温育９０分钟后，白念菌酶类可分解底物呈现明显黄色。两种方法均正确鉴定了５５例白念菌中的５４例（９８．２％）。阿尼林蓝法中，１株类星形念珠菌也出现荧光，特异性９２．８％，敏感性及预示值均高于芽管法。ＮＧＬ酶法中，７株近平滑念珠菌呈阳性，特异性５０％，但反应快速。将两种方法并用，可使正确鉴定率达１００％，且两种方法简便、价廉，易于推广。     

牛奶培养基用于鉴定白色念珠菌芽管和厚膜孢子

１０ｇ／Ｌ脱脂奶粉或７．５％鲜牛奶培养基用于诱导白色念珠菌芽管和厚膜孢子的形成。在振荡条件下于３７℃培养３０ｍｉｎ或６０ｍｉｎ即可观察芽管，该培养基诱导芽管形成的百分率明显高于人血清，且特异性和人血清一样。白色念珠菌在牛奶培养基中于室温静置培养４８ｈ，可形成厚膜孢子。本法鉴定白色念珠菌简便、快速、特异、安全且培养基容易制备。     

介绍两种鉴定白色念珠菌的方法

应用含０．０１％阿尼林蓝ＷＳ染料的ＹＭ固体培基（ＹＭＡＢ）和以对－硝基苯酚－Ｎ－乙酰－β－Ｄ－氨基半乳糖苷（ＮＧＬ）为底物鉴定白色念珠菌（白念菌），同时进行芽管试验。生长于ＹＭＡＢ上的白念温育１２～１８小时后在伍德灯下可观察到黄绿色荧光。ＮＧＬ酶法温育９０分钟后，白念菌酶类可分解底物呈现明显黄色。两种方法均正确鉴定了５５例白念菌中的５４例（９８．２％）。阿尼林蓝法中，１株类星形念珠菌也出现荧光，特     

山苍子精油对白色念珠菌生物被膜芽管形成的抑制作用研究

目的研究山苍子精油在体外对白色念珠菌生物被膜芽管形成初始阶段的抑制作用,为预防由白色念珠菌生物被膜引起的难治性感染提供新思路。方法通过血清芽管实验,观察不同浓度山苍子精油对白色念珠菌出芽生长现象的抑制作用。结果 2~5μL/mL的山苍子精油对白色念珠菌出芽生长的抑制率为100.0%,但不具有杀菌作用,0.25μL/mL的山苍子精油对白色念珠菌芽管生长的抑制率为85.0%。结论 2~5μL/mL的山苍子精油可完全抑制白色念珠菌初始阶段生物被膜的形成,但不能杀灭酵母细胞。0.25μL/mL几乎不能抑制芽管生长。     

在牛胆汁中白色念珠菌芽管的形成

白色念珠菌在人成某些动物的血清中,37℃孵育2-3小时即形成芽管。但血清不能用通常的灭菌法(高压或蒸气灭菌)处理,因此难以保存。作者提出用蒸馏水1:5-1:10稀释的牛胆汁代替血清,试验了50株各种类型的念珠菌属酵母样真菌(白色念珠菌,热带念珠菌、假热带念珠菌,克柔氏念珠菌等)证实,在牛胆汁中只有白色念珠菌经过37℃孵育2小时,就形成芽管。其它类型真菌发生芽管时间均大大推迟。牛胆汁可用蒸气灭菌或用高压灭菌。用蒸馏水稀释30倍灭菌后的新鲜胆汁保存数月仍不影响其刺     

中药液应用于鉴定念珠菌的芽管试验

<正>白假丝酵母菌(也称为白色念珠菌)是临床常见的条件致病菌,常规鉴定该菌需做血清芽管试验。使用动物血清不利于临床操作,使用人血清则可能因血清来源的个体不同造成结果不稳定。     

洗衣粉-三氯化铁培养基快速鉴定白色念珠菌

形成芽管的能力是鉴定白色念珠菌的一个重要方法。我们利用表面活性剂的原理,以白猫牌洗衣粉-三氯化铁培养基培养白色念珠菌,能迅速形成芽管,达到快速鉴定目的。     

念珠菌性阴道炎576例菌种鉴定及药敏分析

念珠菌(现称假丝酵母菌)性阴道炎是最常见的外阴道感染性疾病[1],是妇科门诊和性病门诊的常见病和多发病。现将广西医科大学第四附属医院(即柳州市工人医院,下同)对576例霉菌性阴道炎患者菌种的鉴定结果和药敏分析报告如下。1临床资料1.1一般资料柳州市工人医院2007-01/2008-01妇科门诊送检的阴道分泌物,年龄18~58(平均38)岁。1.2方法1.2.1标本采集女性患者采用外阴常规消毒,用窥阴器扩张阴道,无菌棉拭子清理子宫口,再用一无菌棉拭子插入宫颈1cm处转动约10 s取出标本,直接涂片。另取一无菌棉拭子,放入无菌试管,立即送检培养。1.2.2直接显微镜检查涂片经革兰染色后镜检,显微镜下见到革兰阳性,圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝,可初步确认为假丝酵母菌感染。1.2.3分离培养和鉴定将标本接种在沙氏培养基上,25~30℃培养1~7 d后,培养基表面可出现奶油色类酵母型菌落,镜检可见假菌丝和芽生孢子。1.2.4芽管形成试验将假丝酵母菌接种于0.2~0.5 m l人或动物血清中,37℃孵育1.5~4 h,镜检观察有无芽管形成。白假丝酵母菌可形成芽管,其他假丝酵母菌一般不形成芽管。芽管试验是鉴定白色念株菌的...     

白色念珠菌抗体ELISA检测法及初步临床应用

测定血清中白色念珠菌(下称白念菌)甘露聚糖(Mannan)抗原,是白念菌病的早期特异的诊断方法,但敏感性较低。动物感染白念菌一周后即可产生保护性抗体,并随感染量、时间呈进行性递增。因而测定患者血清中白念菌抗体在临床上有诊断价     

白色念珠菌的几种快速鉴定方法

我们对白色念珠菌的鉴定,特别是有鉴别价值的芽管试验及微量培养,做了些摸索和改进,方法介绍如下.一、快速鉴定步骤(一)标本涂片,直接镜检或革兰氏染色镜检,可发现芽生孢子和菌丝.     

阿司匹林对白念珠菌生物膜的作用

目的了解阿司匹林对白念珠菌游离菌、芽管生成及生物膜的作用。方法微量平板法制备白念珠菌生物膜，加不同浓度阿司匹林，37℃培养，以活菌数判断其对白念珠菌游离菌和生物膜的作用。结果阿司匹林对白念珠菌游离菌MIC为0．78～1．56mmol／L；1mmol／L阿司匹林对不同时期白念珠菌生物膜均有抑制作用；0．4～0．8mmol／L阿司匹林对24h白念珠菌生物膜有抑制作用；1mmol／L的阿司匹林对白念珠菌芽管生成无抑制作用。结论阿司匹林对白念珠菌游离菌和生物膜有抑制作用，对芽管无抑制作用。     

荧光原位杂交法快速鉴定血培养中白念珠菌的方法学评价

目的：评价荧光原位杂交法(FISH)快速鉴定血培养中阳性的白念珠菌的应用价值。方法：当BacT／ALERT报警后。涂片革兰染色，若发现念珠菌，与针对白念珠菌的特异性探针杂交，同时将分离菌转种沙保罗培养基，比较2种方法的鉴定结果。结果：探针的特异性经15株标准菌株证实，分离到的36株念珠菌中，杂交法在3h内可全部得到鉴定结果，与培养法比较，杂交法的特异性和敏感性均为100％．结论：使用FISH可直接快速鉴定报警阳性血培养中的白念珠菌，结果可靠。     

血浆凝集试验在白色念珠菌与非白色念珠菌鉴别诊断中的应用

建立一种快速、灵敏、准确的白色念珠菌与非白色念珠菌的鉴别试验。采用芽管形成试验和厚膜孢子试验对试验菌株进行鉴定 ,再对鉴定过的试验菌株分别进行血浆 (包括正常人血浆和家兔血浆 )玻片凝集试验与试管凝集试验。 91株白色念珠菌中 ,血浆 (正常人和家兔 )玻片凝集试验的阳性率均为 97.8% ,血浆 (正常人和家兔 )试管凝集试验均为阴性 ;6 7株非白色念珠菌中 ,血浆 (正常人和家兔 )玻片凝集试验的阳性率均为 10 .4 % ,血浆 (正常人和家兔 )试管凝集试验均为阴性。血浆玻片凝集试验可作为一种快速、准确的白色念珠菌与非白色念珠菌的鉴别试…     

293例妊娠妇女阴道念珠菌病的病原学特征及耐药率分析

目的通过对妊娠妇女阴道念珠菌病患者阴道分泌物进行直接镜检、分离培养鉴定及体外药敏试验来了解妊娠妇女阴道念珠菌病的病原学特征及其对常用抗真菌药物的敏感性。方法采用超高倍显微镜对患者阴道分泌物进行直接镜检。用科玛嘉念珠菌显色培养基和Vitek60全自动微生物鉴定仪对分离的念珠菌进行菌种鉴定，并采用Rosco纸片扩散法进行体外抗真菌药物敏感试验。结果共分离出293株念珠菌，其中自念珠菌217株、光滑念珠菌48株、热带念珠菌24株、克柔念珠菌1株、近平滑念珠菌3株。药敏试验结果显示对氟康唑的耐药率分别为5．07％、31．25％、20．83％、100．00％、33．33％。所有菌株均对两性霉素B和制霉菌素敏感。结论目前阴道念珠菌感染仍以白念珠菌感染为主，但其他非白念珠菌感染有明显上升趋势。分离的白念珠菌对唑类抗真菌药物仍较敏感，非白念珠菌对唑类药物的耐药率有所上升，应加强念珠菌的检测和药物敏感性分析。     

048三种商品系统用于鉴定临床实验室常见酵母菌的对比研究

念珠菌引起的真菌感染是免疫低下患者院内感染的重要原因。传统的鉴定念珠菌方法冗长耗时 ,从而促进在 4～ 72ｈ鉴定致病菌的商品系统发展。ＲａｐＩＤ酵母系统是在 4ｈ内鉴定酵母菌的微量方法 ,许多研究比较了常规方法或ＡＰＩ 2 0同化测定 ,但ＲａｐＩＤ酵母鉴定系统与ＡＰＩ 2 0系统和Ｖｉｔｅｋ酵母生化鉴定一起比较尚未见资料报告。作者共研究 2 10株酵母菌包括白念 ,热带念珠菌 ,光滑球拟酵母 ,近平滑念珠菌 ,克柔念珠菌 ,新隐球菌 ,葡萄牙念珠菌 ,深红酵母 ,酿酒酵母。常规鉴定为参考方法 ,商品化系统鉴定与参考方法鉴定一致则被认为…     

在普通微生物实验室中5分钟鉴定白色念珠菌

本文介绍了一种新的鉴定白色念珠菌的方法——Albistrip 法。它利用白色念珠菌(白念)初次培养物可产生足够量的酶来进行鉴定。Albistrip是附有两条滤纸的塑料片,一条滤纸浸有对—硝基苯胺—脯氨酸(PRO),另一条浸有4—甲基伞形酮—N—乙酰—β—半乳糖苷(NAG)。标本接种     

外阴阴道念珠菌病患者菌群调查及其ERG5基因突变研究

目的?了解外阴阴道念珠菌病（VVC）患者白念珠菌分离及ERG5基因突变情况。方法?收集无锡市妇幼保健院2018年6—12月妇产科门诊VVC患者阴道分泌物500例，通过镜下观察菌丝及孢子选取可疑标本，经沙保弱琼脂平板增菌后接种科玛嘉显色平板，进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）鉴定；用真菌快速培养鉴定药敏试剂盒对白念珠菌进行药敏试验；PCR扩增部分白念珠菌ERG5基因并进行测序分析。结果?显色平板鉴定结果显示，VVC病原以白念珠菌最多（54.7%），其次为光滑念珠菌（22.5%）、热带念珠菌（16.5%）、克柔念珠菌（4.2%）和其他真菌（2.1%）；156株显色平板鉴定结果为白念珠菌的菌株中，经MALDI-TOF MS鉴定为白念珠菌共155株。155株白念珠菌对5-氟尿嘧啶均敏感，对各类唑类药物呈现不同水平耐药性；对7株（3株唑类药物耐药菌株，3株唑类药物敏感菌株和1株质控菌株）进行ERG5扩增测序，检出2个突变位点（1个同义突变位点G528A，1个错义突变位点G528C）。结论?外阴阴道念珠菌以白念珠菌为主，并对各类唑类药物表现出不同的耐药率，耐药菌株中ERG5基因在G528C位点突变可能与耐药有关。     

白念珠菌烯醇化酶重组蛋白质的制备及鉴定

目的 制备具有高免疫原性的白念珠菌重组烯醇化酶蛋白质。 方法 以白念珠菌C1标准株基因组DNA作为模板,用PCR法扩增烯醇化酶的全长DNA序列,以pET28a(+)为载体,构建重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导重组融合蛋白质表达。用抗his标签的单克隆抗体和白念珠菌抗体阳性的病人血清进行western blot鉴定,亲和层析柱纯化重组蛋白质。 结果 获得了含白念珠菌烯醇化酶全长基因的重组表达载体和相应工程菌株,经IPTG诱导后能高效表达重组融合蛋白质。经已含抗体的病人血清进行western blot鉴定,表明诱导的重组蛋白质有良好的免疫原性。 结论 成功克隆了白念珠菌烯醇化酶全长基因并在大肠埃希菌中获得高效表达;重组蛋白质具有良好的免疫原性。     

用噬菌体模拟抗原检测白念珠菌菌丝蛋白抗体的研究

目的 用噬菌体展示文库技术制备白念珠菌菌丝蛋白模拟抗原，建立测定白念珠菌抗体的酶联免疫吸附测定法（ELISA）。方法 用抗白念珠菌菌丝蛋白P47的单克隆抗体从噬菌体随机12肽库中筛选能与之免疫学结合的肽，即模拟抗原表位。将该模拟抗原包被微孔板，用于酶联免疫吸附测定法测定病人血清白念珠菌菌丝蛋白抗体。结果 用噬菌体模拟抗原建立ELISA，其敏感性、特异性及重复性良好，测定了10份确诊白念珠菌侵袭性感染的病人血清，全部阳性，与用纯化的菌丝蛋白抗原P47测定结果一致；服用免疫抑制剂患者血清阳性率33％，健康人群阳性率为2％。结论 用抗白念珠菌菌丝蛋白单克隆抗体从噬菌体展示随机肽库筛到的噬菌体模拟抗原可代替白念珠菌P47抗原进行抗体测定。     

白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p的原核细胞表达及鉴定

摘要：目的：原核细胞表达白念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段Set1-208p,鉴定重组蛋白质的抗原性。 方法：用比对软件对白念珠菌H3K4甲基转移酶与其他物种甲基转移酶进行比对。选择与人类无同源性的抗原特异性片段,以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板,PCR扩增Set1-208p的编码基因,以pET28a (+) 为载体,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白质表达。用抗His标签的单克隆抗体鉴定融合蛋白,并用确诊侵袭性白念珠菌感染（IC）患者血清进行抗原性鉴定。 结果：成功克隆了白念珠菌抗原特异性H3K4甲基转移酶片段Set1-208p基因并诱导表达,获得了纯化的重组肽段,所得蛋白质分子量（Mr）约为29 000,带有His标签,经western blot鉴定,诱导的重组蛋白可与IC患者血清特异性反应。 结论：成功诱导表达了具有良好抗原反应性的Set1-208p重组蛋白质,为建立相应的抗原、抗体ELISA检测方法提供基础。