肉桂醛或柠檬醛调控酵母生长对谷胱甘肽合成的影响

酵母细胞中,合成的谷胱甘肽(glutathione,GSH)通常不能有效分泌,限制了GSH的过量合成;实验考察了酵母培养过程添加肉桂醛、柠檬醛对GSH合成能力的影响。研究发现向发酵培养基中加入一定浓度的肉桂醛、柠檬醛后,酵母细胞生长受到抑制,但细胞分泌GSH能力提高,将调控培养细胞用于酶催化合成GSH,结果显示,经过45μg/mL肉桂醛或100μg/mL柠檬醛调控的细胞,其合成GSH总量相较未处理细胞分别提高了59.3%和46.3%。采用优化发酵策略:葡萄糖初始浓度45 g/L,装液量70 mL/250 mL,震荡培养24h后补加25 g/L葡萄糖,静态培养12 h,其间结合添加肉桂醛和柠檬醛对细胞生长进行调控,发现经45μg/mL肉桂醛或100μg/mL柠檬醛调控后的细胞,其合成GSH总量分别达到580 mg/L和551 mg/L,相较未处理细胞分别提高了107%和96.8%。     

耦合吸附树脂对细胞酶法合成谷胱甘肽的影响

通过静态吸附-解吸试验从3种吸附树脂中筛选出最适合分离谷胱甘肽（GSH）的树脂,将其与酵母渗透细胞耦合,通过补加前体物质,酶法合成GSH。结果表明,在试验的3种树脂中,D301吸附效果最佳。采用单因素和正交试验法,确定酶法合成GSH的优化工艺为：反应2.0 h后添加树脂2.0 g/10 mL,反应3.0 h时补加60%初始浓度的前体物质,最终得到GSH产量1 154 mg/L,与未添加树脂和前体合成法相比GSH产量提高77.5%。     

酶法合成生物表面活性剂

总结了外源酶催化法和整胞微生物代谢法合成生物表面活性剂的特点,并将外源酶催化法对整胞微生物代谢法及传统化学合成法的优势进行了比较.详细介绍了单甘酯、糖酯、(溶血)磷脂、纯异头烷基糖苷和氨基酸型表面活性剂等生物表面活性剂的酶催化合成方法及其研究进展;展望了酶工程的进步、化学 酶催化技术进展、外源多酶联合催化技术的开发与应用、酶膜反应器和其它连续酶反应器的开发,以及反应 分离耦合技术在酶催化过程中的应用将给酶法合成生物表面活性剂带来的机遇.     

酵母菌谷胱甘肽合成能力比较及催化条件优化

试验收集培养了9株酵母菌,分别测定他们的细胞生物量和胞内谷胱甘肽(GSH)含量,酿酒酵母SP004细胞干重达到11.39g/L,啤酒酵母TS013胞内GSH含量达到1.5282mg/g湿细胞;验证考察了4种不同提取方法对细胞内GSH含量测定的影响,结果表明,温差破碎法提取效果较好.同时比较9株酵母菌催化合成GSH的能力,结果显示,絮凝酵母SP5 GSH合成酶活力相对较高,酶活达到2.385mg/g湿细胞,每克湿细胞催化前体氨基酸(AA)合成GSH转化率为7.76％.用单因素试验和正交试验分析法研究不同反应液体积与菌体量比、硫酸镁浓度、磷酸钾缓冲液浓度以及葡萄糖浓度对絮凝酵母SP5细胞催化前体AA合成GSH的影响,结果表明,合成GSH的适宜条件为:谷氨酸60mmol/L、半胱氨酸20mmol/L、甘氨酸20mmol/L、七水合硫酸镁20mmol/L、葡萄糖0.5mol/L、pH值为7.0磷酸钾缓冲液100mmol/L,30℃下,160r/min,振荡反应时间6h.在此条件下,絮凝酵母SP5细胞GSH合成酶活力平均达到2.9498mg/g湿细胞,每克絮凝酵母SP5湿细胞催化前体AA合成GSH的转化率平均为9.60％.     

微生物酶法合成低聚糖的问题与策略

主要讨论利用微生物酶法合成低聚糖所存在的相关问题及其策略,涉及酶法合成低聚糖的酶源、底物特异性、副反应以及工艺技术等,旨在促进相关研究以增加酶法合成低聚糖的品种、提高底物转化率和产品规格。     

透性化处理对酵母细胞谷胱甘肽分泌能力的影响

酵母细胞一般具有谷胱甘肽(GSH)的合成能力和储存稳定性。为了考察和促进酵母细胞的GSH分泌能力,实验研究了低p H胁迫、冻融、细胞干燥、渗透压冲击和有机溶剂等透性化处理对酵母细胞膜通透性的影响。结果显示:冻融法对酵母GSH的胞外分泌作用效果不明显;低p H胁迫、细胞干燥、渗透压冲击和有机溶剂处理都能一定程度地改变酵母细胞膜通透性,促使GSH分泌到细胞外,其中低p H胁迫和渗透压效果不稳定,有机溶剂处理效果最好。在细胞酶催化前体氨基酸合成GSH的反应液中加入8%(v/v)的丙酮,酶催化合成48 h,GSH总产量达到551 mg/L,比对照组提高了51%,表明合适的透性化处理能够促进酵母细胞内GSH的胞外分泌和积累。      

离子液体中酶法催化合成糖酯的研究进展

离子液体作为一类极具有发展潜力的绿色溶剂,其用于酶催化反应介质有着传统有机溶剂和功能性离子液体无法超越的优势。综合对国内外近十几年公开发表的有关离子液体中酶法催化合成糖酯的文献,从常见离子液体分类,离子液体对酶活性、稳定性和选择性的影响,以及糖酯酶法催化合成的方法及研究现状进行了归纳与总结,同时指出了今后在离子液体中糖酯酶法催化合成领域值得研究的重要内容。      

碳氮源对酶法合成L-半胱氨酸的影响

以假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138为供试菌株,研究了在酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸中碳氮源对酶源细胞酶活力的影响,确定了在产酶培养基中最适的碳源是葡萄糖,最适加入量为4.0%;最适的氮源是酵母粉、蛋白胨和尿素的组合,最适加入量分别是蛋白胨1.0%,酵母粉1.5%,尿素0.3%,酶源细胞的酶活力达到2679 U·mL-1.     

温和压力对面包酵母CICC1447谷胱甘肽合成的影响

研究了保压时间、压力和升降压速率对面包酵母CICC1447谷胱甘肽(GSH)生物合成能力的影响。以高纯空气(O2∶N2=21∶79)为加压介质,通过单因素实验确定了最优加压条件。实验结果表明,在温和压力刺激条件下酵母菌受可产生应激性反应。谷胱甘肽在最适条件(保压时间6 h、压力0.5 MPa、升降压速率0.05 MPa/min~0.10 MPa/min)下的最大产量比常压下提高了17.21%。结果表明温和压力可以提高微生物重要应激产物谷胱甘肽的产量。     

气调贮藏对猕猴桃抗坏血酸-谷胱甘肽代谢的影响

为探讨气调贮藏调控猕猴桃采后衰老的可能机理。以空气比例(20.9%O2+0.04%CO2)为对照,研究了不同气体成分[CA1(2%O2+3%CO2)、CA2(2%O2+6%CO2)、CA3(5%O2+3%CO2)、CA4(5%O2+6%CO2)]对采后‘红阳’猕猴桃可溶性固形物(SSC)、可溶性总糖、淀粉、可滴定酸(TA)、抗坏血酸(ASA)和谷胱甘肽(GSH)含量,自由基(DPPH、超氧阴离子)清除能力及抗坏血酸-谷胱甘肽循环相关酶活性的影响。结果表明:较普通冷藏和其它气体成分相比,CA1(2%O2+3%CO2)处理可抑制果实SSC、可溶性总糖含量的增加,减缓淀粉、TA含量的下降。另外,CA1、CA2和CA3处理可提高猕猴桃的谷胱甘肽和抗坏血酸含量,减缓果实自由基清除能力和抗坏血酸-谷胱甘肽循环相关酶活性的下降,其中CA1处理的效果最明显。因此,2%O2+3%CO2对‘红阳’猕猴桃衰老的抑制作用与其维持果实中较高的ASA和GSH有关。     

利用变温提高汉逊酵母发酵生产谷胱甘肽的研究

依据温度对细胞代谢过程的影响,建立了一种提高谷胱甘肽（Glutathione,GSH）产量的方法。通过单因素实验确定了多形汉逊酵母DL-1的最适生长温度、GSH合成的最佳温度和培养基初始pH分别为30、37℃和pH6.5;接着,通过变温调控分批发酵,确定最佳变温条件为:45℃培养16h后将温度降低为37℃继续培养32h,采用该方法摇瓶发酵后GSH总量及GSH含量分别为420.76mg/L和105.19mg/g,比恒温培养（37℃）分别提高了2.34倍和1.27倍,即胞内GSH积累幅度显著升高;最后,通过5L发酵罐扩大培养,生物量和GSH总量分别达42.35g/L和927.68mg/L。实验结果表明该方法可用于提高利用多形汉逊酵母的GSH产量。      

Changes in glutathione content in human hair follicle keratinocytes as a function of age of donor: relation with glutathione dependent enzymes

Glutathione (GSH) plays an important role in cellular protection during ageing. The hair plucking technique is a non-invasive method for the direct biochemical study of keratinocytes. Hair was taken from the suboccipital area of 63 volunteers (men and women whose ages ranged from 13 to 103 years). The results show a diminution in the glutathione content as a function of age. We compare two groups of population: group A (less than 80) and group B (more than 80). A remarkable fact is observed: group B displays a weak dispersion of the values as compared to A. The glutathione content (nmol 10⁻³ mg DNA) is 5.42 ± 0.60 for A and 1.86 ± 0.35 for B. A reduction of 88% was observed in glutathione reductase activity and of 78% in the activity of glutathione-S-transferase from group A to group B. The glutathione peroxidase activity remains relatively constant. The decrease in the GSH concentration and the constancy of the glutathione peroxidase suggest that the capacity of the cell to protect itself from peroxides remains unchanged but that the GSH concentration may become the limiting factor.     

棉织物精练中温度对酶催化效率的影响

为了提高棉织物中酶精练对非纤维素杂志的去除效果,考察了温度对酶精练催化效率的影响。发现,在一定温度范围内,精练时温度对各种酶催化效率影响重大,催化效率最高时的温度远高于酶的最适反应温度。通过研究不同温度时棉织物对碱性纤维素酶的吸附量、蜡质的熔点及蜡质含量对纤维素酶去除棉籽壳的效率的影响,分析认为这与棉纤维表层结构和化学组成有很大的相关性,并据此讨论了酶精练中温度对酶催化效率的影响机制。     

酶法合成甘油二酯的研究进展

介绍了脂肪酶催化合成甘油二酯的工艺及其所用固定化酶反应器的研究进展。     

环境因子对发酵液中谷胱甘肽稳定性的影响

利用酵母生产还原型谷胱甘肽（GSH）时,GSH的稳定性直接影响细胞酶催化合成GSH的效率。在絮凝酵母摇瓶发酵培养24 h时,模拟胞外存在GSH的环境,向发酵液中添加200 mg/L的GSH,考察胞内外GSH稳定性情况;同时检测环境因子氧、温度、pH,以及金属离子（Zn2+、Mn2+、Cd2+）对胞内外GSH稳定性的影响。结果表明：正常环境条件下培养6 h,发酵液中GSH的回收率达到70%,导致GSH不稳定的主要因素是氧化,细胞内GSH浓度相对变化不明显;在温度≤25 ℃,pH3.5～4.5和厌氧发酵条件下,发酵液中GSH稳定性显著提高(P＜0.05);Zn2+、Mn2+和Cd2+对GSH稳定性影响不明显(P＞0.05)。     

谷胱甘肽添加对贮藏猕猴桃酒香气成分的影响

在以徐香猕猴桃为原料酿造得到的猕猴桃酒中,分别添加25 mg/L和50 mg/L的谷胱甘肽,以不添加谷胱甘肽的猕猴桃酒为对照组,4℃条件下密封贮藏6个月后取样测定各样品的香气成分,分析贮藏后猕猴桃酒香气成分的变化以及添加谷胱甘肽对贮藏猕猴桃酒香气成分的影响。采用顶空固相微萃取（SPME）法进行猕猴桃酒香气成分提取,通过气相色谱-质谱（GC-MS）进行猕猴桃酒香气成分分析。结果表明:从猕猴桃酒中共检测出42种香气成分,主要包括醇类、酯类、酸类以及萜烯类和C₁₃-降异戊二烯衍生物。贮藏6个月后猕猴桃各类香气总量均产生逸散,然而与贮藏后的对照组样品相比,谷胱甘肽添加处理的猕猴桃酒特征香气保持效果更好,香气物质总量更高,25 mg/L和50 mg/L的谷胱甘肽的添加分别可以降低6.68%和46.24%的香气损失,说明谷胱甘肽在猕猴桃酒贮藏阶段的添加更有益于猕猴桃酒的贮藏。      

外源性氧化胁迫对酿酒酵母突变株Y518合成谷胱甘肽的影响

利用外源过氧化氢对酿酒酵母突变株Y518进行氧化胁迫来研究外源性氧化胁迫对Y518合成谷胱甘肽的影响。结果表明:添加过氧化氢会抑制Y518细胞生长,但会促进其合成谷胱甘肽;当过氧化氢的添加时间为24h,添加量为0.6mmol/L时,Y518胞内谷胱甘肽含量达到(13.69±0.28)mg/g,比未添加过氧化氢时提高了约14%;在24h时添加0.6 mmol/L过氧化氢会对Y518产生外源性氧化胁迫,激活转录调节子YAP1和SKN7调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶编码基因GSH I和GSH II的表达,提高γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶的活力,以促进Y518合成谷胱甘肽。因此,添加外源过氧化氢能够使酿酒酵母突变株Y518产生外源性氧化胁迫,促进Y518进一步合成谷胱甘肽。     

前体氨基酸对热带假丝酵母产谷胱甘肽的影响

以能利用木糖发酵产谷胱甘肽(GSH)的热带假丝酵母突变株CV26为实验菌株,分别研究了添加L-半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸3种前体氨基酸对CV26产GSH的影响。在单因素实验基础上,对3种前体氨基酸的添加进行了正交实验,结果表明:在GSH发酵的12h添加6mmol/L的甘氨酸和2mmol/L的谷氨酸,24h添加3mmol/L的L-半胱氨酸,GSH的产量和胞内含量都有较大的提高,分别达到149.28mg/L和20.43mg/g,比对照组分别提高了51.5%和57.8%。