葡萄糖氧化酶膜过滤发酵工艺的研究

在葡萄糖氧化酶发酵过程中，配以外置式的膜过滤系统进行膜过滤发酵、可减缓发酵过程中产物及分解代谢物对酶合成的阻遏和抑制作用，使酶产率增加。实验结果表明；膜过滤发本酵的产物速度高达４．１４０×１６．６７μｍｏｌ／ｓ．ｈ，比人批发酵高３倍以上，且能在较长时间内维持较高的酶产率。     

葡萄糖氧化酶发酵工艺的研究

本文通过摇瓶实验确定了自选青霉菌株Ｚ—Ｉ—Ｃ分批发酵生产葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）的适宜工艺条件，并在２．６立升台式发酵罐中进行了小试，监测了发酵过程中溶氧（ＤＯ）、ｐＨ、还原糖、菌体干重（ＤＣＷ）、氨基氮（ＮＨ２－Ｎ）和酶活等工艺参数的变化规律，为进一步提高ＧＯＤ的发酵产率提供了依据。     

葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶的生物合成

研究了黑曲霉细胞的生长及其葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶的生物合成．ＣａＣＯ３是２种酶的产酶诱导因子,其产酶模式都是延续合成型,最大比生长速度μｍａｘ、菌体得率Ｙ（Ｘ／Ｓ）、葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶合成得率Ｙ（ＧＯＤ／Ｓ）、Ｙ（ＣＡＴ／Ｓ）分别为０．０９７ｈ－１、０．０７５ｇ．ｇ－１、２９．３４μｍｏｌ·ｍｉｎ－１·ｇ－１、３８９．１７μｍｏｌ·ｍｉｎ－１·ｇ－１．也研究了各种物质对葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶活力的影响,金属离子对葡萄糖氧化酶有抑制,阴离子对葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶有抑制,还原性小分子化合物是葡萄糖氧化酶的激活剂     

葡萄糖氧化酶发酵动力学的研究

利用恒化器研究了葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）发酵动力学，建立了较为合理的恒化培养系统。对采集的数据用计算机进行回归，求得最大比生长速率μｍａｘ＝０．２２５ｈ－１、饱和常数Ｋｓ＝８．９１ｇ／Ｌ、基质得率系数ＹＧｍａｘ＝０．４９ｇ／ｇ以及维持系数ｍ＝０．０２ｇ／ｇ·ｈ。并研究了ｐＨ、ＤＯ、ＮＨ２－Ｎ、葡萄糖酸、细胞产率，酶比活及体积产酶速率等参数随比生长速率变化的规律。在Ｄ＝０．１３１ｈ－１下体积产酶速率（ＤＥ）达最大值，为３．４６×１６．６７μｍｏｌ／ｓ·Ｌ·ｈ，是分批发酵最大体积产酶速率（１．５３×１６．６７μｍｏｌ／ｓ·Ｌ·ｈ）的２．２６倍。     

螺旋霉素的生物合成——Ⅲ.溶氧对螺旋霉素发酵的影响

本文考查了螺旋霉素发酵过程中溶氧的变化规律,不同溶氧水平对螺旋霉素发酵的影响,各种前体、混合碳源、氮源等对溶氧变化和发酵单位的影响。试验结果表明:在使用混合碳源下,溶氧在发酵过程中一般会出现3次低谷;溶氧水平在发酵前期一般维持在10～40%,后期维持在40～70%空气饱和度的水平,溶氧过高或过低均不利于螺旋霉素的生物合成;前体中乙酸钠有提高发酵单位的作用。比较不同比例的混合碳源发现,淀粉∶葡萄糖=5.5～6.5∶1时发酵中后期的呼吸仍较强,其溶氧水平在50～60%,混合碳源中含乳糖或蔗糖时发酵中、后期呼吸减弱,溶氧水平在75%以上。比较不同菌种的生产能力时也发现,中、后期呼吸减弱的,发酵单位低。发酵培养基中加适量油,可降低糖耗1/3,提高发酵单位42%。     

磷酸盐和剪切力对螺旋霉素生物合成的影响

文题试验结果表明，磷酸盐（Ｐｉ）过高固然有利于细胞生长，不利于螺旋霉素（ＳＰＭ）合成，但过低对生产也不好。发酵过程中补入适量Ｐｉ能显著提高细胞菌体的生产能力。根据静息细胞试验结果推测，Ｐｉ具有缓解过量葡萄糖或氨离子（ＮＨ）对ＳＰＭ合成的阻遏作用；能减少ＳＰＭ对其自身合成的反馈抑制，促进己糖和大环内酯的合成以及它们之间的连接。摇瓶发酵结果表明，单次补Ｐｉ的时间以发酵７２ｈ最有利，分二次补时以４２ｈ和８６ｈ最好，补入的Ｐｉ量以０．０５％～０．１％为宜。试验中还发现，ＳＰＭ发酵对剪切力很敏感，搅拌转达过高或摇瓶中加入玻璃珠会导致ＳＰＭ效价为零。     

黑曲霉中提取葡萄糖氧化酶的探索 Ⅰ.葡萄糖氧化酶合成及其性质

多次筛选培育获得含有较高活力葡萄糖氧化酶的黑曲霉菌株ＺＢＹ－７,在原有培养基条件的基础上,研究了培养时间、培养温度、ｐＨ、中和剂的浓度对生产葡萄糖氧化酶影响．并进一步对细胞浸出液的葡萄糖氧化酶性质进行研究．实验结果表明：胞外葡萄糖氧化酶含量远远低于胞内酶．     

黑曲霉中提取葡萄糖氧化酶的探索：I.葡萄糖氧化酶合成及 …

多次筛选培育获得含有较高活力葡萄糖氧化酶的黑曲霉菌株ＺＢＹ－７，在原有培养基条件的基础上，研究了培养时间，培养温度，ｐＨ，中和剂的浓度对生产葡萄糖氧化酶影响，并进一步对细胞浸出液的葡萄糖氧化酶性质进行了研究，实验结果表明，胞外葡萄糖氧化酶含量远远低于胞内酶。     

阿维菌素发酵过程有机酸积累规律与生物合成的关系

对S．avermitilis发酵过程茵体胞内与胞外的几种有机酸浓度进行跟踪测定。通过与产素关联发现低产批次与高产批次有机酸积累有明显不同。低产批次胞内丙酮酸浓度高迭31．6mg／L,此后降至5mg／L以下,而胞外在80h后都开始出现积累;乙酸、柠檬酸与琥珀酸一直都大量出现在胞外,如柠檬酸胞内胞外浓度比值初期低于0．1。这体现出生长期延长以致与产素期重叠过多造成产素偏低。     

静息细胞培养系统中葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶的生物合成

黑曲霉发酵生产葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）及过氧化氢酶（ＣＡＴ）受许多因素的影响［１］．弄清楚这些因素究竟是直接对酶的生物合成起作用,还是通过影响细胞的生长,间接对酶合成起作用,用发酵法是难以判断的;但是研究清楚这些因素的可能机制,对指导该酶的发酵生产及研...     

葡萄糖氧化酶的膜透析发酵工艺研究

用膜透析法可减缓发酵过程中代谢物对葡萄糖氧化酶生物合成的阻遏作用。初步研究结果表明，带膜透析的发酵其产酶速率比对照（不带透析的发酵）高一倍，总产量提高３０－５０％。膜发酵过程中ＰＨ、ＮＨ２－Ｎ的变化较对照平缓。对透析条件也作了初步摸索。     

用静息细胞培养法研究L－谷氨酸氧化酶的生物合成

建立了静息细胞培养系统，并以此研究了Ｌ－谷氨酸氧化酶生物合成的影响因素。结果表明，发酵１６ｈ的菌体在有诱导物情况下有酶的合成，无诱导物则无酶的合成，发酵４０ｈ的菌体在有、无诱导物的条件下均有酶的合成。对发酵１６ｈ的菌体研究表明：β－丙氨酸（Ⅰ）、α－酮戊二酸（Ⅱ）、丙酮酸钠（Ⅲ）是酶合成的诱导物，谷氨酸（Ⅳ）则不是。而对发酵４０ｈ菌体而言：ＭｇＣｌ＿２，ＣａＣｌ＿２能促进酶的合成；Ⅰ不能作氮源利用；Ⅰ～Ⅳ均具有高浓度抑制产酶、低浓度促进产酶的双重作用。     

金纳米颗粒修饰的固定化葡萄糖氧化酶酶膜制备

分别利用柠檬酸钠和NaBH4作为还原剂、以PVP作为包覆剂制备不同类型、不同包覆情况的金纳米粒子,并用紫外可见分光光谱仪、透射电微镜等手段对制备的金纳米粒子的粒径、形貌和分散性进行表征。用金纳米粒子对葡萄糖氧化酶膜进行修饰,并在SBA生物传感分析仪上进行感应测量。研究结果表明,粒径小、分散性好的球状金纳米粒子可以极大地提高葡萄糖酶膜的灵敏度。     

纤维素固定化葡萄糖氧化酶的研究

用高碘酸钠（NaIO4)溶液将棉纤维素氧化成氧化纤维素,并将其作为载体使葡萄糖氧化酶能够固定化。考察了溶液的pH值、氧化时间、温度和氧化剂浓度等氧化条件对氧化纤维素醛基含量的影响,优化了氧化条件,研究了固定化葡萄糖氧化酶的活性,借助傅里叶红外光谱和酸－碱滴定法等手段,探讨了葡萄糖氧化酶的固定化机理。研究结果表明,纤维素固定化葡萄糖氧化酶具有较高的生物活性。     

葡萄糖生物传感器在有机介质中的特性研究

研究了β－环糊精与二茂铁主客体葡萄糖生物传感器在正丙醇、乙醇、乙腈三种有机溶液中的循环伏安响应特性,发现该传感器在有机溶液中的响应电流较缓冲溶液中增加;且有机溶液的浓度对传感器响应产生的影响,其最适百分比浓度分别为：正丙醇４０％,乙醇４５％,乙腈４０％;并探讨有机溶液对葡萄糖生物传感器产生影响的机理。     

营养物质及代谢产物对杂交瘤细胞生长的影响

研究了葡萄糖、谷氨酰胺、氨和乳酸对鼠鼠杂交瘤细胞G_5F_4生长的影响。实验发现,对于G_5F_4细胞,最适宜的葡萄糖和谷氨酰胺浓度范围分别为21～41 mmol/L和6～10mmol/L。乳酸是细胞生长的弱抑制剂,在正常培养产生的乳酸范围内(1.5～2.0 mg/InL),对细胞生长无明显抑制作用。氨是一种强抑制剂,其浓度在2.5～5.0mmol/L内,表现出较明显的抑制作用;当其浓度超过5.0 mmol/L时,有严重的抑制作用,细胞生长基本停止。     

螺旋霉素（SPM）膜透析发酵研究

本文采用膜透析法对SPM发酵工艺进行探讨。结果表明,经透析向发酵液提供新鲜基质,稳定了铵离子、葡萄糖浓度。同时除去了部分产物,减轻了碳、氮代谢物调节作用及终产物反馈调节作用,减少了微生物生长及产物合成的不稳定性。当透析膜孔为3.0μm,开始透析时间为60h,发酵液与透析液体积之比为1时,SPM总产增加50%。