软骨肉瘤WIF-1基因甲基化及Wnt-5a蛋白表达的临床病理意义

目的 研究软骨肉瘤中Wnt抑制因子-1基因(WIF-1)启动子区甲基化状态及Wnt-5a蛋白表达情况,探讨其临床病理意义.方法 应用甲基化特异性PCR(MSP)法及免疫组织化学SP法,检测61例软骨肉瘤和作为对照的40例软骨瘤组织中,WIF-1启动子甲基化及Wif-1和Wnt-5a蛋白的表达.结果 软骨肉瘤WIF-1基因甲基化阳性率和Wnt-5a蛋白表达阳性率均高于软骨瘤组(p＜0.05).软骨肉瘤中发生浸润转移者Wnt-5a蛋白阳性表达率高于未发生浸润转移者(P＜0.05).软骨肉瘤WIF-1基因甲基化与Wif-1蛋白表达下降及Wnt-5a蛋白过表达相关(Kappawif-1值为0.747,Pwif-1 ＜0.001;Kappawnt-5a值为0.468,Pwnt-5a＜0.05).结论 WIF-1基因甲基化可能在软骨肉瘤发生的早期起作用,软骨肉瘤Wnt-5a蛋白高表达与肿瘤的侵袭性呈正相关,WIF-1基因甲基化与Wnt-5a蛋白过表达在软骨肉瘤形成中可能存在协同作用.     

WIF－1 基因甲基化及Wnt－5a 蛋白在软骨肉瘤病人中表达的临床意义

目的: 研究WIF－1 基因甲基化及Wnt－5a 蛋白在软骨肉瘤病人中的表达情况,探讨二者在软骨肉瘤
病人中的临床意义。方法: 选取我院病理科2008－06 ～ 2012－06 收治的软骨肉瘤病人43 例,另选取软骨瘤病人
43 例作为对照。收集病人的病历资料及临床病理表现,通过甲基化特异性PCR检测法及免疫组织化学方法,监
测两组病人WIF－1 基因和Wnt－5a 蛋白表达情况。结果: 软骨肉瘤WIF－1 基因甲基化阳性率高于软骨瘤,比较
差异具有统计学意义( χ2 = 5． 658,#P= 0． 003) ; 软骨肉瘤Wnt－5a 蛋白表达阳性率高于软骨瘤,比较差异具有统
计学意义( χ2 = 4． 656,* P= 0． 006) 。黏液型软骨肉瘤Wnt－5a 蛋白表达阳性率明显高于普通型软骨肉瘤,差异
具有统计学意义( χ2 = 4． 941,#P= 0． 002) 。发生浸润转移的软骨肉瘤病人Wnt－5a 蛋白表达阳性率高于未发生
浸润转移的病人( χ2 = 4． 681,P= 0． 003) 。结论: WIF－l 基因的甲基化可能导致Wif－l 蛋白表达下降,在软骨肉瘤
早期作用; Wnt－5a 蛋白表达可能使肿瘤更具有侵袭性,二者可能存在协同作用。     

巢式甲基化特异性PCR检测不同类型组织标本中WIF-1基因启动子异常甲基化

目的:采用一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性PCR法(nested-MSP,nMSP),检测外科手术切除新鲜组织、石蜡包埋组织及纤维支气管镜活检组织中WIF-1基因启动子的异常甲基化状态。方法:将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,最后经凝胶电泳检测目的片段。结果:在3种类型的原发性非小细胞肺癌标本中都检测出了WIF-1基因启动子的异常甲基化。结论:巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化的分析。     

Aurora B激酶在软骨肉瘤中的表达及临床意义

目的:检测Aurora B激酶在软骨肉瘤中的表达及将其作为软骨肉瘤新的预后指标及分子治疗靶点的可行性.方法:用免疫组织化学SP法,研究软骨肉瘤(69例)和软骨瘤(39例)组织中Aurora B激酶的表达情况,并探讨Aurora B激酶的表达与软骨肉瘤各临床病理特征的关系.结果:Aurora B激酶在软骨肉瘤中的表达明显高于在软骨瘤中的表达,差异有统计学意义(P＜0.01);Aurora B激酶在软骨肉瘤普通类型低级别组的表达低于在中、高级别组的表达,差异有统计学意义(P＜0.01);Aurora B激酶在软骨肉瘤的复发组与非复发组、转移组与非转移组中的表达,差异也有统计学意义(P＜0.05),而与年龄、性别临床参数无统计相关性(P＞0.05).结论:Aurora B激酶可能通过某种机制参与软骨肉瘤的发生、发展过程,研究Aurora B激酶阳性表达可以作为软骨肉瘤预后预测的新指标及软骨肉瘤治疗的分子靶点.     

软骨肉瘤中P^27和P^16蛋白表达的临床意义

探讨Ｐ＾２７和Ｐ＾１６表达对软骨肉瘤诊断,分级和预后的临床意义。方法：分析Ｐ＾２７和Ｐ＾１６蛋白表达与良,恶性性软骨肿瘤和软骨肉瘤病理分级间以及与软骨肉瘤不同临床病理因素间的关系。     

颌骨软骨肉瘤中E2F—1表达及意义

目的分析E2F-1在颌骨软骨肉瘤中的表达及意义。方法利用免疫组化ABC法检测E2F-1在20例颌骨软骨肉瘤和8例骨软骨瘤中的表达。结果软骨肉瘤中E2F-1的阳性表达率为65％(13/20),病理学分级间阳性表达率差异无显著性(P>0.05),原发与复发病例的阳性表达率差异无显著性(P>0.05);在骨软骨瘤中的阳性率为12.5％(1/8),与软骨肉瘤相比差异有显著性(P<0.05)。结论E2R1在颌骨软骨肉瘤中过表达并可作为癌基因标志之一。     

肝细胞癌患者癌组织中RASSF1A和WIF-1基因甲基化的临床意义

目的 观察肝细胞癌患者癌组织中RASSF1A基因甲基化状态的临床意义,阐明WIF-1基因甲基化在肝细胞癌发生发展中的作用.方法 97例肝细胞癌患者手术切除癌组织蜡块标本为肝细胞癌组,随机留取26例手术切除肝细胞癌旁肝硬化组织蜡块标本为肝硬化组.两组标本经蜡块组织DNA提取、亚硫酸盐甲基化修饰,并采用甲基化特异性PCR法对抑癌基因RASSF1A和WIF-1进行目的片段的扩增,扩增产物通过电泳凝胶成像系统进行甲基化结果分析判定;根据患者术前实验室检测是否感染HBsAg,将肝细胞癌组细分为HBsAg阳性组及HBsAg阴性组,分析抑癌基因RASSF1A和WIF-1甲基化的意义.结果 RASSF1A基因甲基化率肝细胞癌组(67.01％)高于肝硬化组(42.31％),差异有统计学意义(P=0.021);WIF-1基因甲基化率肝细胞癌组(46.39％)高于肝硬化组(7.69％),差异有统计学意义(P＜0.05);肝细胞癌组中抑癌基因RASSF1A和WIF-1基因甲基化表达均阳性为35.05％,肝硬化组为7.69％,差异有统计学意义(P=0.006).HBsAg阳性肝细胞癌组RASSF1A基因的甲基化阳性率(72.84％)高于HBsAg阴性组(23.08％),差异有统计学意义(P=0.001);WIF-1基因在HBsAg阳性(44.44％)和阴性肝细胞癌组(53.84％)差异无统计学意义(P =0.528).肝细胞癌患者RASSF1A和WIF-1基因的甲基化状态与生存率比较差异无统计学意义(P=0.735,P=0.229).结论 肝细胞癌患者癌组织较肝硬化组织RASSF1A,WIF-1基因甲基化率高,提示抑癌基因RASSF1A和WIF-1的甲基化在肝细胞癌的发生中起到一定作用.     

Wnt-1蛋白和β-catenin在卵巢癌中的表达及意义

目的 研究Wnt-1蛋白及β-连环蛋白(β-catenin)在卵巢上皮癌中的表达情况,探讨二者在卵巢癌发生发展中的作用及意义.方法 应用免疫组织化学技术(S-P法)检测60例卵巢癌、24例卵巢上皮良性肿瘤以及26例正常卵巢上皮组织的石蜡包埋组织中Wnt-1蛋白和β-catenin的表达情况.结果 Wnt-1蛋白在卵巢癌组织组中表达水平分别与卵巢上皮良性肿瘤组和正常卵巢上皮组织组相比,差异有显著性(P<0.05);β-catenin在卵巢癌组织组中的异位表达水平显著高于正常卵巢上皮组织组,并有统计学意义(P<0.05);β-catenin与卵巢癌的组织学分型及分化程度具有相关性(P<0.05).结论 Wnt-1蛋白和β-catenin的表达可能对卵巢癌的演变过程起到作用,为卵巢癌的靶向治疗提供理论依据和参考.     

急性白血病患者WIF-1基因启动子甲基化及β连环蛋白表达的研究

目的 探讨急性白血病(AL)患者Wnt抑制因子1(WIF-1)基因启动子甲基化及β连环蛋白(β-catenin)的表达在白血病中的意义.方法 采用甲基化特异性PCR检测山东大学附属千佛山医院2009年1月至2010年6月55例AL患者及对照组骨髓单个核细胞WIF-1基因启动子甲基化情况,流式细胞术检测AL患者及对照组骨髓单个核细胞β-catenin表达.结果 32.7％(18/55)的AL患者WIF-1基因启动子区域有异常甲基化,对照组末检测到WIF-1基因甲基化,两组差异有统计学意义(P＜0.05).甲基化组首次诱导治疗完全缓解率(38.9％,7/18)低于非甲基化组(81.1％,30/37),差异有统计学意义(P＜0.05).甲基化组与非甲基化组β-catenin的表达(17.5％±3.3％、15.4％±3.6％)均高于对照组(10.5％±1.5％,均P＜0.05);甲基化组β-catenin的表达高于非甲基化组(P＜0.05).结论 WIF-1基因启动子甲基化及β-catenin过表达可能参与了AL患者Wnt/β-catenin途径的异常激活.     

肝癌细胞中WIF-1的甲基化状态分析

目的探讨WIF-1基因在肝癌细胞中的甲基化状态及其与蛋白表达的关系,并初步研究了WIF-1与肝癌发生发展的关系。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)和测序方法分析了9种肝癌细胞系中WIF-1启动子区的甲基化状态,用RT-PCR检测了其mRNA的表达。用去甲基化药物5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理肝癌细胞株并分析其mRNA和蛋白的表达的变化。结果6种肝癌细胞中检测到异常的甲基化,甲基化率为66.7%。在用5-Aza-CdR处理细胞后,WIF-1表达缺失的肝癌细胞系不同程度地恢复了表达。MTT法分析发现WIF-1对SMMC-7721(7721)细胞生长有较为显著的抑制效果。结论推断WIF-1启动子区频繁甲基化的现象可能是它在肝癌中表达沉默的主要机制,并在肝癌的发生发展起作用。     

胰腺癌组织中Kail蛋白的表达及其临床意义

①目的　了解Kail蛋白在胰腺癌组织中的表达及其意义。②方法　应用免疫组织化学方法 ,检测 12例正常胰腺和 4 7例胰腺癌组织中Kail蛋白的表达。③结果　正常胰腺组织中Kail蛋白阳性表达率为 83.3% ,明显高于胰腺癌组织中Kail蛋白阳性表达率 (χ2 =4 .0 8,P <0 .0 5 )。Kail蛋白阳性表达率与胰腺癌淋巴结和肝转移密切相关 (χ2 =5 .4 7、4 .83,P <0 .0 5 ) ,而与胰腺癌的侵袭能力、组织学分级和病人 1年生存率无关 (χ2 =3.14～ 3.5 8,P >0 .0 5 )。④结论　Kail蛋白异常表达在胰腺癌的转移中起重要作用     

急性白血病病人骨髓细胞BAALC基因表达及意义

目的通过检测脑和急性白血病胞质(BAALC)mRNA在急性白血病(AL)病人表达,探讨其与AL病情进展及预后关系。方法应用逆转录聚合酶链反应技术,检测20例急性髓系白血病(AML)、8例急性淋巴细胞白血病(ALL)及11例特发性血小板减少性紫癜(ITP)、缺铁性贫血(IDA)等非恶性血液病病人(对照组)骨髓单个核细胞BAALC mRNA表达水平。结果初治组AL病人BAALC mRNA表达水平较对照组显著升高(F=8.59,q=5.62,P<0.05);经治疗获完全缓解后,与初治组比较,其表达水平显著下降,两组比较差异有显著性(q=3.99,P<0.05)。BAALC mRNA表达水平与AL病人外周血白细胞计数及骨髓原始细胞比例无明显相关性(P>0.05)。结论 BAALC mRNA表达与AL疾病进展及预后密切相关,可作为AL预后判断的有意义指标。     

P16蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 :探讨P16蛋自在乳腺癌中的表达情况及其临床价值。方法 :应用SP免疫组织化学方法对 75例乳腺癌组织中CDKNI抑癌基因P16蛋白表达进行检测。结果 :P16蛋白阳性表达与淋巴结转移呈负相关 (P <0 0 5 ) ,与乳腺癌的术后生存期呈正相关 (P <0 0 5 ) ,与乳腺癌的组织学分级 ,以及肿瘤的大小无相关性。结论 :P16蛋白表达水平 ,可作为估计乳腺癌预后的重要指标。     

肿瘤病人降钙素基因高度甲基化检测的临床意义

①目的探讨降钙素(CT)基因的高度甲基化与肿瘤发生、发展的关系及其对肿瘤诊断、鉴别诊断及预后判断的价值。②方法从肿瘤组织和癌旁组织中提取微量DNA,采用限制性内切酶HapⅡ和多聚酶链反应技术,测定了103例肿瘤病人肿瘤组织和其中30例病人的癌旁组织CT基因的甲基化程度。③结果30例癌旁组织无1例检测到CT基因高度甲基化,而77.50%(31/40)的结直肠癌、56.25%的(27/48)肺癌和26.67%(4/15)的甲状腺腺瘤病人检测出CT基因高度甲基化,与癌旁组织比较,差异均有显著性(χ2=5.796~46.015,P<0.05、0.01);不同类型的肺癌病人,CT基因高度甲基化的阳性率不同,小细胞肺癌病人的阳性率明显高于鳞状细胞癌、腺癌和大细胞癌病人(P=0.030、0.010、0.011)。随访4例高度甲基化阳性的甲状腺腺瘤病人,有2例分别在之后的8、14个月发生了恶变,而11例CT基因高度甲基化阴性的甲状腺腺瘤病人同期内无1例发生恶变。④结论CT基因的高度甲基化与肿瘤的发生、发展密切相关,可作为恶性肿瘤恶性克隆增殖的标志,为肿瘤的诊断、鉴别诊断及预后判断开辟了新的途径。     

胃癌中P16基因启动子区甲基化检测的临床意义

目的：探讨P16基因启动子区域甲基化在胃癌发生和发展过程中的临床意义。方法：采用甲基化特异性PCR（MSP）对37例胃癌病人手术切除肿瘤组织及其癌旁组织P16基因启动子区域甲基化状态进行检测。结果：P16基因在手术切除的29．7％的胃癌组织和2．7％的癌旁组织发生了甲基化，且与年龄、性别、淋巴结转移以及分化程度等临床病理指标无相关性。结论：P16基因启动子区甲基化可能是肿瘤特异性的（P〈0．05），可作为胃癌早期诊断的分子标记物。     

乳腺癌中c-erbB-2蛋白表达的临床意义

目的：探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２ 表达与乳腺癌生物学行为及预后的关系。方法：采用免疫组化技术,检测５０ 例乳腺癌ｃ－ｅｒｂＢ－２ 蛋白的表达情况。结果：２４ 例（４８．００％ ）ｃ－ｅｒｂＢ－２ 蛋白表达阳性,ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达在有淋巴结转移的乳腺癌中较多见（Ｐ＜ ０．０５）,其阳性组５ 年生存率低于阴性组（Ｐ＜０．０５）,ｃ－ｅｒｂＢ－２ 蛋白表达不是影响乳腺癌患者预后的独立因素。结论：ｃ－ｅｒｂＢ－２ 蛋白表达与乳腺癌的转移及预后密切相关。     

nm23-H1蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的：为探讨ｎｍ２３－Ｈ１蛋白与鼻咽癌发生发展的关系。方法：采用免疫组化法检测了８０例鼻咽癌组织。２０例无瘤鼻咽癌组织ｎｍ２３－Ｈ１基因产物的表达结果：ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在鼻咽癌组织、鼻咽部无瘤组织中的表达无显著性差异;ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在鼻咽癌中的表达与性别、临床分期、原发灶大小无关,但在有颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组之间,差异有显著性。结论：ｎｍ２３－Ｈ１基因国咽癌有无淋巴结转移有关,但它     

子宫内膜腺癌组织中KAI1蛋白的表达及其与临床病理因素的关系

目的探讨子宫内膜腺癌组织中转移抑制基因1(KAI1)蛋白的表达及其意义。方法应用免疫组织化学EnviSion法检测20例正常子宫内膜和70例子宫内膜腺癌组织中KAI1蛋白的表达水平。结果子宫内膜腺癌组织中KAI1蛋白阳性表达率明显低于正常子宫内膜组织(χ2=12.22,P<0.01);子宫内膜腺癌组织中KAI1蛋白的表达与病理分级、手术-临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移有关(2χ=10.80~14.91,P<0.01)。结论KAI1蛋白表达下调可能是子宫内膜腺癌发生发展及浸润和转移的重要原因之一。     

乳癌组织中Cyclin D1的表达及临床意义

目的探讨细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)对乳癌诊断及预后判断的意义。方法采用免疫组织化学SP法对78例乳腺浸润性导管癌Cyclin D1表达进行检测,并结合雌激素受体(ER)表达情况,对两者关系以及预后进行分析。以37例乳腺腺病和乳腺不典型增生作为对照。结果对照组及乳癌组Cyclin D1阳性表达率分别为18.92%和55.13%,差别有统计学意义(2χ=7.291,P<0.01)。Cyclin D1阳性率在乳癌高分化组为47.62%,中分化组为61.76%,低分化组为17.39%,各组间差别有显著统计学意义(2χ=11.008,P<0.05)。ER阳性乳癌病人Cyclin D1阳性表达率高于阴性病人,差别有统计学意义(χ2=4.019,P<0.05)。Cyclin D1( )ER( )组预后与Cyclin D1( )ER(-)及Cyclin D1(-)ER(-)组比较差别有统计学意义(χ2=4.501、3.992,P<0.05),而与CyclinD1(-)ER( )组比较差别无统计学意义。结论Cyclin D1的表达是肿瘤发生中的早期事件,参与癌前病变的发生并影响癌细胞分化程度。Cyclin D1在乳癌中表达与病理分级、ER状态有关。Cyclin D1异常表达的ER(-)乳癌病人预后较差,而Cyclin D1异常表达的ER( )乳癌病人预后最好。