阿司匹林和塞来昔布对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的：观察阿司匹林和塞来昔布及二者分别联合阿那曲唑对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,探讨并比较阿司匹林和塞来昔布的抗肿瘤作用。方法：MTT法检测不同浓度的阿司匹林（2.5 、5.0和10.0 mmol•L^-1）和塞来昔布（30、60和120 μmol•L^-1）分别作用人乳腺癌细胞株MCF-7不同时间（24、48和72 h）的细胞增殖抑制率,以不含药物的培养液作为阴性对照组,以阿霉素作为阳性对照组。MTT法检测不同浓度阿那曲唑（0.5和1.0 mmol•L^-1及其分别联合不同浓度阿司匹林（2.5、5.0和10.0 mmol•L^-1）和塞来昔布（30、60和120 μmol•L^-1）作用于MCF-7细胞48 h的细胞增殖抑制率,以不含药物组为阴性对照组。结果：①阿司匹林各剂量组细胞增殖抑制率随药物浓度的增加、作用时间的延长而提高(P<0.01)。②塞来昔布各剂量组的细胞增殖抑制率随药物浓度的增加、作用时间的延长而升高(P<0.01)。③10 mmol•L^-1阿司匹林和120 μmol•L^-1塞来昔布单独作用72 h抑制率分别达68.88%和87.00％;阳性对照组阿霉素2.0 μmol•L^-1作用72h抑制率达86.30％。④0.5 μmol•L^-1阿那曲唑与阿司匹林联合各剂量组的抑制率均明显高于0.5 μmol•L^-1阿那曲唑单药组(P<0.05),0.5 μmol•L^-1阿那曲唑联合10.0 mmol•L^-1阿司匹林对MCF-7的抑制率明显高于0.5 μmol•L^-1阿那曲唑联合2.5、5.0 mmol•L^-1阿司匹林(P<0.05)。0.5 μ mol•L^-1阿那曲唑分别与60、120 μmol•L^-1塞来昔布联合组的抑制率明显高于0.5 μmol•L^-1阿那曲唑单药组及0.5 μmol•L^-1阿那曲唑与30 μmol•L^-1塞来昔布联合组的抑制率(P<0.05),0.5 μmol•L^-1阿那曲唑联合120 μmol•L^-1塞来昔布对MCF-7的抑制率明显高于0.5 μmol•L^-1阿那曲唑联合60 μmol•L^-1塞来昔布(P<0.05)。1.0 μmol•L^-1阿那曲唑分别联合10.0mol•L^-1阿司匹林、60和120 μmol•L^-1塞来昔布各组的抑制率明显高于1.0 μmol•L^-1阿那曲唑单药组(P<0.05),1.0 μmol•L^-1阿那曲     

乳腺癌组织中的COX-2和VEGF的表达及其临床意义

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）在乳腺癌组织中的表达及其表达之间的关系。方法S-P免疫组织化学方法检测60例乳腺癌石蜡包埋组织中COX-2和VEGF的表达，分析其表达之间的关系及其与临床病理参数的关系。结果乳腺癌组织中COX-2阳性表达率为81．7％（49／60），VEGF阳性表达率为86．7％（52／60）。在淋巴结无转移组COX-2和VEGF表达明显低于有转移组COX-2的表达（P〈0．05）。VEGF在COX-2阳性表达组中的阳性率（95．9％）明显高于阴性组（45．5％）（X^2=19．79，P=0．000）。结论乳腺癌组织中COX-2和VEGF的高表达可能有利于淋巴结转移；乳腺癌组织中COX-2的表达可能有促进肿瘤血管生成的作用。     

厄贝沙坦对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用及对VEGF表达的影响

目的研究厄贝沙坦对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制作用及对血管表皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测厄贝沙坦对乳腺癌MCF-7细胞分别作用24 h、48 h、72 h后的抑制率,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测厄贝沙坦高、中、低三个剂量(7.2μg/ml、3.6μg/ml、1.8μg/ml)对乳腺癌MCF-7细胞干预前后,乳腺癌MCF-7细胞中VEGF表达水平的差异,以顺铂作为阳性对照组(给药浓度为5μg/ml)。结果厄贝沙坦对乳腺癌MCF-7细胞的半数抑制浓度(IC50)为2.3μg/ml;厄贝沙坦对细胞增殖有显著抑制作用,且随着浓度的增加而增强,三个剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01);厄贝沙坦作用组中VEGF的表达水平与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),厄贝沙坦高剂量组和顺铂阳性对照组VEGF的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论厄贝沙坦对乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有显著抑制作用,可以下调血管表皮生长因子的表达水平。     

塞来昔布对乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM的增殖抑制作用

目的： 通过研究选择性环氯化酶2(COX-2)抑制剂塞来昔布联合阿霉素(ADM)对乳腺癌MCF-7/ADM细胞株生长的作用,探讨塞来昔布的抗肿瘤作用。方法：MCF-7/ADM细胞加入不同浓度等倍稀释的ADM（0.05、0.10、0.20、0.40、0.80和1.60 mg/L）为对照组,MCF-7/ADM细胞加入无细胞的完全培养基为阴性对照组,在对照组的基础上联合应用10、20 μmol/L塞来昔布为实验组,各组细胞于24、48、72 h后采用CCK-8检测细胞生长抑制率。MCF-7/ADM细胞单加0.05 mg?L-1ADM及联合塞来昔布(10、20 μmol/L)处理后3 h收集细胞,采用流式细胞术检测细胞内ADM水平。结果：不同浓度ADM单药及联合塞来昔布（10和20 μmol/L）　作用于MCF-7/ADM 24、48和72 h后细胞生长受到抑制,实验组不同时间细胞生长抑制率均高于对照组(P<0.05),且20 μmol/L塞来昔布实验组细胞生长抑制率高于10 μmol?L-1塞来昔布实验组,差异具有统计学意义（P<0.05）。对照组24、48和72 h的细胞未见明显变化,但实验组细胞作用48和72 h后出现细胞改变及死亡,呈塞来昔布剂量依赖性。与对照组比较,塞来昔布实验组（10和20 μmol/L）细胞内ADM浓度升高（P<0.05）;20 μmol/L塞来昔布实验组细胞内ADM浓度高于 10 μmol/L塞来昔布实验组(P<0.05)。结论：选择性COX-2抑制剂塞来昔布联合ADM可有效逆转乳腺癌ADM细胞株耐药。
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塞来昔布预防大鼠乳腺癌发生及其机制

目的观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对化学致癌剂7,12-二甲基苯蒽(DMBA)化学诱发的大鼠乳腺癌形成的影响。方法DMBA油剂灌胃复制大鼠乳腺癌模型,90只大鼠分为3组:单纯诱癌组作为阴性对照、三苯氧胺组作为阳性对照和塞来昔布组,观察塞来昔布对大鼠乳腺肿瘤发生率和COX-2、VEGF蛋白表达的影响。结果三苯氧胺组(48.15%)和塞来西布组(50.00%)肿瘤发生率明显低于单纯诱癌组(85.71%),差异具有显著性(P=0.003;P=0.004)。塞来昔布组COX-2蛋白表达率(28.57%)低于单纯诱癌组(83.33%)和三苯氧胺组(69.23%),差异具有显著性(P=0.001;P=0.035)。塞来昔布组VEGF蛋白表达率(42.86%)低于单纯诱癌组(79.17%)(P=0.023);和三苯氧胺组(46.15%)无显著性差异(P=0.863)。结论塞来昔布能抑制DMBA诱发的大鼠乳腺癌的发生、发展,下调COX-2和VEGF蛋白表达可能是其机制之一。     

COX-2和VEGF在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨环氧化酶-2(cyclooxygenagse-2,COX-2)、血管内皮生长因子(vascul( )r endothelial cell growth factor,VEGF)在胃癌中的表达及意义.方法用免疫组化S-P法检测45例胃癌、癌旁组织COX-2、VEGF的表达.结果胃癌组织COX-2、VEGF的阳性表达率分别是77.78%和75.56%,明显高于癌旁组织(P＜0.01,P＜0.05);COX-2、VEGF均与胃癌的浸润浓度、淋巴结转移和临床分期密切相关(p＜0.05):COX-2( )组VEGF表达率显著高于COX-2(-)组(p＜0.05).结论COX-2.VEGF与胃癌的浸润转移及病期进展有关,COX-2可上调VEGF表达.     

塞来昔布对乳腺癌细胞株MCF-7生长的影响

目的 检测乳腺癌细胞株MCF-7中COX-2的表达及其意义,观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布对其生长的影响,寻求新的乳腺癌的治疗方法.方法 采用免疫组化、原位杂交的方法分别检测应用选择性COX-2抑制剂塞来昔布前、后.COX-2蛋白和mRNA的表达情况;采用MTT法研究塞来昔布对乳腺癌细胞株MCF-7生长的影响.结果 应用选择性COX-2抑制剂塞来昔布作用前、后,COX-2蛋白和mRNA在乳腺癌细胞株MCF-7细胞质中的表迭差异有显著性(P＜0.01);塞来昔布可明显抑制MCF-7细胞生长,且随药物浓度的增加和时间的延长,细胞凋亡数目逐渐增加,呈浓度和时间依赖性.结论 选择性COX-2抑制剂塞采昔布可抑制乳腺癌细胞增殖,并促进细胞凋亡,提示COX-2可作为乳腺癌治疗的新的分子靶点,塞来昔布可作为一种新的药物来治疗乳腺癌.     

COX-2与VEGF在乳腺癌中的表达及其预后的临床意义

目的探讨环氧化酶2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其对预后的临床意义。方法收集我院1999-2006年有完整存档蜡块资料的117例乳腺癌蜡块以随机分配的原则组成组织芯片,并对其进行免疫组织化学染色,检测COX-2、VEGF在乳腺癌中的表达,并且对二者的表达情况与疾病的病理生物学特点、患者的生存时间进行分析,以判断其对预后的意义。结果COX-2阳性表达55.6%,COX-2在肿瘤中的表达与肿瘤临床分期(r=0.238、P=0.01)、淋巴结转移(r=0.326、P<0.01)、表皮生长因子2(HER-2)(r=0.218、P=0.025)呈正相关。与雌激素受体(ER)(r=-0.205、P=0.026)状态呈负相关。VEGF同样在乳腺癌组织中有高表达为66.7%,且与COX-2的表达在统计学上具有正相关(r=0.608、P<0.01)。COX-2和VEGF表达水平均与患者生存时间有密切关系。结论COX-2、VEGF在乳腺癌中均有高表达,且均与乳腺癌预后有关,可以作为乳腺癌预后的重要指标。     

塞来昔布抑制Tca8113释放PGE2及与COX-2、VEGF-C mRNA表达的相关性研究

目的 观察环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对人舌鳞癌Tca8113细胞释放前列腺素E2及抑制COX-2、VEGF-C mRNA表达的作用. 方法 MTT法检测细胞的生长抑制率,ELISA法检测细胞分泌PGE2变化,RT-PCR法检测COX-2、VEGF mRNA表达变化. 结果 塞来昔布以量效依赖方式抑制Tca8113细胞增殖的同时,抑制PGE2释放,其抑制Tca8113细胞释放PGE2与抑制VEGF-C mRNA的表达呈正相关关系(r=0.880,P=0.000),但与抑制COX-2 mRNA的表达相关关系虽然有统计学意义,但并不密切(r=0.422,P=0.020)). 结论 塞来昔布抑制Tca8113细胞增殖、抑制VEGF-C及COX-2蛋白及mRNA的表达,可能与调控PGE2的释放有关.     

VEGF和COX-2蛋白在脑星形细胞瘤表达的研究

目的 :检测VEGF和COX 2蛋白在脑星形细胞瘤中的表达 ,分析其表达变化与不同病理类型肿瘤的相关性。方法 :选用 5 4例Ⅰ～Ⅳ级星形细胞瘤手术后存档蜡块标本为实验标本 ;应用流式细胞术分别定量检测不同病理类型肿瘤组织中VEGF和COX 2蛋白表达量。结果 :VEGF和COX 2蛋白在星形细胞瘤组织中的表达量 (FI值 )显著增加 ,其表达强度与病理组织学分级显著相关 (P <0 .0 1 )。COX 2蛋白FI值与VEGF蛋白FI值呈显著正相关 (P <0 .0 1 )。结论 :VEGF和COX 2蛋白过度表达在星形细胞瘤形成和演化过程中起重要作用。COX 2蛋白通过诱导VEGF的表达参与肿瘤血管生成。     

乳腺癌组织COX-2、VEGF-C的表达与淋巴结转移的关系

目的 研究COX-2、VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及其与淋巴管生成、淋巴结转移间的相关性.方法 采用免疫组化学S-P法检测46例浸润性导管癌组织中COX-2、VEGF-C的表达,通过淋巴管特异性标记物D2-40记数淋巴管密度(LVD),分析COX-2、VEGF-C的表达与淋巴管生成和淋巴结癌组织转移的相关性.结果 ①乳腺癌组织COX-2、VEGF-C表达阳性率分别为73.91%(34/46)和71.74%(33/46).②有淋巴结转移组COX-2阳性率为86.48%(32/37)、VEGF-C为81.08%(30/37),D2-40阳性淋巴管密度为(13.350±3.097)/×200.无淋巴结转移组COX-2为22.22%(2/9)、VEGF-C为33.33%(3/9)、LVD为(9.560±2.031)/×200,转移组中COX-2、VEGF-C的表达及淋巴管密度均明显高于无转移组(P＜0.01).③VEGF-C表达与COX-2表达呈正相关(r=0.757,P＜0.01),并且COX-2、VEGF-C的表达与LVD也呈正相关(P＜0.01).结论 VEGF-C、COX-2在人乳腺癌组织呈高水平表达,其表达与肿瘤淋巴管密度及癌组织淋巴结转移有关;COX-2可能通过诱导VEGF-C表达促进肿瘤淋巴管生成和淋巴结转移.     

毛酸浆内酯通过抑制STAT3诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

[目的]旨在探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)在毛酸浆内酯（PPB）诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡中发挥的作用。[方法]采用荧光染色法分析PPB诱导MCF-7细胞凋亡;使用生物信息学方法预测PPB抗乳腺癌的潜在机制;采用噻唑蓝（MTT）法考察STAT3抑制剂S3I-201以及STAT3小干扰RNA(siRNA)对PPB抑制MCF-7细胞生长的作用;采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法考察PPB单独处理或STAT3 siRNA预处理后对MCF-7细胞中STAT3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(Caspase8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase9)、细胞色素c(Cytochrome c)以及多聚ADP核糖聚合酶（PARP）蛋白表达的影响。[结果] MCF-7细胞经PPB作用后凋亡形态特征明显,凋亡比例上升;生物信息学结果显示PPB与乳腺癌疾病的共同靶点STAT3在乳腺癌组织中高表达,单基因GSEA结果提示STAT3高表达与凋亡信号通路呈负相关;Western Blot法检测结果显示PPB能够抑制STAT...     

桃儿七提取物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的作用

目的:研究桃儿七对人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制和促进凋亡的作用,探讨其抗癌作用的机制.方法:应用MTT法检测桃儿七提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显微镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,FCM分析细胞周期及凋亡率,免疫细胞化学法检测细胞增殖凋亡调控相关蛋白的表达.结果:桃儿七提取物可明显抑制MCF-7细胞的增殖,1,2,3 mg/L桃儿七作用72 h后,细胞生长抑制率分别为43.0%,54.9%,78.5%,抑制作用呈时间及浓度依赖性.形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成.FCM分析发现桃儿七阻断MCF-7细胞生长于细胞周期的G2/M期,凋亡诱导作用呈时间及浓度依赖性.免疫细胞化学结果显示,2 mg/L桃儿七作用48 h后,PCNA,Bcl-2蛋白表达分别由154.78±0.16,85.56±0.09降至78.46±0.15,40.43±0.07,P＜0.01;而p21WAF1/CIP1和c-Myc蛋白由92.32±0.12,114.48±0.14增至125.54±0.09,156.52±0.08,P＜0.01.结论:桃儿七提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长有明显的呈时间及浓度依赖性的抑制作用,G2/M期阻滞并诱导凋亡.该作用与p21WAF1/CIP1表达增加及PCNA表达降低有关,通过下调Bcl-2和上调c-Myc表达诱导乳腺癌细胞凋亡.     

上皮性卵巢肿瘤中COX-2和VEGF的表达

目的：探讨环氧合酶-2(COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在上皮性卵巢癌发生发展中的作用。 方法：采用免疫组化S-P法检测13例浆液性囊腺瘤、10例交界性囊腺瘤、70例囊腺癌组织中COX-2及VEGF的表达。 结果：①COX-2表达强度在浆液性囊腺瘤和囊腺癌间比较差异具有显著性（P<0.05）;COX-2表达强度在上皮性卵巢癌的不同临床分期（早期、晚期）间比较差异具有显著性(P<0.05)。②VEGF表达强度在浆液性囊腺瘤和囊腺癌间比较差异具有显著性（P<0.05）;在浆液性囊腺瘤和交界性囊性瘤间比较差异具有显著性（P<0.05）;VEGF阳性表达率早期上皮性卵巢癌低于晚期（P<0.05）,无淋巴结转移组低于有淋巴结转移组（P<0.05）。③COX-2及VEGF在上皮性卵巢癌中的表达具有协同作用。 结论：COX-2与VEGF在上皮性卵巢癌的发生发展中起着不同的作用,二者的联合监测对卵巢癌的诊断、临床分期、预后有指导作用。     

人乳腺癌MCF-7细胞系中肿瘤干细胞的富集与鉴定

采用无血清培养液(SFM)悬浮细胞聚球法体外培养人乳腺癌MCF-7细胞系,第5、10、15天拍照,观察干细胞球的生成。悬浮培养第5天可以开始观察到悬浮细胞球形成,细胞球形成效率为(0.6±0.5)%,第10天时细胞球形成效率为(2.4±1.2)%,比第5天时明显增多,培养第15天时细胞球形成效率达到(3.8±1.8)%,MCF-7悬浮成球细胞中侧群细胞(SP)细胞含量为(3.9±1.4)%,高于常规培养的MCF-7贴壁细胞(1.1±0.5)%(P<0.05),采用无血清悬浮细胞聚球培养法可以从MCF-7细胞系中简便、高效地富集乳腺癌干细胞。