直接降解木质素的漆酶/木聚糖酶体系的合成

对一株高产漆酶及伴有木聚糖酶和少量纤维素酶的菌株,用不同的碳源和氮源对其调控培养,合成漆酶/木聚糖酶体系。实验结果表明,最佳的碳源是可溶性淀粉,用它作碳源,漆酶活性高达730IU/mL,木聚糖酶活性是4.49IU/mL,纤维素酶活性只有0.23IU/mL;最佳的氮源是蛋白胨,用其作氮源,合成漆酶活性可达812IU/mL,木聚糖酶活性是4.68IU/mL,纤维素酶活只有0.09IU/mL。     

杂色云芝产木质纤维素酶及对稻草秸秆的降解

在外加碳源和氮源的固态稻草秸秆基质上,对杂色云芝生长过程中产酶活性、主要化学成分及结构进行了分析. 结果表明,不同的碳源、氮源浓度对所产酶活性有较大影响,除产半纤维素酶的最佳条件是低碳低氮外(0.15%的葡萄糖和0.03%氯化铵),其他如纤维素酶、木质素过氧化物酶、锰依赖过氧化物酶和漆酶产生的最佳条件都是高碳低氮(2%的葡萄糖和0.03%氯化铵). 各种酶在稻草秸秆的降解中起着关键作用,酶活性直接影响主要化学成分的降解率. 纤维素和半纤维素的降解对木质素的降解有明显的促进作用. 经过32 d的培养,稻草秸秆中纤维素、半纤维素和木质素的降解率分别为65.39%, 45.11%和39.16%. 经过降解,秸秆结构发生了明显的变化.     

白腐菌Coriolus versicolor的培养及产漆酶条件的研究

从液体和固体两种培养体系出发,探索不同培养条件对白腐菌分泌漆酶的影响。液体培养体系中,白腐菌的最佳生长和漆酶分泌条件是缓冲体系起始pH值为5.8、摇瓶转速为180r/min、装液量为100mL/500mL;在所有测试的碳源中,葡萄糖为最佳碳源,在二糖中以蔗糖为碳源,漆酶酶活相对较高,而多糖(如淀粉)不利于漆酶的生成。在所有测试的氮源中,硝酸铵和酒石酸铵组合为最佳氮源,氯化铵和尿素的效果次之,蛋白胨的效果最差。当碳源与氮源质量比(C/N)大于10∶1,即高碳低氮的培养条件有利于漆酶的生成。芳香化合物诱导剂ABTS浓度为0.5～1mmol/L时,对产漆酶的影响最明显,与限氮培养基中产酶相比可提高酶活5倍,约为230IU/mL;0.5mmol/L愈创木酚、1mmol/L阿魏酸和0.05mmol/L二甲基苯胺的添加可提高酶活约2～2.5倍;0.01mmol/L黎芦醇的添加可提高漆酶酶活约1.6倍。由于酪氨酸具有酚类化合物的特点,也可作为一种无毒的天然漆酶诱导剂。菌株漆酶活力在固体培养体系明显低于在液体培养体系。     

白毒鹅膏菌漆酶的诱导及其对直接黑G的脱色作用

白毒鹅膏菌是一种重要的产生胞外漆酶的菌株.探讨了漆酶在各种营养条件下的分泌情况以及对直接黑染料的降解情况.结果表明,以麸皮作为碳源,酵母膏作为氮源,在120 r/min的转速下培养,漆酶的产量最高.另外染料在较低质量浓度(10 mg/L)时,漆酶对染料的降解迅速而彻底,在pH=4.5、50℃条件下,偶氮染料直接黑G能被粗酶液(10 U/L)有效地降解,在120 r/min时降解率达到84.4%.     

白腐菌液体培养产生漆酶的研究

研究了碳源、氮源和综合因素对白腐菌P.conchatus液体培养产漆酶和生长情况的影响。碳源为葡萄糖,氮源为酒石酸铵时,菌株的产漆酶能力较强;麦麸为碳源,酵母膏为氮源,对菌株的生长最为有利。通过正交实验确定了最佳培养基组成为葡萄糖10 g/L,酒石酸铵5 g/L,大量元素为基础培养基的3倍,微量元素为20 mL。葡萄糖是影响菌株生长的主要因素。     

白构菌液体发酵合成漆酶的培养条件研究

提高底物碳源的聚合度和采用有机氮源有利于诱导白构菌(Flammlina velutipes)合成漆酶，实验结果表明选择淀粉和黄豆粉作为白构菌液体发酵制取漆酶的碳源和氮源有良好的效果。采用振荡培养能够强化白构菌液体发酵体系内的传质作用，更适于菌体的生长及漆酶的合成。以180r／rain速率振荡培养白构菌16d，漆酶活力可达到308IU／mL，比静置培养提高83．3％。经活化后的白构菌接种并在振荡条件下培养可显著提高漆酶活力，180r／min振荡培养6d后漆酶活力可达到1749IU／mL。     

白构菌液体发酵合成漆酶的培养条件研究

提高底物碳源的聚合度和采用有机氮源有利于诱导白构菌 (Flammulinavelutipes)合成漆酶 ,实验结果表明选择淀粉和黄豆粉作为白构菌液体发酵制取漆酶的碳源和氮源有良好的效果。采用振荡培养能够强化白构菌液体发酵体系内的传质作用 ,更适于菌体的生长及漆酶的合成。以1 80r/min速率振荡培养白构菌 1 6d ,漆酶活力可达到 3 0 8IU/mL ,比静置培养提高 83 .3 %。经活化后的白构菌接种并在振荡条件下培养可显著提高漆酶活力 ,1 80r/min振荡培养 6d后漆酶活力可达到 1 749IU/mL。     

白腐真菌褐山小薄孔菌固体发酵高产漆酶培养条件的研究

研究了白腐真菌褐山小薄孔菌Antrodiella brunneimontana进行稻草秸秆固体发酵产生高活性漆酶的最佳培养方案。在筛选合适的碳源、氮源和硫酸铜浓度的基础上,进行四因素四水平正交实验,筛选出最优培养方案,即以麦芽浸粉为氮源,其质量浓度为3%(m/V);葡萄糖为碳源,质量浓度为1%(m/V);硫酸铜质量浓度为0.15%(m/V);含水量为80%(wt),在此条件下培养12天产生的漆酶活性可达到最高值304 U/g。     

氮源浓度和芳香化合物对白腐菌Panus conchatus产木素降解酶的影响

白腐菌Panusconchatus只分泌锰过氧化物酶和漆酶，不分泌术素过氧化物酶，该菌分泌这两种酶的能力大大高于同样培养基条件下的Pleuronssajor-caju。氮源浓度对Panusconchatus分泌术素降解酶的能力有显著影响，高氮条件可能是这种类型的白腐菌生产木素降解酶的必要条件。研究不同芳香化合物对Panusconchatus木素降解酶分泌情况的影响发现，紫丁香醇和香豆酸对其锰过氧化物酶和漆酶分别起显著的诱导作用。     

白腐菌Funalia trogii以稻草进行固体发酵产漆酶的研究

研究了硬毛粗毛盖孔菌Funalia trogii以稻草为培养基质进行固体发酵产生高活性漆酶。在筛选合适的碳源、氮源和硫酸铜浓度的基础上,开展四因素正交实验,筛选出最优培养方案,即以稻草粉为基质,淀粉0.5%、尿素0.3%、硫酸铜1%(质量分数),湿度为70%的条件下培养7天后漆酶活性即可达到145.42 U/gds。在最优方案条件下连续培养,发现该菌在稻草粉培养基质上培养28天产生的漆酶活性能达到最高,为1 518.76 U/gds。而在增加培养规模的情况下,以最优方案培养28天的漆酶活性平均能达到1 753.49 U/gds。     

重组人aFGF工程菌发酵条件的优化

目的优化重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)工程菌的发酵条件。方法采用分批补料方式,在菌体快速生长阶段,通过变速流加碳源和氮源,控制流加比例,调节pH值和溶解氧(DO)含量,实现工程菌的高密度发酵及目的蛋白的高效表达。结果当碳源与氮源流加比例为3:1时,菌体湿重可达145g/L,干重达36g/L,目的蛋白表达量达28.9%;DO控制在20%时,全菌体和裂解液中目的蛋白的表达量均最高,分别可达29.11%和44.28%。结论已初步优化了rhaFGF工程菌的发酵条件。     

十二碳二元酸生产菌培养基碳源与氮源的优化

以热带假丝酵母菌(Candida tropicalis)为试验菌株,在摇瓶发酵培养基础上,对种子培养基及发酵产酸培养基的碳源、氮源进行优化。结果表明:种子培养基最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母浸粉FM902;菌体产酸培养基最适碳源为蔗糖(w)2%、葡萄糖(w)0.5%,比仅有2%蔗糖的培养基产酸量提高14.5%;最适氮源为0.08%(w)酵母浸粉FM902,比只含酵母浸膏LM902的培养基产酸量提高35.3%。     

两株剑麻脱胶酶生产菌的培养条件优化

微生物的生物量将直接影响脱胶酶的分泌量。以微生物的生物量作为指标,优化了两株剑麻脱胶酶的培养条件,探讨了营养条件(碳源、氮源)和环境条件(接种量、培养时间)对微生物生长的影响。最终优化的培养条件:TJM-3剑麻脱胶菌的最佳碳源是葡萄糖,最佳氮源为玉米浆,最优接种量7%,最佳菌种培养时间20 h;TJM-6剑麻脱胶菌的最佳碳源是乳糖,最佳氮源为牛肉膏,最优接种量5%,最佳菌种培养时间16 h。上述条件下培养菌种对应的生物量均提高较大,为下一步脱胶酶的分泌奠定良好的基础。     

氮源浓度和芳香化合物对白腐菌Panus conchatus产木素降解酶…

白腐菌Ｐａｎｕｓｃｏｎｃｈａｔｕｓ只分泌锰过氧化的酶和漆酶，不分泌木素过氧化物酶。该菌分泌这两种酶的能力大大高分子同样培养基条件下的Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｓａｊｏｒ－ｃａｊｕ。氮源浓度对Ｐａｎｕｓｃｏｎｃｈａｔｕｓ分泌木素降解酶的能力有显著影响，高氮条件可能是这种类型的白腐菌生产木素降解酶的必要条件，研究不同芳香化合物以Ｐａｎｕｓｃｏｎｃｈａｔｕｓ木素降解酶分泌情况的影响发现，紫丁胺醛和香豆酸对其锰过     

漆酶改善分离木素和OCC纸浆特性的研究

应用漆酶处理纤维素酶分离酶解木素和OCC(Old corrugated containers)纸浆,结果表明:木素在漆酶处理过程中会发生降解,经漆酶处理后再经加热处理会使木素发生聚合,木素降解主要发生在高分子量木素部分,而聚合作用主要发生在低分子量木素之间;木素经漆酶处理后,酚羟基的含量略有增加,这是由于在漆酶处理木素的过程中,木素不但发生酚氧自由基的离域现象,而且还有高分子量的木素发生降解产生了新的酚羟基;经不同用量的漆酶处理的OCC纸浆手抄片的湿环压指数和湿抗指数与对照样相比均有明显提高,特别是漆酶用量为24 U/g时,湿环压指数达到4.1 N.m/g,提高了41%。经不同用量的漆酶处理的OCC纸浆干环压强度和干抗张强度与对照样相比略有提高,但提高的幅度不大。     

碳源和Mn(Ⅱ)对白腐菌Panus conchatus产木素降解酶的影响

研究了碳源及二价锰离子Mn（Ⅱ）对白腐菌Panusconchatus产木素降解酶的影响。结果表明碳源的种类对标过氧化物酶（MnP）和漆酶（laccase）产生的影响有明显的差异。Mn(Ⅱ）对P．conchatusMnP和laccase的产生有明显调节作用。不加Mn(Ⅱ)条件下,P.cochatrus几乎不分泌MnP,而laccase在木素降解醇中占据了主导地位。加入并提高Mn（Ⅱ）浓度,MnP活力随之提高,而laccase活力却相应降低。     

枯草芽孢杆菌出芽培养条件优化

探索了提高枯草芽孢杆菌产生芽孢的方法,使用单批一次投料培养法研究了培养基成分、p H值、培养过程中通气量及装液体积比对菌体产芽孢的影响。试验结果说明:枯草芽孢杆菌最适生长和产生芽孢的碳源是糖蜜,最适氮源是酵母浸粉;二价锰离子和无机盐对菌体的生长和产芽孢有很大影响。菌体生长和产芽孢的最适培养基组成:糖蜜1.0%,酵母粉0.8%,(K2HPO4+KH2PO4)0.5‰,Mn SO4 0.2‰;产芽孢的最适条件:开始培养p H值为7.0,最适装液量为20%(体积比)。在5L半自动发酵罐中,溶氧大于70%,发酵24 h后,芽孢数量为5.1×1011CFU/m L,出芽率为98.0%。     

培养条件对HBsAg转基因人参细胞的生长及表达量的影响

目的研究培养条件对HBsAg转基因人参细胞生长及HBsAg表达量的影响。方法通过单因子实验,分别考察碳源、氮源、有机成分对HBsAg转基因人参细胞生长和HBsAg表达量的影响,并通过不同组合实验,探索氮源浓度、有机成分和起始pH的最佳组合。结果在3%蔗糖、10mmol/L氮源、0·25%乳清蛋白和起始pH6·2的情况下,细胞生长量略有增加,HBsAg的表达量增加1倍。结论通过改善培养条件,可以提高HBsAg转基因人参细胞的生长速度和抗原表达量。     

莠去津高效降解菌的鉴定和降解特性分析

[目的]筛选并鉴定莠去津降解菌,分析其降解特性。[方法]从土壤中分离降解菌,用形态观察、生理生化鉴定、16S r DNA序列扩增和同源性分析方法,明确菌株分类地位。通过改变培养条件,分析菌体生长、温度、pH值、盐度和碳源对莠去津降解的影响。[结果]降解菌为肠杆属细菌,菌体生长与莠去津降解同步,在25～35℃、pH值近中性、0.5%盐度、单糖或双糖下降解效果好。[结论]菌株具有较高的莠去津降解能力,具开发潜力。     

焦化废水吡啶降解菌的筛选及降解条件

从武钢焦化废水活性污泥中分离筛选出1株能以吡啶为唯一碳源和氮源生长的高效降解菌,考察了吡啶初始浓度、接种量、pH值、温度和金属离子等因素对菌株降解特性的影响。实验结果表明,该菌株对吡啶耐受力较强,可达1200mg/L。吡啶降解适宜条件为30℃,pH7.5和接菌量5%,投加适量Fe2+可促进吡啶降解。