EXPRESSION DIFFERENCES OF VASCULAR GROWTH FACTORS IN HUMAN LUNG ADENOCARCINOMA CELL LINE A549 AND CISPLATIN-RESISTANT HUMAN LUNG ADENOCARCINOMA CELL LINE A_(549)~(DDP)

Objective To elucidate the expression differences of vascular growth factors in human lungadenocarcinoma cell line A549 and cisplatin-resistant human lung adenocarcinoma cell line A549DDP . Methods RT-PCR and immunohistochemistry was used to detect the mRNA and protein expressions of vascular endothelial growth factor ( VEGF) and basic fibroblast growth factor ( bFGF) in A549 and A549DDP . Results VEGF and bFGF mRNA were expressed in A549 and in A549DDP VEGF and bFGF mRNA expression levels in A549DDP were significant higher than those in A549 (P< 0 .025 ). VEGF and bFGF protein expressions were all strong positive in A549 and A549DDP. Conclusion There are certain differences between VEGF and bFGF expressions in A549 and A549DDP . Drug-resistance of lung cancer is associated with those above genes over-expressions. Over-expression of vascular growth factors are related to drug resistance of lung cancer.     

微血管定量和血管内皮生长因子表达在非小细胞肺癌中的意义

目的 :研究非小细胞肺癌 (NSCL C)的预后与血管内皮生长因子 (VEGF)表达及肿瘤微血管定量间的关系。方法 :对81例行手术治疗的 NSCL C患者运用免疫组织化学的方法检测 VEGF的表达及微血管定量 ,检测 VEGF使用抗 VEGF单克隆抗体 ;检测微血管定量用抗 CD34 单克隆抗体。结果 :在术后半年出现转移的 32例 NSCL C中微血管定量为 (32± 15 .4)根/ mm3比术后未出现转移的 49例患者 (12± 8.6 )根 / mm3明显增高 ,经统计学处理 (P=0 .0 0 1)。在术后半年出现转移的 32例中有 2 4例 VEGF表达阳性 (75 % ) ,在术后未出现转移的 49例中有 2 5例 VEGF表达阳性 (5 1% ) ,经统计学处理 (P=0 .0 31)。结论 :NSCL C的转移形式为血管形成依赖性 ,VEGF是 NSCL C的血管形成的一个重要因素。VEGF的表达是检测NSCL C预后的一个有意义的指标     

血管内皮生长因子在非小细胞癌的表达及其意义

目的 :研究血管内皮生长因子 (VEGF)表达水平和肿瘤微血管密度与肺癌生物学行为及其预后的关系。方法 :采用免疫组化方法检测 96例肺癌和 18例正常肺组织中 VEGF的表达和微血管密度。结果 :肺癌与正常肺组织 VEGF的表达和微血管密度具有非常显著性差异 (P <0 .0 0 1～ 0 .0 0 0 0 1) ,肺癌微血管密度随着 VEGF的表达增强而增多 ;VEGF的表达和微血管密度随着肺癌分化程度的降低而显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 0 0 0 1) ;肺腺癌组织中 VEGF表达程度比鳞癌组织显著增高(P <0 .0 5 )。结论 :VEGF作为最重要的血管生成因子 ,参与了肺癌的发生和发展过程 ,可作为肺癌生物学行为及其预后判断的指标     

血管内皮细胞生长因子在脑胶质瘤的表达

目的 :探讨血管内皮细胞生长因子 (VEGF)与胶质瘤发生、演进、诊断及预后的关系。方法 :采用免疫组化SP法研究 132例脑胶质瘤VEGF的表达。结果 :高分级胶质瘤VEGF呈高表达 ,而正常脑组织表达很低 (P<0 0 5 ) ,此规律在星形细胞瘤中更明显。髓母细胞瘤也呈高表达 (90 91% ) ,良恶性室管膜瘤、少突神经胶质瘤表达均略高 (P >0 0 5 )。结论 :VEGF在胶质瘤中的表达随病理分级的增高而增高 ,VEGF的表达对胶质瘤的发生、演化、诊断、治疗和预后有重要意义     

人肺腺癌A549细胞系SP细胞亚群的分选及初步探讨

目的：探讨一种简单有效的分离肺癌干细胞的方法。方法：用免疫组化方法检测人肺腺癌A549细胞系中ABCG2蛋白的表达情况;用流式细胞学方法分选A549细胞系中side population cells（SP细胞）及非SP细胞亚群,并对该两亚群细胞的分化功能进行检测;用RT—PCR方法检测两亚群细胞ABCG2的表达。结果：免疫组化方法检测A549细胞系中ABCG2蛋白的阳性表达率为2％。流式方法成功分选得到SP细胞及非SP细胞亚群,其中SP细胞含量约为A549活细胞总量的1．09％,经拮抗剂Verapamil处理后下降为0．20％,两亚群细胞经培养后重新上机检测,发现SP细胞亚群可产生SP细胞及非SP两种细胞,而非SP细胞只能产生非SP细胞。SP细胞表达ABCG2,非SP细胞则不表达。结论：人肺腺癌A549细胞系SP亚群细胞富集了肺癌干细胞。通过流式细胞仪分选肺腺癌SP细胞亚群是分离肺腺癌干细胞的有效方法。     

人肺腺癌细胞系AGZY-83A敏感药物体外检测

采用微量核酸前体掺入试验(MINI-Assay)对人肺腺癌细胞系AGZY-83A进行七种抗癌剂的敏感性检测。结果显示:丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、甲氨蝶呤(MTX)及5-氟尿嘧啶(5-Fu)对受试的人肺腺癌细胞有较明显的抑制作用,抑制率分别为95%、92%、87%及63%。     

CUGBP1在人肺腺癌组织和细胞中的表达

目的比较分析CUGBP1基因在人肺腺癌组织和细胞内表达的特点,及其CUGBP1表达水平与癌细胞增殖活性的关系。方法以人肺腺癌组织标本和人肺腺癌细胞株A549为研究对象,应用免疫组化、WesternBlot、RT—PCR方法检测人肺腺癌组织、细胞内CUGBP1蛋白和基因的表达,并分析其特点。结果CUGBP1基因主要在人肺腺癌组织的细胞核呈强阳性表达,在所有类型腺癌组织中80％以上的癌巢细胞CUGBPl基因呈阳性表达,阳性表达率明显高于正常对照组,差异有显著性（t=100．01,P＜0．001）。95％以上的A549细胞CUGBP1表达呈阳性,且CUGBP1表达量明显低于LPS组,差异有显著性（t=407．53,P＜0．001）。结论CUGBPl基因在人肺腺癌癌巢细胞和A549细胞的胞核内高表达;炎性刺激可增强人肺腺癌细胞株A549的增殖和CUGBPl基因表达;CUGBP1基因可能成为人肺腺癌的早期诊断和增殖状态判断的新指标。     

层粘连蛋白受体和血管内皮生长因子在胃腺癌中的表达

目的探讨层粘连蛋白受体 (lamininreceptor,LN R)和血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在判断胃腺癌转移和预后中的作用。方法应用免疫组织化学S P法检测 76例胃腺癌组织和 10例正常胃组织中LN R和VEGF的表达水平 ,比较LN R和VEGF的不同表达率与生存率的关系及其与肿瘤特征的相关性。结果LN R和VEGF阳性表达率分别是 5 1.3%、72 .4 % ,较正常组织显著增高 (P <0 .0 5 ) ,与浸润深度、肿块大小、淋巴结转移程度具有显著相关性 (P <0 .0 5 ) ,阳性表达者的生存时间较阴性者显著缩短 (P <0 .0 5 )。结论LN R和VEGF与血管发生密切相关 ,可作为判断胃腺癌转移和预后的重要指标     

黄芪总苷对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究黄芪总苷(TA)对人肺腺癌A549细胞增值及凋亡的影响.方法:采用不同药物浓度作用于人肺腺癌A549细胞,应用MTT、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术分析药物对细胞的影响.结果:TA对A549细胞有明显的生长抑制及凋亡作用,并呈剂量、时间依赖性.DNA凝胶电泳显示出特征性凋亡梯状带.结论:在一定条件下,TA可抑制人肺腺癌细胞增殖,抑制作用具有明显的浓度和时间依赖性,同时可诱导其凋亡,凋亡可能与细胞周期阻滞有关.     

STAT3、CA125在人肺腺癌细胞A549中的表达及意义

目的：探讨信号转导和转录激活因子3（STAT3）对肺腺癌的诊断价值。方法：采用免疫组织化学PV二步法检测人肺腺癌细胞A549和正常人胚肺细胞MRC－5中STAT3、CA125蛋白表达,分析在人肺腺癌细胞A549中STAT3与CA125表达的相关性。结果：STAT3、CA125在人肺腺癌细胞A549中的阳性表达水平均明显高于正常人胚肺细胞MRC-5（P〈0．01）,且在人肺腺癌细胞．8549中STAT3与临床上常用的肺肿瘤标志物CA125的表达均呈正相关。结论：STAT3有望成为一种新的肺肿瘤标志物推荐临床使用。     

人肺腺癌细胞系SPC－A_8的建立及生物学特性

１９８９年８月４日，作者以一例肺腺癌手术标本（原发灶）为原代培养材料，建立了能长期稳定传代培养的肺腺癌细胞系ＳＰＣ－Ａ８。类多边形细胞贴壁生长，倍增时间３２．５小时，克隆形成率２３．９％，ＤＮＡ指数（ＤＩ）２．１６，染色体众数在７７～８２范围内，核型为８６．ＸＹ．＋３Ａ，－２Ｂ，＋１１Ｃ，－３Ｄ，＋８Ｅ，＋６Ｆ，＋１０Ｇ，另有５条染色体不能分组。ＳＰＣ－Ａ８细胞的Ｇ６ＰＤ和ＬＤＨ同功酶谱与ＨｅＬａ细胞相同。ＳＰＣ－Ａ８细胞的裸鼠移植瘤呈腺癌结构。以上特征证明ＳＰＣ－Ａ８为人肺腺癌细胞系。     

血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在子宫内膜异位症 (EM)中的表达及其与 EM发病机制的关系。方法 :收集 2 9例EM患者的卵巢子宫内膜异位病灶组织 ,2 9例在位内膜组织及 30例非子宫内膜异位症患者的子宫内膜组织 (对照组 ) ,分别测定 VEGF的表达情况。结果 :1VEGF的表达在位内膜组高于对照组和异位内膜组 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,异位内膜组高于对照组 ,差异亦有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;2在位内膜组和对照组的不同月经周期 VEGF的表达差异无统计学意义(P >0 .0 5 )。结论 :VEGF为促进血管生成的重要细胞因子 ,在 EM的异位内膜及在位内膜中均有表达 ,VEGF的促血管生成是 EM发生发展中的一个重要环节。     

人肺腺癌A549细胞系干细胞样细胞的培养检测及其抗顺铂能力的研究

目的:从人肺腺癌A549细胞系中培养获得含干细胞样细胞的球细胞(Sphere细胞),检测相关标志物表达及其对顺铂的耐药性.方法:采用含特定生长因子的无血清培养基诱导A549细胞的Sphere细胞形成,用亲脂荧光染料标记技术和免疫荧光法检测Sphere细胞中干细胞的存在,用流式细胞术检测干性标志物CD133,OCT4,C...     

厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的:探讨厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549的作用.方法:survivin siRNA转染、厄洛替尼单独或联合应用于人肺腺癌细胞A549,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察对A549细胞的增殖抑制作用,免疫组化染色法观察A549细胞Survivin蛋白的表达情况.结果:survivin ...     

血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子在子宫内膜异位症在位内膜的表达

目的 检测血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在子宫内膜异位症（EM）在位内膜的表达，探讨二种因子与EM发病机制的关系。方法 收集EM患者的在位子宫内膜组织38例及正常子宫内膜37例，采用免疫组织化学SP法分别测定VEGF及bFGF在内膜组织中的表达情况，并用组织学评分对实验结果进行半定量统计，比较其表达强度。结果 （1）VEGF在二组内膜的腺体及间质细胞中均有表达，主要定位于细胞浆，在位内膜组的表达强度高于正常对照组，二者差异有显著性（P＜0.05）；（2）VEGF在EM患者在位内膜分泌期中的表达强度比增生期明显增强，在月经周期中呈周期性变化；（3）bFGF在正常子宫内膜及EM患者在位内膜的增生期和分泌期中均有表达，表达强度差异无显著性（P＞0.05），无周期性变化；（4）VEGF和bFGF在EM患者增生期和分泌期的在位内膜中的表达呈正相关关系。结论 VEGF和bFGF在子宫内膜异位症的在位内膜均有表达，而二者均为促进血管生成的重要细胞因子，从而表明血管生成是EM发生发展中一个重要环节。     

番茄红素对动脉粥样硬化斑块中P选择素和VEGF表达的影响

目的：观察动脉粥样硬化家兔斑块内P选择素和VEGF的表达情况并分析其机制。方法：雄性新西兰兔36只,随机分为3组：正常对照组（12只）,高胆固醇模型组（12只）和番茄红素治疗组（12只）。正常组每天给予正常饮食,模型组每天除正常饮食外,给予1．5％的胆固醇和3％的猪油,治疗组在模型组饮食的基础上给予60mg／kg的6％的番茄红素粉荆。实验周期为12周,待12周后确定模型组成功后麻醉处死家兔,取主动脉标本观察大体形态,进行HE染色观察病理变化,免疫组织化学方法观察斑块内P选择素和VEGF的表达情况。结果：与高胆固醇模型组相比,番茄红素治疗组相对于模型组的主动脉斑块面积减少,斑块内P选择素和VEGF表达也明显减少。结论：番茄红素能减少动脉粥样硬化斑块的P选择素和VEGF的表达,这可能是番茄红素减少动脉粥样斑块的机制之一。     

肺癌病人血管内皮生长因子表达与临床预后的关系

①目的　探讨肺癌病人血管内皮生长因子 (VEGF)表达与预后的关系。②方法　应用SABC免疫组织化学方法检测VEGF在 71例肺癌组织标本中的表达情况。③结果　肺癌组织VEGF表达阳性率为 76 .0 6 % ,明显高于肺良性病变的 2 0 .0 0 % (χ2 =2 1.2 1,P <0 .0 1) ;低分化癌VEGF阳性表达率显著高于高分化癌 (χ2 =4.146 ,P <0 .0 5 ) ,有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者 (χ2 =5 .2 2 6 ,P <0 .0 5 ) ,Ⅲ～Ⅳ期癌显著高于Ⅰ～Ⅱ期癌 (χ2=5 .42 0 ,P <0 .0 5 )。④结论　VEGF是判断肺癌病人预后的重要指标之一。     

STAT3与WWOX在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的：研究STAT3与WWOX在非小细胞肺癌及肺正常组织中的表达及两者之间的关系。方法：应用免疫组织化学S-P法,检测STAT3、WWOX在40例非小细胞肺癌组织、20例正常肺组织中的表达情况,并分析其与各临床病理指标之间的关系。结果：①STAT3在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于肺正常组织（P〈0.01）,WWOX在非小细胞肺癌组织中的表达明显低于肺正常组织（P〈0.01）。②STAT3在腺癌组织中的表达明显高于鳞癌（P〈0.01）,WWOX基因的表达与淋巴结转移相关（P〈0.01）,在有淋巴结转移的肺癌组织,其表达更少或缺失。③STAT3蛋白与WWOX在非小细胞肺癌中的表达呈负相关（P〈0.01）。结论：①非小细胞肺癌中有组成性激活的STAT3信号通路,提示STAT3信号通路在非小细胞肺癌发生、发展中发挥重要作用;②STAT3与WWOX在非小细胞肺癌中的表达呈负相关。     

EphA2和E-cad在非小细胞肺癌中的表达及其临床病理学意义

目的：探讨EphA2和E—cad在NSCLC（non—smallcelllungcRnceY,非小细胞肺癌）中的表达情况及与临床病理特征的关系,并研究EphA2过表达与E—cad表达的相关性,探讨EphA2过表达可能的机制,筛选出能反映肿瘤预后的相关指标。方法：运用免疫组织化学Envision法检测62例NSCLC中EphA2和E—cad的表达情况。结果：1．EphA2在62例NSCLC的阳性表达率为50％（31／62）,EphA2的阳性表达率与有淋巴结转移、临床分期晚、5a生存率有关（P〈0．05）,而与患者吸烟与否、肿瘤的组织学类型和分化程度无关（P〉0．05）。EphA2阴性组的生存时间长于阳性组,有统计学意义（P〈0．01）。2．E—cad在62例NSCLC的异常表达率为53．2％,E—cad的异常表达率与有淋巴结转移、临床分期晚和5a生存率有关（P〈0．01）。与患者吸烟与否、肿瘤的组织学类型和分化程度无关（P〉0．05）,E—cad正常表达组的生存时间长于异常表达组,有统计学意义（P〈0．01）。3．EphA2与E—cad的表达呈负相关性（P〈0．01）。结论：在NSCLC中EphA2的过表达及E—cad的低表达与肿瘤的淋巴结转移、临床分期及术后生存时间有关,因此可作为判断NSCLC预后的指标。     

血管内皮生长因子在肾癌中的表达及其作用

目的　 探讨血管内皮生长因子 (VEGF)的表达与肾癌侵袭、转移等生物学行为的关系。方法　 采用免疫组织化学技术对 4 2例肾癌和 9例正常肾组织中VEGF及微血管密度 (MVD)进行检测。结果　4 2例肾癌组织中VEGF阳性表达 2 7例 (6 4.3% ) ,MVD均值为 (6 4.38± 2 5 .17) ,显著高于正常肾组织 (P <0 .0 1)。肾癌组织中VEGF表达和MVD与其组织类型、分级、淋巴转移及 5年生存期都明显相关 (P <0 .0 1)。结论　肾癌组织中VEGF、MVD可作为判定肾癌预后的重要生物学指标