二氢杨梅素对肺癌A549细胞凋亡的作用

目的 探讨二氢杨梅素（DMY）对肺癌A549细胞的诱导凋亡作用。方法 以肺癌A549细胞为研究对象,采用MTT法研究DMY对A549细胞的抗肿瘤作用,并进一步通过流式细胞术检测DMY对A549细胞的凋亡作用,免疫印迹法（Western blotting）检测促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2表达水平,进一步探讨其机制。
结果 DMY浓度越大,对A549细胞的抑制作用越明显,48h的IC50为64.45g/L;流式细胞术显示,随着DMY浓度的增加A549细胞凋亡也逐渐增加;Western blotting结果显示,DMY可诱导A549细胞中凋亡因子Bax蛋白表达增加,同时抗凋亡因子Bcl-2蛋白表达减少,尤其高浓度组改变明显。
结论 DMY可以在体外诱导A549细胞凋亡。     

二氢杨梅素联合依托泊苷对绒毛膜癌细胞JAR的抑制作用

目的 探讨二氢杨梅素（DMY）联合依托泊苷（VP16）对绒毛膜癌细胞JAR的抑制作用及其相关机制。方法 体外培养JAR细胞,设空白对照组、DMY组、VP16组以及DMY与VP16联合（DMY+VP16）组。MTT法检测各组细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析各组细胞的凋亡率;克隆形成实验检测细胞生存能力;Western blotting法检测凋亡抑制蛋白Bcl-2、细胞凋亡抑制蛋白2（c-IAP2）表达水平。 结果 MTT检测结果显示,与空白对照组比较,DMY组、VP16组及DMY+VP16组在24 h和48 h时间点的细胞存活率均下降,且DMY+VP16组细胞存活率下降最为明显;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术结果显示,与对照组相比各实验组凋亡率均有增高,DMY+VP16组凋亡率明显高于各单独用药组;克隆形成实验结果显示,对于JAR细胞,实验组的克隆球数目均少于对照组,且DMY+VP16组克隆球数目最少;对于正常肝脏HL7702细胞,DMY组与对照组相比无明显差异,VP16组与DMY+VP16相比亦无明显差异;Western blotting实验结果显示,与对照组相比,无论DMY和VP16单独还是联合使用均可下调Bcl-2、c-IAP2蛋白表达,同时DMY+VP16组下调作用最明显。 结论 二氢杨梅素联合依托泊苷明显增强对绒毛膜癌细胞JAR的生长抑制作用,联合使用可以减少化疗药物VP16的用量,其抑制肿瘤细胞作用可能与下调Bcl-2、c-IAP2蛋白的表达有关。     

二氢槲皮素与二氢杨梅素的抗肿瘤活性对比

目的:研究二氢槲皮素和二氢杨梅素对H22 荷瘤小鼠抑瘤作用。方法:建立小鼠H22 移植性肿瘤模型(除空白外)。造模24 h 后分成6 组:模型组,阳性对照组(环磷酰胺25 mg/ kg),二氢槲皮素和二氢杨梅素高、低剂量组(30、10 mg/kg),除阳性对照组腹腔给药,其余各组均灌胃给药,测定其对H22 荷瘤小鼠抑瘤率、免疫器官指数、生化指标和细胞因子含量的影响,并通过HE 染色,观察瘤组织内坏死程度。结果:二氢槲皮素和二氢杨梅素高、低剂量组(30 mg/ kg、10 mg/ kg)均对肿瘤具有一定抑制作用,且均可提高H22 荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数,其中二氢槲皮素高剂量组(30 mg/ kg)抑瘤效果最佳,其抑瘤率为58.8%。二氢槲皮素和二氢杨梅素高、低剂量组均可升高H22 荷瘤小鼠细胞因子白细胞介素鄄2(IL-2)和肿瘤坏死因子 (TNF)的水平,升高超氧化物歧化酶(SOD)的水平,降低丙二醛(MDA)水平。此外,二氢槲皮素和二氢杨梅素高、低剂量组对H22 荷瘤小鼠肝肾功能没有毒理作用。结论:二氢槲皮素和二氢杨梅素高、低剂量组均对肿瘤具有一定抑制作用,其中二氢槲皮素组的作用较明显,且呈剂量依赖性,其作用机制可能与增强抗氧化能力、提高机体免疫功能和升高细胞因子水平有关。     

二氢杨梅素对实验性结肠炎小鼠调节性B细胞的影响

目的 探讨二氢杨梅素(DHM)对实验性结肠炎小鼠的作用及其对调节性B细胞(Breg)的影响.方法 将小鼠随机分为正常组、DSS(葡聚糖硫酸钠)组、DSS+DHM组、DSS+mesalazine组(造模采用4％DSS连续饮用7 d).7 d后,每天分别给予灌胃水(0.2 mL/d)、DHM(40 mg/kg·d)和美沙拉...     

LHRH-PE40对非小细胞肺癌细胞A549的作用

目的研究促黄体激素释放激素(LHRH)基因与绿脓杆菌外毒素A(PE40)基因重组蛋白(LHRH-PE40)对非小细胞肺癌细胞A549的毒性作用。方法从用扫描电镜观察LHRH-PE40对A549细胞产生的细胞毒性作用,用流式细胞仪检测LHRH-PE40对A549细胞周期的影响。结果扫描电镜观察可见LHRH-PE40对A549细胞产生的毒性作用使A549细胞表面凸凹不平,流式细胞仪检测发现LHRH-PE40使A549细胞出现明显的凋亡。结论 LHRH-PE40可以诱导A549细胞凋亡。     

二氢杨梅素联合丝裂霉素对胃癌细胞的生长抑制作用

目的: 探讨二氢杨梅素(AMP)联合细胞化疗药物丝裂霉素(MMC)对胃癌细胞SGC-7901的抑制作用。方法: 体外培养人胃癌细胞株SGC-7901,分别设空白对照组、AMP组、MMC组以及AMP+MMC组。用MTT法观察细胞生长;流式细胞术分析细胞凋亡率;Western blotting检测细胞Bcl-2及survivin的表达情况。结果: 在AMP组中,当浓度在2.2 mg/L-14.84 mg/L时,AMP对胃癌细胞生长均有抑制作用,以14.84 mg/L抑制作用最明显(60.85%±1.13%,P<0.05)。MMC随着浓度由1×10^-3g/L增加至1×10g/L,其抑制率也由17.40%±0.30%增加至72.23%±1.36%,呈递增趋势。AMP联合MMC的抑制作用随着MMC浓度由1×10^-3 g/L增加至5×10^-3g/L,抑制率也由21.83%±2.50%增加至46.70%±1.45%。联合治疗组优于单独给药组。AMP、MMC及AMP+MMC均可以下调Bcl-2及survivin的表达,其中AMP+MMC组下调作用最明显。结论: AMP联合MMC可以增强对胃癌细胞的抑制作用,联合应用可以减低MMC的剂量;其抑制肿瘤作用可能与下调Bcl-2及survivin蛋白的表达有关。     

异鼠李素及黄酮对人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MCF-7的影响

目的 :探讨新药异鼠李素及黄酮能否抑制人肺癌细胞A5 49、人乳腺癌细胞MCF 7增殖及其初步研究其机制。方法 :以不同浓度异鼠李素、黄酮加入体外培养的A5 49、MCF 7细胞中 ,用MTT比色法 ,细胞计数法 ,细胞形态学等观察测定体外抗肿瘤活性 ,用流式细胞仪等观察其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。结果 :新药异鼠李素及黄酮对人肺癌细胞A5 49、人乳腺癌细胞MCF 7有明显抑制作用 ,其作用与肿瘤细胞凋亡有关。结论 :异鼠李素及黄酮是一种有较好前景的抗肿瘤的新型中药 ,诱导细胞凋亡可能是其抗肿瘤作用机制之一异鼠李素及黄酮对人肺癌细胞A549、…     

纳米羟基磷灰石可介导转染人肺癌A549细胞

目的 探讨纳米羟基磷灰石（nHAP）介导带有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因的pGenesil-1质粒转染人肺癌A549细胞的可行性。方法 用均相沉淀法制备nHAP;透射电镜观察纳米粒结构;经超声分散及碳酸钠预处理后,在pH值7.4环境下应用多聚赖氨酸（PLL）修饰nHAP;实验分为nHAP-PLL组、脂质体组及对照组,分别配制转染复合物并转染A549细胞;荧光显微镜观察EGFP的表达;流式细胞仪检测pGenesil-1的转染率。结果 透射电镜下nHAP呈针状颗粒,粒径较均匀,约（15~20）nm×（60~80）nm,分散程度良好;nHAP-PLL组和脂质体组均见EGFP表达阳性的A549细胞,对照组未见EGFP表达阳性的A549细胞;nHAP-PLL组pGenesil-1转染A549细胞的转染率为(31.8±1.9)%,与脂质体组的转染率 (33.4±3.7)%无差异（P>0.01）,对照组未见转染阳性的A549细胞。结论 nHAP经PLL表面修饰后可介导人肺癌A549细胞基因转染。     

BHD基因在人肺腺癌A549细胞的表达及其对A549细胞转移能力的影响

目的 了解BHD基因在肺癌细胞中的表达部位及其在影响肺癌细胞转移、运动方面的作用. 方法 制备BHD真核表达质粒,转染肺腺癌细胞,用免疫荧光法检测Folliculin蛋白在肺癌细胞中的表达位置;筛选sRNAi片段,选取有效抑制片段转入肺癌细胞,与转入BHD质粒的肺癌细胞对比,用Transwell实验了解BHD基因对肺癌细胞运动方面的影响. 结果 转入BHD质粒后,A549细胞质内出现明显的Folliculin蛋白表达,Transwell实验显示,转入BHD质粒能抑制A549细胞的侵袭能力,而转入BHD siRNA片段的A549细胞运动迁移能力升高.结论 BHD表达产物Folliculin蛋白在肺癌细胞的胞质内表达,BHD可能是肺癌转移抑制基因.     

赫赛汀对吉非替尼诱导肺癌A549细胞凋亡的影响

目的： 研究吉非替尼与赫赛汀联合应用对人肺腺癌A549 细胞凋亡的影响。方法: 应用MTT法,流式细胞仪Annexin V－PI 双标法、DAPI荧光染色等多项方法,体外研究吉非替尼与赫赛汀联合对A549 细胞的促凋亡作用。结果: 吉非替尼与赫赛汀单独应用及联合应用均可以明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长，促进细胞凋亡,并呈浓度及时间依赖性,2者联合作用人肺腺癌A549 细胞24 h、48 h、72 h 的凋亡率显著高于单用吉非替尼或赫赛汀组(P<0.05),2者呈现出相加的抗瘤效果。结论: 吉非替尼与赫赛汀联合应用在体外对人肺腺癌A549 细胞有明显的促凋亡作用。     

川楝子水提物对肺癌A549细胞增殖的抑制作用

目的:研究川楝子水提物对肺癌A549细胞的作用,初步探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测川棟子水提物对A549细胞的增殖抑制率,同时观察细胞形态变化;qPCR法检测川楝子水提物作用后p53、Bax、Bcl-2、Bad和Bcl-xl等在mRNA水平的相对变化。结果:川楝子水提物可抑制肺癌A549细胞的增殖,其抑制率与作用时间和作用浓度呈正相关;实验组较对照组p53的mRNA表达量上调,Bax和Bad的mRNA表达量上调,Bcl-2和Bcl-xl的mRNA表达量下调。结论:川楝子水提物可抑制A549细胞增殖,可能与其激活P53基因和Bcl-2家族诱导细胞凋亡有关。     

5-氟尿嘧啶诱导人肺腺癌A549细胞自噬

目的 探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)是否诱导人肺腺癌A549细胞发生自噬.方法 吖啶橙(AO)荧光染色和透射电镜观察自噬泡的变化;细胞免疫化学法测定LC3-Ⅱ的表达;流式细胞术及吖啶橙染色结合激光扫描共焦显微镜检测细胞凋亡;DNA电泳检测凋亡梯形条带的产生.结果 吖啶橙荧光染色和透射电镜观察结果显示,5-氟尿嘧啶处理细胞...     

蛋白酶激活受体激活对A549细胞IL-28和IL-29 mRNA表达的影响

目的用蛋白酶和蛋白酶激活受体激动肽(PAR-AP)刺激A549细胞后检测细胞中白细胞介素IL-28和IL-29 mRNA表达情况以分析蛋白酶激活受体激活对人肺上皮细胞IL-28和IL-29基因表达的影响。方法用最佳工作浓度的凝血酶、胰蛋白酶、类胰蛋白酶及蛋白酶激活受体-1,2,3,4的激动肽刺激A549细胞后,分别在第2、8、16h收集细胞,用实时定量逆转录聚合酶链式反应(q-RT-PCR)方法分析A549细胞内IL-28和IL-29 mRNA表达。结果凝血酶作用A549后,细胞内IL-29 mRNA表达增强,高达对照组9.6倍;而细胞内IL-28 mRNA表达无明显变化。胰蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强,分别为对照组6.1倍和4.4倍。类胰蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强分别高达对照组的3.1倍和2.1倍。弹性蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29 mRNA表达增强高达对照组5.1倍而IL-28 mR-NA无明显变化。PAR-1AP(SFLLR)作用后,A549细胞内IL-29 mRNA表达增强为对照组1.7倍而IL-2...     

Bevacizumab induces A549 cell apoptosis through the mechanism of endoplasmic reticulum stress in vitro

Aims: To observe the effect of bevacizumab on human A549 cells and explore its mechanism. Methods: After different concentrations (0 μM, 1 μM, 5 μM, 25 μM) of bevacizumab treating in A549 cells, CCK8 assay detect the impact of bevacizumab on A549 cell proliferation and flow cytometry determine the effect of bevacizumab on human A549 cells apoptosis. Real-time PCR and Western blotting detect the changing expression of the target gene (CHOP, caspase-4, IRE1, XBP-1) on mRNA and Protein level. Results: Treatment with bevacizumab for 24-hr have induced cell death in a does-dependent manner dramatically (P<0.05). In terms of the mRNA level, expression of XBP-1 has increased obviously in each group (1 μM, 5 μM, 25 μM) (P<0.01); the expression of CHOP (25 μM) and caspase-4 (5 μM) have increased slightly (P<0.05). In terms of the protein level, the expression of CHOP has increased obviously in each group (1 μM, 5 μM, 25 μM) when compared with the control group (0 μM) (P<0.05). As for caspase-4 (5 μM, 25 μM), the expression have increased slightly when compared with the control group (0 μM) (P<0.05). Conclusion: Bevacizumab can induce A549 cell apoptosis through the mechanism of endoplasmic reticulum stress.     

胶质瘤细胞及其干细胞的放疗敏感性差异

目的探讨脑胶质瘤细胞与脑肿瘤干细胞(BTSCs)的放射敏感性差异。方法胶质瘤细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基进行培养。用血清剥夺法(无血清的DMEM/F12培养基添加bFGF、EGF和B27,即干细胞培养液)培养胶质瘤干细胞。CD133免疫细胞化学染色鉴定BTSCs。用直线加速器分别以0、2、4、6、8、10Gy X线照射胶质瘤细胞及BTSCs,然后继续培养36h。流式细胞仪检测上述细胞中CD133+细胞比率。采用MTT法检测细胞的存活情况。结果胶质瘤细胞中存在BTSCs,后者能在干细胞培养液中存活并悬浮生长,增殖形成克隆球,具有自我更新和增殖能力,表达特异性标志物CD133。胶质瘤细胞及BTSCs在X线照射后,其增殖能力都下降,但BTSCs的下降幅度远没有胶质瘤细胞大(P0.05)。CD133+比率显示,X射线对普通胶质瘤细胞中极其微量的CD133+细胞几乎没有影响,而BTSCs中的CD133+细胞的比例在0-10GyX射线放射过程中,与放射剂量成正比(P0.05)。结论 BTSCs的放射敏感性明显低于胶质瘤细胞,其机制可能与放疗过程中CD133+细胞的增加有关。     

I. hepatitis E virus (87A strain) propagated in A549 cells

A strain of hepatitis E virus (HEV), the 87A strain isolated in 2BS cells from the feces of a patient with hepatitis E, has been reported previously. In this study, the 87A strain was propagated in A549 cells, and the marked cytopathic effect (CPE) appeared in the infected monolayer cells. The size of this virus is about 30 nm in diameter. Furthermore, HEV-RNAfrom the supernatants of the virus of different passages was detected by polymerase chain reaction (PCR) amplification using ET1 .1 HEV primers. A band of HEV for 239 bp from PCR products was revealed by electro-phoresis. PCR products of the fourth passage were sequenced. These results show that the 87A virus replicates in the A549 cell line. © Wiley-Liss, Inc.     

RNA干扰对人肺泡上皮A549细胞巨噬细胞移动抑制因子基因表达抑制作用

目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)小干扰RNA(siRNA)干扰对人肺泡上皮A549细胞株MIF基因表达的影响.方法将MIF siRNA用转染剂Interferin介导转染体外培养的A549细胞,通过RT-PCR方法观察不同浓度MIF siRNA转染后,对MIF mRNA表达的影响;采用细胞免疫荧光方法分析MIF蛋白表达的强弱;应用MTT方法测定MIF siRNA转染对细胞的毒性,及脂多糖(LPS)刺激对A549细胞生存率的影响.结果 (1)MIF siRNA转染人肺泡上皮A549细胞株后,可下调细胞中MIF mRNA的表达,只有当MIF siRNA转染浓度大于50 nmol/L时,才能明显下调MIF mRNA的表达;(2)MIF siRNA转染人肺泡上皮A549细胞株后,A549细胞MIF的荧光蛋白表达也明显降低,在此基础上再加入MIF刺激,MIF的蛋白表达又明显增加;(3)MIF siRNA转染对A549细胞几乎没有毒性,且对LPS刺激A549细胞导致细胞死亡及细胞的生存率下降有一定的保护作用.结论 MIF siRNA能在A549细胞特异沉默目的基因MIF和抑制MIF蛋白的表达,且对LPS刺激导致细胞死亡有一定的保护作用.