暗纹东方Tun蛋白酶活性的研究

pH是影响蛋白酶活性的显著因素之一。本文仅初步探讨了pH对一龄、二龄两种规格暗纹东方Tun的胃、肠、肝胰脏蛋白酶活性的影响。结果表明,一、二龄鱼的胃蛋白酶最适pH均在2．2,肠蛋白酶最适pH为8．5,而一龄鱼肝胰脏蛋白酶最适pH在9．0以上,二龄鱼的最适pH为8．5。另外,蛋白酶活性大小依次为胃、肠、肝胰脏。0．5mol/L CaCI2溶液能明显地抑制胃蛋白酶的活性。     

养殖三龄暗纹东方鲀性腺发育及其毒性

对三龄养殖暗纹东方鲀性腺发育情况进行了较全面观察与测量,同时对其卵巢和肝脏的毒性进行了检验,结果表明养殖三龄暗纹东方鲀雌鱼和雄鱼性腺均发育到了第ＩＶ期,成熟系数在１９．８～２６．０ 之间,存在作为种鱼进行全人工繁殖的可能性;养殖三龄暗纹东方鲀的肝脏和卵巢均未检出毒性．     

暗纹东方鲀线粒体若干tRNA基因的克隆及序列分析

利用分离纯化的暗纹东方鲀肝脏mtDNA为模板，按照红鳍东方纯（Takifugu rubripes）mtDNA序列设计合成特异引物进行PCR扩增，首次克隆并测定了暗纹东方纯mtDNA的Cytb、COⅠ、COⅡ、COⅢ、D-loop等5个重要基因及其侧翼的8个tRNA基因。上述基因均已在GenBank登录。8个tRNA基因含有69-72个碱基。推定了各个tRNA的二级结构并进行了初步的序列分析。结果表明：8个tRNA基因具有较为典型的三叶草型结构，各臂的碱基配对率大多数较高，稳定性较好.     

暗纹东方鲀鱼苗培育中苗间互残行为对成活率的影响

暗纹东方鲀育苗期饵料不同投喂量与成活率的关系表明，苗期相互残食是其行为特征．鱼苗饱食时残食减轻，饥饿时残食加重．鱼苗个体大小差异不显著时残食减轻，差异显著时残食加重．喂食人工饵料的驯化完成后，残食现象大大减轻．     

暗纹东方鲀线粒体12S rRNA基因的克隆及序列分析

利用提取纯化的暗纹东方纯肝脏的mtDNA为模板,按照红鳍东方纯mtDNA序列设计合成特异引物进行PCR扩增,首次克隆并测定了暗纹东方纯mtDNA的12S rRNA基因.同时运用DNA分析软件,对暗纹东方纯与GenBank中选取的几种同目鱼类的相应序列进行比较分析,显示暗纹东方纯与这些鱼类的12S rRNA基因具有较高的同源性.利用分子生物学相关软件,对暗纹东方纯及与其同目的5种鱼的12S rRNA基因序列建立NJ和MP分子进化树,并与传统的分类地位进行比较,结果表明与传统的分类地位基本吻合.     

嗜水气单胞菌感染暗纹东方鲀脾脏的蛋白质组学分析

为了解暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)受到病原菌感染后参与应答的主要蛋白的功能与调控作用,采用TMT标记、高效液相色谱(HPLC)分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术,分析了暗纹东方鲀感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 12 h后脾脏组织的蛋白表达水平,鉴定差异表达蛋白,并通过亚细胞定位、GO(Gene Oncology)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)对差异表达蛋白进行进一步分析.本次实验共鉴定到306个差异表达蛋白,其中120个上调表达蛋白,186个下调表达蛋白;利用平行反应检测实验(PRM)对4个(1个上调,3个下调)与免疫相关的差异蛋白进行验证,其结果与蛋白质测序结果一致;亚细胞定位结果显示:差异表达蛋白主要定位在细胞质、细胞核和胞外; GO分析发现:差异表达蛋白参与的主要生物进程有代谢过程、细胞进程和单一生物进程,主要的分子功能有结合、催化活性和机构分析活性; KEGG通路分析结果显示:差异表达蛋白主要参与了核糖体、视黄醇代谢、卟啉和叶绿素代谢、ECM受体相互作用、吞噬体...     

暗纹东方鲀（Takifugu obscurus）性别分化的组织学及芳香化酶基因表达研究

采用组织切片技术和实时定量PCR（qRT-PCR）方法研究了暗纹东方鲀性别分化过程中性腺发育的组织学及芳香化酶基因CYP19A的表达变化.结果显示：孵化后11d的仔鱼切片中可看到原始生殖细胞（PGC）;孵化后17d可看到隆起的性腺原基（GA）;孵化后26d发育成为原始性腺（PG）并从体腔膜上游离出来.卵巢分化时间早于精...     

野生和人工养殖暗纹东方鲀不同组织中河豚毒素(TTX)含量的初步研究

采用小鼠生物检测法测定了野生和人工养殖暗纹东方不同组织中河豚毒素（ＴＴＸ）的含量．野生暗纹东方不同组织中ＴＴＸ含量由高到低依次是：卵巢、肝脏、胃肠、肾脏,肌肉毒性最小;而人工养殖暗纹东方不同组织中ＴＴＸ含量都极低,几乎无毒．结果表明,用人工养殖方法可以培育出低毒或无毒河豚,在一定程度上支持了河豚毒素的微生物起源学说．     

暗纹东方鲀线粒体ND1及其侧翼tRNA基因的克隆及序列分析

利用提取纯化的暗纹东方纯（rakifugu fasciatoz）肝脏的mtDNA为模板，按红鳍东方纯（rakifugu rubripes）mtDNA序列设计合成特异引物进行PCR扩增，首次克隆并测定了暗纹东方纯mtDNA的ND1亚基及其侧翼的tRNA基因。运用DNA分析软件，对暗纹东方纯与GenBank中选取的几种同目的鱼类的相应序列进行比较分析，显示暗纹东方纯与这些鱼类的各个相应基因具有较高的同源性。利用分子生物学相关软件，对暗纹东方纯及与其同目的6种鱼的ND1基因序列建立NJ和MP分子进化树，并与传统的分类地位进行比较，结果表明与传统的分类地位基本吻合。3个tRNA基因含有69～71个碱基，推定了各个tRNA的二级结构，均具有较为典型的三叶草型结构。     

暗纹东方鲀胚胎发育的观察

详细记叙了暗纹东方　胚胎发育各阶段的形态特征及早期发育的生物学资料．暗纹东方　的卵为沉性卵，入水后具粘性，其粘度与受精效果有关．卵径为１．１１８～１．２７４ｍｍ，具油球２８０～３９０个，油球径为０．０２６～０．０７８ｍｍ．作者采用连续法对受精卵的发育进行观察．在水温１８．７～２１．２℃时，受精卵历时１３９ｈ１０ｍｉｎ开始孵出仔鱼．其发育过程划分为３５个时期．本研究可为开展暗纹东方　的人工育苗提供必要的参考资料．     

养殖三龄暗纹东方性腺发育及其毒性

对三龄养殖暗纹东方Ｔｕｎ性腺发育情况进行了较全面观察与测量,同时对其卵巢和肝脏的毒性进行了检验,结果表明,养殖三龄暗纹东方Ｔｕｎ雌鱼和雄鱼性腺均发育到了第Ⅳ期,成熟系数在１９．８－２６．０之间。     

野生与养殖暗纹东方鲀(Fugu obscurus)脂肪酸组成和含量的初步研究

对野生及２龄养殖暗纹东方肝脏和肌肉总脂中脂肪酸的组成和含量进行了测定,结果表明主要的组分均为１６０、１６１、１８１,其中１８１（亚油酸）是最主要的脂肪酸．野生暗纹东方肝脏和肌肉总脂中的脂肪酸种类,尤其是多烯酸种类,均多于养殖鱼．养殖鱼肝脏中（ＤＨＡ＋ＥＰＡ）的含量超过了野生鱼,而肌肉中（ＤＨＡ＋ＥＰＡ）的含量与野生鱼相近     

暗纹东方鱼苗培育中苗间互残行为对成活率的影响

暗纹东方育苗期饵料不同投喂量与成活率的关系表明,苗期相互残食是其行为特征.鱼苗饱食时残食减轻,饥饿时残食加重.鱼苗个体大小差异不显著时残食减轻,差异显著时残食加重.喂食人工饵料的驯化完成后,残食现象大大减轻.     

盐度、温度和pH对2株海南地衣芽孢杆菌相对蛋白酶活性的影响

采用脱脂牛奶平板法,测定了不同盐度、温度和pH对2株分离白海南热带海水养殖系统的地衣芽孢杆菌（Bacillus lichen@rmis）Pb．WC09001和Pb—WC09002的相对蛋白酶活性的影响．结果表明：随着盐度的增加,2个菌株的相对蛋白酶活性都趋于减弱,当盐度增加到50时,仅Pb-WC09001还存在一定的酶活性,其相对蛋白酶活性为1．56U·mL-1,说明Pb—WC09001对高盐度环境的适应性更强．此外,还测定了在18～38℃（以4℃为梯度差）范围内菌株的相对蛋白酶活性,当在与菌体培养相同的温度下测定培养液的酶活时,Pb-WC09001与Pb—WC09002酶活性最高的温度均为34℃;当在30℃测定2个菌株在不同温度下的培养液酶活时,酶活性最高的培养液所对应的培养温度分别为22℃和30℃,说明这2个菌株在相同温度下可产生不同的蛋白酶,同时,Pb-WC09001在低温环境下的相对酶活性强于Pb-WC09002．在30℃、盐度30、菌体终浓度为2×10^3／mL时,Pb-WC09001在pH8．0、Pb—WC09002在pH7．5时的酶活性最高,相对酶活均为2．74U·mL-1,因此,Pb-WC09001对海水环境（pH8．0—8．4）的适应性更强．     

pH对真鲷蛋白酶和淀粉酶活力的影响

应用酶学分析研究不同pH度条件下真鲷成鱼胃、肠、肝胰脏和幽门盲囊4个部位蛋白酶和淀粉酶活力的变化.结果表明,真鲷成鱼胃、肠、肝胰脏和幽门盲囊蛋白酶的最适pH分别为6.4,7.2,7.6和8.4,淀粉酶的最适pH分别为6.4,8.0,8.0和7.6.     

锯缘青蟹幼体消化酶活力昼夜节律的实验研究

定活性培育条件下,锯缘青蟹幼体「蚤状幼体（Ｚ５）、大眼幼体（Ｍ）」４种消化酶（蛋白酶、α－淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶）比活力的昼夜变化,结果表明,青蟹幼体４种消化酶活力表现出昼夜节律,蜕皮后第２天的Ｚ５幼体,其４种消化酶比活力仅表现出一种单相周期型昼夜变化模式为临变态到Ｍ的Ｚ５幼体和Ｍ幼体,其４种消化酶活力则表现出４种不同的昼夜变化模式,讨论了青蟹幼体消化酶活力昼夜节律可能的调节机制,初步认为,幼体消化酶活力的昼夜节律主要受发育期和蜕皮周期的影响,并通过激素这个中间环节控制的消化酶的合成和分泌。