正常胎脑髓鞘发育状况的MRI研究

目的：探讨胎脑髓鞘的生长发育状况。材料与方法：采用超导０．３５Ｔ磁共振成像仪，对４４例孕妇进行ＭＲ成像，分析其正常胎脑主要结构的信号变化。结果：胎儿的大脑（基底节除外）、小脑实质在Ｔ１加权像上为略低信号，在质子密度加权像上为等信号，在Ｔ２加权像上为高信号。孕２９周前脑干、基底节在Ｔ１加权像上呈略低信号，孕２９周后呈等信号；在质子密度加权像及Ｔ２加权像上其信号同大脑、小脑实质信号。结论：脑干、基底节的髓鞘在孕２９周后形成；其形成过程由脑干开始至基底节；而在胎儿期，大脑（基底节除外）、小脑实质内髓鞘尚未形成     

实验性癫痫大鼠血清MBP，脑髓鞘MBP免疫组化和电镜研究

为探索脑髓鞘及其髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）与癫痫发病机理的相关性，作者采用简易的ＭＢＰＥＬＩＳＡ检测实验性癫痫大鼠血清ＭＢＰ含量，同时进行脑ＭＢＰ免疫组化和髓鞘电镜观察。结果显示：癫痫大鼠血清ＭＢＰ含量高于阈下刺激组和正常组（Ｐ＜０．０５），与临床癫痫患者血清ＭＢＰ增高的结果类似；癫痫大鼠脑海马区ＭＢＰ免疫组化和髓鞘电镜观察结果均显示部分区域原有髓鞘规则的多层膜结构松解、紊乱。由此表明癫痫不仅伴有髓鞘损害和脂质组成变化，同时还伴有蛋白质如ＭＢＰ组成的改变和释出，从而影响神经冲动精确定向和快速传导，在癫痫发病机理中起勿容置疑的作用     

实验性癫痫大鼠血清MBP,脑髓鞘MBP免疫组化和电镜研究

为探索脑髓鞘及其髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）与癫痫发病机理的相关性，作者采用简易的ＭＢＰＥＬＩＳＡ检测实验性癫痫大鼠血清ＭＢＰ含量，同时进行脑ＭＢＰ免疫组化和髓鞘电镜观察。。结果显示，癫痫大鼠血清ＭＢＰ含量高于阈下刺激组和正常组组（Ｐ〈０．０５），与临床癫痫电镜观察结果均显部分区有髓鞘规则的多层膜结构松解、紊乱、由此表明癫痫不仅伴有损害和脂质组成变化，同时还伴有蛋白质和如ＭＢＰ组成的改变和释出，从而     

氯化甲基汞对不同发育阶段大鼠脑组织c-Jun表达的影响

目的 :探讨氯化甲基汞 (MMC)对发育脑组织损伤的机理。方法 :将 Wistar系妊娠大鼠于妊娠 7～ 1 0 d连续灌胃给予 MMC 4mg/kg,取 P1 (postnatal day 1 ) ,3,5,7,1 0 ,1 5仔鼠脑组织制备常规组织切片 ,采用免疫组织化学法检测 c- Jun表达。结果 :对照组发育阶段仔鼠大、小脑有c- Jun表达。随着出生后时间延长 ,大、小脑c- Jun阳性细胞数下降 ,并且 c- Jun阳性细胞具有典型凋亡形态。实验组 c- Jun表达有高于对照组的趋势 ,其中 P7,1 0 ,1 5小脑中 c- Jun表达明显高于对照组 (P<0 .0 5)。结论 :c- Jun参与了脑细胞发育中正常的凋亡过程。MMC诱导大鼠脑发育中神经细胞凋亡 ,可能是通过 c- Jun表达实现的。     

人脑髓鞘硷性蛋白的分离纯化

A simplified procedure for isolation and purification of myelin basic protein (MBP) from human brain is described. Purified myelin from white matter was isolated at first, then delipidated with heated organic solvents. The pellet was washed with triethanolamine buffer and extracted with 0.01 mol/L HCl. Finally the protein in the acidic supernatant was purified with Sephadex G-150 column. By using three different PAGE and immunoelectrophoresis, the purified MBP was identified as a homogeneous component with an apparent molecular weight of 18.5 kd and pI 10.6. This procedure has the advantage of simplicity, rapidity, high yield and purity.     

大鼠不同发育期脑神经元核抗原的表达研究

目的研究正常大鼠不同发育阶段脑神经元核抗原(neuronal nuclei,NeuN)的表达。方法应用免疫组化及West-ern blot观察不同发育阶段大鼠NeuN的表达及变化。结果各发育阶段大鼠脑皮质及海马NeuN免疫组化阳性染色细胞随日龄逐渐增加,积分光密度值P0、P2、P7、P15各组之间比较差异有统计学意义。P15、P30、P90 3组间差异无统计学意义。Westernblot检测各组全脑NeuN相对光密度值随大鼠日龄逐渐增大,至P30达高峰,其后有所下降。除P15、P30组之间差异无统计学意义外,其余各组之间差异均有统计学意义。结论大鼠脑NeuN蛋白自出生时已有少量表达,P2~P15迅速增加,P30已达高峰,提示大鼠脑灰质发育优先于白质。     

人脑髓鞘硷性蛋白的分离纯化

作者从人脑组织先分离出髓鞘,再经热有机溶剂除脂、三乙醇胺硷性液洗涤和稀酸液抽提、最后用Sephadex G-150柱层析纯化制备出人脑髓鞘硷性蛋白。经三种不同类型的聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫电泳证明,该产品为单一组分,并测得其分子量为18.5kd,等电点为10.6,与文献报道相符。本法具有简便快速、产量和纯度均高等优点,为人脑髓鞘硷性蛋白研究提供了可靠的手段。     

孕期注射Poly（I∶C）对大鼠子代认知行为及脑髓鞘碱性蛋白的影响

目的 通过分析孕鼠感染多聚肌苷酸：多聚胞苷酸（Polyriboinosinic-polyribocytidilic acid,Poly （I∶C）后子代行为学和脑白质髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）的变化,了解脑白质在孕期感染所致子代行为异常中的作用.方法两组模型组孕鼠分别给予5 mg/kg Poly（I∶C）和10 mg/kgPoly（I∶C）处理,对照组给予5 mg/kg生理盐水处理.待子代生长至8周时用前脉冲抑制实验、被动规避实验、主动规避实验检测子代精神分裂症样行为,用免疫组化方法观察脑白质MBP的变化.结果 前脉冲抑制结果显示PP2、PP4、PP8差异有显著性（F=10.381,P=0.001,F=10.313,P=0.001,F=15.233,P=0.000）,两个模型组均小于对照组,双倍剂量组均小于单倍剂量组（P＜0.05）;被动规避结果显示T1、T2差异有显著性（F=17.524,P=0.000,F=23.555,P=0.000）,两个模型组的T1时间均大于对照组,双倍剂量组大于单倍剂量组（P＜0.05）;两模型组T2时间均小于对照组,双倍剂量组小于单倍剂量组（P＜0.05）;主动规避结果显示总条件反射次数和条件反射率差异有显著性（F=8.631,P=0.000,F=6.986,P=0.001）,两个模型组均小于对照组,双倍剂量组小于单倍剂量组（P＜0.05）;两模型组大鼠脑白质MBP免疫组化结果与对照组相比有统计学意义（P＜0.05）,两模型组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 Poly（I∶C）处理后子鼠存在行为学和MBP的改变,且行为学改变的程度与药物剂量有相关性.     

大鼠出生后不同发育阶段大脑海马CA3区PCNA和NGF表达的研究

目的:通过对大鼠出生后海马CA3区PCNA和NGF表达的研究,以期寻找出大脑海马的发育规律.方法:取生后第1天、第2天、第3天、第5天、第10天、第20天、第30天大鼠脑,10%福尔马林固定,免疫组化染色,观察PCNA、NGF在大脑海马CA3区表达的变化情况.结果:大鼠出生后海马CA3区细胞增殖以第5天最为明显,其中多形层细胞增殖数量最多,其次是分子层,锥体层细胞增殖最少,第10天以后逐渐减少,第30天时基本不再有增殖.NGF在第1～5天时未见表达,第10天开始出现表达,其中以锥体层阳性表达最多,第20天时基本稳定.结论:NGF的表达对神经细胞的生存有支持作用.     

氯化甲基汞对不同发育阶段大鼠脑组织c—Jun表达的影响

目的：探讨氯化甲基汞（ＭＭＣ）对发育脑组织损伤的机理。方法：将Ｗｉｓｔａｒ系妊娠大鼠于妊娠７￣１０ｄ连续灌胃给予ＭＭＣ ４ｍｇ／ｋｇ,取Ｐ１（ｐｏｓｔｎａｔａｌ ｄａｙ １）,３,５,７,１０,１５仔鼠脑组织制备常规组织切片,采用免疫组织化学法检测ｃ－Ｊｕｎ表达。结果：对照组发育阶段仔鼠大、小脑有ｃ－Ｊｕｎ表达。随着出生后时间延长,大,小脑ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞数下降,并且ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞上有典型凋     

人不同胎龄胎脑海马神经干细胞发育规律初探

目的探讨人不同胎龄胎脑海马部位神经干细胞的发育规律.方法收集胎龄16～32周的水囊引产胎儿100例,采用免疫组织化学和光镜技术对人胎脑海马部位神经干细胞的分布、形态、存在方式以及数量进行检测.结果不同胎龄胎脑海马均存在神经干细胞,神经干细胞位于海马多形细胞层、锥体细胞层、颗粒细胞层及分子层,以多形细胞层、锥体细胞层及颗粒细胞层多见.细胞呈圆形、椭圆形、三角形及星形,以圆形和椭圆形多见,未见明显突起.细胞胞浆丰富,核呈圆形及椭圆形,染色质疏松,2～6个核仁不等.多数单个散在分布于其它神经元间,可见对称分裂现象,但有的神经干细胞呈簇状及群状分布,各组神经干细胞随着胎龄的增加呈减少趋势.结论人不同胎龄胎脑海马广泛存在神经干细胞,各胎龄神经干细胞在分布部位、形态、存在方式及数量上存在一定的差异,海马可能是神经干细胞新的生发区.     

脑发育不同阶段慢性铅暴露对大鼠在体海马不同时间一氧化氮含量及合酶活性的影响

目的:比较脑发育不同阶段低浓度慢性铅暴露对大鼠在体海马一氧化氮含量及合酶活性的影响。方法:分别在仔鼠出生21 d、42 d、63 d时测定对照组、断乳后暴露组、母体暴露组和持续暴露组仔鼠血铅含量和海马NO含量和NOS活性,并与对照组进行比较。结果:各暴露组在不同时间血铅含量均高于对照组(P<0.05)。断乳后铅暴露组和持续铅暴露组NOS活性与对照组比较,差异均有显著性(P<0.05),出生21 d时明显高于对照组,而42 d和63 d明显低于对照组。持续暴露组NO含量与对照组比较,差异有显著性,出生21 d时明显高于对照组,而42 d和63 d明显低于对照组。结论:脑发育任一阶段的慢性铅暴露均对海马NO含量和NOS活性有影响。与发育成熟海马相比,未成熟期海马对铅的神经毒性更为敏感,突触可塑性更易受损。     

脑发育不同阶段慢性铅暴露对大鼠在体海马不同时间一氧化氮含量及合酶活性的影响

目的：比较脑发育不同阶段低浓度慢性铅暴露对大鼠在体海马一氧化氮含量及合酶活性的影响。方法：分别在仔鼠出生21 d、42 d、63 d时测定对照组、断乳后暴露组、母体暴露组和持续暴露组仔鼠血铅含量和海马NO含量和NOS活性,并与对照组进行比较。结果：各暴露组在不同时间血铅含量均高于对照组（P〈0.05）。断乳后铅暴露组和持续铅暴露组NOS活性与对照组比较,差异均有显著性（P〈0.05）,出生21 d时明显高于对照组,而42 d和63 d明显低于对照组。持续暴露组NO含量与对照组比较,差异有显著性,出生21 d时明显高于对照组,而42 d和63 d明显低于对照组。结论：脑发育任一阶段的慢性铅暴露均对海马NO含量和NOS活性有影响。与发育成熟海马相比,未成熟期海马对铅的神经毒性更为敏感,突触可塑性更易受损。     

脑组织糖胺聚糖对脑发育的影响

研究目的探讨出生后不同年龄大鼠脑组织中糖胺聚糖对脑发育的影响。研究背景糖胺聚精在关节软骨和动脉壁中所起的作用报道很多，而在脑组织发育中的作用却报道甚少。研究方法测定出生后不同年龄大鼠脑组织（包括全脑、大脑、小脑和脑干）中的糖胺聚糖含量，并对精胺聚据与DNA含量之间的关系进行了统计学分析。结果大鼠全脑中精胺聚糖含量在出生后1～15天迅速增加，第30天下降至第8天水平，此后基本处于平稳状态。相关分析表明，粘胶聚糖含量与DNA含量呈正相关。脑组织中糖胺聚糖含量以大脑最高，脑干次之，小脑最低。结论糖胺聚糖与脑发育有密切关系。     

甲状腺激素缺乏对不同发育时期大鼠脑组织氧化应激指标的影响

目的：研究甲状腺激素缺乏对不同发育时期大鼠脑组织丙二醛（MDA）、总抗氧化力（TAC）及超氧化物歧化酶（SOD）的影响,探讨甲状腺激素缺乏影响鼠脑发育的机制。方法：实验组以丙基硫氧嘧啶溶液灌胃孕鼠制造大鼠围产期甲状腺激素缺乏模型,收集出生后7、14和21 d的仔鼠血清和脑组织,测定血清游离三碘甲状原氨酸及甲状腺素（FT3 、FT4）水平,脑组织匀浆后检测MDA、TAC及SOD的水平。正常孕鼠所产的年龄匹配仔鼠作为对照组,同样测定上述指标。结果：21 d实验组仔鼠脑组织MDA水平高于正常对照组［(14.63±3.44) μmol/g vs (10.52±2.32) μmol/g,P<0.05］;TAC水平高于正常对照组［(0.051±0.006) mmol/g- vs (0.042±0.003) mmol/g,P<0.05］;SOD活性高于正常对照组［(79.63±10.10) μmol?min-1/g vs （63.51±8.35） μmol/min/g,P<0.05］。实验组与对照组7 d和14 d的标本MDA水平、TAC水平及SOD活性比较差异无显著性［7 d MDA:(11.20±2.39) μmol/g vs (12.29±1.79) μmol/g,P>0.05;14 d MDA: (13.07±3.16) μmol/g vs (12.98±2.93) μmol/g,P>0.05;7 d TAC:(0.046±0.006) mmol/g- vs (0.047±0.004) mmol/g,P>0.05;14 d TAC:(0.042±0.007) mmol/g vs (0.046±0.007) mmol/g,P>0.05;7 d SOD:(66.34±11.20) μmol/min/g vs (65.49±7.52) μmol/min/g,P>0.05;14 d SOD:(67.53±12.01) μmol/min/g vs (64.57±8.28) μmol/min/g,P>0.05］。结论：大鼠脑发育期甲状腺激素缺乏可引起脑组织MDA水平、TAC水平及SOD活性的改变,这可能参与了甲状腺功能减退性脑损伤的发生。     

甲状腺功能减退对发育期鼠脑氧化应激状态的影响

目的研究甲状腺功能减退(甲减)对发育期大鼠脑组织氧化应激状态的影响,进一步探讨甲减鼠脑发育异常的机制。方法以丙基硫氧嘧啶溶液灌胃,制成大鼠围生期甲减模型,收集出生后21 d的正常(对照组)及甲减幼鼠(甲减组)脑组织,测定脑组织匀浆液各项氧化应激指标的水平。结果甲减组幼鼠脑组织蛋白羰基及硫代巴比妥酸反应产物水平、总抗氧化力、还原型谷胱甘肽水平、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶的活性较对照组升高(P<0.05);过氧化氢酶活性两组间无统计学差异(P>0.05)。结论大鼠脑发育期甲减可引起脑组织氧化应激状态的改变,这可能参与了甲减性脑损伤的发生。     

产前糖皮质激素应用对胎鼠脑发育的影响

目的:探讨产前应用不同剂量糖皮质激素(antenatal corticorsteriod theray,ACT)对胎鼠脑发育的影响.方法:对怀孕第17天的SD大鼠每天肌注地塞米松0.8 mg/kg,肌注1次的为1剂组、肌注3次的为3剂组和肌注4次的为4剂组,没有使用地塞米松的为对照组.对各组孕鼠所生的胎鼠,分别于生后第1、第7和第14天测量体重、全脑重量、脑细胞凋亡情况并与对照组作比较.结果:实验组胎鼠的体重、全脑重量较对照组明显下降,尤以4剂组最明显;脑细胞凋亡数3剂组、4剂组与对照组在第1天有差别,第7天和第14天差别减弱.结论:ACT对胎鼠的体重、全脑重量、脑细胞凋亡等产生不良影响,剂量越大副作用越明显.     

七氟醚麻醉大鼠脑钠泵活性的动态变化

目的 :动态观察七氟醚吸入麻醉不同时期大鼠各脑区Na+ ,K+ -ATP酶活性变化 ,结合行为学改变 ,探讨七氟醚麻醉的作用机制。方法 :4 0只SD大鼠随机均分为 5组 :对照组、诱导期组、麻醉期组、恢复期组和清醒期组。用分光光度法测定不同时期大脑皮层、脑干、海马Na+ ,K+ -ATP酶活性变化。结果 :大鼠各脑区Na+ ,K+ -ATP酶活性在诱导期即开始下降 ,大脑皮层、脑干、海马Na+ ,K+ -ATP酶活性分别降低 2 1.9%、10 .5 %、19.3% ,其中大脑皮层和海马Na+ ,K+ -ATP酶活性的降低有统计学意义 (与对照组比较 ,P <0 .0 5 ) ;麻醉期Na+ ,K+ -ATP酶活性下降至最低 (P <0 .0 1) ,大脑皮层、脑干、海马Na+ ,K+ -ATP酶活性分别降低 37.2 %、33.5 %、38.9% ;恢复期Na+ ,K+ -ATP酶活性又开始升高 ,但仍低于对照组水平 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,大脑皮层、脑干、海马Na+ ,K+ -ATP酶活性分别降低 18.3%、17.9% (P <0 .0 5 )和 2 2 .6 % (P <0 .0 1) ;而清醒期该酶活性基本恢复至对照组水平 (P >0 .0 5 )。大鼠各脑区Na+ ,K+ -ATP酶活性改变与麻醉深度的变化相平行。结论 :七氟醚可明显抑制大鼠大脑皮层、脑干、海马Na+ ,K+ -ATP酶活性 ,且与行为变化相平行 ,提示七氟醚可能通过抑制Na+ ,K+ -ATP酶活性而发挥麻醉效应 ,麻醉深度与?     

Effect of electro-acupuncture at different acupoints on neuropeptide and somatostatin in rat brain with irritable bowel syndrome

Objective:To compare the regulatory effects of electro-acupuncture(EA) at acupoints Zusanli (ST36) and Hegu(LI4) on the visceral hyper-sensitivity in the rat model of irritable bowel syndrome(IBS),and to explore the acting targets and specialty of acupoints.Methods:Except 8 rats of the normal control group,the rest 32 rats were prepared to set up the IBS models.IBS animal model was prepared by enema with acetic acid.Model rats were divided into three groups.Except for rats in the model group for control,those in the other two groups were treated 20 min by EA on ST36(EA-ST36) and LI4(EA-LI4) respectively for 2 weeks to observe the effect on behavior response of viscera sensitivity.The changes of neuropeptide(NPY),the somatostatin(SS) levels in blood and tissues of brain and intestine were monitored as well.Results:The volume thresholds for abdomen uplifting and back hunching were obviously increased after EA-ST36(P<0.05),but showed insignificant change after EA-LI4. NPY contents lowered and SS contents increased in model rats;both EA-ST36 and EA-LI4 could raise the level of thalamic NPY(P<0.01 and P<0.05,respectively),but showed insignificant effects on NPY in colonic tissue.As for SS content,its colonic level could be reduced by EA-S36 and EA-LI4(P<0.01 and P<0.05,respectively),however, its blood level was affected only by EA-ST36(P<0.05).Conclusions:EA-ST36 or EA-LI4 could regulate the NPY in thalamus and SS in colonic tissue,the former could affect blood level of SS as well.It is deemed that NPY and SS may be the key substances for regulating the action of acupuncture in the brain-intestinal axis;their different levels could be regarded as an indicator for the functional difference between the acupoints.