新型苯并咪唑类化合物的合成及抗柯萨奇B3病毒活性

3-硝基邻苯二甲酸酐经氨解、Hoffman降解、水合肼还原及闭环反应得2-芳基-1H-苯并咪唑-4-羧酸,经氯化亚砜酰氯化后与相应的胺反应,制得2-取代芳基-1H-苯并咪唑-4-酰胺类衍生物1a～1g,均为新化合物.并测定了其抑制柯萨奇B3病毒(CVB3)活性.结果显示,化合物1b、1c、1e和1g的活性优于利巴韦林.     

木犀草素体外抗柯萨奇B3病毒的作用

目的：了解木犀草素体外抗柯萨奇Ｂ３病毒的作用及其机制。方法：采用组织培养法,通过ＣＰＥ观察药物对ＨｅＬａ细胞的最大无毒浓度,柯萨奇Ｂ３病毒的滴度。药物抗病毒实验,使用染料摄入法测定细胞存活情况。结果：本犀草素的最大无细胞毒浓度为９．７５ｕｌ／ｍｌ。经不同时间给药,木犀草素在０．３０～９．７５ｕｇ／ｍｌ浓度范围内,对ＣｏｘＢ３病毒均有显著的抑制细胞病变作用。结论：木犀草素具有体外抗ＣｏｘＢ３病毒作用     

清咽滴丸6种成分提取物体外抗柯萨奇病毒B3、B5的作用研究

目的:研究清咽滴丸6种中药成分提取物体外抗柯萨奇病毒B3、B5(CVB3、CVB5)的作用。方法:以Vero细胞为模型,通过观察药物毒性和病毒致细胞病变效应,用MTT法辅助检测细胞活性情况,检验药物的毒性和药物的抗病毒效应。结果:清咽滴丸的6种主要成分中只有甘草和诃子既可以抑制病毒侵入Vero细胞,又能治疗被CVB3、CVB5感染的Vero细胞。结论:甘草、诃子提取物可保护Vero细胞,抑制病毒在细胞内增殖,并具有一定的抗CVB3、CVB5感染的能力。     

柯萨奇-腺病毒受体在恶性肿瘤细胞中的表达研究

柯萨奇-腺病毒受体(CAR)是柯萨奇B组病毒(CBV)和腺病毒(Ad)与靶细胞结合的共同体.柯萨奇病毒是无衣壳的核糖核酸(RNA)病毒,属于微小的RNA病毒家族,有A、B、C、D、E、F六种血清型.腺病毒为无衣壳的DNA病毒,这是两种在种系发育过程中不相干的病毒,却有一个共同的受体--CAR.CAR是一种跨膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族成员之一.由于其在生物学领域的特殊作用,近年来已经成为肿瘤学领域中的热点问题.     

木犀草素体外抗柯萨奇B3病毒的作用

目的了解木犀草素体外抗柯萨奇B3病毒的作用及其机制。方法采用组织培养法,通过CPE观察药物对HeLa细胞的最大无毒浓度,柯萨奇B3病毒的滴度。药物抗病毒实验,使用染料摄入法测定细胞存活情况。结果木犀草素的最大无细胞毒浓度为9．75μl／ml。经不同时间给药,木犀草素在0．30～9．75μg／ml浓度范围内,对CoxB3病毒均有显著的抑制细胞病变作用。结论木犀草素具有体外抗CoxB3病毒作用。     

双黄连粉针剂抗柯萨奇病毒B3型效应的实验研究

目的：探讨双黄连在体外抗柯萨奇病毒（ＣＶＢ３）的效应。方法在Ｗｉｓｈ细胞上采用微量细胞病变抑制法。结果（１）３．０ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌ双黄连均可直接杀伤１００、１０ＴＣＩＤ５０病毒,且３．０ｍｇ／ｍｌ直接灭活ＣＶＢ３的产应明显。（２）０．５、０．２５、０．１２５ｍｇ／ｍｌ双黄连可分别阻断１００、１０、１ＴＣＩＤ５０病毒吸附细胞。（３）１．５、０．２５、０．２５ｍｇ／ｍｌ双黄连可分别抑制１０     

大蒜多糖体外抗柯萨奇病毒B3作用

目的研究大蒜多糖体外抗柯萨奇病毒B3(Coxsackievirusg roup B type 3,CVB3)作用。方法观察大蒜多糖A,B,C的细胞毒性、对CVB3直接灭活作用、抗CVB3吸附作用及对CVB3生物合成抑制作用。结果大蒜多糖A,B,C对Hep-2细胞的半数中毒浓度(TC50)分别为1000,800,4000μg／mL;均无直接灭活CVB3及抗CVB3吸附作用;除A外,B和C均可剂量依赖性抑制CVB3生物合成。结论大蒜多糖B和C在体外通过抑制CVB3生物合成而发挥抗CVB3的作用。     

益心康对体外心肌细胞感染柯萨奇病毒B_3影响的实验研究

目的观察益心康对体外心肌细胞感染柯萨奇病毒B3的影响。方法益心康药液作用于乳鼠心肌细胞,观察心肌细胞的搏动、形态及酶学水平的变化。结果利巴韦林组(C组)CK-MB、LDH、AST水平低于病毒感染组(B组),P<0.01。益心康组(D组)、益心康加地塞米松组(E组)细胞中的CK-MB、LDH、AST水平明显低于B组,同时低于C组。D组、E组的酶学水平与B组比较,P<0.01;与C组比较,P<0.05;D组、E组之间比较,P>0.05。结论益心康对柯萨奇病毒感染的心肌细胞具有保护作用。     

抗柯胶囊总皂苷对柯萨奇病毒B型诱导细胞凋亡的抑制作用

目的 观察抗柯胶囊总皂苷抑制柯萨奇病毒B型(CVB)诱导细胞凋亡的作用,探讨其可能的机制。方法 通过接种病毒液的方式建立体外细胞感染模型,采用细胞病变效应法(CPE)测定抗柯胶囊总皂苷对CVB₃、CVB₄、CVB₅株50%抑制浓度(IC₅₀)及治疗指数(TI);CCK-8试剂盒检测细胞存活情况;TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL法)测定心肌细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测大鼠原代心肌细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果 抗柯胶囊总皂苷可明显抑制CVB₃、CVB₄、CVB₅致细胞病变,对CVB3、CVB4、CVB5的IC50分别为223.34、315.48、306.53μg·mL^-1,治疗指数分别为4.68、3.24、3.24;390.63、195.32、97.66μg·mL^-1剂量组可明显提高3种病毒感染后心肌细胞的存活率,抑制心肌细胞凋亡。抗柯...     

遗传毒性鸡血藤水提物抗柯萨奇病毒B3作用及机制

目的:探讨鸡血藤抗柯萨奇B3病毒(CVB3)的作用和机制。方法:不同浓度的鸡血藤水提物与适量CVB3感染的Vero E6细胞共同培养,采用甲基噻唑基四唑塞唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,计算鸡血藤水提物对CVB3,CVB5,埃可病毒9(Echo virus 9,EV9),EV29和脊髓灰质炎病毒(Polio virus1,PVⅠ)这5种肠道病毒的半数抑制浓度(IC50)和治疗指数(TI),并用RT-PCR检测鸡血藤水提物对CVB3侵染Vero E6细胞的RNA复制的影响。结果:鸡血藤水提物能有效抑制CVB3,CVB5,EV9,EV29和PVⅠ这5种肠道病毒引发的细胞病变,IC50分别为60.8,47.1,17.1,65.5和29.1μg.mL-1,TI分别为4.1,5.3,14.6,3.8和8.6,对肠道病毒的抑制作用存在量效关系;鸡血藤不能阻止CVB3对Vero E6细胞的吸附作用,但可干扰CVB3侵染细胞后病毒核酸的复制。结论:鸡血藤能抑制CVB3引发的细胞病变,其机制可能是抑制侵染后病毒复制的初级阶段。     

重楼皂苷的制备及其抗A型流感病毒活性

目的研究重楼皂苷的制备及体内外对A型流感病毒(IAV)活性的影响。方法 采用柱层析和反相液相色谱分离技术,从重楼中提取重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ,应用高效液相色谱法测定其纯度。采用MTT比色法测定重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ的细胞毒性,并检测其体外对IAV的直接灭活作用、对IAV吸附和侵入细胞的阻断作用及对IAV在靶细胞内增殖的抑制作用。用IAV滴鼻法制备IAV感染小鼠模型,模型制备4 h后分别每天ig给予重楼皂苷Ⅰ5和10 mg.kg-1及阳性对照药奥司他韦3 mg.kg-1,每天分2次给药,连续5 d,自给药后每天观察并记录小鼠发病情况和死亡数,共观察14 d,计算小鼠死亡率和生命延长率,评价其体内抗IAV作用。结果 提取分离得到的重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ的纯度分别为95.3%,90.2%,92.4%和86.8%。重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ浓度分别低于50,12.5,6.25和12.5 mg.L-1时,未见对靶细胞MDCK的细胞毒性。重楼皂苷Ⅰ6.25,12.5,25和50 mg.L-1,重楼皂苷Ⅱ6.25和12.5 mg.L-1,重楼皂苷Ⅵ3.13和6.25 mg.L-1,重楼皂苷Ⅶ6.25和12.5 mg.L-1及奥司他韦40 mg.L-1对IAV均有显著的直接灭活作用(P<0.01),对IAV吸附和侵入靶细胞亦具有一定的阻断作用(P<0.01),对IAV在靶细胞内的增殖具有抑制作用(P<0.01)。重楼皂苷Ⅰ5和10 mg.L-1可明显降低IAV感染小鼠的死亡率(P<0.01),由流感病毒感染组的8/10均下降到2/10;并可延长IAV感染小鼠的存活时间(P<0.01),存活时间由(8.5±0.3)d分别延长到12.7±0.4和(13.2±0.5)d(P<0.01),生命延长率分别为49.4%和55.3%,效果与奥司他韦近似。结论 从植物重楼中分离到高纯度的重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ,重楼皂苷Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ在体外具有较好的抗IAV活性,重楼皂苷Ⅰ在体内外均具有较好的抗IAV活性。     

黄金方对流感病毒FM1株感染小鼠肺组织病毒载量及免疫功能的影响

目的:观察黄金方对甲型H1N1流感病毒FM1株感染小鼠肺组织病毒载量I,FN-γ及血清CD 4+/CD 8+比值的影响。方法:采用滴鼻感染流感病毒FM1株建立小鼠肺炎模型,治疗4 d后采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肺组织中相对病毒载量,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中CD4+和CD 8+含量及肺组织IFN-γ含量。结果:黄金方大、中、小剂量组(6,3,1.5 g.kg-1)均可明显降低感染流感病毒FM1株小鼠肺组织病毒载量,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05),大、中剂量组可明显提高肺组织中IFN-γ水平(与模型对照组比较,P<0.01),中、小剂量组可提高血清CD4+/CD8+比值,与模型对照组比较差异显著(P<0.05)。结论:黄金方在体内对H1N1流感病毒FM1株感染有较好的治疗作用,其治疗作用可能是通过调节免疫功能来实现的。     

Antiviral activities of extracts and selected pure constituents of Ocimum basilicum

1. Ocimum basilicum (OB), also known as sweet basil, is a well known medicinal herb in traditional Chinese medicine preparations. In the present study, extracts and purified components of OB were used to identify possible antiviral activities against DNA viruses (herpes viruses (HSV), adenoviruses (ADV) and hepatitis B virus) and RNA viruses (coxsackievirus B1 (CVB1) and enterovirus 71 (EV71)). 2. The results show that crude aqueous and ethanolic extracts of OB and selected purified components, namely apigenin, linalool and ursolic acid, exhibit a broad spectrum of antiviral activity. Of these compounds, ursolic acid showed the strongest activity against HSV-1 (EC50 = 6.6 mg/L; selectivity index (SI) = 15.2), ADV-8 (EC50 = 4.2 mg/L; SI = 23.8), CVB1 (EC50 = 0.4 mg/L; SI = 251.3) and EV71 (EC50 = 0.5 mg/L; SI = 201), whereas apigenin showed the highest activity against HSV-2 (EC50 = 9.7 mg/L; SI = 6.2), ADV-3 (EC50 = 11.1 mg/L; SI = 5.4), hepatitis B surface antigen (EC50 = 7.1 mg/L; SI = 2.3) and hepatitis B e antigen (EC50 = 12.8 mg/L; SI = 1.3) and linalool showed strongest activity against AVD-II (EC50 = 16.9 mg/L; SI = 10.5). 3. No activity was noted for carvone, cineole, beta-caryophyllene, farnesol, fenchone, geraniol, beta-myrcene and alpha-thujone. 4. The action of ursolic acid against CVB1 and EV71 was found to occur during the infection process and the replication phase. 5. With SI values greater than 200, the potential use of ursolic acid for treating infection with CVB1 and EV71 merits further investigation.     

复方柴胡胶囊抗甲I型流感病毒作用的实验研究

目的:观察复方柴胡胶囊抗甲I型流感病毒的作用。方法:以甲I型病毒滴鼻感染小鼠,观察复方柴胡胶囊对小鼠肺指数、病毒致小鼠死亡率及肺部病理切片的影响。结果:复方柴胡胶囊0.5、1.0、2.0g/kg三个剂量组均可明显延长感染甲I型流感病毒小鼠的存活期,其中高剂量组可有效降低感染小鼠的肺指数,对肺组织的病变有一定的保护作用。结论:复方柴胡胶囊可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状,延长生命率,降低甲I型流感病毒感染小鼠的死亡率,对病毒性感冒有较好的疗效。     

复方柴胡胶囊抗甲Ⅰ型流感病毒作用的实验研究

目的：观察复方柴胡胶囊抗甲Ⅰ型流感病毒的作用。方法：以甲Ⅰ型病毒滴鼻感染小鼠，观察复方柴胡胶囊对小鼠肺指数、病毒致小鼠死亡率及肺部病理切片的影响。结果：复方柴胡胶囊0．5、1．0、2．0g／kg三个剂量组均可明显延长感染甲Ⅰ型流感病毒小鼠的存活期，其中高剂量组可有效降低感染小鼠的肺指数，对肺组织的病变有一定的保护作用。结论：复方柴胡胶囊可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状，延长生命率，降低甲Ⅰ型流感病毒感染小鼠的死亡率，对病毒性感冒有较好的疗效，     

人感染H7N9禽流感诊治概况

2013年3月中国上海首先报道了人感染H7N9禽流感病例,这是由上海市公共卫生临床中心应急实验室首先发现,经中国疾病预防控制中心确认的新型重配禽流感病毒H7N9亚型所引起的人感染病例,在患者呼吸道标本中检测到该病毒,该病毒可引起快速进展的重症肺炎及多脏器功能衰竭,3例病例均已死亡。由于这是一种新的病毒引起的禽源性呼吸道传染病,人类所知有限,引起全世界的关注。本文根据已获得的资料,从流行病学、临床表现、诊断与治疗等方面对该新发现的疾病做一介绍。该病在流行病学上有禽类接触史,经呼吸道传播;临床表现为快速进展的重症肺炎、急性呼吸窘迫综合征、多器官功能障碍等;确诊依据是患者呼吸道标本采用RT-PCR检测H7N9禽流感病毒核酸;治疗上尽量在发病48h内首选奥司他韦或扎那米韦抗病毒治疗。     

鱼腥草注射液体内抗流感病毒药效学研究

本研究评价新、老两种鱼腥草注射液制剂在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用。采用甲型H1N1流感病毒FM1和PR8株, 滴鼻感染正常小鼠和免疫低下小鼠造成肺炎模型, 分别进行治疗性和预防性给药, 观察小鼠肺指数。结果显示: 鱼腥草注射液新、老两种制剂对两种流感病毒感染引起的小鼠肺部炎症均有明显治疗作用, 且小剂量时新制剂对FM1株治疗作用优于老制剂; 新、老两种制剂对两种病毒感染免疫低下小鼠引起的肺部炎症有明显预防作用, 且小剂量时老制剂对PR8病毒株的预防作用优于新制剂。鱼腥草注射液可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状, 降低H1N1感染小鼠的肺指数, 在体内对H1N1流感病毒感染有较好的防治作用。     

热毒宁注射液及其组分对流感病毒神经氨酸酶的抑制作用研究

目的研究热毒宁注射液及其组分对流感病毒神经氨酸酶(NA)抑制活性。方法通过测定流感病毒NA的荧光强度值来确定热毒宁注射液及其组分对流感病毒NA的抑制活性。结果热毒宁注射液对H1N1、H3N2、B流感病毒NA抑制活性较高,半数抑制浓度(IC50)分别为(46.49±2.25)、(49.77±1.77)、(45.33±5.32)μg/mL。金银花聚酰胺柱洗脱浓缩液、醋酸乙酯萃取液及残液、柱色谱提取物、隐绿原酸、异绿原酸A和异绿原酸B对H1N1、H3N2、B流感病毒NA酶活性均具有抑制作用。结论热毒宁注射液及其有机酸类成分对流感病毒神经氨酸酶活性均具有一定抑制作用。     

热毒宁注射液体外抑制甲型H1N1流感病毒的研究

目的 研究热毒宁注射液体外抑制甲型H1N1流感病毒的作用。方法 以奥司他韦为阳性对照,采用CPE和MTT法观察热毒宁注射液对甲型H1N1流感病毒的抑制作用。结果 CPE法结果表明热毒宁注射液最大无毒浓度（TC₀）为16.2 mg/mL,半数中毒浓度为（TC₅₀）为（24.5±8.1）mg/mL;MTT法测定结果表明热毒宁注射液TC₀为16.2 mg/mL,TC₅₀为（21.7±9.4）mg/mL。热毒宁注射液体外抑制甲型H1N1流感病毒结果显示,CPE法和MTT法热毒宁注射液作用感染细胞1次组半数有效浓度（IC₅₀）为（900.0±173.2）、（933.3±57.7）μg/mL,治疗指数（TI）为27.2、23.2;热毒宁注射液作用感染细胞3次组IC₅₀为（666.7±115.5）、（866.7±208.1）μg/mL,TI为36.7、25.0。结论 热毒宁注射液具有明显体外抗甲型H1N1流感病毒的作用。     

盐酸阿比朵尔抗流感病毒感染的药效学研究

目的　探讨盐酸阿比朵尔的抗流感病毒作用。方法　建立体内、体外流感病毒模型 ,体外实验为应用一定浓度盐酸阿比朵尔作用于甲型流感病毒H1N1亚型病毒感染宿主细胞 ,通过观察CPE及采用MTT法测定细胞存活率 ;体内实验为应用盐酸阿比朵尔治疗流感病毒感染小鼠模型 ,计算肺指数的变化。结果　盐酸阿比朵尔在体内、体外均具有明显的抗流感病毒作用。结论　盐酸阿比朵尔是一种较好的抗流感病毒药物。