桂皮醛衍生物的合成及其对CVB_3的作用

目的：合成桂皮醛衍生物,观测其对心肌细胞的毒性及抗CVB3病毒的作用。方法：化学合成6种桂皮醛衍生物,其中3种进行了红外、质谱等结构表征;MTT法检测被CVB3病毒感染和用桂皮醛衍生物治疗后的心肌细胞活性。结果：α-溴代对氯肉桂醛、α-溴代对甲基肉桂醛、对氯肉桂醛3种桂皮醛衍生物对心肌细胞的半数毒性浓度（TC50）分别为2151.28μg·mL-1,1475.32μg·mL-1,22460.32μg·mL-1;对CVB3病毒的半数抑制浓度（IC50）分别为178.94μg·mL-1、173.35μg·mL-1、6045.25μg·mL-1;对CVB3病毒的治疗指数（TI）分别为12.02,8.51,3.71。结论：桂皮醛3种衍生物具有直接抑制CVB3病毒作用,但对病毒的细胞合成和吸附无明显作用。     

桂皮醛衍生物的合成及其对CVB3的作用

目的:合成桂皮醛衍生物,观测其对心肌细胞的毒性及抗CVB3病毒的作用.方法:化学合成6种桂皮醛衍生物,其中3种进行了红外、质谱等结构表征;MTT法检测被CVB3病毒感染和用桂皮醛衍生物治疗后的心肌细胞活性.结果:α-溴代对氨肉桂醛、α-溴代对甲基肉桂醛、对氯肉桂醛3种桂皮醛衍生物对心肌细胞的半教毒性浓度(TC50)分别为2151.28μ g·mL-1,1475.32μg·mL-1,22460.32μ g·mL-1;对CVB3病毒的半数抑制浓度(IC50)分别为178.94μg·mL-1、173.35μg·mL-1,6045.25μg·mL-1;对CVB3病毒的治疗指数(TI)分别为12.02,8.51,3.71.结论:桂皮醛3种衍生物具有直接抑制CVB3病毒作用,但对病毒的细胞合成和吸附无明显作用.     

氨基酸为显色剂比色法测定京尼平的含量

建立了一种京尼平含量的快速测定方法。研究了京尼平与氨基酸的显色反应条件,京尼平(0.0768mg·mL1)与氨基酸溶液(0.2mg·mL1)体积比为1:1,100℃下显色反应10min,检测波长590nm。该方法检测线性范围为0.76～30.73·g·mL1,线性回归方程为Y=0.2409X 0.0036,相关系数为0.9998,最低检测限为0.38μg·mL1,精密度为1.6%。本方法操作简便、快速,且结果准确可靠。     

脯氨酸测定方法的改进

25mg·mL-1的酸性茚三酮溶液至少可以保存35 d,它与同体积脯氨酸充分反应的最大浓度为156μg·mL-1,当样品提取液的浓度大于100μg·mL-1时,需适当稀释.酸性茚三酮与脯氨酸充分显色的时间至少30 min沸水浴.     

高效液相色谱法同时检测棉花根中的多种植物激素

目的：探寻高效液相色谱同时检测棉花根中多种植物激素含量的方法。方法：采用WatersC18反相色谱柱（4.6×250mm,5μm）,在柱温为35℃、流速为1mL.min-1的条件下,以乙腈和三乙胺溶液为流动相梯度洗脱,在每种物质的保留时间附近切换至最大吸收峰（GA3除外）波长作为检测波长,并与254nm同一波长检测多种植物激素含量的方法进行比较,分离和检测棉花根中的玉米素（Z）、玉米素核苷（ZR）、赤霉酸（GA3）、生长素（IAA）和脱落酸（ABA）的含量。结果：切换波长法检测5种植物激素的灵敏度和回收率均较高,检出限均较低。回收率为：Z 96.82%、ZR 94.14%、GA3 92.75%、IAA 93.38%、ABA 95.57%;检出限为：Z 0.1μg.mL-1、ZR 0.1μg.mL-1、GA3 0.5μg.mL-1、IAA 0.3μg.mL-1;ABA 0.05μg.mL-1,能准确检测出棉花根中Z、ZR、GA3、IAA和ABA的含量。结论：采用Waters C18反相色谱柱（4.6×250mm,5μm）,在柱温为35℃、流速为1mL.min-1的条件下,以乙腈和三乙胺溶液为流动相梯度洗脱,结合切换波长法能同时检测出植物组织中多种植物激素含量。     

HPLC法测定酮洛芬在大鼠血浆中的浓度

目的:建立大鼠血浆中酮洛芬的HPLC测定方法,进行酮洛芬微乳凝胶的药物动力学研究.方法:血浆样品采用甲醇沉淀蛋白方法处理,萘普生钠为内标;色谱柱为DiamosilC18(200mm× 4.6mmi.d,5μm),流动相为甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾(70:30,磷酸调pH3.0),流速1 mL·min-1,检测波长为255 nm.进样量为20μL,柱温为室温.结果酮洛芬与内标萘普生钠完全分离且血浆中内源性物质对酮洛芬的含量测定无影响;酮洛芬在0.2～50 μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 8;最低定量限为0.05μg·mL-1;日内和日间精密度均(RSD)小于2.4%;回收率为91.3%～107.2%.结论:所用方法灵敏、准确、重复性好、回收率高,可用于酮洛芬微乳凝胶的血药浓度检测.     

6种微藻对氯霉素和硫酸新霉素敏感性研究

目的:探讨3种真眼点藻(点状魏氏藻(Visderia punctata)、波氏真眼点藻(Eustigmatos polyphem)、魏氏真眼点藻(Eustigmatos vischeri))和3种绿藻(栅藻(Scnedesmus sp.)、斜生栅藻(Scenedesmus obliqulis)、爪哇栅藻(Scenedesmus jaoaensis))对2种抗生素的敏感性.方法:采用藻液细胞计数法和藻细胞固体平板培养法研究了氯霉素和硫酸新霉素对6种微藻生长的影响.结果:液体培养,3种绿藻对氯霉素敏感性均高于硫酸新霉素,10μg·mL-1氯霉素即可明显抑制3种绿藻的生长(P＜0.05),而硫酸新霉素在浓度为200 μg·mL-1时才显示出明显抑制作用:3种真眼点藻对2种抗生素都不敏感.固体培养,除波氏真眼点藻外,其它5种微藻对氯霉素的致死浓度均为50μg·mL-1;波氏真眼点藻、栅藻、斜生栅藻和爪哇栅藻对硫酸新霉素的致死浓度分别为100 μg·mL-1、200μg· mL-1、50μg·mL-1和50μg·mL-1.结论:氯霉素可作为选育6种微藻抗性突变株的筛选剂.     

椒目及椒目仁油中α-亚麻酸的含量测定研究

目的:建立同时测定椒目及椒目仁油中α-亚麻酸含量的HPLC方法。方法:用固定相为KromasilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-1%醋酸溶液(90:10),检测波长为205nm,流速为1.0 mL·min-1,柱温:25℃,进样量:10μL,测定椒目及椒目仁油中α-亚麻酸的含量;结果:α-亚麻酸在(22~500)μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,5批椒目和椒目仁油中α-亚麻酸的平均含量分别为4.56%,32.72%,平均回收率分别为99.87%,98.97%。结论:所建方法操作简便,准确可靠,重现性良好,可有效的控制椒目及椒目仁油的质量。     

HPLC法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量。方法：色谱柱为DiamonsilTM C18（250×4.6 mm,5滋m）,流动相为甲醇-0.05mol.L-1磷酸溶液（93∶7）为流动相,检测波长210 nm,进样量10滋L。结果：熊果酸在21.28滋g.mL-1～212.8滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率为97.79%（RSD=1.30%）;齐墩果酸在24.02滋g.mL-1～240.2滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率为98.36%（RSD=1.11%）。结论：该方法简便、灵敏、准确,可用于鸡矢藤药材的质量评价。     

甲胎蛋白和癌胚抗原的胶体金免疫层析同步检测

目的:探讨建立一种同时快速检测甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)两种肿瘤标志物的方法.方法:用胶体金分别标记鼠抗AFP单克隆抗体和鼠抗CEA单克隆抗体,喷于胶金垫上.与之配对的抗体喷在硝酸纤维素膜(NC膜)上分别做检测线T2和T1,兔抗鼠二抗喷在NC膜上做质控线,利用免疫层析技术进行检测.结果:采用Frens方法制备的胶体金粒径在20nm,紫外可见吸收峰在521 nm处,金标抗体的最适pH在9.0,最适抗体量为200μl,胶体金标记2.4μg抗体.测试结果表明同时检测AFP和CEA的试纸条灵敏度分别为20 ng.mL-1和5 ng.mL-1,检测时间仅需10min,与PSA、CA125、CA15-3、Ferritin、Human Albumin等没有交叉反应,稳定性好.结论:应用胶体金免疫层析技术,实现了AFP和CEA的同步检测.     

ELISA检测奶牛乳房炎疫苗效果方法的建立

建立一种检测抗乳房炎疫苗抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,用于免疫后具有保护性效果的抗体水平。通过对细胞抗原制备、最佳抗原包被浓度的确定、抗原包被和封闭最佳条件确定、酶标抗体的最佳工作浓度及作用时间等反应体系的筛选和确定,建立了检测抗乳房炎疫苗抗体的间接ELISA方法。结果表明,金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae)抗原最佳包被质量浓度分别为5 mg.L-1、10 mg.L-1、10 mg.L-1;包被条件为4℃过夜;用2%人血白蛋白作为封闭剂最佳封闭条件是37℃封闭30 min;酶标抗体最佳作用时间为30 min。结论攻毒试验表明,疫苗免疫后,血清中抗体滴度达到或超过免疫前2倍时,奶牛即具有较好的乳腺保护效力。这一指标可作为疫苗效力检验的标准。     

DETERMINATION OF RNA AND DNA CONCENTRATIONS IN NATURAL PLANKTON SAMPLES USING THIAZOLE ORANGE IN COMBINATION WITH DNASE AND RNASE DIGESTIONS1

A fluorometric technique, based on the combination of RNase and DNase incubation with the use of thiazole orange (RNase/DNase method), was investigated to determine DNA and RNA concentrations in marine plankton. Tests were performed to optimize both RNase and DNase assay conditions. The RNase assay should be conducted at 37° C for 20 min with 0.5 μg·mL^?1 of DNase-free RNase. An incubation at 25° C for 20 min with 10 units ·mL^-1 of RNase-free DNase were the optimal conditions required for DNA digestion by DNase. The detection limits in terms of minimum biomass for reliable measurements of DNA and RNA were 7.5 and 10 μg of protein · (mL assay)^?1, respectively. RNA and DNA concentration were estimated in oligotrophic water samples using the RNase/DNase and other available methods (e.g. a double fluorochrome method). The different techniques provided similar DNA estimations. However, the RNase/DNase method provided the highest sensitivity and a low variability for the estimation of RNA.     

银杏叶枯病的田间药剂防治试验

用 4种药剂和 2种药剂组合防治银杏叶枯病的田间试验。示范结果表明 :扑海因 +甲基托布津 ,敌力脱防效最好 ;与其它的参试药剂相比 ,其防效有显著差异。从始病期 (4月中下旬 )开始 ,每隔 1 5 d左右 ,用 2 5 %敌力脱 2 0 0 0倍液 ,5 0 %扑海因 1 0 0 0倍液 + 70 %甲基托布津 1 0 0 0倍液 (按 1∶ 1的体积比混合 )交替喷药 1次 ,特别是在 6月 1 0日和 7月 30日左右的发病高峰前必须重点施药 ,防治效果就可达到 85 %以上 ,有效控制叶枯病的发生。研究结果还表明 ,喷药的时间不同 ,防治效果不同 ;用药时能加强病害综合防治的其它措施 ,防治效果也会有显著的提高。     

Effect of heavy metals (Cu,Cd and Pb) on aspartate and alanine aminotransferase in Ruditapes philippinarum (Mollusca: Bivalvia)

The accumulation of cadmium, copper and lead and their effects on aspartate and alanine aminotransferases in digestive gland, gills, foot and soft body in the clam Ruditapes philippinarum were examined. The animals were exposed to different concentrations: Cd (200–600 μg·l⁻¹), Pb (350–700 μg·l⁻¹) and Cu (10–20 μg·l⁻¹) for 7 days. The highest concentrations were found in digestive gland for cadmium and copper, and in gills for lead, and the lowest values were observed in the foot. Aspartate aminotransferase activity (AST), in general, was not inhibited by cadmium, lead or copper during the exposure. Only in clams exposed to cadmium (600 μg·l⁻¹, 7 days) and copper (20 μg·l⁻¹, 5 days) were observed significant differences (P<0.05) in foot and gills, respectively, with respect to control. In the case of alanine aminotransferase activity (ALT), significant differences were observed for cadmium and lead in treated animals with respect to control. With regard to copper, a decrease in ALT was observed in gills and foot exposed to 20 μg·l⁻¹. A significant correlation (P<0.05) was observed between ALT and metal accumulation for cadmium, copper and lead in gills. In the case of soft body, only cadmium and lead showed a significant correlation. In summary, R. philippinarum can be considered a bioindicator species for cadmium and lead accumulation and ALT could be useful as biomarker of sublethal stress for these metals in soft tissues and gills. Only gills can be considered an adequate target tissue for copper.     

马来沉香组织培养技术研究

以马来沉香茎段为外植体,分别对外植体的消毒、启动培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、炼苗移栽环节进行研究,着重探索马来沉香组织培养技术各个环节的最佳培养基配方,为马来沉香的工厂化育苗提供技术指导。结果表明:马来沉香最佳消毒方法是用0.1%升汞消毒4～5min;启动率最高的培养基配方是1/2MS+6-BA 0.2mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂5.8g·L-1,启动率达70.5%;增殖系数最高的培养基是1/2MS+0.1mg·L-16-BA+25g·L-1蔗糖+5.8g·L-1琼脂,增殖系数达2.9;最佳壮苗培养基是1/2MS+30g·L-1蔗糖+5.8g·L-1琼脂;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 5.0mg·L-1+20g·L-1糖+6g·L-1琼脂,培养2d后移入1/2MS培养基继续培养,生根率为83%;马来沉香移栽较难成活,在泥炭土∶黄泥土(2∶1)的基质上成活率最高,移栽成活率65%。     

牛角瓜离体快繁技术

该文选用牛角瓜茎段为外植体,通过组织培养方法探索牛角瓜组织培养和种苗快繁技术。结果表明:最佳外植体表面消毒方法是以0.1%HgCl_2处理7 min,外植体存活率为32.3%;初代培养基为MS+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),培养20 d后形成3～4 cm高的再生芽。增殖培养前期筛选的较为适宜的增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1),增殖系数4.6。但在后续的培养过程中发现,牛角瓜组培苗易玻璃化,且随着世代更迭,玻璃化程度加重,到了第四代几乎全部玻璃化。因此在上述增殖培养的基础上,以AgNO_3作为玻璃化抑制剂,筛选出最终的增殖培养基为MS+6-BA1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.05 mg·L~(-1)+AgNO_31.0 g·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂3.5 g·L~(-1)。用此增殖培养基,培养25 d,苗高5～8 cm,增殖系数5.8,玻璃化率低于10%,且连续培养多代,玻璃化率维持在10%以下。生根壮苗培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂3.6 g·L~(-1),培养14 d,生根率98%;将生根苗移栽于70%遮阴度的大棚中,30 d后,苗高20 cm左右,成活率85%。利用该方法可对牛角瓜优良种苗进行规模化生产。     

测定荔枝核中的游离氨基酸

采用氨基酸自动分析仪测定荔枝核水提取液、醇提取液样品。在醇提取液中游离氨基酸的含量高于水提取液,在两种提取液中共检出了21种游离氨基酸(其中4种为未知氨基酸,6种必需氨基酸);已知游离氨基酸的质量分数为307μg.kg-1(醇提取液)和269μg.kg-1(水提取液),总游离氨基酸的质量分数为500μg.kg-1,必需氨基酸的量占总游离氨基酸量的44%。结论:荔枝核中的游离氨基酸具有利用价值。     

丝氨酸生产菌的筛选及静息细胞培养系统中L-丝氨酸的合成

从广西隆安县沼气池里的残渣中筛选到一株能以甲醇为唯一碳源生长的MB200菌株。根据常规形态特征、生理生化性状及16S rDNA基因序列分析将其鉴定为甲基杆菌属(M ethylobacteriumsp.)。其最佳生长条件为:温度32℃、pH值8.0、甲醇体积分数1.25%。建立了MB200生成L-丝氨酸的静息细胞培养系统。确定静息细胞培养的条件为:甘氨酸质量浓度为10 g.L-1,甲醇50 g.L-1,菌体质量浓度为30 g.L-1,pH8.9,于摇床250 r.m in-1,32℃静息培养48 h,L-丝氨酸产量为7.2 g.L-1。     

Circadian rhythms of melatonin in haemolymph and optic lobes of Chinese mitten crab (Eriocheir sinensis) and Chinese grass shrimp (Palaemonetes sinensis)

This study is the first to examine the circadian rhythms of melatonin in Eriocheir sinensis and Palaemonetes sinensis, two economically important crustaceans. We collected haemolymph and optic lobes from both species every 4 h over a whole day cycle. Melatonin content was measured with high-performance liquid chromatography. E. sinensis haemolymph exhibited significant (p < 0.05) peaks in melatonin at 16:00 (0.180 ± 0.020 μg·mL^?1) and 24:00 (0.244 ± 0.055 μg·mL^?1), while eyestalks had significant peaks at 16:00 (72.377 ± 18.100 μg·eyestalk^?1) and 24:00 (98.756 ± 30.271 μg·eyestalk^?1). In P. sinensis, melatonin peaked significantly only at 16:00 in optic lobes (12.493 ± 1.475 μg·eyestalk^?1) (p < 0.05); no significant peaks were present in haemolymph. Thus, both E. sinensis and P. sinensis exhibit species-specific melatonin rhythms. Time of day should therefore be considered when examining the physiological status of both crustaceans, given the potential influence of fluctuating daily melatonin concentrations.     

黄色短杆菌产L-组氨酸菌株的诱变育种

以黄色短杆菌为出发菌,采用诱变育种的方法选育得到一株能高产L-组氨酸的突变菌株。在加有150g·L-1葡萄 糖;35g·L-1硫酸铵;10g·L-1蛋白胨的发酵培养基中培养72h,产L-组氨酸128.28mg·L-1。