油菜蜂花粉中不同分子量级分清除羟自由基的研究

油菜蜂花粉是自然界中存在的营养丰富的一种纯天然食品,营养成分搭配合理,并且富含蛋白质和功能因子,能够增强和改善人体的生理功能,已经日益受到人们的青睐。但是由于油菜蜂花粉本身带有青涩味,口感较差,且我国花粉加工业落后,谈不上高端应用和高科技渗透,大多是原料初级产品,产品附加值低,产品深加工关键技术问题成为制约我国花粉产业化发展的重要因素。     

青藏高原油菜蜂花粉醇提物体外清除自由基活性研究

为探讨青藏高原油菜蜂花粉醇提物的体外清除自由基活性,研究了其对超氧阴离子（O2-.）体系、羟基自由基（·OH）体系和二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）体系的清除效果,并以抗坏血酸（VC）作为阳性对照。结果表明,油菜蜂花粉醇提物对.OH、O2-·和DPPH·均具有一定清除作用,且与浓度呈量效关系,并且对·OH和DPPH·清除效果相对较好,略优于VC。      

油菜蜂花粉酶解物抗氧化性能的研究

对油菜蜂花粉酶解物和水提物进行了体外抗氧化实验。结果表明,花粉酶解物具有良好的抗氧化功能,在50mg/ml浓度下对超氧阴离子自由基、羟自由基和脂质过氧化的抑制率分别达到87．4%、61．2%和95．9%。比较酶解物和水提物抗氧化性能可知,酶解物清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力明显高于水提物,在50mg／ml时,对羟自由基的抑制率比水提物高约30%,清除超氧阴离子自由基的能力高约20%,而抑制脂质过氧化的能力与水提物之间无明显差异。     

油菜蜂花粉中总黄酮的提取及对自由基清除作用

从油菜蜂花粉中提取总黄酮,研究该黄酮对自由基的清除作用。分别用水、甲醇、乙醇提取花粉中的总黄酮,用分光光度法测定黄酮对自由基的清除作用。结果表明甲醇的提取率最高为28.05%,花粉黄酮对.OH和O2-.的清除率达50%时的浓度分别为91.8、104.6μg/mL。油菜蜂花粉中的总黄酮对.OH和O2-.均有一定的清除作用。     

青藏高原油菜蜂花粉酶解破壁研究

采用复合酶制剂对青藏高原油菜蜂花粉进行破壁处理,效果颇佳。方法具有作用时间短(12h左右),破壁率高(≥90%)等优点。破壁后花粉内含营养物质释放充分,各项感官指标明显改善。     

泥鳅肉酶解物对羟自由基的清除作用

为了探讨深度开发泥鳅蛋白制备功能性肽的可能性,采用比色法研究泥鳅肉酶解物对Fenton 体系产生的羟自由基的清除效果,从复合风味蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、菠萝蛋白酶5 种酶中,筛选出菠萝蛋白酶作为酶解泥鳅肉制备具有清除羟自由基活性酶解物的适宜水解酶。用响应面分析法(RSM)对该酶的酶解条件进行优化,并采用Sephadex G-15 凝胶层析测定最佳酶解条件下制得的酶解液中活性肽的相对分子质量分布。结果表明,菠萝蛋白酶的最佳酶解条件为：固液比1:4、加酶量0.2%、pH6.47、温度54.48℃、酶解时间59.97min,酶解物对羟自由基的清除率为99.03 %,IC50 值为0.57mg/mL。酶解液中活性肽的相对分子质量范围为1129～2344。     

贻贝酶解物对羟自由基清除作用的试验研究

通过测定贻贝酶解物对离体实验系统（Fenton体系）产生的羟自由基的清除效果，从胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶3种酶中筛选出木瓜蛋白酶和胰蛋白酶作为酶解贻贝制备具有较高清除羟自由基活性酶解物的理想水解酶；并通过正交实验L9（3^4）对2种酶的水解条件进行优化。结果表明木瓜蛋白酶在温度60℃、酶解时间15min、DH7．5、酶质量分数1．00％的水解条件下，酶解物对羟自由基的清除效果最佳；胰蛋白酶在温度45℃、酶解时间35min,pH8，5、酶质量分数0．75％的水解条件下，酶解物对羟自由基清除效果最佳。木瓜蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时有最大羟基自由基清除率峰，清除率为76．15％，在最大峰处酶解物中活性肽的分子量为1．4kDa；胰蛋白酶酶解物在最大洗脱峰时也有最大羟基自由基清除率峰，其清除率为69．13％，该峰处活性肽的分子量也为1．4kDa。     

大豆分离蛋白酶解物清除羟自由基作用的研究

用比色法测定了大豆分离蛋白(SPI)酶解物对羟自由基的清除作用。结果表明,SPI酶解物对Fenton体系产生的·OH自由基有清除活性。SPI经木瓜蛋白酶水解15min,其酶解物清除能力已达最大值,为56.5%;经SephadexG-50凝胶柱分离,所得肽段各组分间的清除活性存在明显差异;用SDS-PAGE凝胶电泳测定各组分的分子量,结果显示分子量在11.355KD～5.154KD的肽段清除能力最强,达60.4%。     

鳙鱼肉酶解物清除羟自由基的研究

采用优化酶法从鳙鱼肉蛋白中制备具有清除Fenton体系产生的羟自由基(·OH)活性的抗氧化肽.应用响应面分析法以酶解液对Fenton体系产生的羟自由基(·OH)的清除率为指标优化最佳酶解工艺;酶解液相对分子质量分布采用凝胶层析法测定.复合蛋白酶是水解鳙鱼肉制备具有清除羟自由基活性酶解物的适合酶,最佳酶解条件为:温度40℃、酶解时间30 min、PH=7.0、酶加量为600 U/g底物、底物:水=1:2;活性肤相对分子质量范围为519～1088.响应面分析法是优化酶解工艺可行的方法;具有清除羟自由基活性的肽是一些寡肽.     

鲤鱼肉酶解物清除羟自由基的研究

通过测定鲤鱼肉酶解物对Fenton体系产生的·OH的清除效果,从木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶和复合风味蛋白酶中,筛选出复合蛋白酶作为酶解鲤鱼肉制备具有清除羟自由基活性酶解物的水解酶.用响应面分析法(RSM)对该酶的水解条件进行优化,得到最佳酶解条件为:温度55℃、酶解时间1.5 h、pH=6.5、酶加量为250 U/g底物、底物质量分数为25%,在此条件下酶解物的水解度为4.5%.利用Sephadex G-15凝胶层析测定酶解物分子量分布,结果显示,活性肤分子量为477 u～1 058 u.     

油菜蜂花粉及其蜂粮不同溶剂提取物抗氧化活性研究

以油菜蜂花粉及其同种植物源的蜂粮为原料,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2'-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS]自由基清除两种体外抗氧化方法,评价并比较油菜蜂花粉及其蜂粮水提物和醇提物的体外抗氧化活性。结果表明:4种提取物对DPPH自由基和ABTS+·均具有一定的清除能力,依次为蜂花粉醇提物、蜂粮醇提物蜂粮水提物蜂花粉水提物,其中蜂花粉及其蜂粮醇提物清除能力最强,IC50值分别为0.204 mg/mL～0.290 mg/mL和0.094 mg/mL～0.167 mg/mL,二者没有显著差异(p0.05);2种醇提物的体外抗氧化活性与蜂粮水提物、蜂花粉水提物存在显著差异(p0.05)。结果进一步证实蜂花粉及其蜂粮均具有一定的体外抗氧化活性,为其在抗氧化功能性食品等领域的开发应用奠定了理论基础。     

油菜蜂花粉提取物对羟基自由基介导2-脱氧核糖损伤的抑制作用

本文以水、80%乙醇、70%甲醇为溶剂提取油菜蜂花粉中的多酚类物质,测定了提取物中总酚含量、还原力、Fe2+络合能力及对DPPH自由基的清除能力。以Fenton为模型,研究了油菜蜂花粉提取物对羟基自由基介导2-脱氧核糖降解的保护机理。结果表明:3种提取物的抗氧化能力与总酚含量呈正相关,乙醇提取物和甲醇提取物的抗氧化能力较水提取物强;油菜蜂花粉提取物主要是作为自由基清除剂,不是依靠络合能力来发挥清除羟基自由基的作用。     

油菜蜂花粉及其蜂粮的营养成分

本文以油菜蜂花粉及其蜂粮为研究对象,对其常规营养成分、氨基酸和脂肪酸组成进行测定,评价并比较二者的营养价值。结果表明:油菜蜂粮的水分、还原糖和粗脂肪含量显著高于蜂花粉(p<0.05),灰分、蛋白质和总黄酮含量显著低于后者(p<0.05);油菜蜂花粉及其蜂粮中含有8种必需氨基酸,蜂粮总必需氨基酸与总氨基酸的比值(EEA/TAA)显著高于蜂花粉(p<0.05),分别为37.80%和34.74%;油菜蜂花粉和蜂粮的饱和脂肪酸中棕榈酸含量最高,分别为33.81%、33.50%,不饱和脂肪酸中亚麻酸含量最高,分别为32.42%、38.22%,差异显著(p<0.05)。油菜蜂粮是一种优质的必需氨基酸和必需脂肪酸营养源,可以作为一种潜在的原料应用于功能性食品的开发。     

油菜蜂花粉及其提取物对小鼠免疫功能的影响

为观察油菜蜂花粉及其提取物在小鼠体内的免疫调节作用,进行免疫低下小鼠碳廓清实验与小鼠DTH超敏反应实验。结果显示,在碳廓清实验中,花粉组、提取物A、C、D组吞噬指数（a）较模型组有明显升高（p〈0．05与p〈0．01）,其中提取物A的碳廓清指数（K）较模型组有明显升高（p〈0．05）。在小鼠DTH超敏反应实验中,花粉及其提取物组各组对小鼠DTH超敏反应均有抑制作用（p〈0．05与p〈0．01）。本实验说明油菜蜂花粉及其提取物具有调节免疫功能的作用。     

油菜蜂花粉蛋白的分离提取及其抗氧化活性

以油菜蜂花粉为研究对象,根据溶解性的不同,从中分离出了水溶性蛋白、醇溶性蛋白、碱溶性蛋白及盐溶性蛋白,并对各蛋白组分抗氧化活性进行了研究。结果表明:油菜蜂花粉中主要蛋白为水溶性蛋白,占其干重的7.35%,其次为醇溶性蛋白3.65%,盐溶性蛋白和碱溶性蛋白分别占2.50%和2.24%。4种不同溶解性的油菜蜂花粉蛋白均具有一定的体外抗氧化作用,各蛋白组分的总抗氧化能力以及对DPPH自由基、OH.和O2-.的清除能力呈现较好的量效关系;4种蛋白抗氧化活性由强到弱的顺序依次为水溶性蛋白>醇溶性蛋白>碱溶性蛋白>盐溶性蛋白。因此,油菜蜂花粉蛋白质可作为一种潜在的天然抗氧剂进行深入研究。     

油菜蜂花粉蛋白水解度测定方法比较

采用Alcalase 2.4L FG 水解油菜蜂花粉蛋白,比较pH stat 法、OPA 法和TNBS 法测定蜂花粉蛋白水解度的差异。水解118min 后,pH stat 法、OPA 法和TNBS 法测得的水解度分别为24.7% ﹑ 13.4% ﹑ 6.6%。由于OPA试剂和甘氨酸﹑半胱氨酸﹑赖氨酸反应生成的化合物在340nm 波长处的吸光度较低,致使OPA 法测得的水解度低。TNBS 试剂和ε-NH2 的作用不稳定,也可能是由于TNBS 试剂产生的发光物使测定结果降低。在水解度较低的情况下,α-NH2 平均解离度的变化可以忽略,pH stat 法测得的水解度比较准确。     

HPLC法测定油菜蜂花粉中黄酮含量及六种破壁方法对黄酮提取的影响

目的:六种破壁方法处理油菜蜂花粉,运用HPLC测定花粉中的黄酮含量,研究不同破壁方法对黄酮提取的影响.方法:色谱柱为反相C18柱,流动相V(甲醇):V(0.4%磷酸)为60:40,流速0.5ml/min,波长370nm.采用超声法、酶解法、温差法、温差.超声法、温差-酶法和混合方法进行花粉破壁.结果:未破壁花粉总黄酮含量为2.2447mg/g.六种破壁方法提取的花粉总黄酮含量比未破壁的依次增加12.4%、8.3%、23.1%、25.4%、28.1%、31.5%,破壁分别为52.56%、41.31%、76.94%、78.66%、83.13%、86.88%.结论:建立了HPLC测定花粉黄酮的方法;花粉破壁率越高,黄酮的提取得率越高.