新生儿苯丙酮尿症两种实验室筛查方法的质量评价

目的比较筛查新生儿苯丙酮尿症（PKU）的2种检测苯丙氨酸（Phe）的方法——细菌抑制法（BIA）和荧光法。方法参加美国疾病控制中心（CDC）质量评价，分析BIA和荧光法的批内、批间误差及相对偏差，比较2种方法的结果。结果用CDC质控品测得BIA批内变异系数（CV）为14．29％，荧光法为5．85％；用不同浓度质控品测得BIA批间CV分别为25．34％、20．86％、34．78％和25．72％，荧光法为16．46％、13．22％、19．53％和15．41％；BIA的PKU阳性检出率为5．04／10万，荧光法为7．79／10万。结论荧光法较BIA具有更灵敏、准确、可定量、费时少的优点，国内今后应顺应其发展趋势，普及推广运用荧光法筛查新生儿PKU。     

参加美国CDC新生儿疾病筛查室间质量评价十年回顾

目的　对参加美国疾病控制中心(CDC)新生儿疾病筛查实验室室间质量评价10年进行回顾分析。 方法　分别采用DELFIA系统和细菌抑制法(BIA法)或荧光法检测CDC分发的各批质控标本的促甲状腺激素 (TSH)和苯丙氨酸(Phe)值,分析质控回报结果。结果　38批190份标本测定,TSH及Phe偏倚分布范围广;测 定值均在回报群体结果95%可信范围内,年度相对偏倚呈逐年下降趋势;临床评估结果符合率100%;荧光法测 定Phe浓度的偏倚低于BIA法。结论　本实验室室间质评结果在控制限内;接受国际、国内对新生儿疾病筛查 实验室质量的监控,是对大批量检测标本操作的可信性及实验室稳定性、均一性的有效保障。     

应用荧光法筛查葡萄糖6磷酸脱氢酶缺乏症

目的探讨荧光法筛查新生儿葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症中的实用性。方法新生儿出生72 h后采足跟血,滴在规定的滤纸上,采用荧光法测定G6PD活性水平,同时与荧光斑点法、G6PD/6-磷酸葡萄糖酸脱氢酸(6PGD)比值法进行比较。并且检测3 706例新生儿G6PD正常水平及筛查临界值(cut off值)。结果该方法最低检测限为0.52 U/gHb,批内平均变异系数(CV)为9.8%,批间平均CV为11.1%,高、中、低3个浓度的平均回收率为96.4%。实验结果与目前国内筛查使用的荧光斑点法的符合率为97.5%,和G6PD/6PGD比值法的符合率为100%。筛查cut off值建议定为2.7 U/gHb。结论荧光法适用于新生儿G6PD缺乏症的筛查。     

参加美国CDC新生儿疾病筛查室间质量评价十年回顾

目的对参加美国疾病控制中心(CDC)新生儿疾病筛查实验室室间质量评价10年进行回顾分析。方法分别采用DELFIA系统和细菌抑制法(BIA法)或荧光法检测CDC分发的各批质控标本的促甲状腺激素(TSH)和苯丙氨酸(Phe)值,分析质控回报结果。结果38批190份标本测定,TSH及Phe偏倚分布范围广;测定值均在回报群体结果95％可信范围内,年度相对偏倚呈逐年下降趋势;临床评估结果符合率100％;荧光法测定Phe浓度的偏倚低于BIA法。结论本实验室室间质评结果在控制限内;接受国际、国内对新生儿疾病筛查实验室质量的监控,是对大批量检测标本操作的可信性及实验室稳定性、均一性的有效保障。     

流式荧光法与时间分辨法在新生儿PKU筛查中的比较研究

目的比较Astoria-Pacific流式荧光分析法与Perking-Elmer时间分辨荧光分析法在新生儿苯丙酮尿症(PKU)筛查工作中的应用价值。方法分别采用Astoria-Pacific流式荧光法(AP流式荧光法)和WALLAC的Perking-Elmer时间分辨荧光分析法(PE荧光法)同时对1 103例健康新生儿的筛查血片和27例已经确诊的PKU阳性患儿血片进行筛查。收集试验数据分析比较两种方法的相关性及有效性。同时应用AP流式荧光法对不同浓度的已知样本进行检测,统计分析这些检测数据后对AP流式荧光法进行方法学的评价。结果两种方法有很好的相关性(r=0.975),同时,AP流式荧光法的阳性复合率(103.7%)和阴性复合率(99.9%)均较PE荧光法高。AP流式荧光法的准确度、精密度、携带率及最低检测限均能胜任PKU的筛查工作,其中AP流式荧光法的Phe/Tyr比值是提高PKU筛查准确度的重要参数。结论 AP流式荧光法优于PE荧光法,完全适合新生儿PKU的筛查工作,值得推广应用。     

输血相容性试验室内质控品的研制

目的研制出简易可行,可在一般实验室使用的质控品。方法选择10人份健康献血者的浓缩红细胞(O/AB型RhD阳性)制备红细胞质控品,取新鲜血浆(O/AB型RhD阳性)和抗-D(IgG)人血清配制血浆质控品。对制备好的质控品进行性能评价,包括重复性、稳定性、最佳条件与常规条件下测定比较以及微柱凝胶法与凝聚胺法测定比较。结果质控品的批内重复性CV均10%,批间重复性差异无统计学意义(P0.05)。在不同保存时间,条件及方法的条件下,质控品检测结果均无明显变化(P0.05)。统计分析6个月的室内质控结果,在控率为100%。结论成功研制出输血相容性试验室内质控品,该质控品具有较好的重复性,稳定性及实用性。     

我国新生儿遗传代谢病串联质谱筛查室内质控变异系数分析

目的了解我国串联质谱筛查新生儿遗传代谢病的室内质量控制的变异系数。方法采用基于Web的室间质量评价软件系统,收集于2016年4月参加新生儿遗传代谢病串联质谱筛查全国室间质评项目的 79家实验室的室内质控数据,包括2016年4月2个水平(批号1和批号2)当月和累积的室内质控在控数据的变异系数(CV)。根据1/3室间质量评价限(TEa)和1/4 TEa这2个标准,计算各个项目2个批号质控品的室内质控CV的通过率。结果氨基酸类项目批号1中70%以上实验室的当月在控CV都能满足≤1/3TEa,约50%实验室的当月在控CV能满足≤1/4TEa。批号2中除甲硫氨酸外,其他氨基酸项目满足≤1/3TEa的实验室均超过90%。酰基肉碱类项目批号1中约80%实验室的当月在控CV和70%以上实验室的累积在控CV能满足≤1/3TEa,半数以上实验室的当月在控CV和累积在控CV都能满足≤1/4TEa。批号2中,当月在控CV和累积在控CV满足≤1/3TEa的实验室分别约为90%和80%,满足≤1/4TEa的实验室分别约为80%和60%。结论大多数新生儿遗传代谢病筛查实验室室内质控CV可以满足1/3TEa,但满足1/4TEa的实验室仍相对较少,新生儿遗传代谢病筛查实验室应继续加强室内质量控制,进一步提高其检测质量水平。     

自制血清蛋白质电泳质控品用于室内质控的研究

目的 比较血清蛋白质电泳自制质控品和Helena质控品的性能,探讨自制质控品在血清蛋白质电泳室内质量控制中的应用.方法 用美国Helena SPIFE 2000全自动快速电泳分析系统,分别测定Helena质控品和自制质控品的批内精密度、凝胶板间的差异、自制质控品的日间精密度和稳定期.结果 自制质控品与Helena质控品相关性好,电泳后蛋白质各组分的批内CV均小于5%;2种质控品在琼脂糖凝胶板间的CV也均小于5%;自制质控品的日间CV除α1球蛋白7.36%、β球蛋白5.50%外,其余均小于5%.结论 自制质控品的性能符合室内质量控制的要求,可在常规工作中应用.     

同位素稀释质谱法在美国CDC-CRMLN计划中的比对结果分析

目的总结并回顾性分析同位素稀释质谱法在美国疾病预防控制中心(CDC)胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)中的比对结果,为我国血脂测定提供质量保证。方法采用我国建立的同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)测定血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)的方法参加CRMLN比对。2016年之前每3个月1次,每次4种样品,测定2批。2016年之后每半年比对1次,每次4种样品,测定2批。每次测定中至少同时测定2个有证标准物质作为质控品。结果 15次TC比对结果显示,本血脂参考实验室(以下简称"本室")平均CV为0.43%,CDC各参加实验室间CV为0.42%,本室与实验室间总体均值的偏移为0.22%,与CDC靶值的偏移为0.58%。15次TG比对结果显示,本室平均CV为0.62%,本室测定TG的结果与实验室间均值的偏移为-0.98%,与CDC靶值的偏移为-0.80%。TC和TG各60个比对结果中,98%(59/60)的TC测定CV满足CDC的精密度要求,70%(42/60)的测定满足TC准确度要求(TC:CV≤1%,偏移≤1%);92%(55/60)的TG测定准确度满足CDC的要求(TG:偏移≤2.55%)。结论 ID-LC/MS/MS测定血清TC和TG的方法在CRMLN比对中数据良好,与CDC及各网络实验室测定结果一致,有望在我国血脂标准化中发挥重要作用并为参考测量比对计划提供经验和技术支持。     

流式荧光法检测血清胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ的应用评价

目的：评价流式荧光法在血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ/Ⅱ检测中的临床应用价值。方法评价流式荧光法检测 PGⅠ/Ⅱ的精密度,通过检测临床血清标本与酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒进行方法学比对,初步建立健康人群 PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ比值的参考值范围,并应用流式荧光法检测浅表性胃炎、萎缩性胃炎、胃癌患者血清。结果PGⅠ检测批内变异系数(CV批内)为4.26%~5.35%,批间变异系数(CV批间)为6.73%~7.75%。PGⅡ检测 CV批内为5.48%~6.42%,CV批间为8.46%~8.85%。与 ELISA 方法进行方法学比对存在线性关系,线性方程分别为 PGⅠ：Y =0.911X -22.635(r =0.966,P <0.05);PGⅡ：Y =0.892X -0.548(r=0.980,P <0.05)。PGⅠ和 PGⅠ/PGⅠ比值的参考区间下限分别为32.77 ng/mL、4.16。萎缩性胃炎和胃癌患者血清 PGⅠ水平和 PGⅠ/PGⅡ比值明显低于浅表性胃炎患者,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论流式荧光法可以实现PGⅠ、PGⅡ的并行测试,方法学性能良好,可以提高检测效率,流式荧光法对血清 PGⅠ和 PGⅡ的测定可以为早期胃癌和萎缩性胃炎的筛查及诊断提供实验室依据。     

山东省18家新生儿疾病筛查中心实验室TSH和17α-OHP项目室内质控数据室间比对分析

目的 应用新生儿疾病筛查数据分析与质量控制管理平台对山东省18家新生儿疾病筛查中心实验室的两项室内质控数据17羟孕酮(17α-hydroxyprogesterone,17α-OHP)和促甲状腺素(thyroid-stimulating hormone,TSH)进行室间比对分析。方法 17α-OHP和TSH的实验室检测方法为时间分辨免疫荧光法,并通过荧光分析仪计算出质控数据,质控数据由各实验室定期上传至山东省新生儿筛查数据分析与质量控制管理平台,最终应用此平台采集全省18家参评实验室的室内质控数据并进行分析。结果 17α-OHP低值质控测定数与变异系数(CV)、标准差指数(SDI)、变异系数指数(CVI)和总误差(TE)合格率分别为6 536,15.38%,100%,46.15%和100%; 相应高值质控分别为6 580,61.54%,100%,61.54%和100%。相应TSH低值质控测定数与CV,SDI,CVI和TE合格率分别为4 964,90.91%,90.91%,72.73%和100%; 相应高值质控分别为4 967,90.91%,100%,90.91%和100%。结论 通过对山东省18家新生儿疾病筛查实验室17α-OHP和TSH两项室内质控数据室间比对分析,可帮助各新生儿疾病筛查中心管理室内质控、统计分析数据、评价实验室的精密度和准确度,掌握各新生儿疾病筛查实验室质量控制现状,提高筛查质量。     

粪便自动化分析仪及室内质控品的临床应用评价

目的 评价LTS-E100和FA160两种型号粪便自动化分析仪检测粪便标本的临床应用价值及对FA160配套室内质控品的适用性进行分析.方法 收集该院2019年6—10月门诊患者的新鲜粪便标本共1250份,分别应用LTS-E100、FA160两种粪便自动化分析仪和人工镜检法进行粪便常规检测,以人工镜检法作为金标准,对两种...     

Evaluation of reduced activity galactose-1-phosphate uridyl transferase by combined radioisotopic assay and high-resolution isoelectric focusing

Fifty-nine patients referred for testing of galactose-1-phosphate uridyl transferase (GALT) activity were evaluated by a combination of radioisotopic assay and an improved high-resolution isoelectric focusing (IEF) method for determination of individual genotypes. The majority of evaluations (43 of 59) were undertaken because of an abnormal fluorometric GALT screening assay conducted as part of a state newborn galactosemia screening program or as a diagnostic test for an infant with one or more clinical signs of galactosemia. Only 12 of the 43 patients with an abnormal fluorometric screening test were found to have less than 3% GALT activity by quantitative assay, no GALT-staining by IEF, and a clinical history consistent with classical galactosemia. The majority of the remainder (24 of 43) were found to be heterozygotes for galactosemia, the Duarte variant, or both. IEF was found to be a fast and accurate technique for assignment of GALT genotypes in conjunction with quantitative enzymatic assay.     

PHE/TYR比值在新生儿苯丙酮尿症筛查中的应用

目的 分析Phe/Tyr比值在新生儿苯丙酮尿症筛查中的作用.方法 采用API-300 SPOTCHECK连续流动荧光分析系统检测1103例正常新生儿的筛查血片和27例已经确诊的PKU阳性患儿血片的Phe和Tyr值,并进行分析.结果 API-300 SPOTCHECK连续流动荧光分析法的阳性复合率为103.7%,阴性复合率为99.9%.结论 Phe/Tyr 比值是提高PKU筛查准确度的重要参数.     

Tandem mass spectrometry in newborn screening: a primer for neonatal and perinatal nurses

Since 1961, newborn screening for errors of metabolism (EM) has improved the diagnosis, treatment and outcome of newborns with an EM. Recently, advances in laboratory technology with tandem mass spectrometry (MS/MS) has increased the identification of newborns with an EM. With a single dried filter paper blood spot (Guthrie R, Susi A. A simple phenylalanine method for detecting PKU in large populations of newborn infants. Pediatrics. 1963;32:338-343), MS/MS can identify more than 30 disorders of metabolism. This review will explore MS/MS to provide a better understanding of the development and application of this technology to newborn screening for perinatal and neonatal nurses.     

广西地区新生儿疾病筛查结果回顾性分析

目的：了解2009～2012年广西地区新生儿疾病筛查情况及确诊率。方法通过检测促甲状腺素（TSH）筛查甲状腺功能减低症（CH）、苯丙氨酸（PHe）筛查苯丙酮尿症（PKU）、17-羟孕酮（17-OHP）筛查先天性肾上腺皮质增生症（CAH）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）筛查G-6-PD缺乏症,对初次筛查阳性的患儿进行及时召回并确诊。结果2009年1月至2012年12月广西新生儿疾病筛查中心合作单位的新生儿筛查率呈逐年上升趋势且CH、PKU、CAH、G-6-PD初次筛查阳性患儿召回率及确诊率存在差异。结论新生儿筛查可以在早期发现CH、PKU、CAH、G-6-PD缺乏症患儿,对其早期进行干预可以防止其发病从而降低对其智力及生长发育的影响,对提高人口素质有重要意义。     

Issues in newborn screening for phenylketonuria.

The blood sample for phenylketonuria (PKU) screening should be obtained at least 12 hours after the infant's birth. Newborn screening for PKU has largely eliminated mental retardation caused by this disease. If the first phenylalanine test demonstrates positive results, a repeat test should be performed. Treatment to prevent sequelae from this disorder is best carried out in cooperation with an experienced PKU center. Dietary care is expensive, and financial assistance may be necessary for many families. A phenylalanine-restricted diet should be started as soon as possible. Occasionally, cases of PKU are missed by newborn screening. Thus, a repeat PKU test should be performed in an infant who exhibits slow development.     

恩施州新生儿先天性甲状腺功能减退症与苯丙酮尿症筛查情况分析

目的 了解恩施州新生儿先天性甲状腺功能减退症(CH)及苯丙酮尿症(PKU)发病率及新生儿筛查情况.方法 采用足跟血纸片法对恩施州2010年10月1日至2011年9月30日活产新生儿45 451例中的30 867例进行CH及PKU筛查.结果 CH发病率约为1∶1 715,未发现PKU病例.结论 新生儿筛查有利于CH、PKU患儿的早诊断、早治疗,有助于避免新生儿发生体格和智能发育障碍,是提高人口素质的重要措施.