反义c—myc寡核苷酸抑制人肝癌细胞SMMC—7721生长

用逆转录病毒载体将反义ｃ ｍｙｃ质粒通过ＰＡ317包装后转染人肝癌细胞 ,能够抑制人肝癌细胞的生长[1 ] ,本研究采用反义ｃ ｍｙｃ核酸技术初步观察了反义ｃ ｍｙｃ寡核苷酸(ＯＤＮ)对人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1生长的抑制作用。材料和方法一　寡核苷酸的合成及修饰　正义、错配及反义ｃ ｍｙｃＯＤＮ(均为 15 ｍｅｒ)的合成和硫代磷酸化修饰均由上海生物工程公司完成。二　人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1培养和基因转染　人肝癌细胞ＳＭＭＣ 772 1在 37℃、5 %ＣＯ2 条件下 ,用 10 %胎牛血清(ＦＢＳ) 16 40液进行培养。选取对数生长期ＳＭＭＣ …     

重组腺病毒介导反义c-myc基因对人肝癌细胞系的治疗作用

目的：探讨重组腺病毒介导反义ｃ－ｍｙｃ基因（Ａｄ－ＡＳｍｙｃ）治疗人肝癌细胞的作用。方法：观察Ａｄ－ＡＳｍｙｃ对人肝癌细胞系的转导效率,通过细胞生长曲线、克隆形成实验、ＤＮＡ片段化分析、ＲＴ－ＰＣＲ、裸鼠皮下移植瘤治疗实验,分析Ａｄ－ＡＳｍｙｃ对人肝癌细胞系Ｂｅｌ－７４０２、ＱＳＧ－７７０１、ＳＭＭＣ－７７２１和ＨＣＣ－９２０４细胞生长和ｃ－ｍｙｃ基因表达及裸鼠肿瘤生长的抑制作用。结果：Ａｄ－ＡＳｍｙｃ可高效转导人肝癌细胞系,抑制细胞生长;转染细胞克隆形成能力降低,克隆成活率为对照组的５３．９％～６９．１％,ｃ－ｍｙｃ基因表达下降;Ａｄ－ＡＳｍｙｃ处理肝癌细胞,ＤＮＡ凝胶电泳出现明显的梯形条带,瘤内注射Ａｄ－ＡＳｍｙｃ可抑制裸鼠皮下移植瘤生长。结论：重组腺病毒介导的反义ｃ－ｍｙｃ基因转移,有可能成为肝癌基因治疗     

视黄酸对胃癌细胞生长和p53及c—myc基因表达的影响

目的：探讨视黄酸对胃癌细胞生长和基因表达的影响。方法：以ＭＴＴ法测定细胞生长，软琼脂集落形成实验测定癌细胞恶性程度，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ测定Ｐ５３及ｃ－ｍｙｃ基因表达水平。结果：１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ全反式视黄酸（ＡＴＲＡ）能够有效地抑制ＭＧｅ８０－３和ＢＧＣ－８２３细胞生长，但不能抑制ＭＫＮ４５细胞生长，ＡＴＲＡ还能够降低了３株胃癌细胞形成集落的能力。ＭＧｃ８０－３和ＧＢＣ－８２３细胞经ＡＴＲ     

低密度脂蛋白—阿克拉霉素复合物抗肿瘤作用的研究

目的：观察低密度脂蛋白－阿克拉霉素（ＬＤＬ－ＡＣＭ）复合物对小鼠肝癌Ｈ２２细胞的细胞毒作用。方法：ＭＴＴ法及蛋白质合成抑制实验。结果：ＭＴＴ显示，与正常肝细胞组相比，与正常肝细胞组相比，ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物对Ｈ２２细胞有更显著的生长抑制作用。蛋白质合成抑制实验除显示了ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物的生长抑制作用外，还反映出该复合物作用的饱和性。结论：ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物对小鼠肝癌Ｈ２２细胞有靶向杀伤作用。     

茶多酚对体外人肝癌细胞的生物效应

作者以细胞数、细胞分裂指数标记指数标记有丝裂指数为观察指标，研究了茶多酚对体外培养的体肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１的抗肿瘤活性，并与政党人肝细胞作比较。结果：０．０２５ｍｇ／ｍｌ和０．０５ｍｇ／ｍｇ的ＧＴＰ对肝癌细胞的生长有明显的抑制作用细胞分裂指数明显下降，能阻滞细胞周期的各个进程，并与剂量有关，较大剂量的作用较明显。     

低密度脂蛋白- 阿克拉霉素复合物抗肿瘤作用的研究

目的：观察低密度脂蛋白－ 阿克拉霉素（ Ｌ Ｄ Ｌ Ａ Ｃ Ｍ） 复合物对小鼠肝癌 Ｈ２２ 细胞的细胞毒作用。方法： Ｍ Ｔ Ｔ 法及蛋白质合成抑制实验。结果： Ｍ Ｔ Ｔ 实验显示,与正常肝细胞组相比, Ｌ Ｄ Ｌ Ａ Ｃ Ｍ 复合物对 Ｈ２２ 细胞有更显著的生长抑制作用。蛋白质合成抑制实验除显示了 Ｌ Ｄ Ｌ Ａ Ｃ Ｍ 复合物的生长抑制作用外,还反映出该复合物作用的饱和性。结论： Ｌ Ｄ Ｌ Ａ Ｃ Ｍ 复合物对小鼠肝癌 Ｈ２２ 细胞有靶向杀伤作用。     

肝癌细胞胞内游离Ca~(2+)测定及其与间隙连接通讯功能的相关性研究

 目的 研究肝细胞肝癌和正常肝细胞胞内信号分子游离 Ｃａ２＋浓度变化，及其对间隙连接通讯功能的意义。方法 通过Ｆｌｕｏ－３ＡＭ负载和激光扫描共聚焦显微镜分析，定位及定量研究静息状态下肝癌细胞系ＨＨＣＣ，ＳＭＭＣ－７７２１和正常肝细胞系ＱＺＧ胞内游离Ｃａ２＋浓度。结合Ｌｕｃｉｆｅｒ Ｙｅｌｌｏｗ划痕标记荧光传输技术，分析对上述细胞间隙连接通讯功能的影响。结果 激光扫描共聚焦显微镜研究证实，定量分析静息状态下［Ｃａ２＋］ｉ在正常肝细胞ＱＺＧ和肝癌细胞ＨＨＣＣ，ＳＭＭＣ－７７２１中分别为１０８．３７ ｎｍｏｌ／Ｌ，３５．１３ｎｍｏｌ／Ｌ和 ４７．０８ ｎｍｏｌ／Ｌ，［Ｃａ２＋］ｉ在 ＨＨＣＣ，ＳＭＭＣ－７７２１细胞与正常肝细胞 ＱＺＧ比较显著降低。肝癌细胞ＨＨＣＣ，ＳＭＭＣ－７７２１的间隙连接通讯功能较正常肝细胞ＱＺＧ明显减弱。结论 肝癌细胞内第二信使游离Ｃａ２＋浓度的降低，与肝癌细胞的间隙连接通讯功能障碍相一致，可能与肝癌的发生密切相关。     

Geldanamycin增强顺铂的抗肿瘤作用

目的：研究抗生素苯醌安莎霉素（Ｇｅｌｄａｎａｍｙｃｉｎ,ＧＤＭ）对人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞周期的影响和联合应用顺铂（ＣＤＤＰ）的体外体内抗肿瘤作用。方法：采用ＭＴＴ法检测药物的生长抑制作用,〔＾３Ｈ〕－ＴｄＲ掺入法测定ＤＮＡ合成抑制作用,流式细胞术分析细胞周期,小鼠移植性肝癌Ｈ２２模型研究药物单用或联合应用时的体内抗肿瘤作用。结果：ＭＴＴ法测得ＧＤＭ对ＢＥＬ－７４０２细胞的生长抑制ＩＣ５０为０．     

绿茶儿茶素对人肝癌细胞生长的抑制作用

绿茶儿茶素（ＧｒｅｅｎＴｅａＣａｔｅｃｈｉｎ,ＧＴＣ）是绿茶的主要成分,流行病学和动物实验研究表明,ＧＴＣ具有抑瘤作用。本文旨在研究ＧＴＣ对体外培养人肝癌细胞生长的影响。１　材料与方法１１　材料人肝癌ＢＥＬ－７４０２、ＳＭＭＣ－７７２１细胞由中国医学科学院血液学研究所提供。ＧＴＣ由中国医学科学院肿瘤学研究所程书钧教授惠赠。ＭＴＴ（四唑盐）为Ｓｉｇｍａ公司产品。１２　方法１２１　ＧＴＣ对ＢＥＬ－７４０２和ＳＭＭＣ－７７２１细胞的生长抑制作用　该两种细胞均培养于含１５％胎牛血清的ＰＲＭＩ１６…     

药理浓度的雌二醇对人胃癌细胞株MGC生长的影响

本文观察了药理浓度的雌二醇（２￣４０ｕｍ）对雌激素受体阳性胃癌细胞株ＭＧＣ的生长影响，实验结果表明：２￣５ｕｍ的雌二醇抑制ＭＧＣ的增殖，大于１０ｕｍ的雌二醇出现细胞毒作用：雌二醇在发生细胞增殖抑制作用的同时，伴随着细胞周期特征的改变，即ＤＮＡ合成期细胞百分率（ＬＩ）下降。上述结果提示：药理浓度的雌二醇对雌激素受体阳性的胃癌细胞ＭＧＣ的生长具有抑制作用，本文对上述结果的意义进行了讨论。     

成纤维细胞介导的人α型干扰素基因疗法与过继免疫化疗联合治疗人肝癌的实验研究

作者以皮下接种人肝细胞癌细胞ＳＭＭＣ７７２１的裸鼠为荷瘤模型，由人外周血单个核细胞经体外ＩＬ－２和丝裂霉素Ｃ灭活的人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１共同刺激培养后激活的杀伤细胞（ＡＫ），研究了将成纤维细胞介导的人ＩＦＮ－α基因疗法与ＩＬ－２／ＡＫ／阿霉素过继免疫化疗联合应用后对肝癌的治疗作用。结果表明：（１）给肝癌裸鼠单独腹腔埋植人ＩＦＮ－α基因转移的ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞（ＮＩＨ３Ｔ３－ＩＦＮ－α￣＋）就能显著抑制肝癌（皮下）体内生长，使荷瘤裸鼠存活期明显延长；（２）在腹腔埋植ＮＩＨ３Ｔ３－ＩＦＮ－α￣＋之后再静脉注射ＡＫ细胞、腹腔内注射ＩＬ－２，发现荷瘤裸鼠的皮下肿瘤结节生长抑制作用更明显；（３）将ＮＩＨ３Ｔ３－ＩＦＮ－α￣＋与ＩＬ－２／ＡＫ／阿霉素联合应用后，对肝癌裸鼠的治疗效果更佳。     

抗人胰腺癌单克隆抗体介导LAK细胞体外体内抗胰腺癌作用的研究

体外４小时５１Ｃｒ释放试验表明，抗人胰腺癌单克隆抗体（ＹＰＣ３ＭｃＡｂ）能增强ＬＡＫ细胞对Ｃａｐａｎ－２人胰腺癌细胞的杀伤作用，这种ＬＡＫ细胞的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ＡＤＣＣ），随ＹＰＣ３ＭｃＡｂ的浓度增加而加强，５０μｇ／ｍｌ的ＹＰＣ３ＭｃＡｂ增加ＬＡＫ细胞的杀伤率约６０％。而对照抗体无此作用。裸鼠体内实验表明，ＹＰＣ３ＭｃＡｂ和ＬＡＫ细胞同时使用，能完全阻止Ｃａｐａｎ－２细胞的生长，优于ＬＡＫ细胞、脾细胞和ＹＰＣ３ＭｃＡｂ的分别作用。结果提示，ＹＰＣ３ＭｃＡｂ和ＬＡＫ细胞的联合应用，对胰腺癌治疗有一定价值。     

钙咪唑啉对人胃腺癌MGC—803细胞增殖分化的影响

目的：探讨钙调蛋白在癌细胞增殖分化中的作用。方法：应用钙调蛋白拮抗剂－－钙咪唑啉（Ｃａｌｍｉｄａｚｏｌｉｕｉｎ ＣＤＺ）５０～１５０ｍｍｏｌ／Ｌ作用于人胃腺癌ＭＧＣ－８０３细胞，用白细胞计数法观察到ＣＤＺ对人胃癌细胞的增殖有明显的抑制作用，利＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、ＰＤＥ活性测定、ＣＡＭＰ含量测定、流式细胞光度术、ｃＡＭＰ－ＰＤＰａｓｅ电镜细胞化学技术进行系统研究。结果：旧白拮抗剂ＣＤＺ抑制ＭＧＣ－８     

位点选择性8—Cl—cAMP对人肺巨细胞癌生长调控作用的研究

作者研究了两种ｃＡＭＰ类似物，双丁酰ｃＡＭＰ（ＤＢｃＡＭＰ，无位点选择性）和８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ（位点选择性）对高转移人肺癌细胞系ＰＧ细胞生长的调控作用。ＭＴＴ法检测结果显示，ＤＢｃＡＭＰ１ｍｍｏｌ／Ｌ在第８天，对ＰＧ细胞生长的抑制率为３０％，而８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ２１０－２０ｕＭ为７５％￣８０％。磷酸二酯酶抑制剂ＩＢＭＸ与８－Ｃｌ－ｃＡＭＰ合用没有增加其抑制作用，而与ＤＢｃＡＭＰ合用则具有明显协同作     

鲨鱼软骨制剂对人骨癌细胞增殖抑制作用的研究

目的 研究ＳＣＰ对人胃癌细胞生长、抑制和损伤效应，探讨其抗癌作用机制。方法用不同浓度的ＳＣＰ加入体外培养的入胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）中，观察加药后细胞生长和有丝分裂指数（ＭＩ）的变化，用ＭＴＴ法检测其细胞增殖抑制作用，用吖啶橙荧光染色方法观察细胞ＤＮＡ和ＲＮＡ含量的变化，用透射电镜观察细胞的损伤效应。结果 ＳＣＰ明显抑制ＭＧＣ８０－３细胞生长，ＩＣ５０值为１ｍｇ／ｍｌ，ＭＩ于加药后１２ｈ较对照组     

人脐血和外周血单个核细胞增生活性及紫外线B照射抑制作用的研究

目的：比较人脐血（ＣＢ）和外周血（ＰＢ）单个核细胞（ＭＣｓ）的增生活性及其紫外线Ｂ照射（ＵＶＢ）在增生活性上的抑制作用。方法：应用ＰＨＡ诱导细胞增生以＾３Ｈ－ＴｄＲ结合检测增生活性（ｃｐｍ）；ＵＶＢ照射后的ＰＨＡ刺激和ＭＬＣ抑制作用，以未照射细胞的活性面分数表示。结果：人ＣＢＭＣｓ和ＰＢＭＣｓ ｃｐｍ平均值无统计学差异，但单个实验的标准偏差均显示人ＣＢＭＣｓ的ｃｐｍ高于ＰＢＭＣｓ，二者对小剂量ＵＶ     

薏苡仁提取物对原发性肝癌细胞毒性作用的实验研究

目的：研究康莱特注射液对原发性肝癌细胞的毒性作用。方法：用ＭＴＴ法对康莱特等７种药物的体外抗肝癌细胞活性进行检测。结果：康莱特与常用的化疗药ＣＰ、ＤＤＰ、５－ＦＵ等对肝癌细胞有毒性作用。可达３０以上。结论：康莱特注射液对肝癌细胞有较好的毒性作用，是一种天然的副作用低的抗癌新药，有良好的应用前景。     

成纤维细胞介导的人α型干扰素基因疗法与过继免疫化疗联合治…

作者以皮下接种人肝细胞癌细胞ＳＭＭＣ７７２１的裸鼠为荷瘤模型，由人外周血单个核细胞经体外ＩＬ－２和丝裂霉素Ｃ灭活的人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１共同刺激培养后激活的杀伤细胞（ＡＫ），研究了将成纤维细胞介导的人ＩＦＮ－α基因疗法与ＩＬ－２／ＡＫ／阿霉素过继免疫化疗联合应用后对肝癌的治疗作用。结果表明：（１）给肝癌鼠单独腹腔埋植人ＩＦＮ－α基因转移的ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞（ＮＩＨ３Ｔ３－ＩＦＮ－α＾＋）就     

丹参酮对人肝癌细胞某些表型的逆转作用

目的观察丹参酮促人肝癌细胞株在体外向正常方向分化的效果。方法体外培养的人肝癌细胞（ＳＭＭＣ┐７７２１）经０．５μｇ／ｍｌ丹参酮处理４天后，作光电镜观察，ＢｒｄＵ掺入试验，ＰＣＮＡ免疫组化及ＦＣＭ检测。结果在镜下，细胞形态趋向良性分化，细胞生长明显被抑制；ＢｒｄＵ标记率和ＰＣＮＡ阳性率均明显低于对照组；流式细胞仪检测显示丹参酮处理组的细胞被阻止于Ｇ０／Ｇ１期，而Ｓ期细胞数量明显减少，ｃ┐ｍｙｃ癌基因蛋白表达降低，ｃ┐ｆｏｓ癌基因蛋白表达明显增加。结论丹参酮可诱导人肝癌细胞某些表型的逆转，可能是一种有前途的分化诱导剂。     

nm23H1对肝癌细胞增殖及体内肿瘤形成能力的影响

目的 研究ｎｍ２３Ｈ１对肝癌细胞增殖、体内肿瘤形成和转移的影响。方法 构建正反义ｎｍ２３Ｈ１ ｃＤＮＡ表达载体并转染肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１,得到ｎｍ２３Ｈ１稳定最高和最低表达的两种细胞克隆,并进行细胞生长曲线测定、裸鼠皮下及脾包膜下移植试验。结果 转染反义表达载体后,肝癌细胞ｍＲＮＡ和蛋白表达下降,在体内、体外增殖加速;转染正义表达载体后,出现与之相反的结果。正义表达细胞接种组裸鼠肿瘤结节形成