三种肝血流阻断法对大鼠肝脏缺血再灌注后肝细胞凋亡的影响

目的探讨三种肝血流阻断法对大鼠肝缺血再灌注损伤后肝细胞凋亡的影响。方法将128只大鼠随机分为假手术组、Pringle法组、半肝阻断组和保留半肝动脉血供的入肝血流阻断组。分别于再灌注后1h、2h、6h和24h检测ALT和AST水平及肝细胞凋亡率,观察肝脏病理学及肝细胞超微结构改变。结果 Pringle法再灌注后各时间点ALT和肝细胞凋亡率显著高于半肝血流阻断组和保留半肝动脉血供的入肝血流阻断组;肝脏病理学包括肝细胞超微结构变化重于半肝血流阻断组和保留半肝动脉血供的入肝血流阻断组;再灌注后72h,Pringle法、半肝血流阻断和保留半肝动脉血供的入肝血流阻断组生存率分别为87.5%(7/8)、100%(8/8)和100%(8/8)。结论保留半肝动脉血供的入肝血流阻断法能够减少缺血再灌注后肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注损伤。     

保留半肝动脉血供的肝血流阻断技术应用观察

肝切除术中常温下阻断入肝血流的安全时限是15～20min,尤其合并肝硬变的肝切除,时同更应控制在15m in之内,如超过这一时限可导致肝坏死、肝衰竭。为减少术中非切除肝组织的缺血损害,许多学者采用半肝血流阻断法,然而有些病例因种种原因无法实现半肝血流阻断。为解决这一矛盾,2002年8月至2005年3月,我院采用保留半肝动脉血供的肝血流阻断技术行肝切除术32例,效果良好。现报告如下。     

七氟烷对大鼠缺血再灌注损伤肝脏的保护作用及其机制

目的 观察七氟烷对大鼠缺血再灌注损伤肝脏的保护作用,并探讨其机制.方法 雌性SD大鼠32只,随机分为A、B、C、D4个组,各8只.A、B组采用腹腔注射1％戊巴比妥钠(PB) 40 mg/kg麻醉,A组仅分离肝脏周围韧带不阻断入肝血流;B组麻醉后夹闭肝动脉和门静脉左支,造成约70％肝脏缺血60 min、再灌注3h,建立肝脏缺血再灌注模型.C、D组采用七氟烷吸入麻醉,C组余操作同A组,D组麻醉后行部分肝脏缺血再灌注.采用化学发光法检测血清ALT、AST和乳酸脱氢酶(LDH);采用硫代巴比妥酸分光光度法方法检测肝组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH);采用HE染色和Tunel染色进行组织学观察;Western blot法检测肝脏组织中的Caspase3、p53蛋白.结果 D组血清ALT、AST、LDH、MDA低于B组,SOD和GSH高于B组(P均＜0.05).D组缺血再灌注损伤肝脏组织形态学变化轻于B组,且肝脏组织中的Caspase3和p53蛋白表达水平亦较B组减少(P均＜0.05).B、D组肝细胞凋亡指数高于A、C组,且B组高于D组(P均＜0.05).结论 七氟烷对大鼠缺血再灌注损伤肝脏具有保护作用,可能是通过抑制肝细胞凋亡来实现的.     

尿石素A预处理对肝缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用

目的探讨尿石素A(Uro-A)对肝缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠模型的保护作用。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、Uro-A低剂量组(1 mg/kg)和Uro-A高剂量组(3 mg/kg),每组10只。造模前Uro-A低剂量和高剂量组每天灌胃药物1次,持续5 d。动物麻醉后造模,恢复血流后6 h检测血清中ALT、AST与乳酸脱氢酶(LDH)的含量,ELISA法检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、IL-1β、IL-6和TNFα含量,观察肝脏病理损伤与肝细胞凋亡情况,Western Blot法检测肝脏中内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、下游应激转录因子(CHOP)和凋亡蛋白家族(Caspase-12)的表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 Uro-A高剂量组ALT、AST、LDH、MDA、CAT、IL-1β、IL-6、TNFα、CHOP、GRP78、Caspase-12水平及凋亡率均较模型组降低,SOD含量较模型组升高,差异均有统计学意义(P值均0.05)。模型组肝脏结构破坏严重,阳性率90%,Uro-A高剂量组肝脏结构完好,未见明显组织增生与炎性细胞增多,阴性率80%。与Uro-A高剂量组相比,Uro-A低剂量组ALT、AST、LDH水平和细胞凋亡率均显著升高(P值均0.05)。结论 Uro-A预处理可降低大鼠肝脏缺血再灌注造成的损伤,减少氧化损伤与炎症因子的释放,其机制与通过抑制内质网应激通路减少肝细胞的凋亡有关。     

SHVE在规则性肝切除术中的应用

56例肝切除术患者分为半肝血流阻断术组（P组）、选择性阻断入肝和出肝血流（SHVE）组（S组），比较两组手术时间和术中出血量，术后肝功能的恢复以及术后并发症。结果：P、S组手术时间无显著性差异（P〉0．05），术中出血量分别为617ml、426n11（P〈0．05），S组术后3d和6d的血清谷丙转氨酶（ALT）水平显著低于P组，白蛋白水平显著高于P组（P〈0．01）；P组术后并发症显著高于S组。认为SHVE可将病侧肝脏与体循环进行有效隔离，防止健侧肝脏缺血再灌注损伤，肝外控制肝静脉，不阻断下腔静脉，全身血流动力学稳定，是一种安全、有效的肝血流阻断技术。     

改良大鼠离体肝脏灌注模型在供肝冷保存中的应用研究

背景:供肝冷保存和缺血再灌注损伤是影响肝移植患者预后的关键因素,建立稳定的冷保存再灌注动物模型是开展相关研究的基础。目的:建立适用于综合评价供肝质量的改良大鼠离体肝脏灌注模型,为供肝冷保存研究提供合适的离体再灌注模型。方法:12只Sprague-Dawley大鼠随机分为两组,对照组正常获取供肝后进行离体灌注90 min,实验组供肝经30 min热缺血后获取,冷保存24 h后再行离体灌注。离体灌注期间监测灌注液转氨酶水平、电解质浓度和pH值;以压力感受器监测供肝门静脉压力;以超微自由基探针监测肝组织过氧化氢(HPO)水平。灌注结束后记录胆汁流出量,检测供肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)水平及其组织病理学改变和肝细胞凋亡情况。结果:与对照组相比,实验组供肝AST、ALT水平、门静脉压力和HPO水平明显增高,胆汁流出量显著减少,肝组织Cu/Zn SOD水平显著降低。对照组供肝组织病理学损伤和肝细胞凋亡相对较轻。结论:经热缺血和冷保存后,供肝的肝功能和抗氧化能力均明显降低。本研究构建的改良大鼠离体肝脏灌注模型可有效监控和评估大鼠供肝冷保存再灌注损伤情况。     

循环缺血后处理次数对大鼠肝大部分切除后残肝缺血再灌注损伤影响的比较分析

目的研究不同循环次数缺血后处理对大鼠肝大部分切除后残肝缺血再灌注损伤保护作用的多方面影响。方法健康清洁级雄性sD大鼠80只,体重230—280g,随机分为6组70％单纯肝切除组、PH70％肝切除合并缺血再灌注组、缺血后处理组（IPO）于动脉夹开放前给予IPO然后采用再灌注60S,夹闭60s（60s-60s）循环根据循环次数分为缺血后处理1组（IP01）：循环2次、2组（IP02）：循环4次、3组（IP03）：循环6次、4组（IP04）：循环8次;再灌注1h、12h、24h、48h后取各组大鼠下腔静脉血及残肝组织测定血清ALT和AST活性及肝细胞凋亡指数结果并测定血清活性及肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）水平。结果与PH组比较,PHIR组各时点ALT、AST活性升高,MDA、MPO水平也升高,而SOD水平则下降,差异具有统计学意义;与PHIR组比较,IPO各组个时点ALT、AST活性下降,MDA、MPO水平也下降,而SOD水平则上升,以IP03组和IP04组变化明显,差异具有统计学意义;与PH组比较,PHIR组、IPO各组肝细胞凋亡指数升高,差异均有统计学意义,IP04组升高程度最低;与PHIR组比较,IPO各组肝细胞凋亡指数下降,IP04肝细胞凋亡指数下降最为显著;48h观察残肝病理学可见：与PHIR组相比,IPO各组肝细胞肿胀减轻,变性范围减小,点、片状坏死明显减少。与PH组比较,IPO组仅在再灌注48h肝细胞肿胀,偶可见点状坏死。结论IP04组MPA含量下降及SOD活性显著升高程度最为明显,ALT、AST水平影响最小,同时IP04肝细胞凋亡指数在IPO各组中较PH组比较最小;经60s-60s循环缺血后处理,肝细胞肿胀程度明显减轻,变性范围变小,其中8次改善最为明显。     

保留半肝动脉血流阻断法在肝细胞癌手术中的意义

目的探讨保留半肝动脉血流阻断法在肝细胞癌(HCC)患者手术中的应用价值。方法回顾性分析2014年2月至2016年10月在我院接受治疗的HCC患者的临床资料,根据其手术方式分为Pringle法组和保留半肝动脉血流阻断法组,比较两组患者手术一般情况,比较两组患者手术前后肝功能、肿瘤标志物及并发症发生率。结果两组患者手术时间无差别,保留半肝动脉血流阻断法组术中出血量较Pringle法组少,住院时间较Pringle法组短;两组患者治疗前肝功能指标无差别,治疗后3个月,保留半肝动脉血流阻断法组的ALT、AST、DBil和TBil水平低于Pringle法组;两组患者治疗前肿瘤标志物水平无差别,治疗后3个月,保留半肝动脉血流阻断法组的CA19-9和AFP水平低于Pringle法组;两组患者胸腔积液、消化道再出血及感染发生率无明显差别。结论保留半肝动脉血流阻断法在HCC患者手术中效果较好,具有良好的应用价值。     

缺血后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨缺血后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法将75只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和缺血后处理组,建立大鼠肝脏局部缺血再灌注模型。检测大鼠血清、肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平,并行肝组织病理学和超微结构检查及免疫组化法检测内源性一氧化氮合成酶（eNOS）的表达。结果与缺血再灌注组相比,缺血后处理组血清ALT和AST水平及肝组织MDA明显降低（P＜0．01）,而SOD水平则显著升高（P〈0．01）;肝组织病理损伤减轻,在再灌注7min时IPO组肝组织eNOS蛋白表达比IR组增强。结论缺血后处理可通过抑制再灌注后氧自由基的过量生成和再灌注损伤保护激酶通路,从而减轻肝细胞损伤。     

肝泡型包虫病应用半肝入肝血流阻断法的临床疗效及对术后肝功能恢复的影响

目的探究肝泡型包虫病应用半肝入肝血流阻断法的临床疗效及对术后肝功能恢复的影响。方法选取2015年5月至2017年1月河南省某医院收治的780例肝泡型包虫病患者作为研究对象,按照肝血流阻断方法的不同分为两组每组390人,对照组应用全肝入肝血流阻断法进行血流的阻断;研究组应用半肝入肝血流阻断法,对比两组患者术后3个月的生活质量,两组患者治疗前后血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)等变化情况以及两组患者手术结果对比。结果研究组患者术后3个月的生活质量明显优于对照组(P0.05);血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)恢复情况也比对照组好(P0.05);研究组患者手术出血量比对照组显著减少,下床活动时间和住院天数相对对照组也有明显缩短(P0.05)。结论肝泡型包虫病应用半肝入肝血流阻断法的临床疗效好,对术后肝功能恢复也有明显推动作用,应该在临床推广使用。     

肝动脉化疗栓塞治疗原发性肝癌的疗效及影响因素

目的观察肝动脉化疗栓塞治疗对原发性肝癌的疗效及影响因素．方法单纯化疗（Ａ组）；化疗加碘油栓塞（Ｂ组）；化疗加碘油加明胶海绵栓塞（Ｃ组）．结果５年内肝动脉化疗栓塞治疗中、晚期肝癌４２８例，３８６例经２个月～５０个月随访．肿瘤缩小率：Ａ组１４％，Ｂ组５５％，Ｃ组７９％（三组间Ｐ＜００１）．肿瘤基本消失：Ｃ组５％，Ａ，Ｂ两组无１例消失．生存时间：１年生存率Ａ组０％，Ｂ组１０％，Ｃ组４５％，其中１２例患者获Ⅱ期手术切除，切除标本病理检查见肿瘤区癌细胞全部或部分凝固坏死，瘤旁癌细胞稀疏．结论影响疗效因素与肿瘤的病理类型及血供情况，门静脉主干瘘和癌栓、肝动脉插管治疗方式有关．     

Clinical experience of hepatic hemangioma undergoing hepatic resection

The indications for surgery on cavernous hemangiomas, the most common benign tumors of the liver, remain unclear. This study reviewed 43 patients with cavernous hemangioma of the liver who underwent hepatic resection from 1984 to 2000. Patients were divided into three groups based on the reasons for surgery. Group I comprised 13 patients whose lesions presented symptoms and dimensions that were the main indications for operation. Group II consisted of 28 patients diagnosed with malignant tumors or who displayed malignant growth that could not be ruled out preoperatively. Group III comprised 2 patients with tumors found incidentally at laparotomy for other malignancies. No surgical mortality related to hepatectomy was noted. Postoperative bile leak was found in 2 (morbidity rate: 4.7%). Patients were followed up from 6 months to 12 years. Thirteen residual tumors progressed in size. The clinical status or symptoms changed only slightly in 10 patients with recurrence. The results suggest that resection therapy is an effective indicator for patients with symptoms and a questionable diagnosis. Hepatic resection may and should be carried out with no mortality and minimal morbidity risks since the lesion is benign.     

Reconstruction of hepatic organoid by hepatic stem cells

Recent advances in culture methods, stem cell research, and tissue engineering provide clues for making tissues in vitro that are functionally and structurally similar to hepatic tissues. To reconstruct hepatic organoids, two approaches to establish the methods have been proposed: the use of cells and the combination of cells and a scaffold (called tissue engineering). Recently, the coculture of hepatic cells (mature hepatocytes, small hepatocytes, hepatoblasts) and hepatic nonparenchymal cells has been reported to form hepatic organoids that possess differentiated hepatic functions. On the other hand, hepatocytes in a roller bottle were shown to form specific structures, consisting of biliary epithelial cells, connective tissue, mature hepatocytes, and endothelial cells. In this review, the studies of hepatic tissue formation in vitro will be summarized.     

Congenital hepatic fibrosis disclosed late by hepatic encephalopathy

A case of hepatic encephalopathy revealing congenital hepatic fibrosis in a 47-year-old woman is reported. The characteristic features of this observation were: a) the long clinical latency of a congenital disease usually discovered in childhood or in adolescence; b) the existence of hepatocellular insufficiency which appeared without any other reason than an ordinary infection; c) the absence of digestive bleeding or portacaval shunt, factors always found in the rare, previously described cases of encephalopathy in congenital hepatic fibrosis.     

肝硬化时肝窦毛细血管化形成机制

目的:探讨肠源性内毒素血症在肝窦毛细血管化形成中的作用及其可能机制.方法:♂ Wistar大鼠40只,完全随机分为模型组(n=32)与正常对照组(n=8),采用复合因素致肝硬化大鼠模型.模型组分别在饲养第2,4,6,8周末,正常对照组在实验开始时,经肠系膜上静脉末端穿刺测PVP.肝脏HE、VG染色,肝脏免疫组织化学染色观察α-SMA、LN、TGF-β1的动态表达,测定外周血中的内毒素、TNF-α、ALT的动态变化,采用扫描电镜观察肝窦内皮细胞失窗孔情况.结果:模型组ALT在第2周末达到高峰(57.84±7.57IU/L),随后逐渐下降;内毒素在第2、4、6周末,各点呈递增趋势,到第8周末时略有下降;TNF-α在第2、4周末呈递增趋势,到第6周末时略有下降,第8周末时又逐渐升高,但各点组均较对照组明显升高(均P<0.05);模型组PVP在第2、4周末,各点呈递增趋势,到第6周末时略有下降,第8周末时又逐渐升高;肝窦内皮细胞扫描电镜结果示随着肝纤维化及硬化程度的加重,窗孔逐渐变小、变少至消失;LN、TGF-β1免疫组织化学染色结果示随着病变的发展,与对照组和同指标前一时间组相比阳性表达逐渐增强(均P<0.05).α-SMA免疫组织化学染色在第2、4、6周末,阳性表达逐渐增强,到第8周末时略有下降.结论:肝硬化大鼠发生了肠源性内毒素血症,其可使TGF-β1、TNF-α、LN等合成增多,促进肝窦内皮细胞去窗孔化,间接参与肝窦毛细血管化的形成.     

肝硬化腹水和肝性胸水的治疗

腹水和肝性胸水是肝硬化失代偿期的并发症,其产生主要是由于门脉压升高、激活交感神经系统、肾素-血管紧张素-醛固酮系统、血浆胶体渗透压降低等因素有关,肝性胸水还有膈肌破裂形成裂孔等有关。治疗上多采用利尿剂、排放腹腔积液、输注白蛋白、腹水浓缩静脉回输、外科手术,甚至肝移植等综合治疗措施。