鸟苷酸交换因子Trio通过调控神经嵴细胞迁徙影响颅颌面发育

目的:研究鸟苷酸交换因子Trio在胚胎发育过程中对神经嵴细胞的影响.方法:将trio反义寡核苷酸通过显微注射入斑马鱼胚胎内,抑制其trio功能;在斑马鱼胚胎发育96 h时使用体式显微镜观察神经嵴细胞衍生物下颌骨的发育情况,120 h时通过阿尔辛蓝染色观察颅颌面部软骨的发育状况.利用转基因斑马鱼(sox10:EGFP)特...     

麦考酚酸对斑马鱼胚胎颅面部发育的影响

目的　研究麦考酚酸对斑马鱼胚胎的颅面部发育毒性。方法：对斑马鱼胚胎进行麦考酚酸加药,观察不同时期麦考酚酸对胚胎造成的颅面部发育畸形。胚胎发育至72小时,软骨染色观察颅面部软骨的发育状况。Q-PCR方法检测次黄嘌呤核苷酸脱氢酶（IMPDH）基因的表达水平。同时鸟苷酸加药,从表型和基因层面考察鸟苷酸对麦考酚酸造成畸形的挽救情况。结果：麦考酚酸可以造成斑马鱼胚胎严重的颅面部畸形,染色结果显示颅面部软骨发育延迟,形态异常。基因检测发现麦考酚酸能够明显下调impdh1b和impdh2的表达水平。鸟苷酸可以挽救麦考酚酸造成的胚胎畸形。结论：麦考酚酸通过下调IMPDH基因,抑制了IMPDH活性,从而造成了斑马鱼胚胎的颅面部发育畸形。     

小鼠颅神经嵴细胞的培养和特征

目的：在体外原代培养Balb/c小鼠胚胎的颅神经嵴细胞。为颅面部各种组织细胞的发育研究提供细胞来源。方法：采用胰酶消化法分离小鼠胚胎第8.5天的颅神经管，从小鼠颅神经管中游离出来的细胞即为颅神经嵴细胞，用免疫组织化学方法鉴定细胞的来源，并测定细胞的生长曲线。结果：成功地培养出小鼠的颅神经嵴细胞，其形态类似成纤维样细胞，免疫组化检测结果表明，神经特异性烯醇化酶（NSE）抗体染色结果阳性。细胞的群体倍增时间为43.65h。结论：原代培养的小鼠颅神经嵴细胞生长稳定，来源明确，是颅面部各种细胞的发育和分化研究中一种有用的工具。     

下颌骨髁状突软骨发育中的细胞凋亡及增殖

目的：研究胎儿下颌骨髁状突软骨细胞凋亡及增殖情况。方法：32例胎儿下颌骨髁状软骨标本按胎龄分为两组：A组（13－22周）；B组（23－33周）。采用原位末端标记法（TUNEL）及免疫组织化学法观察胎儿髁状突软骨发育不同时中的细胞凋亡及PCNA的表达，并对表达结果作定量分析。结果：两胎龄组中均有PCNA及TUNEL阳性表。PCNA、TUNEL染色以增殖层阳性细胞率最大，其次为成软骨细胞层，肥大软骨细胞层最小，B组PCNA染色强于A组，A组TUNEL染色强于B超。A组TUNEL／PCNA大于B组，TUNEL／PCNA在肥大软骨细胞层大于成软骨细胞层，增殖层最大小。结论：细胞凋亡与细胞增殖在胎儿颗状突软发育中具有一定意义。     

Raplb在斑马鱼神经嵴中表达情况的初探

目的：研究Raplb与斑马鱼颅面部发育的关系。方法：利用模式动物斑马鱼,取由神经嵴发育而来的颅面部组织做实时定量RT-PCR,观察不同时期Raplb的mRNA表达情况。再通过Raplb整体原位杂交观察其在斑马鱼发育过程中时间和空间的表达情况,并与神经嵴特异性标志基因Crestin原位杂交表达情况在时间和空间上对比。结果：实时定量RT—PCR结果显示,Raplb在神经嵴形成、迁移、分化过程中在颅面部均有表达。原位杂交结果显示,Raplb与Crestin在斑马鱼中的表达在时间和空间上有重叠。结论：Raplb可能通过调节神经嵴发育参与颅面部发育。     

Wnt信号系统在颌面骨发育中的作用

<正>在颅面部发育早期,来自前脑、中脑及后脑的颅神经嵴细胞迁移至鼻突及上下颌突,分化为第一鳃弓间充质细胞,继而形成原发性及继发性软骨,通过膜内成骨和软骨内成骨形成颅面骨。其中上颌骨和下颌骨体通过膜内成骨形成,下颌支及髁突通过软骨内成骨形成。在整个发育过程中许多相关的信号传导途径扮演这重要的角色,包括TGF/BMP、FGF、SHH和最近研究热点Wnt信号系统等。本文就Wnt信号系统在颌骨发育中的作用作一综述。     

rhBMP-2诱导颅神经嵴细胞向神经元分化的体外研究

目的；观察重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）对颅神经嵴细胞的诱导发化作用。方法：分别用不含rhBMP-2的无血清培养液和含有不同浓度rhBMP-2的培养液对颅神经嵴细胞进行培养。10d后，观察两组细胞的形态学差别，用胶质纤维酸性蛋白（GFAP），神经纤维细丝蛋白（NF），颅神经嵴细胞的特异性抗体P75等抗体进行免疫组化染色，鉴定细胞的分化状态，并计算NF阳性细胞数的百分比及进行统计分析。结果：在含有rhBMP-2的培养液中，颅神经嵴细胞的形态由成纤维细胞样向神经元样的表型进行转变，可见较长的细胞突起出现。NF染色结果阳性，而GFAP，P75染色结果阴性。50ng/mL组中，NF的阳性细胞数比其它浓度组明显增多，并有显著性差异（P＜0．05）。结论：rhBMP-2可以诱导颅神经嵴细胞向神经元进行分化，50ng/mL是其中最有效的诱导浓度。     

细胞凝聚区的形成在C57BL/6N系 小鼠下颌骨发育中的作用意义

目的：观察胚胎早期间充质细胞增殖、分化的改变,明确下颌骨在胚胎早期由细胞凝聚到定向分化成成骨细胞而发育形成的过程。方法：用免疫组化及ＴＵＮＥＬ染色等方法,检测了胚龄１３～１９ｄ及出生１ｄ的小鼠下颌骨中未分化间充质细胞增殖、细胞程序性死亡（ＰＣＤ）及表型转化的生物学改变。结果：胚龄１３～１５ｄ,间充质细胞开始凝聚形成下颌骨始基并迅速增殖。胚龄１６～１９ｄ,凝聚区细胞明显向成骨细胞表型转化并开始成骨。麦克尔软骨消失。结论：下颌骨的发育始于胚胎间充质细胞的局部凝聚,大部分细胞经历了快速增殖后逐渐分化成熟,少量细胞出现ＰＣＤ以清除病变或非必需细胞并与麦克尔软骨的发生及退化有密切关系     

英文文摘

1．肋软骨细胞和牙髓干细胞及FGF9的共培养对组织工程软骨形成和骨化的影响（英）／DaiJ…／／Biomaterials．-2012,33（31）．-7699—7711． 牙髓干细胞（DPSCs）来源于颅神经嵴细胞,具有多向分化潜能,是颅面组织再生的重要种子细胞。与关节软骨细胞相比,肋软骨细胞（CCs）容易获取,增殖扩增能力更强。CCs具有软骨形成能力,能够有效地修复关节缺损。     

血清对神经嵴细胞向神经胶质细胞分化诱导的体外研究

目的：探讨神经嵴细胞在含血清培养基中向神经细胞的自发分化过程，方法：取妊娠第8．5天的BALB／c胎鼠的神经嵴细胞，分别在无血清和含血清培养基中培养，免疫组化和透射电镜鉴定和观察神经嵴细胞的分化情况.结果：在无血清的培养基中，NSE染色结果阳性，透射电镜下未见神经内分泌颗粒，神经嵴细胞保持其原有的特性，在有血清的培养基中，神经嵴细胞自发分化，胶质纤维酸性蛋白（GFAP），神经特性烯醇化酶（NSE）和S－100染色阳性，透射电镜下可见大量的神经内分泌颗粒。结论：血清可使神经嵴细胞自发的向神经胶质细胞分化。     

Experimental analyses of the migration and cell lineage of avian neural crest cells

Neural crest cells migrate extensively during embryonic development and give rise to numerous and varied derivatives. Two important and unresolved questions are: what controls the migration and differentiation of these cells? This review summarizes recent experiments that address these issues. Specifically, this overview describes the pathways of neural crest cell migration, the functional importance of interactions between neural crest cells and the extracellular matrix for their movement, and studies on neural crest cell lineage in vivo by labelling individual precursor cells.     

ADAR1对口腔鳞癌细胞生物学特征的影响

检测RNA编辑酶1（ ADAR1）在口腔鳞癌细胞中的表达,探讨其对口腔鳞癌细胞生物学行为特征的影响及作用机制。方法：利用实时定量RT?PCR、Western Blot检测ADAR1在口腔鳞癌细胞中的表达;化学合成siRNA（ si?ADAR1）转染细胞,观察其迁移和侵袭能力;检测ADAR1敲减后口腔鳞癌细胞中上皮间质转化指标（ Vimentin、E?cadherin）、干性指标（ Sox2、Oct4）以及 onco?microRNAs （ miR?21?3p、miR?18a?3p、miR?210?3p、miR?155?5p、miR?181a?3p、miR?19a?3p ）表达水平。结果：ADAR1在口腔鳞癌细胞中高表达;ADAR1敲减后的口腔鳞癌细胞迁移和侵袭能力下降（P＜0．05）,上皮间质转化指标 E?cadherin低表达、Vimentin高表达,干性指标（ Sox2、Oct4）及口腔鳞癌相关onco?MicroRNAs低表达。结论：ADAR1与口腔鳞癌细胞的生物学行为密切相关,推测 ADAR1可能通过促进口腔鳞癌相关 onco?microRNAs成熟影响口腔鳞癌细胞的生物学行为。     

淋巴增强因子-1在口腔医学中的研究进展

淋巴增强因子-1是Wnt信号路径的重要组成成分,在由上皮和间充质的相互作用而产生的器官如牙的发育中发挥着重要的调节作用。下面就其在调控牙发育、维持牙上皮细胞活性、抑制成骨细胞的终极分化和在口腔恶性肿瘤的发生发展中的作用作一综述。     

Bmi1对舌鳞癌侧群细胞迁移、侵袭和增殖能力的调控作用及机制探讨

目的: 探讨Bmi1如何调控舌鳞癌侧群细胞的迁移、侵袭和增殖能力。 方法: 首先采用Hoechst33342法,利用流式细胞仪分选舌鳞癌细胞株UM1（高转移株）中的侧群细胞（side population cell, SP）和非侧群细胞（non-side population cell, Non-SP）。Transwell 实验检测沉默Bmi1后SP细胞的迁移、侵袭能力。球囊形成和平板克隆实验检测沉默Bmi1后SP细胞的球囊和克隆形成率;CCK8 实验检测沉默Bmi1后SP细胞的增殖能力。Western免疫印迹检测沉默Bmi1后SP细胞中侵袭、转移相关基因（SOD2、Slug）及干细胞标志物（ABCG2、Nanog）的表达水平。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学处理。 结果: 转染Bmi1 siRNA使SP细胞中Bmi1表达水平下调后,SP细胞的迁移和侵袭能力显著下降;球囊形成率和克隆形成率也显著低于对照组;增殖能力受到抑制;SOD2、Slug和干细胞标志物ABCG2和Nanog的表达水平显著下降。 结论: 沉默Bmi1可调控舌鳞癌侧群细胞的迁移、侵袭和增殖。     

miR‐140‐5p‐mediated regulation of the proliferation and differentiation of human dental pulp stem cells occurs through the lipopolysaccharide/toll‐like receptor 4 signaling pathway

Human dental pulp stem cells (DPSCs) are oral mesenchymal stem cells with potential to differentiate into various cell types. Recent studies of DPSCs have focused on microRNAs (miRNAs), a class of small noncoding RNAs that play crucial roles in regulating DPSC phenotypes. In the current study, the expression of miR‐140‐5p was significantly decreased during lipopolysaccharide (LPS)‐mediated differentiation of DPSCs in vitro. Overexpression of miR‐140‐5p enhanced proliferation of DPSCs and inhibited DPSC differentiation, whereas suppression of miR‐140‐5p produced the opposite effect. Moreover, the expression of toll‐like receptor 4 (TLR‐4), a critical regulator of DPSCs, was negatively correlated with the levels of miR‐140‐5p. A luciferase reporter analysis confirmed that miR‐140‐5p could regulate TLR‐4 by directly binding to the 3′‐untranslated region (3′‐UTR) of the TLR4 mRNA. Additionally, we suppressed TLR‐4 expression by treating cells with a TLR‐4 inhibitor, CLI‐095, and demonstrated that the effect of the miR‐140‐5p inhibitor on DPSC proliferation and differentiation could be partially reversed by blocking TLR‐4. Taken together, our data suggest that miR‐140‐5p is a novel miRNA that regulates DPSC proliferation and differentiation.