丙烯腈对小鼠肺成纤维细胞增殖分化的影响

目的 研究丙烯腈(ACN)对小鼠肺成纤维细胞增殖分化的影响.方法 将ICR小鼠肺成纤维细胞纯化后进行细胞培养,加入二甲亚砜和浓度分别为0.01、0.5、1.0、10.0、50.0、100.0、200.0μg/ml的ACN,作为对照组和染毒组,每组10个平行样.从细胞形态学角度,通过细胞计数,观察细胞生长与分化的过程,同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力.结果 浓度为0.01、0.5、1.0、10.0μg/ml的ACN对小鼠肺成纤维细胞生长无抑制作用,而浓度达到50.0、100.0、200.0μg/ml时,小鼠肺成纤维细胞的增殖和分化明显受到抑制,集落形成率明显减少,细胞体积变小,且随着ACN浓度的加大,其抑制作用增大.当ACN剂量为50.0、100.0、200.0μg/ml时,小鼠肺成纤维细胞相对蛋白质含量低于对照组(P＜0.05).当ACN剂量为10.0、50.0、100.0、200.0μg/ml时,小鼠肺成纤维细胞MDA的含量高于对照组(P＜0.01).当ACN剂量为10.0、50.0、100.0、200.0μg/ml时,小鼠肺成纤维细胞SOD活力低于对照组(P＜0.05).结论 ACN能抑制小鼠肺成纤维细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成,并引起脂质过氧化有关.     

肺成纤维细胞增殖与其合成胶原功能间的关系

目的　探讨肺成纤维细胞 (FB)增殖与其合成胶原功能间的关系。方法　通过卟啉醇肉豆蔻酸乙酸乙酯 (PMA)和 1 (5 异喹啉基 ) 2 甲基哌嗪 (H 7)改变肺FB的增殖状态 ,观察肺FB数、细胞内DNA中3 H 胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR)掺入量与细胞新合成蛋白质中3 H 脯氨酸 (3 H Pro)掺入量的关系。结果　 2 0nmol/L的PMA作用 3d时 ,肺FB数 [(12 .2± 2 .3)× 10 4 个 /孔 ]和细胞内DNA中3 H TdR掺入量 [(1.89± 0 .0 9)× 10 3 Bq]分别较对照组 [(7.5±1.1)× 10 4 个 /孔、(1.6 7± 0 .16 )×10 3 Bq]明显增多 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;但细胞分泌的蛋白质中3 H Pro掺入量 [(6 87.5± 2 0 0 .5 )Bq/ 10 5cells]比对照组 [(1181± 147.5 )Bq/ 10 5cells]却明显减少 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。5 0 μmol/L的H 7作用 3d时 ,肺FB数 [(4.2± 0 .8)× 10 4 个 /孔 ]和细胞内3 H TdR掺入量 [(0 .72±0 .13)× 10 3 Bq]分别较对照组 [(7.5± 1.1)× 10 4 个 /孔、(1.12± 0 .0 8)× 10 3 Bq]明显减少 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,但3 H Pro掺入量 [(170 5 .5± 2 5 1.5 )Bq/ 10 5cells]比对照组 [(1181± 147.5 )Bq/ 10 5cells]明显增多 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　肺FB合成胶原蛋白的功能与其增殖状态有关。肺     

川芎嗪对人肾间质成纤维细胞增殖和形态的影响

目的：观察川芎嗪（TMP）对肾间质纤维化来源的人肾间质成纤维细胞（hRIFs）体外增殖和形态的影响。方法：组织块培养法体外培养hRIFs；MTT比色法分别检测对照组及不同浓度TMP（0．25、0．50、1．00和2．00mg／m1）组hRIFs在培养的d1、3、5、7、9的增殖情况；用倒置相差显微镜观察TMP作用下bRIFs形态的改变。结果：与对照组相比，0．25mg／ml或0．50mg／ml的TMP作用于hRIFs后5～9d、1．0mg／ml的TMP作用于hRIFs后3～9d、2．00mg／ml的TMP作用于b．RIFs后1～9d对hRIFs体外增殖有显著的抑制作用，用药后FBS形态也发生明显变化。结论：TMP对hRIFs体外增殖具有明显抑制作用．且有时间、浓度依赖性：同时TMP可使体外培养hRIFs出现形态异常。     

纳米氧化硅刺激巨噬细胞介导的肺成纤维细胞增殖及对胶原合成的影响

目的 研究纳米氧化硅诱导巨噬细胞生成细胞因子在成纤维细胞增殖和胶原合成中的作用.方法 31.25、125.00、500.00 μg/ml纳米氧化硅及500.00 μg/ml微米SiO2对巨噬细胞系RAW264.7染毒24 h,用酶联免疫(ELISA)法测定培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)及白细胞介素-1β(IL-1β)的表达;取上述浓度尘粒染毒RAW264.7细胞培养上清液与中国全鼠肺成纤维细胞(CHL)共同孵育后,分别用噻唑蓝(MTT)进行比色分析法,用消化法测定CHL细胞增殖率及羟脯氨酸生成量.结果 125.00、500.00μg/ml纳米氧化硅组及500μg/ml微米SiO2组TNF-α[(19.97±0.76、22.76±2.69、24.09±1.44)pg/ml]、TGF-β1[(53.07±3.88、58.78±5.48、59.75±7.93)pg/ml]及IL-1β(11.76±0.82、12.71±0.30、15.08±2.18)pg/ml]含量明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);125.00、500.00μg/ml纳米氧化硅组及500μg/ml微米SiO2组诱导CHL细胞增殖率及羟脯氨酸含量较阴性对照组增加,差异有统计学意义(P＜0.05);500.00μg/ml纳米氧化硅组CHL细胞中羟脯氨酸含量高于500 μg/mg微米SiO2处理组,差异有统计学意义(P＜0.05).随纳米氧化硅染毒浓度的增加,细胞因子的含量、CHL细胞增殖率及羟脯氨酸生成量逐渐升高.结论 纳米氧化硅在介导巨噬细胞释放大量细胞因子、诱导肺成纤维细胞增生和胶原纤维生成增多方面,具有与微米SiO2同样的作用.     

高碘对体外培养成纤维细胞增殖活性的影响

目的 研究不同浓度碘对体外培养的人皮肤成纤维细胞增殖活性的影响.方法 将体外培养的成纤维细胞(HSF)分为9组,[1个空白对照组(0μg/L),8个实验组(100、500、1 000、3 000、5 000、7 000、9 000、11 000μg/L),每组6个平行样].应用含不同浓度碘化钾的DMEM培养基连续培养24 h,观察成纤维细胞的密度和形态的变化并采用四唑盐(MTT)比色试验检测细胞增殖活性.结果 碘的浓度在5 000 μg/L以下时,成纤维细胞的增殖活性随碘浓度的升高而增加;5000、7000 μg/L组细胞增殖活性最高,两组间增殖活性差异无统计学意义(P＞0.05);7000、9000、11000 μg/L组细胞增殖活性随碘浓度的升高而降低.结论 碘的浓度在5 000 μg/L以下,具有促进成纤维细胞增殖的作用;高于7 000 μg/L时,会抑制成纤维细胞的增殖活性.     

阴道植入物对成纤维细胞增殖和蛋白合成的影响

目的:探讨不同网片对盆底功能障碍性疾病患者阴道前壁成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成的影响。方法:选取2013年3~5月在该院妇产科,行盆底重建术的患者5例为研究对象。术中切取阴道前壁组织,组织块培养法于体外行成纤维细胞原代培养。用抗波形蛋白抗体和抗角蛋白抗体进行免疫组化法鉴定成纤维细胞。将培养至第4~6代成纤维细胞分为4组,设加入Prolift网片为Prolift组、加入Avaulta网片为Avaulta组、加入TVT-O网片为TVT-O组及不加网片为正常对照组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测4组培养2、4、7天时的细胞增殖情况,采用Western bolt法检测细胞与网片共培养4天时成纤维细胞分泌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白情况。结果:1网片与细胞共培养2天时,正常对照组、Prolift组、Avaulta组和TVT-O组吸光值分别为(0.790±0.023)、(0.655±0.017)、(0.644±0.022)和(0.538±0.067);培养4天时,分别为(0.843±0.014)、(0.716±0.045)、(0.673±0.025)和(0.283±0.008);培养7天时,分别为(2.040±0.035)、(1.201±0.126)、(1.109±0.087)和(0.196±0.017)。正常对照组各时期细胞吸光度值分别与其他3组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Prolift组与Avaulta组各时期之间的吸光度值分别比较,差异无统计学意义(P>0.05)。培养2天时,Prolift组和Avaulta组分别与TVT-O组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);培养4天和7天时各组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);2网片与细胞共培养4天时,4组Ⅰ型胶原蛋白表达量分别为(7.801±0.253)、(5.421±0.191)、(5.274±0.195)和(4.041±0.154);Ⅲ型胶原分别为(1.062±0.104)、(0.870±0.051)、(0.865±0.047)和(0.651±0.073)。正常对照组的Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白分别与其他3组进行比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中Prolift组和Avaulta组分别比较,差异无统计学意义(P>0.05),但Prolift组、Avaulta组分别与TVT-O组进行比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:网片孔径越大,对成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成影响越小。     

锌对神经细胞增殖和分化作用的影响

目的探讨锌对神经细胞增殖和分化作用。方法NT2细胞在锌鳌合剂TPEN作用下,检测神经的凋亡情况,用MTT方法检测细胞的增殖活性．细胞的神经发育标志蛋白GFAP和NeuN的表达情况。结果随着TPEN浓度的增高,细胞核荧光强度越强,凋亡越强;细胞增殖活性越低,GFAP和NeuN蛋白表达越低。结论锌对神经细胞增殖和分化有较严重的抑制作用。     

亚砷酸钠对人胚肺成纤维细胞增殖活性及细胞周期的影响

目的 探讨亚砷酸钠对人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖活性及细胞周期的影响.方法 将体外培养的HELF细胞分别暴露于浓度为0(对照)、20、40、60 μmol/L的亚砷酸钠培养基24、48和72 h.采用噻唑蓝(MTr)法检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞周期分布.结果 与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒24、48、72 h后细胞抑制率均升高,差异有统计学意义(P＜0.05);HELF细胞抑制率与亚砷酸钠浓度及作用时长均呈正相关(P＜0.05).HELF细胞G2+M期的比例仅在染毒24、48 h时均与亚砷酸钠染毒浓度呈正相关(P＜0.05).HELF细胞S期比例在染毒48 h时与亚砷酸钠染毒浓度呈负相关(P＜0.05).结论 亚砷酸钠染毒可降低HELF细胞的增殖活性,并能够选择性地将细胞阻滞在合成末期及分裂期(G2+M期).     

巨噬细胞移动抑制因子与子宫内膜容受性

胚胎植入需要囊胚与子宫内膜同步发育,着床窗口期子宫内膜容受性在植入过程中起关键作用.近年研究发现,许多细胞因子、酶类等与子宫内膜容受性密切相关.巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是目前公认的一种调节免疫反应的多功能细胞因子.研究发现,MIF可影响...     

Inhibitory Effects and Mechanisms of Luteolin on Proliferation and Migration of Vascular Smooth Muscle Cells

Atherosclerosis (AS) is a complicated progress, involving many types of cells. Although the exact mechanisms of progression of atherosclerosis are uncertain, the balance of vascular smooth muscle cells (VSMCs) proliferation and apoptosis appears to play a pivotal role in the pathogenesis and progression of atherosclerosis, and much discussion has been undertaken to elucidate the detailed mechanisms, relevant gene expression and transduction pathways. Drug treatment has focused on ameliorating atherosclerosis. Some researchers have indicated that inhibiting VSMCs proliferation is involved in attenuating atherosclerosis. Luteolin is a kind of flavonoids naturally occurring in many plants and possesses beneficial effects on cardiovascular diseases. Luteolin can reduce VSMCs’ proliferation and migration and this reduction is stimulated by several factors. The aim of this review is to summarize the existing inhibitory effects and mechanisms of luteolin on proliferation and migration of VSMCs, and consider whether luteolin may be a potential candidate for preventing and treating atherosclerosis.     

巨噬细胞移动抑制因子在不明原因早期复发性流产者血清、绒毛和蜕膜中的表达及意义

目的:研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在正常早孕和不明原因早期复发性流产血清、绒毛和蜕膜中的表达水平及在不明原因早期复发性流产(UERSA)发病中的作用。方法:选取2008年1～12月在天津医科大学第二医院计划生育科因不明原因早期复发性流产就诊的患者30例(UERSA组)以及同孕龄正常早孕妇女30例(正常早孕组),采用ELISA方法检测两组外周血清中MIF的浓度,并采用实时荧光RT-PCR检测两组绒毛、蜕膜组织中MIF-mRNA的表达水平,进行统计学比较。结果:UERSA组血清MIF水平(10.98±3.02ng/ml)低于正常早孕组(17.53±5.34ng/ml),绒毛、蜕膜组织中MIF-mRNA的2-△△CT值(0.022±0.001;0.97±0.58)均较正常早孕组(1.290±1.110;1.20±0.85)显著降低。经过相关分析,血清MIF水平与绒毛、蜕膜组织中MIF-mRNA的水平呈正相关(r=0.69,0.71)。结论:妊娠期母胎界面MIF表达降低,可能在不明原因早期复发性流产的发生发展中起重要作用。     

无机砷对人皮肤成纤维细胞增殖毒性的实验观察

目的观察亚砷酸钠诱导体外培养的人皮肤成纤维细胞的作用，探讨砷性皮肤损伤的分子机制。方法通过直接细胞计数法和噻唑蓝（MTT）还原法检测亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞生长的影响。结果与对照组比较，皮肤成纤维细胞经不同剂量的亚砷酸钠诱导后，吸光度值均有改变，存在剂量效应关系（P〈0.01）。0．5～5．0μmol／L浓度的亚砷酸钠对皮肤成纤维细胞有明显的增殖作用，而10μmol／L浓度的亚砷酸钠产生明显的毒性作用。结论低浓度NaAsO2、NaAsO2刺激人皮肤成纤维细胞增殖，高浓度具有细胞毒性。     

锆离子对牙髓干细胞增殖及成骨分化的影响

目的研究Zr4＋对大鼠牙髓干细胞增殖及矿化功能的影响。方法四甲基偶氮噻唑盐（MTT）检测Zr4＋对牙髓干细胞增殖的影响,碱性磷酸酶活性测定法检测其对牙髓干细胞成骨分化的影响。结果Zr4＋在1×10-9-1×10-5m01／L的浓度范围内均能够促进牙髓干细胞的增殖及分化。结论锆离子对牙髓干细胞的增殖和分化具有促进作用,含锆物质适于应用于口腔护理。     

ERK1/2在氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的 研究细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase 1 and 2,ERK1/2或p42-44MARK)信号通路在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,Ox-LDL)诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用.方法 采用3个时间水平(24h、48h、72h),4个剂量水平(0,50,100,200μg/ml)的两因素析因设计观察Ox-LDL对兔主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecels,VSMCs)增殖影响的时间、剂量效应关系;Ox-LDL对兔主动脉血管平滑肌细胞ERK1/2活性影响;ERK1/2的特异断剂U0126对Ox-LDL诱导兔主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响.结果 Ox-LDL在剂量为50,100μg/ml时,可诱导血管平滑肌细胞增殖,当Ox-LDL剂量达到200μg/ml时,细胞增殖能力迅速降低,并与其作用时间和剂量显着相关(P值均<0.01);Ox-LDL可引起血管平滑肌细胞ERK1/2活性的改变;ERK1/2的特异阻断剂U0126可完全抑制Ox-LDL诱导的VSMCs增殖.结论 Ox-LDL诱导血管平滑肌细胞增殖与其作用浓度、时间相关;ERK1/2信号通路可能在Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞增殖过程中起着关键的信号转导作用.     

过氯酸铵对大鼠肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞影响的研究

目的通过探讨过氯酸铵(AP)对大鼠肺泡巨噬细胞(AM)损伤及对肺成纤维细胞(FB)增殖的影响,研究AP的致肺纤维化作用。方法用AP浓度分别为0.5,1.0,2.0 mg/ml和SiO2浓度为0.1 mg/ml 的培养液培养AM,对照组采用RPMI1640培养液培养,24 h 后收集培养上清液,分别检测AM内MDA含量、GSH-Px活力以及上清液中LDH活力。并用AM上清液培养FB,检测FB增殖活力和FB内羟脯氨酸含量.结果 1.0,2.0 mg/ml AP组及SiO2组MDA含量(2.21,2.58,2.32 nmol/ml)均比对照组(1.97 nmol/ml)增加,差异有显著性或非常显著性(P＜0.05或P＜0.01); 2.0 mg/ml AP组及SiO2组GSH-Px活力(29.47,30.79 U/106 AM)比对照组(26.70 U/106 AM)明显增强,差异有显著或非常显著性(P＜0.05或P＜0.01); 0.5,1.0,2.0 mg/ml AP组和SiO2组LDH活力(151.03,252.31,446.50,583.88U/106 AM)均明显高于对照组(77.06U/106 AM,P＜0.05或P＜0.01), 且随AP染毒剂量的增加而升高。SiO2组AM上清液使FB羟脯氨酸含量(0.900 μg/ml)及增殖活力(0.165)明显高于对照组(0.379 μg/ml,0.138,P＜0.05或P＜0.01)。结论 AP对肺泡巨噬细胞具有一定的细胞毒作用,而AP染毒的AM上清液未发现有促进FB的增殖和胶原合成的作用。     

体外培养肌腱细胞增殖与碱性成纤维细胞生长因子（BFGF）的关系探讨

目的探讨不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)对体外培养肌腱细胞增殖和量效关系的影响,并初步估计促增长的最佳浓度。方法免疫组化细胞定性,MTT法染色,在酶联免疫检测仪上测出不同浓度BFGF组吸光度OD均值。结果与对照组OD均值相比:1.0、2.0、5.0、10、30、40、50ng/mlBFGF组有显著性差异(P<0.05);0.5、20ng/mlBFGF组无显著性差异(P>0.05)。各组OD均值随BFGF浓度的增加,先逐渐增大(0～5.0ng/ml),达到峰值后,又逐渐减少(5.0～50ng/ml)。结论1.0、2.0、5.0、10ng/mlBFGF有促进肌腱细胞增殖作用;0.5和20ng/mlBFGF对肌腱细胞增殖无明显作用;30、40、50ng/mlBFGF有抑制肌腱细胞增殖作用。5.0ng/ml是促肌腱细胞增殖最佳BFGF浓度。